本發(fā)明涉及生物農藥加工技術領域，尤其涉及一種木霉菌油懸浮劑及其制備方法。
背景技術：
目前常見的木霉制劑主要為可濕性粉劑，使用過程中藥效較低，體積大，不易計量，在使用過程中會產生飄移現(xiàn)象，導致藥劑有較大的損失，在靶標上有不良的黏附性，對環(huán)境也造成污染?？蓾裥苑蹌┑牧６群芗?，在生產和使用過程中會出現(xiàn)大量的粉塵，產生的粉塵會增加操作者吸入和造成對皮膚和眼睛的刺激，另粉塵與一些敏感物質接觸后會有爆炸的危險。
油懸浮劑是一種能將油類溶劑中不溶的固體農藥活性成分均勻地分散在非水介質（即油類）中，依靠表面活性劑形成高分散且穩(wěn)定的懸浮液體的制劑。油懸浮劑具有滲透性和黏附性強、抗蒸發(fā)、耐雨水沖刷、增效等優(yōu)點，適用于防治在熱帶雨林和多雨季節(jié)發(fā)生的各種植物病害。同時，它能將制劑中的活性成分（木霉菌孢子）均勻地分散在非水介質（即油類）中，依靠表面活性劑形成高分散且穩(wěn)定的懸浮液體的制劑。使用的非水介質可在環(huán)境中自然降解，同時在生產與使用過程中無粉塵，對環(huán)境和人、畜安全，不造成污染。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明結合木霉制劑和油懸浮劑的優(yōu)點，提供一種適用于在熱帶雨林和多雨季節(jié)，能夠有效防治植物病害的木霉菌油懸浮劑；同時能滿足將制劑中的活性成分（木霉菌孢子）均勻分散、無環(huán)境污染、增效和提高植物抗病害能力的要求。
為了實現(xiàn)上述技術目的，本發(fā)明提供的技術方案為：
一種木霉菌油懸浮劑，各組分及其重量配比為：
濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液 15-25 %
乳化劑 1-3 %
增稠劑 1-2%
植物油 70-83 %。
為了優(yōu)化上述技術方案，本發(fā)明所采取的技術措施還包括：
優(yōu)選地，上述的濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液的木霉菌品種選自哈茨木霉菌、棘孢木霉、綠色木霉、短密木霉、橘綠木霉、長枝木霉和康寧木霉的任意一種或幾種；最優(yōu)選哈茨木霉菌。
優(yōu)選地，上述的乳化劑選自月桂酰基谷氨酸鈉、月桂酰兩性二乙酸二鈉、對辛基苯酚聚氧乙烯醚、烷基苯磺酸鈉或山梨酸醇脂肪酸酯中的一種或幾種。
優(yōu)選地，上述的增稠劑選自黃原膠、硅酸鋁鎂、羧甲基纖維素鈉、羧乙基纖維素、甲基纖維素、膨潤土、聚乙烯醇中、海藻酸鈉或聚乙烯吡咯烷酮中的一種或幾種。
優(yōu)選地，上述的植物油選自大豆油、玉米油、菜籽油、花生油和蓖麻油中的任意一種。
優(yōu)選地，上述的木霉菌油懸浮劑活孢子含量不少于2億孢子/毫升，懸浮率不低于80%，傾倒后殘余物不高于5%，洗滌后殘余物不高于0.5%。
另一方面，本發(fā)明還提供一種上述的木霉菌油懸浮劑的制備方法，包括以下步驟：
步驟一，獲得濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液；
步驟二：按所述的木霉菌油懸浮劑的組分及其重量配比，分別量取或稱取木霉菌發(fā)酵液、乳化劑、增稠劑、植物油；
步驟三：將乳化劑、增稠劑、植物油混合均勻后，再加入濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液混合，得到木霉菌油懸浮劑。
為了進一步優(yōu)化上述制備方法，本發(fā)明提供的進一步技術措施包括：
進一步地，上述步驟一的具體操作為：
步驟A原料預處理：碳源、氮源經過100目篩分后，與水混合均勻，攪拌，獲得培養(yǎng)漿液；
步驟B滅菌：將獲得的培養(yǎng)漿液在121℃下滅菌20min；
步驟C種子培養(yǎng)：待培養(yǎng)漿液溫度降至室溫后，加入木霉菌孢子液并發(fā)酵48小時；
步驟D發(fā)酵：在無菌條件下，將步驟C獲得的木霉菌孢子液轉入已經裝入滅菌培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)5-6天；
步驟E靜置：將發(fā)酵罐置于6℃冷庫中，靜置60h后，棄除上清液，獲得濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液。
進一步地，上述步驟三中使用均質機以5000-8000r/min速率均質30min混合乳化劑、增稠劑和植物油，加入濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液后，使用均質機以3000r/min速率均質10min進行混合。
最后一方面，本發(fā)明還提供上述的木霉菌油懸浮劑的使用方法，包括將木霉菌油懸浮劑稀釋后噴灑的步驟；優(yōu)選地，油懸浮劑的稀釋倍數(shù)為250-500倍。
本發(fā)明采用上述技術方案，與現(xiàn)有技術相比，具有如下技術效果：
