本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種鷓鴣茶種子萌發(fā)方法以及一種用于鷓鴣茶種子萌發(fā)的培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

鷓鴣茶[Mallotusoblongifolius(Miq.)Muell-Arg]也叫山苦茶、毛茶和禾姑茶，系大戟科野桐屬植物。鷓鴣茶在海南島主要分布在文昌、萬寧和陵水，也在三亞、樂東、白沙、定安、東方、瓊中、保亭和昌江等地有分布，其中以文昌銅鼓嶺和萬寧東山嶺的出產(chǎn)的鷓鴣茶最為有名。此外，在我國(guó)廣東、云南、廣西，以及中印半島和蘇門答臘島也有野生分布。鷓鴣茶葉圓味甘，是一種奇特的野生茶葉，其葉片等植物體干燥后具有濃郁的零陵香氣；沖泡飲用時(shí)別具風(fēng)味、甘冽爽口，被歷代文人墨客譽(yù)為"靈芝草"。鷓鴣茶是海南具有濃郁地方和民族特色的代茶飲料植物，已成為海南地方茶的一大文化特色。

鷓鴣茶具有顯著的保健作用和藥用功效，是海南重要的民間中藥材，利用歷史悠久。鷓鴣茶的提取物中富含茶多糖、茶多酚、沒食子酸和多酚類等多種有效成分?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，鷓鴣茶中的有效成分具有清除氧自由基、抗動(dòng)脈粥樣硬化、促進(jìn)膽汁分泌、抑制病菌活性、抗疲勞衰老與鎮(zhèn)靜止痛等功效。另外，作為重要的中藥材，海南民間用鷓鴣茶的根治療牙痛有良好的效果。

目前，鷓鴣茶資源的開發(fā)利用尚停留在利用野生資源的水平上，產(chǎn)業(yè)發(fā)展所需的鷓鴣茶人工規(guī)模種植和配套栽培技術(shù)尚處于空白。亦今為止，海南島內(nèi)外或國(guó)內(nèi)外尚沒有建立鷓鴣茶產(chǎn)品商業(yè)化生產(chǎn)的大規(guī)模種植基地，幾乎所有市場(chǎng)上流通的鷓鴣茶產(chǎn)品均是直接從野生植物上獲取。除了個(gè)別農(nóng)戶有零星的庭院式種植外，制作鷓鴣茶產(chǎn)品所需的原材料幾乎全部依賴掠奪式地從野生植株上獲取葉片。受到經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使，目前鷓鴣茶野生資源已經(jīng)逐年減少。由于鷓鴣茶的市場(chǎng)需求量較大，且隨著“海南國(guó)際旅游島”的發(fā)展，鷓鴣茶原葉的需求量也將會(huì)急劇增加。

鷓鴣茶是雌雄異株植物，在自然居群中以雄株多而雌株少為普遍現(xiàn)象。自然授粉條件下，鷓鴣茶的平均結(jié)實(shí)率(成熟種子/雌花數(shù))不足5％，因此如何利用好鷓鴣茶種子是開展野外居群恢復(fù)或野生材料馴化研究中首要解決的問題。然而，鷓鴣茶種子具有短期后熟現(xiàn)象，而此階段氣溫高、雨水較多，在自然狀態(tài)下種子極易腐敗；另外，鷓鴣茶種子具有堅(jiān)硬的外種皮，種子萌發(fā)過程中胚根很難突破外種皮，而發(fā)芽失??；此外，鷓鴣茶種子萌發(fā)初期需要避光環(huán)境。由于上述多種不利因素導(dǎo)致鷓鴣茶種子發(fā)芽率極低，在自然條件或人工撒播到土壤中，其發(fā)芽率均低于5％。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種鷓鴣茶種子萌發(fā)方法，操作簡(jiǎn)單，發(fā)芽率高，填補(bǔ)了鷓鴣茶種子人工萌發(fā)的空白。本發(fā)明還提供了一種用于鷓鴣茶種子萌發(fā)的培養(yǎng)基。

本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供一種鷓鴣茶種子萌發(fā)方法，包括以下步驟：

步驟1，選取飽滿無損傷的成熟鷓鴣茶種子；

步驟2，將種子洗凈后，消毒；

步驟3，破除種子外種皮，清洗除去殼屑；

步驟4，再消毒，清洗；

步驟5，接種到種子培養(yǎng)基中，所述培養(yǎng)基為添加了25-35g/L蔗糖和5-10g/L卡拉膠的MS培養(yǎng)基；

步驟6，避光培養(yǎng)至種子開始萌發(fā)，去除避光，繼續(xù)培養(yǎng)10-20天。

優(yōu)選地，步驟5中所述培養(yǎng)基為添加了30g/L蔗糖和7g/L卡拉膠的MS培養(yǎng)基。

優(yōu)選地，步驟2中消毒采用乙醇消毒。

進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟2中消毒為：將種子在70-80％的乙醇中浸泡3-8分鐘。

