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用于秋石斛蘭快速繁殖的培養(yǎng)基組的制作方法

文檔序號(hào):11489020閱讀:419來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)領(lǐng)域
】本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)
技術(shù)領(lǐng)域
,具體涉及一種用于秋石斛蘭快速繁殖的培養(yǎng)基組。
背景技術(shù)
:秋石斛蘭(dendrobiumspp.)為蘭科石斛屬常綠類石斛,又稱蝴蝶石斛、杜蘭、石斛、石蘭等;多是以原產(chǎn)于新幾內(nèi)亞的熱帶原生種蝴蝶石解(dendrobiumphalaenopsis)為親本育成的雜交品種。秋石斛蘭是是近幾年在中國(guó)插花市場(chǎng)上流行的花卉,種類繁多,花形花姿優(yōu)美,色彩艷麗,花期長(zhǎng),具有較高的觀賞價(jià)值,在國(guó)內(nèi)切花和盆花的市場(chǎng)需求量逐年增加。近年我國(guó)大陸引進(jìn)了不少秋石斛蘭品種,但是種苗生產(chǎn)主要靠分株繁殖,不僅繁殖速度慢,而且病毒不斷積累嚴(yán)重影響品質(zhì),難以滿足生產(chǎn)需求。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)能夠使秋石斛蘭種苗快速繁殖,目前國(guó)內(nèi)雖然有對(duì)秋石斛蘭組織培養(yǎng)的相關(guān)報(bào)道,但是現(xiàn)有的秋石斛蘭組織培養(yǎng)均存在著培養(yǎng)效果不理想的問(wèn)題,尤其是組織快速繁殖過(guò)程中常出現(xiàn)原球莖與芽并存生長(zhǎng)現(xiàn)象,極大影響了種苗繁育的效率,并且不利于原球莖的進(jìn)一步研究與利用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種用于秋石斛蘭快速繁殖的培養(yǎng)基組,提高了秋石斛蘭快速繁殖能力,而且培養(yǎng)獲得的苗健壯、生根能力強(qiáng)。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問(wèn)題的:一種用于秋石斛蘭快速繁殖的培養(yǎng)基組,該培養(yǎng)基組包括原球莖增殖培養(yǎng)基、原球莖分化培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基,其中:原球莖增殖培養(yǎng)基的組分為:hm1基本培養(yǎng)基、tdz0.5~1.0mg/l、naa0.1~0.2mg/l、活性炭0.3~0.6g/l、椰汁20~80ml/l、白糖20~30g,且ph為5.4~5.8;所述hm1基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量如下:花寶1號(hào)1.0~1.5g/l、kno3800~950mg/l、nh4no3825~875mg/l、kh2po4100~125mg/l、mgso4.7h2o200~250mg/l、cacl2.2h2o330~440mg/l、mnso4.h2o16.9mg/l、znso4.7h2o8.6mg/l、h3bo36.2mg/l、ki0.83mg/l、na2moo2.2h2o0.25mg/l、cocl2.6h2o0.025mg/l、cuso4.5h2o0.025mg/l、feso4.7h2o27.8mg/l、na2.edta37.3mg/l、鹽酸硫胺素10.0~15.0mg/l、煙酸3.0~5.0mg/l、鹽酸吡哆醇1.0mg/l、甘氨酸2.0mg/l、肌醇100~120mg/l;原球莖分化培養(yǎng)基的組分為:hm2基本培養(yǎng)基、6-ba1.0~3.0mg/l、kt0.5~2.0mg/l、ad0~1.0mg/l、naa0.1~0.2mg/l、水解乳蛋白200~500mg/l、酸水解酪蛋白200~500mg/l、白糖25~30g/l、香蕉泥50~100g/l、凝固劑6.0~6.5g/l,且ph為5.4~5.8;所述改良hm2基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量如下:花寶1號(hào)1.3~1.8g/l、kno3800~950mg/l、nh4no3825~875mg/l、kh2po4100~150mg/l、mgso4.7h2o200~250mg/l、cacl2.2h2o330~440mg/l、mnso4.h2o16.9mg/l、znso4.7h2o8.6mg/l、h3bo36.2mg/l、ki0.83mg/l、na2moo2.2h2o0.25mg/l、cocl2.6h2o0.025mg/l、cuso4.5h2o0.025mg/l、feso4.7h2o27.8mg/l、na2.edta37.3mg/l、鹽酸硫胺素5.0~7.0mg/l、煙酸2.0~3.0mg/l、鹽酸吡哆醇1.0mg/l、甘氨酸2.0mg/l、肌醇150~180mg/l;生根培養(yǎng)基的組分為:hm