本發(fā)明制備的木霉菌油懸浮劑，使用時具有良好的黏著性和展著性，容易黏附于蠟質或光滑的葉面，抗雨水沖刷能力強，使用介質安全可降解，生產使用過程中無粉塵，對環(huán)境和人類不造成污染。
具體實施方式
本發(fā)明提供了一種木霉菌油懸浮劑，各組分及其重量配比為：
濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液 15-25 %
乳化劑 1-3 %
增稠劑 1-2%
植物油 70-83 %。
下面通過具體實施例對本發(fā)明進行詳細和具體的介紹，以使更好的理解本發(fā)明，但是下述實施例并不限制本發(fā)明范圍。
實施例1
濃縮木霉菌分生孢子發(fā)酵液的制備
制作方法，包括如下步驟：
（1）按土豆粉7%，葡萄糖3%，水90%的比例配置搖瓶培養(yǎng)基，土豆粉、葡萄糖需經過100目篩分后，與水混合均勻，攪拌成漿，分裝于搖瓶，裝液量250mL/1L。將搖瓶在121℃下滅菌20min，降至室溫后，接入生長于土豆葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上的哈茨木霉菌，置于搖床上，在28℃，200rpm培養(yǎng)32-48h。
（2）按土豆粉7%,葡萄糖3%,水90%的比例配置培養(yǎng)基150L。
（3）原料預處理：土豆粉、葡萄糖需經過100目篩分后，與水混合均勻，攪拌成漿。
（4）滅菌：將漿液在200L發(fā)酵罐中121℃下滅菌20min；
（5）發(fā)酵：滅菌后，待漿液溫度降至室溫后，按5%-10%比例無菌接入到200L發(fā)酵罐中，26-32℃，攪拌速度180RPM，通氣量50L-150L/min培養(yǎng)6天。
（6）靜置：將下罐的發(fā)酵孢子液置于6℃冷庫中，靜置60h后，棄除上清液，保留余下的沉降濃縮液備用。
油懸浮劑的制備：
分別量取或稱取木霉菌發(fā)酵液100ml，月桂?；劝彼徕c30ml，有機膨潤土20g，大豆油850ml。先將月桂?；劝彼徕c、有機膨潤土、大豆油使用均質機8000r/min，均質30min，再加入木霉菌發(fā)酵液3000r/min，均質10min即得木霉菌油懸浮劑。
實施例2
分別量取或稱取木霉菌發(fā)酵液濃縮液800ml，山梨酸醇脂肪酸酯80ml，硅酸鋁鎂80g，玉米油3040ml。先將山梨酸醇脂肪酸酯、硅酸鋁鎂、玉米油使用均質機8000r/min，均質30min，再加入木霉菌發(fā)酵液3000r/min，均質10min即得木霉菌油懸浮劑。其他操作同實施例1。
實施例3
分別量取或稱取木霉菌發(fā)酵濃縮液1000ml，月桂?；劝彼徕c100ml，黃原膠60g，大豆油840ml。先將月桂酰基谷氨酸鈉、黃原膠、大豆油使用均質機8000r/min，均質30min，再加入木霉菌發(fā)酵液3000r/min，均質10min即得木霉菌油懸浮劑。其他操作同實施例1。
分別測定上述3個實施例獲得的木霉菌油懸浮劑的孢子含量、懸浮率、傾倒后殘余物、洗滌后殘余物并觀察外觀，具體結果如下表1。
應用實施例4
使用實施例1配制的木霉菌油懸浮劑進行獼猴桃潰瘍病田間防治實驗，試驗在上海孫橋卉綠有機農莊進行，試驗區(qū)18m X 55 m共4行(約 26株獼猴桃/行)，行與行的間隙為3m。將試驗區(qū)中的獼猴桃樹苗全部接種獼猴桃潰瘍病病原菌—丁香假單胞桿菌反復幾次直至發(fā)病。測試共有四個處理，分別是：化學藥劑：潰腐靈（稀釋50-100倍噴霧，濰坊奧豐作物病毒防治有限公司）、Tr309T可濕性粉劑、Tr309T油懸浮劑和清水處理。每隔7天施藥一次（均勻噴霧枝葉），連續(xù)施藥五次，35天后對各處理的獼猴桃病株進行愈合率（%）的統(tǒng)計以及次年（3月份）對各處理的獼猴桃病株進行復發(fā)病率（%）的統(tǒng)計。
愈合率%=（處理前病株數(shù)-防治后病株數(shù)）/處理前病株數(shù)*100%
復發(fā)病率%=病株數(shù)/總病株愈合數(shù)
測試結果見下表二：
由表二實驗結果可以看出，本發(fā)明對獼猴桃潰瘍病防效明顯，防治效果遠優(yōu)于木霉菌可濕性粉劑和化學藥劑潰腐靈。隨著用藥后時間的延長，在木霉菌油懸浮劑的實驗區(qū)域，重復發(fā)病的株數(shù)少，且發(fā)病株的藥斑面積有減小的趨勢。
綜上所述，本發(fā)明所制備的木霉菌油懸浮劑，使用的介質可被降解，同時在生產與使用過程中無粉塵，對環(huán)境和人類不造成污染。本發(fā)明制備的木霉菌油懸浮劑具有滲透性和黏附性強、抗蒸發(fā)、耐雨水沖刷、增效等優(yōu)點，解決了特殊地區(qū)或季節(jié)，如熱帶雨林、臺風和雷雨季，可濕性粉劑等易被雨水沖刷而不能很好的發(fā)揮其防治病害的功效的問題。
以上對本發(fā)明的具體實施例進行了詳細描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實施例。對于本領域技術人員而言，任何對本發(fā)明進行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應涵蓋在本發(fā)明的范圍內。