本發(fā)明涉及麻櫟無性繁殖技術(shù)，尤其是一種麻櫟組培苗生根誘導(dǎo)方法。
背景技術(shù)：
麻櫟（Quercus acutissima Carruth）又名青岡、橡椀樹，系殼斗科（Fagaceae）櫟屬（Quercus）喬木，高達(dá)30米，胸徑達(dá)1米，樹皮深灰褐色，深縱裂。生于海拔60-2200米的山地陽坡，成小片純林或混交林，陽性喜光，喜濕潤氣候。耐寒，耐干旱瘠薄，不耐水濕，不耐鹽堿，在濕潤肥沃深厚、排水良好的中性至微酸性沙壤土上生長最好，排水不良或積水地不宜種植。與其它樹種混交能形成良好的干形，深根性，萌芽力強(qiáng)，但不耐移植?？刮廴?、抗塵土、抗風(fēng)能力都較強(qiáng)。壽命長，可達(dá)500～600年。產(chǎn)遼寧、河北、山西、山東、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、河南、湖北、湖南、廣東、海南、廣西、四川、貴州、云南等省區(qū)。
目前，麻櫟常見的種植方式為播種造林和植苗造林。組織培養(yǎng)技術(shù)是一種快速無性繁殖技術(shù)，選擇麻櫟優(yōu)良家系或者無性系為材料，通過組織培養(yǎng)方法繁殖苗木，既可以滿足生產(chǎn)上的數(shù)量要求，又可保持母本性狀。然而在組培過程中，常常出現(xiàn)生根率低、生根不統(tǒng)一、根系數(shù)量少以及根系不粗壯的問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種能提高麻櫟組培苗的生根率，根系數(shù)量以及根系萌發(fā)整齊度的麻櫟組培苗生根誘導(dǎo)方法。
為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種麻櫟組培苗生根誘導(dǎo)方法，選取增殖繼代麻櫟小苗，先進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根組培苗，主要操作步驟如下：
（1）取材：選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的麻櫟繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄，備用；
（2）預(yù)生根培養(yǎng)：將步驟（1）修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)；
（3）生根培養(yǎng)：待步驟（2）中的單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。
以上所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+NAA 1.0～2.0mg/L+維生素C6g/L++VC 15mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+IAA 1.0～2.0mg/L+ABT1#0.5～2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良MS培養(yǎng)基的基本組成為：KNO3 950 mg/L；NH4NO3 790 mg/L；CaCl2·2H2O 260 mg/L；MgSO4·7H2O 395 mg/L；Ca(NO3)2·4H2O 600 mg/L；KH2PO4 320 mg/L；MnSO4·H2O 22.3 mg/L；ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L；CuSO4·5H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；KI 0.83 mg/L；CoCl2·6H2O 0.025 mg/L；維生素B1 1.0 mg/L；維生素B6 0.5 mg/L；煙酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇 90 mg/L。
以上步驟（2）和步驟（3）所述的光溫環(huán)境為：溫度20±1℃，濕度40～45%，光照強(qiáng)度2000～2500lux，光照15～16h/d。
本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)及有益效果如下：
1、本發(fā)明采用1/2改良MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，同時(shí)重點(diǎn)調(diào)整了與麻櫟生根的相關(guān)的微量元素和有機(jī)成分，使得培養(yǎng)基更科學(xué)，更有針對性，更易促使麻櫟繼代芽生根，效果顯著。
2、本發(fā)明在生根誘導(dǎo)前采用低濃度NAA和抗壞血酸（VC）對繼代單芽進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，可使組培苗發(fā)根統(tǒng)一，發(fā)根速度快，根系粗壯且數(shù)量較多。
3、本發(fā)明在增殖繼代單芽經(jīng)過30～35d時(shí)間預(yù)生根培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，即可達(dá)到預(yù)生根培養(yǎng)效果，又避免了小苗在預(yù)生根培養(yǎng)階段長出根系而使后期生根培養(yǎng)發(fā)根不整齊。
4、本發(fā)明的在特定的光溫條件下進(jìn)行預(yù)生根和生根培養(yǎng)，適應(yīng)麻櫟組培苗的生長特性，促進(jìn)苗木的生長。
5、本發(fā)明縮短了麻櫟繼代芽生根周期，生根率高，根系多，質(zhì)量好，生根組培苗移栽成活率高，可實(shí)現(xiàn)麻櫟組培產(chǎn)業(yè)化育苗，為人工無性系林的建設(shè)提供優(yōu)質(zhì)種苗，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～36d的麻櫟繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,置于溫度20±1℃，濕度40%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的條件下進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。其中所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+NAA 1.0mg/L+維生素C6g/L++VC 15mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，置于溫度20±1℃，濕度40%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)。所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+IAA 1.0mg/L+ABT1#0.5 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良MS培養(yǎng)基的基本組成為：KNO3 950 mg/L；NH4NO3 790 mg/L；CaCl2·2H2O 260 mg/L；MgSO4·7H2O 395 mg/L；Ca(NO3)2·4H2O 600 mg/L；KH2PO4 320 mg/L；MnSO4·H2O 22.3 mg/L；ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L；CuSO4·5H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；KI 0.83 mg/L；CoCl2·6H2O 0.025 mg/L；維生素B1 1.0 mg/L；維生素B6 0.5 mg/L；煙酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇 90 mg/L。