3基本培養(yǎng)基、iba0.2~0.3mg/l、naa0.1~0.2mg/l、活性炭0.5~0.8g/l、香蕉粉2.0~3.5g/l、白糖20~25g、凝固劑6.3~7.0g/l,且ph為5.4~5.8;所述hm3基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量如下:花寶1號(hào)0.8~1.2g/l、kno3700~800mg/l、nh4no3500~700mg/l、kh2po485~125mg/l、mgso4.7h2o185~250mg/l、cacl2.2h2o330~440mg/l、mnso4.h2o16.9mg/l、znso4.7h2o8.6mg/l、h3bo36.2mg/l、ki0.83mg/l、na2moo2.2h2o0.25mg/l、cocl2.6h2o0.025mg/l、cuso4.5h2o0.025mg/l、feso4.7h2o27.8mg/l、na2.edta37.3mg/l、鹽酸硫胺素1.0~3.0mg/l、煙酸1.0~2.0mg/l、鹽酸吡哆醇5.0~8.0mg/l、甘氨酸2.0mg/l、肌醇100~120mg/l。進(jìn)一步地,所述凝固劑為瓊脂粉、卡拉膠、或瓊脂粉和卡拉膠的混合物。進(jìn)一步地,所述凝固劑為瓊脂粉和卡拉膠的混合物,且瓊脂粉與卡拉膠的質(zhì)量比為1:1。本發(fā)明用于秋石斛蘭快速繁殖的培養(yǎng)基組的有益效果在于:僅需165~185d的時(shí)間就能將秋石斛蘭的原球莖依次經(jīng)歷原球莖增殖培養(yǎng)、原球莖分化培養(yǎng)及生根培養(yǎng)三個(gè)階段,從而獲得健壯的秋石斛蘭生根苗,即提高了秋石斛蘭快速繁殖能力,實(shí)現(xiàn)較為理想的培養(yǎng)效果;具體地,原球莖增殖率高且質(zhì)量好,能夠保持較強(qiáng)分化能力與再生能力,且培養(yǎng)獲得的苗健壯、生根能力強(qiáng);進(jìn)而克服了現(xiàn)有技術(shù)中原球莖培養(yǎng)效率低、苗分化率低等缺陷;另外,本發(fā)明培養(yǎng)基組中的各培養(yǎng)基組分成本低廉,使得本發(fā)明培養(yǎng)基組易于推廣與應(yīng)用?!揪唧w實(shí)施方式】本發(fā)明用于秋石斛蘭快速繁殖的培養(yǎng)基組,該培養(yǎng)基組包括原球莖增殖培養(yǎng)基、原球莖分化培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基,其中:原球莖增殖培養(yǎng)基的組分為:hm1基本培養(yǎng)基、tdz0.5~1.0mg/l、naa0.1~0.2mg/l、活性炭0.3~0.6g/l、椰汁20~80ml/l、白糖20~30g,且ph為5.4~5.8;所述hm1基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量如下表1所示;表1hm1基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成份名稱用量mg/l序號(hào)成份名稱用量mg/l1花寶1號(hào)1000~150011na2moo2.2h2o0.252kno3800~95012cocl2.6h2o0.0253nh4no3825~87513cuso4.5h2o0.0254kh2po4100~12514feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o200~25015na2.edta37.36cacl2.2h2o330~44016鹽酸硫胺素10.0~15.07mnso4.h2o16.917煙酸3.0~5.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇1.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇100~120原球莖分化培養(yǎng)基的組分為:hm2基本培養(yǎng)基、6-ba1.0~3.0mg/l、kt0.5~2.0mg/l、ad0~1.0mg/l、naa0.1~0.2mg/l、水解乳蛋白(lh)200~500mg/l、酸水解酪蛋白(ch)200~500mg/l、白糖25~30g/l、香蕉泥50~100g/l、凝固劑6.0~6.5g/l,且ph為5.4~5.8;所述改良hm2培養(yǎng)基的成份及各成份用量如下表2所示;表2hm2基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成份名稱用量mg/l序號(hào)成份名稱用量mg/l1花寶1號(hào)1300~180011na2moo2.2h2o0.252kno3800~95012cocl2.6h2o0.0253nh4no3825~87513cuso4.5h2o0.0254kh2po4100~15014feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o200~25015na2.edta37.36cacl2.2h2o330~44016鹽酸硫胺素5.0~7.07mnso4.h2o16.917煙酸2.0~3.