本發(fā)明屬于米櫧無(wú)性繁殖技術(shù)，涉及一種米櫧組培苗生根誘導(dǎo)方法。

背景技術(shù)：

米櫧（castanopsiscarlesii（hemsl.）hay.），殼斗科錐屬，喬木，高可達(dá)20米，芽小，葉披針形，葉全緣，或兼有少數(shù)淺裂齒，嫩葉葉背有紅褐色或棕黃色稍緊貼的細(xì)片狀蠟鱗層，成長(zhǎng)葉呈銀灰色或多少帶灰白色；雄圓錐花序近頂生，花序軸無(wú)毛或近無(wú)毛，果序無(wú)毛，殼斗近圓球形或闊卵形，堅(jiān)果近圓球形或闊圓錐形，熟透時(shí)無(wú)毛，果臍位于堅(jiān)果底部。3-6月開(kāi)花，次年9-11月結(jié)果成熟。產(chǎn)中國(guó)長(zhǎng)江以南各地。生于山地或丘陵常綠或落葉闊葉混交林中。喜雨量充沛和溫暖氣候，能耐蔭，喜深厚、溫潤(rùn)之中性和酸性土，亦耐干旱和貧瘠。既是優(yōu)良的用材樹(shù)種，又是培育食用菌的優(yōu)良原料，培肥土壤、涵養(yǎng)水源能力都比較強(qiáng)。米櫧樹(shù)形高大、美觀，葉橢圓或長(zhǎng)圓形。早期生長(zhǎng)迅速，適應(yīng)能力強(qiáng)，抗風(fēng)力強(qiáng)，又耐煙塵、抗污染并能殺菌。在庭院觀賞及營(yíng)造防火林帶中有著廣闊的應(yīng)用前景和發(fā)展?jié)摿Α?/p>

米櫧一般都采用種子繁殖，造林時(shí)多采用裸根苗造林。在自然條件比較惡劣的栽植地，苗木生長(zhǎng)期長(zhǎng)、成活率低下，從而影響到造林成果。組織培養(yǎng)技術(shù)是一種快速無(wú)性繁殖技術(shù)，選擇米櫧優(yōu)良家系或者無(wú)性系為材料，通過(guò)組織培養(yǎng)方法繁殖苗木，既可以滿足生產(chǎn)上的數(shù)量要求，又可保持母本性狀。然而在組培過(guò)程中，常常出現(xiàn)生根率低、生根不統(tǒng)一、根系數(shù)量少以及根系不粗壯的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種能提高米櫧組培苗的生根率，根系數(shù)量以及根系萌發(fā)整齊度的米櫧組培苗生根誘導(dǎo)方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種米櫧組培苗生根誘導(dǎo)方法，選取增殖繼代米櫧小苗，先進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根組培苗，主要操作步驟如下：

（1）取材：選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的米櫧繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺(tái)上的無(wú)菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長(zhǎng)健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄，備用；

（2）預(yù)生根培養(yǎng)：將步驟（1）修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)；

（3）生根培養(yǎng)：待步驟（2）中的單芽經(jīng)過(guò)30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。

以上所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+naa1.0～2.0mg/l+維生素c6g/l++vc1.0～2.0mg/l+卡拉膠25g/l+瓊脂5.0g/l。

以上所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+iaa1.0～2.0mg/l+abt2#0.5～2.0mg/l+蔗糖25g/l+瓊脂5.0g/l。

以上所述的改良er培養(yǎng)基的配方為：nh4no3980mg/l+kno31120mg/l+cacl2.2h2o440mg/l+mgso4..7h2o310mg/l+kh2po4340mg/l+h3bo30.63mg/l+mnso4..4h2o22.3mg/l+znso4.4h2o8.64h2omg/l+na2moo4.h2o0.025mg/l+cuso4..5h2o0.0025mg/l+cocl2.6h2o0.0025mg/l+feso427.8mg/l+naedta37.3mg/l+肌醇80mg/l+煙酸0.5mg/l+鹽酸吡哆醇0.5mg/l+甘氨酸2mg/l。

以上步驟（2）和步驟（3）所述的光溫環(huán)境為：溫度20±1℃，濕度55～70%，光照強(qiáng)度2000～2500lux，光照15～16h/d。

本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)及有益效果如下：

1、本發(fā)明采用1/2改良er培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，同時(shí)重點(diǎn)調(diào)整了與米櫧生根的相關(guān)的微量元素和有機(jī)成分，使得培養(yǎng)基更科學(xué)，更有針對(duì)性，更易促使米櫧繼代芽生根，效果顯著。

