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技術(shù)特征:

1.一種赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯芽培養(yǎng)和生根培養(yǎng)工序,采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生赤楠嫩枝作為外植體,對(duì)外植體進(jìn)行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲取初始芽,再將初始芽接種于增殖培養(yǎng)基中經(jīng)過4-5個(gè)周期增殖培養(yǎng),形成叢生芽,將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng),最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根,具體操作步驟如下:

(1)外植體選擇:采集半木質(zhì)化、生長(zhǎng)健壯的當(dāng)年生赤楠嫩枝作為外植體;

(2)外植體處理:將外植體置于自來水下沖洗10-15 min,然后去除外植體葉片,再將外植體浸泡在體積濃度 0.1%的升汞溶液中,控制浸泡時(shí)間15-20 min,最后用純凈水洗凈藥物,將外植體裁成帶至少1個(gè)腋芽,1.5-3cm長(zhǎng)的莖段,視莖段木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi),備用;

(3)初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng):將步驟(2)得到的外植體接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)30-35 d,初始芽萌發(fā)、生長(zhǎng);

(4)增殖培養(yǎng):將高≥1cm的初始芽接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng),35-40 d轉(zhuǎn)接一次,循環(huán)往復(fù),經(jīng)4-5個(gè)周期的培養(yǎng),形成叢生芽;

(5)壯芽培養(yǎng):將步驟(4)得到的叢生芽進(jìn)行切割,4-5顆芽/叢,插入壯芽培養(yǎng)基中,培養(yǎng)35-40 d,形成壯芽;

(6)生根培養(yǎng):將步驟(5)得到的高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根;余下小芽叢再次接種于步驟(4)的增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)增殖,然后再重復(fù)步驟(5),循環(huán)往復(fù),獲得大量壯芽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為:1/2改良WPM培養(yǎng)基+6-BA 4.0-6.0 mg/L+IAA 2.0-3.0 mg/L+KT 1.0-2.0 mg/L+ZT 1.5-2.0 mg/L+ VC 15 mg/L+葉酸10mg/L+VB2 15 mg/+瓊脂3.0 g/L+白糖25 g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:所述的增殖培養(yǎng)基的配方為:改良WPM培養(yǎng)基+6-BA 6.0-8.0 mg/L+IAA 2.0-3.0 mg/L+ZT 0.5-1.0 mg/L+VC 15 mg/L+VB2 15 mg+天冬氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.6 g/L+白糖 30 g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:所述的壯芽培養(yǎng)基的配方為:改良WPM培養(yǎng)基+6-BA 3.0-4.0 mg/L+IAA 1.0-1.5 mg/L+VC 15 mg/L+VB2 15 mg+天冬氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+白糖 25 g/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:所述的生根培養(yǎng)基的配方為:1/2改良WPM培養(yǎng)基+6-BA 1.5-2.5 mg/L+IAA 1.0-1.5 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+白糖 30 g/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:所述的改良WPM培養(yǎng)基的配方為:以上所述改良WPM培養(yǎng)基的組分和體積重量比為:NH4NO3 410mg/L,CaCl2·2H2O 80 mg/L,MgSO4·7H20 270 mg/L,KH2PO4 170 mg/L,Ca(NO3)2·4H2O 180 mg/L,KI 0.83 mg/L,MnSO4·H2O 21.6 mg/L,ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L,Na2MoO4·2H2O 0.25 mg/L,CuSO4·5H2O 0.025 mg/L,Na2·EDTA 37.4 mg/L,F(xiàn)eSO4·7H2O 26.6 mg/L,肌醇200 mg/L,煙酸0.5 mg/L,鹽酸吡哆醇0.5 mg/L,鹽酸硫胺素1.0 mg/L,甘氨酸2.0 mg/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的赤楠萌枝快速離體培育方法,其特征在于:步驟(3)所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)的培育控制條件為:光培養(yǎng)、光照500-1000 lx,培養(yǎng)溫度20±1℃;步驟(4)所述的增殖培養(yǎng)、步驟(5)所述的壯芽培養(yǎng)、步驟(6)所述的生根培養(yǎng)的培育控制條件均為:光培養(yǎng),光照2500-4000 lx,每日光照16 h,培養(yǎng)溫度25-28℃。

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