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇1.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇150~180生根培養(yǎng)基的組分為:hm3基本培養(yǎng)基、花寶1號(hào)0.8~1.2g/l、iba0.2~0.3mg/l、naa0.1~0.2mg/l、活性炭0.5~0.8g/l、香蕉粉2.0~3.5g/l、白糖20~25g、凝固劑6.3~7.0g/l,且ph為5.4~5.8;所述改良hm3培養(yǎng)基的成份及各成份用量如下表3所示。表3hm3基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成份名稱用量mg/l序號(hào)成份名稱用量mg/l1花寶1號(hào)800~120011na2moo2.2h2o0.252kno3700~80012cocl2.6h2o0.0253nh4no3500~70013cuso4.5h2o0.0254kh2po485~12514feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o185~25015na2.edta37.36cacl2.2h2o330~44016鹽酸硫胺素1.0~3.07mnso4.h2o16.917煙酸1.0~2.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇5.0~8.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇100~120其中,原球莖分化培養(yǎng)基與生根培養(yǎng)基凝固劑可具體選用瓊脂粉、卡拉膠、或瓊脂粉和卡拉膠的混合物;當(dāng)凝固劑選用瓊脂粉和卡拉膠的混合物時(shí),其中瓊脂粉與卡拉膠的質(zhì)量比為1:1。其中,原球莖分化培養(yǎng)基與生根培養(yǎng)基凝固劑可具體選用瓊脂粉、卡拉膠、或瓊脂粉和卡拉膠的混合物;當(dāng)凝固劑選用瓊脂粉和卡拉膠的混合物時(shí),其中瓊脂粉與卡拉膠的質(zhì)量比為1:1。且需要說(shuō)明的是,在本發(fā)明中花寶1號(hào)產(chǎn)地美國(guó),其n、p、k質(zhì)量比為7:6:19;瓊脂粉、卡拉膠產(chǎn)地日本,強(qiáng)度分別為1400g/cm2、1500g/cm2;白糖為市售質(zhì)量等級(jí)一級(jí)的袋裝白砂糖;香蕉泥與香蕉粉的原料香蕉均選用福建漳州產(chǎn)的天寶香蕉。本發(fā)明培養(yǎng)基組用于秋石斛蘭快速繁殖時(shí),將秋石斛蘭的原球莖置于原球莖增殖培養(yǎng)基中,并以搖床振蕩方式進(jìn)行增殖培養(yǎng),搖床轉(zhuǎn)速80~100r/min,培養(yǎng)溫度25℃,光強(qiáng)為800~1000lx,光照時(shí)間為12h/d;接著將增殖培養(yǎng)后的原球莖接種至原球莖分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)5~7d,之后光強(qiáng)為1800~2000lx,光照時(shí)間12h/d;然后分化培養(yǎng)分化出的芽接種至生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)即可,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)5~7d,之后光強(qiáng)為2000~2500lx,光照時(shí)間12~14h/d。為了對(duì)本發(fā)明培養(yǎng)基組進(jìn)行進(jìn)一步的闡述說(shuō)明,申請(qǐng)人給出了如下幾個(gè)將本發(fā)明具體培養(yǎng)基組進(jìn)行應(yīng)用的實(shí)施例,且這些實(shí)施例僅是示例性的,并不用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例1(1)繁殖材料:秋石斛蘭‘三亞陽(yáng)光’幼芽誘導(dǎo)獲得的原球莖。(2)原球莖增殖培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例原球莖增殖培養(yǎng)基:hm1基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表4所示)、tdz0.5mg/l、naa0.1mg/l、活性炭0.3g/l、椰汁50ml/l、白糖25g/l,且ph為5.4;接著將繁殖材料即所述原球莖置于配制的原球莖增殖培養(yǎng)基中,并以搖床振蕩方式進(jìn)行增殖培養(yǎng),搖床轉(zhuǎn)速90r/min,培養(yǎng)溫度25℃,光強(qiáng)為800lx,光照時(shí)間為12h/d;表4實(shí)施例1中hm1基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成份名稱用量mg/l序號(hào)成份名稱用量mg/l1花寶1號(hào)150011na2moo2.2h2o0.252kno380012cocl2.6h2o0.0253nh4no382513cuso4.5h2o0.0254kh2po410014feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o20015na2.edta37.36cacl2.2h2o33016鹽酸硫胺素10.07mnso4.h2o16.917煙酸3.