優(yōu)選地，步驟4中再消毒采用過氧化氫消毒液。

進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟4中再消毒為采用25-35％的過氧化氫消毒液消毒5-15分鐘。

優(yōu)選地，步驟6培養(yǎng)溫度為22-28℃。

本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供一種用于鷓鴣茶種子萌發(fā)的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基為添加了25-35g/L蔗糖和5-10g/L卡拉膠的MS培養(yǎng)基。

優(yōu)選地，所述培養(yǎng)基為添加了30g/L蔗糖和7g/L卡拉膠的MS培養(yǎng)基。

本申請(qǐng)發(fā)明人為解決現(xiàn)有技術(shù)中的不足，反復(fù)摸索，成功獲得鷓鴣茶種子萌發(fā)的有效方法，該方法操作簡(jiǎn)單，鷓鴣茶的種子發(fā)芽率高達(dá)95％以上，且培養(yǎng)周期短，填補(bǔ)了鷓鴣茶種子人工萌發(fā)的空白。

說明書附圖

圖1為采用本發(fā)明萌發(fā)方法的鷓鴣茶種子的發(fā)芽過程，其中，1為第5天發(fā)芽狀態(tài)，2為第7天發(fā)芽狀態(tài)，3為第10天發(fā)芽狀態(tài)，4為15天小苗，5為25天小苗；6為35天小苗；

圖2為采用水培法的鷓鴣茶種子的變化過程，其中，A為水培第一天的狀態(tài)，B為水培第5天的狀態(tài)，C為水培第13天的狀態(tài)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體的實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，以更好地理解本發(fā)明。

實(shí)施例1

(1)取材：選取飽滿無損傷的成熟鷓鴣茶種子；

(2)初消毒：將種子洗凈后于75％的乙醇中浸泡5分鐘；

(3)破殼：在無菌工作臺(tái)上破除外種皮；

(4)清洗：用水離子水洗除殼屑；

(5)再消毒：加入30％的過氧化氫消毒液消毒10分鐘；

(6)再清洗：用無菌水洗4-5遍；

(7)接種培養(yǎng)基：接種到種子培養(yǎng)基中(MS+30g/L蔗糖+7g/L卡拉膠)；

(8)避光培養(yǎng)：恒溫25度培養(yǎng)箱避光培養(yǎng)5天；

(9)正常培養(yǎng)：避光培養(yǎng)至種子開始萌發(fā)，去除避光，繼續(xù)培養(yǎng)。在該過程中對(duì)發(fā)芽過程進(jìn)行觀察，結(jié)果如圖1所示，在第5天始種子開始萌發(fā)，去除避光后，繼續(xù)培養(yǎng)，芽長(zhǎng)勢(shì)良好，在第15天時(shí)形成小苗，繼續(xù)培養(yǎng)，小苗存活率高，而且培養(yǎng)至20天左右發(fā)芽率達(dá)95％以上。

實(shí)施例2

(1)取材：選取飽滿無損傷的成熟鷓鴣茶種子；

(2)初消毒：將種子洗凈后于70％的乙醇中浸泡8分鐘；

(3)破殼：在無菌工作臺(tái)上破除外種皮；

(4)清洗：用水離子水洗除殼屑；

(5)再消毒：加入35％的過氧化氫消毒液消毒5分鐘；

(6)再清洗：用無菌水洗4-5遍；

(7)接種培養(yǎng)基：接種到種子培養(yǎng)基中(MS+25g/L蔗糖+10g/L卡拉膠)；

(8)避光培養(yǎng)：22-28℃培養(yǎng)箱避光培養(yǎng)5天；

(9)正常培養(yǎng)：第5天始種子開始萌發(fā)，去除避光，培養(yǎng)至20天左右發(fā)芽率達(dá)95％以上。

實(shí)施例3

(1)取材：選取飽滿無損傷的成熟鷓鴣茶種子；

(2)初消毒：將種子洗凈后于80％的乙醇中浸泡3分鐘；

(3)破殼：在無菌工作臺(tái)上破除外種皮；

(4)清洗：用水離子水洗除殼屑；

(5)再消毒：加入25％的過氧化氫消毒液消毒15分鐘；

(6)再清洗：用無菌水洗4-5遍；

(7)接種培養(yǎng)基：接種到種子培養(yǎng)基中(MS+35g/L蔗糖+5g/L卡拉膠)；

(8)避光培養(yǎng)：22-28℃培養(yǎng)箱避光培養(yǎng)5天；

(9)正常培養(yǎng)：第5天始種子開始萌發(fā)，去除避光，培養(yǎng)至20天左右發(fā)芽率達(dá)95％以上。

對(duì)比例

選取飽滿無損傷的成熟鷓鴣茶種子，分別采用與3個(gè)實(shí)施例相同的處理方法，區(qū)別之處在于，采用水培法和土培法進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)第5-7天時(shí)，種子均開始霉變，在第13天左右時(shí)，種子完全霉變，無法發(fā)芽。水培結(jié)果如圖2所示。

以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實(shí)施例。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，任何對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。