本發(fā)明屬于微生物農(nóng)藥領(lǐng)域，具體涉及到一種防治大豆根腐病的可濕性粉劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

大豆根腐病是一種分布廣、危害重、病原菌種類繁多和防治困難的世界性病害。大豆根腐病主要發(fā)生在幼苗期，病株根及莖基部形成褐色橢圓形、一長條形或不規(guī)則形病斑，略凹陷，繼而發(fā)展成環(huán)繞主莖的大斑塊，甚至危害側(cè)根，病菌主要侵害皮層，很少進(jìn)入維管束組織。病株后期根部變黑褐色，表皮腐爛，側(cè)根、須根少或壞死。大豆根腐病是大豆生產(chǎn)上較難防治的病害之一，常造成較大損失。大豆根腐病的病原菌為半知菌亞門鐮刀菌屬真菌。該病菌在土壤、病株殘?bào)w及未腐熟的農(nóng)家肥中或附著在種子上越冬，成為翌年初侵染源，可借助雨水、灌溉水等進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播。近年來，由鐮刀菌屬(fusariumsp.)侵染所引起的植物病害是流行廣、危害大的世界性真菌病害。其中以大豆受害最為嚴(yán)重，發(fā)病率一般為30％～50％，受害重的地區(qū)發(fā)病率高達(dá)80％～90％以上。植株一旦感病，如治理措施不及時(shí)，將會(huì)導(dǎo)致病害迅速蔓延。

毛殼菌是自然界中廣泛存在的子囊菌，球毛殼菌(chaetomiumglobosum)是毛殼菌屬的一種，因其對植物病害生物防治的作用而受到關(guān)注并得到較為深入的研究。由于球毛殼菌(chaetomiumglobosum)具有產(chǎn)生抗生物質(zhì)抑制植物病原菌的生長、生長過程中其與植物病原菌有拮抗作用、球毛殼菌能夠誘導(dǎo)宿主植物產(chǎn)生抗性；某些特定菌株代謝產(chǎn)生的物質(zhì)能夠誘導(dǎo)植物組織抗氧化能力的增強(qiáng)，從而提高宿主植物的抗病能力以及能夠促進(jìn)宿主植物生長。球毛殼菌能夠產(chǎn)生麥角甾醇類物質(zhì)有助于改善和提高土壤肥力，從而促進(jìn)宿主植物的生長并且提高作物產(chǎn)量等眾多作用。楊謙等對球毛殼菌和角毛殼菌生物防治效果以及對多菌靈抗性進(jìn)行研究，并與soytong等合作，成功研制出毛殼菌生物防治制劑。同時(shí)根據(jù)前期研究從木豆分離的球毛殼菌及其發(fā)酵產(chǎn)物對常見植物病原真菌有明顯的抑制作用，參考申請?zhí)枮?01510016944.2的中國專利。因此，球毛殼菌(chaetomiumglobosum)具有作為微生物農(nóng)藥的潛力。

我國每年使用大量的化學(xué)農(nóng)藥制劑與化肥，極易造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)，生物富集，不僅污染生態(tài)環(huán)境，還影響人類的健康。而微生物農(nóng)藥副作用小，對人無害，生產(chǎn)工藝較簡單，是一種具有廣闊前景的綠色農(nóng)藥，日益成為全球農(nóng)藥發(fā)展的一種趨勢。但是，目前微生物藥劑品種較少，效果不穩(wěn)定且不如化學(xué)農(nóng)藥快，受氣候條件影響較大，給生物防治大豆根腐病帶來了危害。植物內(nèi)生真菌類是一類應(yīng)用前景廣闊的資源微生物，近年來已成為生防研制開發(fā)的熱點(diǎn)，利用內(nèi)生真菌進(jìn)行生物防治是生態(tài)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的一個(gè)重要方面。因此，研究高效安全且經(jīng)濟(jì)實(shí)用的植物病害的防治方法就非常重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是，提供一種使用方便、藥效好的防治大豆根腐病的可濕性粉劑。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種防治大豆根腐病的可濕性粉劑，該可濕性粉劑由如下重量份的配方制備而成：球毛殼菌(chaetomiumglobosum)elp-8的發(fā)酵液20-70份；載體10-20份；sds1-5份；pva1-5份。

作為本發(fā)明的優(yōu)選，該可濕性粉劑由如下重量份的配方制備而成：球毛殼菌(chaetomiumglobosum)elp-8的發(fā)酵液70份；載體20份；潤濕劑5份，分散劑5份。