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇1.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇100通過(guò)觀察與分析得知原球莖增殖培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期35d,增殖系數(shù)7.6,增殖培養(yǎng)后的原球莖顆粒大且飽滿。(3)原球莖分化培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例原球莖分化培養(yǎng)基:hm2基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表5所示)、6-ba3.0mg/l、kt2.0mg/l、ad0.5mg/l、naa0.1mg/l、香蕉泥100g/l、白糖25gg/l、瓊脂粉6.0g/l,且ph為5.4;接著將增殖培養(yǎng)后的原球莖接種至配制的原球莖分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)5d,之后光強(qiáng)為1800lx,光照時(shí)間12h/d;表5實(shí)施例1中hm2基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量通過(guò)觀察與分析得知原球莖分化培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期75d,芽分化量大,每克原球莖可分化出150個(gè)芽。(4)生根培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例生根培養(yǎng)基:hm3基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表6所示)、iba0.2mg/l、naa0.1mg/l、活性炭0.5g/l、香蕉粉2.0g/l、白糖20g/l、卡拉膠6.3g/l,且ph為5.4;接著將分化培養(yǎng)分化出的芽接種至配制的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)6d,之后光強(qiáng)為2000lx,光照時(shí)間12h/d;表6實(shí)施例1中hm3基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成分名稱用量mg/l序號(hào)成分名稱用量mg/l1花寶1號(hào)80011na2moo2.2h2o0.252kno370012cocl2.6h2o0.0253nh4no350013cuso4.5h2o0.0254kh2po48514feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o18515na2.edta37.36cacl2.2h2o33016鹽酸硫胺素1.07mnso4.h2o16.917煙酸1.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇5.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇100通過(guò)觀察與分析得知生根培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期75d,獲得株高6.0~7.0cm、根長(zhǎng)2.0~3.0cm、根數(shù)3~5條的完整植株,且生根率達(dá)100.0%。實(shí)施例2(1)繁殖材料:秋石斛蘭‘水晶’幼芽誘導(dǎo)獲得的原球莖。(2)原球莖增殖培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例原球莖增殖培養(yǎng)基:hm1基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表7所示)、tdz0.6mg/l、naa0.2mg/l、活性炭0.5g/l、椰汁20ml/l、白糖20g/l,且ph為5.6;接著將繁殖材料即所述原球莖置于配制的原球莖增殖培養(yǎng)基中,并以搖床振蕩方式進(jìn)行增殖培養(yǎng),搖床轉(zhuǎn)速80r/min,培養(yǎng)溫度25℃,光強(qiáng)為950lx,光照時(shí)間為12h/d;表7實(shí)施例2中hm1基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成分名稱用量mg/l序號(hào)成分名稱用量mg/l1花寶1號(hào)100011na2moo2.2h2o0.252kno390012cocl2.6h2o0.0253nh4no385013cuso4.5h2o0.0254kh2po411014feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o23015na2.edta37.36cacl2.2h2o38016鹽酸硫胺素13.07mnso4.h2o16.917煙酸4.