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一種桔梗葉片的快速誘芽及組培繁殖方法與流程

文檔序號:11867028閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種桔梗葉片組培繁殖的快速誘芽方法,包括對桔梗種子處理并萌發(fā)培養(yǎng)獲得桔梗葉片的步驟,將所得桔梗葉片去柄切塊得葉片切塊的步驟,其特征在于:將葉片切塊作為外植體,轉入芽誘導培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),不經(jīng)愈傷組織的形成與增殖階段,直接誘導產(chǎn)生分化芽;

所述的芽誘導培養(yǎng)基為pH= 5.8的MS培養(yǎng)基,向其中添加工作濃度分別為1mg/L 的6-BA、0.1mg/L 的NAA、6.5g/L的瓊脂粉和30g/L的蔗糖;

所述轉入芽誘導培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的條件為:溫度23 ± 2 ℃,光照時間12h/d,光照強度2000 lx。

2.如權利要求1所述桔梗葉片組培繁殖的快速誘芽方法,其特征在于:所述外植體在芽誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)20d。

3.如權利要求1所述桔梗葉片組培繁殖的快速誘芽方法,其特征在于:所述葉片切塊的大小為0.5cm × 0.5cm。

4.如權利要求1所述桔梗葉片組培繁殖的快速誘芽方法,其特征在于:所述對桔梗種子處理并萌發(fā)培養(yǎng)獲得桔梗葉片的操作方法為:將桔梗種子在赤霉素溶液中浸泡,再經(jīng)消毒劑消毒,接種到MS基礎培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),待種子萌發(fā)長出7-10片葉子時,獲取無菌試管苗,取其葉片。

5.如權利要求4所述桔梗葉片組培繁殖的快速誘芽方法,其特征在于:所述的赤霉素溶液的濃度為250 mg/L,浸泡時間為8h。

6.如權利要求4所述桔梗葉片組培繁殖的快速誘芽方法,其特征在于:所述的消毒劑消毒步驟為:先用75%酒精消毒10 s,然后用1.5 g/L HgCl2 消毒10-15 min。

7.采用權利要求1所述誘芽方法進行桔梗葉片組培繁殖的方法,其特征在于:進行快速誘芽后,將所得的分化芽從基部切下,轉入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)30-35天,獲得無菌桔梗苗,待條件成熟后即可進行移栽。

8.如權利要求7所述桔梗葉片組培繁殖的方法,其特征在于:所述的生根培養(yǎng)基為pH=5.8的1/2 MS培養(yǎng)基,向其中添加工作濃度分別為0.5 mg/L 的IBA、0.5 mg/L 的NAA、6.5 g/L的瓊脂粉和30 g/L的蔗糖。

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