本發(fā)明所述的載體為高嶺土、輕質(zhì)碳酸鈣、膨潤土中的一種或兩種以上的混合物。

本發(fā)明所述的潤濕劑為乙醇、peg8000、甘油和十二烷基硫酸鈉(sds)中的一種或幾種的混合物。

本發(fā)明所述分散劑是是聚乙烯醇(pva)、阿拉伯樹膠、吐溫60和羧甲基纖維素鈉中的一種或幾種的混合物。

本發(fā)明所述可濕性粉劑使用的微生物為球毛殼菌(chaetomiumglobosum)elp-8，保藏編號(hào)為cctccno：m2015001，保藏地址為中國武漢市武漢大學(xué)，保藏日期為2015年1月5日，對病原真菌有很好的抑制作用。

本發(fā)明所述球毛殼菌(chaetomiumglobosum)elp-8發(fā)酵液的制備方法如下：將球毛殼菌接種到pdb培養(yǎng)液中，置于轉(zhuǎn)速120rpm振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)時(shí)間為7天，獲得球毛殼菌的發(fā)酵液。

本發(fā)明所述防治大豆根腐病的可濕性粉劑的制備方法，其特征在于，按所述重量份的配方取發(fā)酵所獲得的球毛殼菌elp-8發(fā)酵液并加入載體，每間隔1h攪拌一次，使載體充分吸附菌體和發(fā)酵產(chǎn)物，48h后離心，取沉淀置于40℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘干，即制得球毛殼菌粉；最后將菌粉與潤濕劑、分散劑按上述重量份比混合，經(jīng)研磨粉碎，過200目篩，制備得到球毛殼菌可濕性粉劑。

本發(fā)明所述防治大豆根腐病的可濕性粉劑在防治大豆根腐病中的應(yīng)用。

本發(fā)明以球毛殼菌(chaetomiumglobosum)elp-8發(fā)酵液制備可濕性粉劑，不僅克服了化學(xué)藥劑所帶來的環(huán)境毒副作用和農(nóng)藥殘留問題，而且高效、無毒、安全無農(nóng)藥殘留的特性。并且它是一種環(huán)境友好型綠色微生物農(nóng)藥，在生物防治大豆根腐病領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

附圖說明

圖1為可濕性粉劑防治大豆根腐病的根部圖，其中a、b、c、d、e和f分別為空白對照組、稀釋可濕性粉劑200倍、400倍、600倍、800倍和1000倍。與空白對照組相比，各處理組防治大豆根腐病的效果顯著升高；同時(shí)隨著可濕性粉劑濃度的增大防治效果增大。觀察根部的變化，空白對照組根部感染嚴(yán)重，有少量的根系并且部分已經(jīng)變成黃褐色。各處理組的根部染病狀態(tài)減輕，其中可濕性粉劑稀釋200倍時(shí)，防治大豆根腐病的效果最佳。

具體實(shí)施方式

具體實(shí)施方式一：

本實(shí)施方式中將球毛殼菌elp-8接種到pdb培養(yǎng)液中，置于轉(zhuǎn)速120rpm振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)時(shí)間為7天，獲得球毛殼菌(chaetomiumglobosum)elp-8發(fā)酵液。

具體實(shí)施方式二：

本實(shí)施方式中將發(fā)酵所獲得的球毛殼菌elp-8發(fā)酵液20-70份并加入載體10-20份，每間隔1h攪拌一次，使載體充分吸附菌體和發(fā)酵產(chǎn)物，48h后離心，取沉淀置于40℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘干，即制得球毛殼菌粉；最后將菌粉與sds1-5份、pva1-5份進(jìn)行混合，經(jīng)研磨粉碎，過200目篩，制備得到球毛殼菌可濕性粉劑。

具體實(shí)施方式三：

本實(shí)施方式中將發(fā)酵所獲得的球毛殼菌elp-8發(fā)酵液70份并加入載體20份，每間隔1h攪拌一次，使載體充分吸附菌體和發(fā)酵產(chǎn)物，48h后離心，取沉淀置于40℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘干，即制得球毛殼菌粉；最后將菌粉與sds5份、pva5份進(jìn)行混合，經(jīng)研磨粉碎，過200目篩，制備得到球毛殼菌可濕性粉劑。

具體實(shí)施方式四：

本實(shí)施方式中防治大豆根腐病的可濕性粉劑，在東北林業(yè)大學(xué)植物園對尖孢鐮刀菌所引起的大豆根腐病，進(jìn)行了初步的田間藥效實(shí)驗(yàn)。

本發(fā)明提供的防治大豆根腐病的可濕性粉劑，分別稀釋200倍、400倍、600倍、800倍和1000倍，以清水處理為空白對照。大豆第一次發(fā)病時(shí)第一次噴施，此后每隔一周噴施一次。藥效計(jì)算方法參考申請?zhí)枮?01410303095.4的中國專利中的計(jì)算方法，防治效果見表1。

表1防治大豆根腐病的可濕性粉劑對大豆根腐病的防治效果