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇1.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇110通過(guò)觀察與分析得知原球莖增殖培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期30d,增殖系數(shù)6.5,增殖培養(yǎng)后的原球莖顆粒大且飽滿。(3)原球莖分化培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例原球莖分化培養(yǎng)基:hm2基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表8所示)、6-ba1.0mg/l、kt0.5mg/l、naa0.1mg/l、lh200mg/l、ch500mg/l、白糖25g/l、瓊脂粉與卡拉膠的混合物6.0g/l(該混合物中瓊脂粉與卡拉膠的質(zhì)量比為1:1),且ph為5.6;接著將增殖培養(yǎng)后的原球莖接種至配制的原球莖分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)7d,之后光強(qiáng)為1900lx,光照時(shí)間12h/d;表8實(shí)施例2中hm2基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量通過(guò)觀察與分析得知原球莖分化培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期60d,芽分化量大,每克原球莖可分化出130個(gè)芽。(4)生根培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例生根培養(yǎng)基:hm3基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表9所示)、iba0.2mg/l、naa0.2mg/l、活性炭0.5g/l、香蕉粉3.0g/l、白糖22g/l、卡拉膠6.5g/l,且ph為5.6;接著將分化培養(yǎng)分化出的芽接種至配制的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)5d,之后光強(qiáng)為2300lx,光照時(shí)間13h/d;表9實(shí)施例2中hm3基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成分名稱用量mg/l序號(hào)成分名稱用量mg/l1花寶1號(hào)80011na2moo2.2h2o0.252kno375012cocl2.6h2o0.0253nh4no360013cuso4.5h2o0.0254kh2po410014feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o23015na2.edta37.36cacl2.2h2o38016鹽酸硫胺素2.57mnso4.h2o16.917煙酸1.58znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇7.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.83肌醇110通過(guò)觀察與分析得知生根培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期75d,獲得株高6.0~7.0cm、根長(zhǎng)2.0~3.0cm、根數(shù)3~5條的完整植株,且生根率達(dá)100.0%。實(shí)施例3(1)繁殖材料:秋石斛蘭‘紅粉佳人’幼芽誘導(dǎo)獲得的原球莖。(2)原球莖增殖培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例原球莖增殖培養(yǎng)基:hm1基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表10所示)、tdz1.0mg/l、naa0.1mg/l、活性炭0.6g/l、椰汁80ml/l、白糖30g/l,且ph為5.8;接著將繁殖材料即所述原球莖置于配制的原球莖增殖培養(yǎng)基中,并以搖床振蕩方式進(jìn)行增殖培養(yǎng),搖床轉(zhuǎn)速100r/min,培養(yǎng)溫度25℃,光強(qiáng)為1000lx,光照時(shí)間為12h/d;表10實(shí)施例3中hm1基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成分名稱用量mg/l序號(hào)成分名稱用量mg/l1花寶1號(hào)150011na2moo2.2h2o0.252kno395012cocl2.6h2o0.0253nh4no387513cuso4.5h2o0.0254kh2po412514feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o25015na2.edta37.36cacl2.2h2o44016鹽酸硫胺素15.07mnso4.h2o16.917煙酸5.