實(shí)施例2：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)36～37d的麻櫟繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,置于溫度20±1℃，濕度40%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的條件下進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。其中所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+NAA 1.5mg/L+維生素C6g/L++VC 15mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，置于溫度20±1℃，濕度40%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)。所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+IAA 1.0mg/L+ABT1#1.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良MS培養(yǎng)基的基本組成為：KNO3 950 mg/L；NH4NO3 790 mg/L；CaCl2·2H2O 260 mg/L；MgSO4·7H2O 395 mg/L；Ca(NO3)2·4H2O 600 mg/L；KH2PO4 320 mg/L；MnSO4·H2O 22.3 mg/L；ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L；CuSO4·5H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；KI 0.83 mg/L；CoCl2·6H2O 0.025 mg/L；維生素B1 1.0 mg/L；維生素B6 0.5 mg/L；煙酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇 90 mg/L。
實(shí)施例3：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)37～38d的麻櫟繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,置于溫度20±1℃，濕度45%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的條件下進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。其中所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+NAA 2.0mg/L+維生素C6g/L++VC 15mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，置于溫度20±1℃，濕度45%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)。所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+IAA 2.0mg/L+ABT1#1.5 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良MS培養(yǎng)基的基本組成為：KNO3 950 mg/L；NH4NO3 790 mg/L；CaCl2·2H2O 260 mg/L；MgSO4·7H2O 395 mg/L；Ca(NO3)2·4H2O 600 mg/L；KH2PO4 320 mg/L；MnSO4·H2O 22.3 mg/L；ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L；CuSO4·5H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；KI 0.83 mg/L；CoCl2·6H2O 0.025 mg/L；維生素B1 1.0 mg/L；維生素B6 0.5 mg/L；煙酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇 90 mg/L。
實(shí)施例4：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)39～40d的麻櫟繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,置于溫度20±1℃，濕度45%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的條件下進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。其中所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+NAA 2.0mg/L+維生素C6g/L++VC 15mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，置于溫度20±1℃，濕度45%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的條件下進(jìn)行生根培養(yǎng)。所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良MS培養(yǎng)基+IAA 2.0mg/L+ABT1#2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良MS培養(yǎng)基的基本組成為：KNO3 950 mg/L；NH4NO3 790 mg/L；CaCl2·2H2O 260 mg/L；MgSO4·7H2O 395 mg/L；Ca(NO3)2·4H2O 600 mg/L；KH2PO4 320 mg/L；MnSO4·H2O 22.3 mg/L；ZnSO4·7H2O 8.6 mg/L；CuSO4·5H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；KI 0.83 mg/L；CoCl2·6H2O 0.025 mg/L；維生素B1 1.0 mg/L；維生素B6 0.5 mg/L；煙酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇 90 mg/L。