本發(fā)明涉及組織培養(yǎng)技術領域，具體涉及一種白蝴蝶的組培繁殖方法。
背景技術：
白蝴蝶(syngoniumpodophyllum)，又名箭葉芋、紫梗芋、剪葉芋、絲素藤、果芋，為天南星科合果芋屬植物。合果芋株態(tài)優(yōu)美，葉形多變，色彩清雅，它與綠蘿、蔓綠絨譽為天南星科的代表性室內觀葉植物。也是目前歐美十分流行的室內吊盆裝飾材料。
為滿足市場的需求，白蝴蝶的人工繁殖及培養(yǎng)技術被大量研究及應用，而組培繁殖是最適合白蝴蝶人工培育的繁殖方法，組培繁殖技術是實現(xiàn)白蝴蝶規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化培育和生產(chǎn)的最優(yōu)技術。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術問題是：本發(fā)明的目的在于提供一種成活率高的白蝴蝶的組培繁殖方法。
為了解決上述技術問題，本發(fā)明采用的技術方案為：提供一種白蝴蝶的組培繁殖方法，包括以下步驟：
1)取白蝴蝶的頂芽作為外植體材料，將外植體使用1‰的升汞浸泡消毒30min；
2)將已消毒的外植體接種于ms培養(yǎng)基上，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba1.5-2mg/l，naa0.8-1mg/l，瓊脂5-7g/l和蔗糖30-40g/l，所述ms培養(yǎng)基的ph為5-6；
3)將步驟2)接種后ms培養(yǎng)基放入到培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)；所述培養(yǎng)條件為：溫度26-28度，光照強度300-500lx，培養(yǎng)時間為4-5周。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba1.5mg/l，naa0.8mg/l，瓊脂5g/l和蔗糖30g/l。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，所述ms培養(yǎng)基的ph為5.4。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，所述培養(yǎng)條件具體為：溫度26度，光照強度400lx，培養(yǎng)時間為4周。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，所述步驟1)后還包括步驟：將外植體使用1‰的升汞浸泡消毒25-30min后，切去升汞腐蝕部分。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，所述步驟：“切去升汞腐蝕部分”后還包括步驟：用無菌水清洗3-5遍。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，具體包括如下步驟：
1)取白蝴蝶的頂芽作為外植體材料，將外植體使用1‰的升汞浸泡消毒30min，切去升汞腐蝕部分，然后用無菌水清洗5遍；
2)將已消毒的外植體接種于ms培養(yǎng)基上；
3)將步驟2)接種后ms培養(yǎng)基放入到培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)；所述培養(yǎng)條件為：溫度26-28度，光照強度300-500lx，培養(yǎng)時間為4周，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba1.5mg/l，naa0.8mg/l，瓊脂5g/l和蔗糖30g/l，所述ms培養(yǎng)基的ph為5.4。
優(yōu)選的，上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，所述步驟3)后還包括步驟：4)組培苗移栽，移栽時采用的種植基質為質量比為3：1的德國泥炭蘚：珍珠巖。
本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明的白蝴蝶的組培繁殖方法中，使用頂芽為外植體，升汞消毒時間為30min，以提高成活率。再在ms培養(yǎng)基的基礎上通過調整激素的配比濃度、蔗糖的用量以及ph等，得到白蝴蝶最適宜的培養(yǎng)基，最終提升產(chǎn)品品質，降低成本。
具體實施方式
為詳細說明本發(fā)明的技術內容、所實現(xiàn)目的及效果，以下結合實施方式予以說明。
本發(fā)明最關鍵的構思在于：使用頂芽為外植體，升汞消毒時間為30min，以提高成活率。
實施例1
一種白蝴蝶的組培繁殖方法，包括以下步驟：
1)取白蝴蝶的頂芽作為外植體材料，將外植體使用1‰的升汞浸泡消毒30min，切去升汞腐蝕部分，然后用無菌水清洗3-5遍；
2)將已消毒的外植體接種于ms培養(yǎng)基上；