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇1.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇120通過(guò)觀察與分析得知原球莖增殖培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期33d,增殖系數(shù)6.8,增殖培養(yǎng)后的原球莖顆粒大且飽滿。(3)原球莖分化培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例原球莖分化培養(yǎng)基:hm2基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表11所示)、花寶1號(hào)1.8g/l、6-ba2.0.0mg/l、kt2.0mg/l、ad1.0mg/l、naa0.2mg/l、lh500mg/l、ch500mg/、白糖30g/l、瓊脂粉與卡拉膠混合物6.5g/l(該混合物中瓊脂粉與卡拉膠的質(zhì)量比為1:1),且ph為5.8;接著將增殖培養(yǎng)后的原球莖接種至配制的原球莖分化培養(yǎng)基上進(jìn)行分化培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)7d,之后光強(qiáng)為2000lx,光照時(shí)間12h/d;表11實(shí)施例3中hm2基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量通過(guò)觀察與分析得知原球莖分化培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期70d,芽分化量大,每克原球莖可分化出145個(gè)芽。(4)生根培養(yǎng):按照如下組分并依據(jù)常規(guī)的培養(yǎng)基配制方法配制本實(shí)施例生根培養(yǎng)基:hm3基本培養(yǎng)基(具體成份及各成份用量如下表12所示)、iba0.3mg/l、naa0.2mg/l、活性炭0.8g/l、香蕉粉3.5g/l、白糖25g/l、瓊脂粉與卡拉膠混合物7.0g/l(該混合物中瓊脂粉與卡拉膠的質(zhì)量比為1:1)且ph為5.8;接著將分化培養(yǎng)分化出的芽接種至配制的生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(24±3)℃,且剛接種時(shí)先放置培養(yǎng)室不開(kāi)培養(yǎng)架燈管即自然光照下培養(yǎng)7d,之后光強(qiáng)為2500lx,光照時(shí)間14h/d;表12實(shí)施例2中hm3基本培養(yǎng)基的成份及各成份用量序號(hào)成分名稱用量mg/l序號(hào)成分名稱用量mg/l1花寶1號(hào)120011na2moo2.2h2o0.252kno380012cocl2.6h2o0.0253nh4no370013cuso4.5h2o0.0254kh2po412514feso4.7h2o27.85mgso4.7h2o25015na2.edta37.36cacl2.2h2o330~44016鹽酸硫胺素3.07mnso4.h2o16.917煙酸2.08znso4.7h2o8.618鹽酸吡哆醇8.09h3bo36.219甘氨酸2.010ki0.8320肌醇120通過(guò)觀察與分析得知生根培養(yǎng)的結(jié)果為:培養(yǎng)周期75d,獲得株高6.0~7.0cm、根長(zhǎng)2.0~3.0cm、根數(shù)3~5條的完整植株,且生根率達(dá)100.0%。綜上,本發(fā)明培養(yǎng)基組用于秋石斛蘭的快速繁殖培養(yǎng)時(shí),僅需165~185d的時(shí)間,就能將外植體的原球莖依次經(jīng)歷原球莖增殖培養(yǎng)、原球莖分化培養(yǎng)及生根培養(yǎng)三個(gè)階段,從而獲得健壯的秋石斛蘭生根苗;具體地,原球莖增殖率高且質(zhì)量好,能夠保持較強(qiáng)分化能力與再生能力,且培養(yǎng)獲得的苗健壯、生根能力強(qiáng);進(jìn)而克服了現(xiàn)有技術(shù)中原球莖培養(yǎng)效率低、苗分化率低等缺陷;另外,本發(fā)明培養(yǎng)基組中的各培養(yǎng)基組分成本低廉,使得本發(fā)明培養(yǎng)基組易于推廣與應(yīng)用。當(dāng)前第1頁(yè)12
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