2、本發(fā)明在生根誘導(dǎo)前采用低濃度naa和抗壞血酸（vc）對(duì)繼代單芽進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，可使組培苗發(fā)根統(tǒng)一，發(fā)根速度快，根系粗壯且數(shù)量較多。

3、本發(fā)明在增殖繼代單芽經(jīng)過(guò)30～35d時(shí)間預(yù)生根培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，即可達(dá)到預(yù)生根培養(yǎng)效果，又避免了小苗在預(yù)生根培養(yǎng)階段長(zhǎng)出根系而使后期生根培養(yǎng)發(fā)根不整齊。

4、本發(fā)明的在特定的光溫條件下進(jìn)行預(yù)生根和生根培養(yǎng)，適應(yīng)米櫧組培苗的生長(zhǎng)特性，促進(jìn)苗木的生長(zhǎng)。

5、本發(fā)明縮短了米櫧繼代芽生根周期，生根率高，根系多，質(zhì)量好，生根組培苗移栽成活率高，可實(shí)現(xiàn)米櫧組培產(chǎn)業(yè)化育苗，為人工無(wú)性系林的建設(shè)提供優(yōu)質(zhì)種苗，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和生態(tài)效益。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。

實(shí)施例1：

選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的米櫧繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺(tái)上的無(wú)菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長(zhǎng)健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+naa1.0mg/l+維生素c6g/l++vc2.0mg/l+卡拉膠25g/l+瓊脂5.0g/l，在溫度20±1℃，濕度55～60%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過(guò)30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+iaa1.0mg/l+abt2#0.5mg/l+蔗糖25g/l+瓊脂5.0g/l，在溫度20±1℃，濕度55～60%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長(zhǎng)出根系。

以上所述的改良er培養(yǎng)基的配方為：nh4no3980mg/l+kno31120mg/l+cacl2.2h2o440mg/l+mgso4..7h2o310mg/l+kh2po4340mg/l+h3bo30.63mg/l+mnso4..4h2o22.3mg/l+znso4.4h2o8.64h2omg/l+na2moo4.h2o0.025mg/l+cuso4..5h2o0.0025mg/l+cocl2.6h2o0.0025mg/l+feso427.8mg/l+naedta37.3mg/l+肌醇80mg/l+煙酸0.5mg/l+鹽酸吡哆醇0.5mg/l+甘氨酸2mg/l。

實(shí)施例2：

選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的米櫧繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺(tái)上的無(wú)菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長(zhǎng)健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+naa1.5mg/l+維生素c6g/l++vc1.0mg/l+卡拉膠25g/l+瓊脂5.0g/l，在溫度20±1℃，濕度60～65%，光照強(qiáng)度2000lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過(guò)30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+iaa1.5mg/l+abt2#1.0mg/l+蔗糖25g/l+瓊脂5.0g/l，在溫度20±1℃，濕度60～65%，光照強(qiáng)度2000lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長(zhǎng)出根系。

以上所述的改良er培養(yǎng)基的配方為：nh4no3980mg/l+kno31120mg/l+cacl2.2h2o440mg/l+mgso4..7h2o310mg/l+kh2po4340mg/l+h3bo30.63mg/l+mnso4..4h2o22.3mg/l+znso4.4h2o8.64h2omg/l+na2moo4.h2o0.025mg/l+cuso4..5h2o0.0025mg/l+cocl2.6h2o0.0025mg/l+feso427.8mg/l+naedta37.3mg/l+肌醇80mg/l+煙酸0.5mg/l+鹽酸吡哆醇0.5mg/l+甘氨酸2mg/l。

實(shí)施例3：

選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的米櫧繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺(tái)上的無(wú)菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長(zhǎng)健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+naa2.0mg/l+維生素c6g/l++vc1.5mg/l+卡拉膠25g/l+瓊脂5.0g/l，在溫度20±1℃，濕度65～70%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過(guò)30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良er培養(yǎng)基+iaa2.0mg/l+abt2#2.0mg/l+蔗糖25g/l+瓊脂5.0g/l，在溫度20±1℃，濕度65～70%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長(zhǎng)出根系。

以上所述的改良er培養(yǎng)基的配方為：nh4no3980mg/l+kno31120mg/l+cacl2.2h2o440mg/l+mgso4..7h2o310mg/l+kh2po4340mg/l+h3bo30.63mg/l+mnso4..4h2o22.3mg/l+znso4.4h2o8.64h2omg/l+na2moo4.h2o0.025mg/l+cuso4..5h2o0.0025mg/l+cocl2.6h2o0.0025mg/l+feso427.8mg/l+naedta37.3mg/l+肌醇80mg/l+煙酸0.5mg/l+鹽酸吡哆醇0.5mg/l+甘氨酸2mg/l。