3)將步驟2)接種后ms培養(yǎng)基放入到培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)；所述培養(yǎng)條件為：溫度26-28度，光照強度300-500lx，培養(yǎng)時間為4-5周，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba1.5mg/l，naa0.8mg/l，瓊脂5g/l和蔗糖30g/l，所述ms培養(yǎng)基的ph為5.4。
4)組培苗移栽，移栽時采用的種植基質為質量比為3：1的德國泥炭蘚：珍珠巖。
實施例2
一種白蝴蝶的組培繁殖方法，包括以下步驟：
1)取白蝴蝶的頂芽作為外植體材料，將外植體使用1‰的升汞浸泡消毒30min；切去升汞腐蝕部分。用無菌水清洗3-5遍。
2)將已消毒的外植體接種于ms培養(yǎng)基上，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba2mg/l，naa1mg/l，瓊脂7g/l和蔗糖40g/l，所述ms培養(yǎng)基的ph為6；
3)將步驟2)接種后ms培養(yǎng)基放入到培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)；所述培養(yǎng)條件為：溫度28度，光照強度500lx，培養(yǎng)時間為5周。
4)將步驟3)所得組培苗移栽，移栽時采用的種植基質為質量比為3：1的德國泥炭蘚：珍珠巖。
實施例3
一種白蝴蝶的組培繁殖方法，包括以下步驟：
1)取白蝴蝶的頂芽作為外植體材料，將外植體使用1‰的升汞浸泡消毒30min，切去升汞腐蝕部分，然后用無菌水清洗5遍；
2)將已消毒的外植體接種于ms培養(yǎng)基上，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba1.5mg/l，naa0.8mg/l，瓊脂5g/l和蔗糖30g/l，所述ms培養(yǎng)基的ph為5-6；
3)將步驟2)接種后ms培養(yǎng)基放入到培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)；所述培養(yǎng)條件為：溫度26度，光照強度300lx，培養(yǎng)時間為4周。
4)將步驟3)所得組培苗移栽，移栽時采用的種植基質為質量比為3：1的德國泥炭蘚：珍珠巖。
對比試驗
1、采用資源圃中高約35-40cm，無可見病斑、蟲害，無變異，無花葉，具有白蝴蝶母本基本生長性狀的健壯母株上的頂芽和側芽作為外植體。
1.1試驗方法
將選好的母株停止?jié)菜胖糜谫Y源圃竹樓中，進行5天的預處理。待其基質表面以下20-50mm處的土層干燥、均勻一致(用手捏成散沙狀，不粘手)，植株葉片呈現(xiàn)輕度萎蔫時便剝去其外部老葉、枯葉直至頂芽緊湊處，用手術刀在植株離地面2-3節(jié)處切下。后在微生物室工作臺上將植株基部老組織、根眼及周圍污漬輕輕削凈并把芽點四周切平滑，并進行分段，每芽一段，將分好段的外植體裝于干凈的杯子中，然后用洗潔精洗凈，瀝干。按芽的大小及老嫩程度進行分類，將分類好的芽放置于無菌空瓶中，8-10個為一瓶。在瓶蓋上標明植物代碼及消毒時間，用1‰的升汞進行消毒。然后用無菌水清洗3-5遍(每次3-5min)，切去外植體被升汞腐蝕的部分，再接種到ms培養(yǎng)基上(1個/瓶)。具體消毒處理如表1。
表1
培養(yǎng)條件：27±1℃；300-500lx；4w，所述ms培養(yǎng)基包括如下組分：6-ba1.5mg/l，naa0.8mg/l，瓊脂5g/l和蔗糖30g/l，所述ms培養(yǎng)基的ph為5.4。
上述的白蝴蝶的組培繁殖方法中，ms培養(yǎng)基中的6-ba和naa的激素濃度利于白蝴蝶芽長高與葉片白斑出現(xiàn)，體現(xiàn)品種特性，激素濃度升高或降低效果就會下降；蔗糖濃度為30g/l時，白蝴蝶白斑明顯且多，材料長勢粗壯，最好，蔗糖濃度升高或降低效果就會下降；ph5.4易液化，利于材料生長與白斑的出現(xiàn)。
2、結果與分析
白蝴蝶在溫度27±1℃，光照強度300-500lx的條件下培養(yǎng)4w后，調查指標：芽萌動時間；真、細菌污染率；死亡率；成活率，具體調查結果詳見表2。
表2
經(jīng)調查發(fā)現(xiàn)：本次白蝴蝶原種制作試驗中頂芽的成活率(43.3％)比側芽的成活率(21.3％)要高出許多，說明本試驗中白蝴蝶以頂芽為外植體試驗效果較好。試驗中處理a、處理d及處理e中均既無真菌污染現(xiàn)象又無死亡現(xiàn)象，說消毒時間為30min較為適宜。處理b中死亡率達到了3.9％，原因可能是較長時間的升汞消毒，導致芽的死亡。而處理c中真菌污染率及細菌污染率均較其他處理要高，原因可能是消毒時間不夠升汞消毒不徹底所導致。
以上所述僅為本發(fā)明的實施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內容所作的等同變換，或直接或間接運用在相關的技術領域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內。