本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種苦瓜雜交隔離方法。
背景技術(shù)：
苦瓜(Momordica charantia L.)為葫蘆科苦瓜屬中的栽培種，一年生草本植物?？喙暇哂休^高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和特殊藥用價(jià)值，深受人們的喜愛(ài)。
在苦瓜的推廣過(guò)程中，制種產(chǎn)量也是關(guān)鍵?？喙蠟榇菩郛惢ㄖ参?，雜交制種可采用空間隔離去除母本雄花進(jìn)行自然雜交或人工隔離再進(jìn)行雜交授粉的方法。采用空間隔離方法需要找一處周圍1000米沒(méi)有種植苦瓜、且土壤環(huán)境條件均符合要求的制種基地，符合此條件的相對(duì)較難。因此，在苦瓜的制種方法上，一般選擇人工隔離的辦法。
現(xiàn)有的人工隔離方法主要包括硫酸紙袋隔離法、鋁片隔離法和嫁接夾法，其中硫酸紙袋隔離法雖標(biāo)識(shí)明顯，雜交種子產(chǎn)量也高，雜交一代純度好，但操作較麻煩，用時(shí)多；嫁接夾法操作簡(jiǎn)單，用時(shí)最短，種子量也較多，但花瓣易破損，操作要非常小心，部分花朵雜交授粉后無(wú)法再進(jìn)行隔離；鋁片隔離法操作較難，松緊度不好控制，松了易滑落，緊了易傷到花蕊，且大量掉落田間后存在一定的隱患。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種苦瓜雜交隔離方法。
本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下：
一種苦瓜雜交隔離方法，包括如下步驟：
(1)將錫箔紙剪成約1.5～2.5cm×3.5～4.5cm大小，在母本雌花和父本雄花開(kāi)花前1天，用錫箔紙包好，包時(shí)保持適度的松緊度；
(2)第二天早上6:30～10:30，在母本雌花開(kāi)花時(shí)進(jìn)行雜交授粉：摘下前一天用錫箔紙包好并已開(kāi)花的父本雄花，取下已開(kāi)花的母本雌花的錫箔紙，進(jìn)行人工授粉，授粉后母本雌花再用錫箔紙包好，掛好標(biāo)記即可。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，將錫箔紙剪成1.8～2.2cm×3.8～4.2cm大小。
進(jìn)一步優(yōu)選的，將錫箔紙剪成2.0cm×4.0m大小。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(2)中，雜交授粉的時(shí)間為第二天早上6:50～10:10。
進(jìn)一步優(yōu)選的，所述步驟(2)中，雜交授粉的時(shí)間為第二天早上7:00～10:00。
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的隔離方法雖雜交種子量不是最多，但隔離效果好、操作簡(jiǎn)單，不傷花蕊，速度快，標(biāo)識(shí)明顯，且所產(chǎn)雜交一代苦瓜性狀表現(xiàn)與現(xiàn)有技術(shù)方法基本一致。
具體實(shí)施方式
以下通過(guò)具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明和描述。
實(shí)施例1
一種苦瓜雜交隔離方法，包括如下步驟：
(1)將錫箔紙剪成約1.5～2.5cm×3.5～4.5cm大小(優(yōu)選的，將錫箔紙剪成1.8～2.2cm×3.8～4.2cm大小，進(jìn)一步優(yōu)選的，將錫箔紙剪成2.0cm×4.0m大小)，在母本雌花和父本雄花開(kāi)花前1天，用錫箔紙包好，包時(shí)保持適度的松緊度；
(2)第二天早上6:30～10:30(優(yōu)選的，為第二天早上6:50～10:10，進(jìn)一步優(yōu)選的，為第二天早上7:00～10:00)，在母本雌花開(kāi)花時(shí)進(jìn)行雜交授粉：摘下前一天用錫箔紙包好并已開(kāi)花的父本雄花，取下已開(kāi)花的母本雌花的錫箔紙，進(jìn)行人工授粉，授粉后母本雌花再用錫箔紙包好，掛好標(biāo)記即可。
實(shí)施例2本發(fā)明的隔離方法與現(xiàn)有技術(shù)其他三種方法的對(duì)比試驗(yàn)：
1、試驗(yàn)具體內(nèi)容
試驗(yàn)品種：漳綠1號(hào)父母本
1.1隔離工具：采用硫酸紙袋、錫箔紙、嫁接夾、鋁片等4種隔離材料進(jìn)行隔離。
1.2隔離方法：硫酸紙袋為6.2×16cm的袋子，將雌花和雄花在開(kāi)花前1天套好，并用嫁接夾固定；錫箔紙剪成2.0×4.0cm大小，將雌花和雄花在開(kāi)花前1天包好；用嫁接夾在雌花和雄花開(kāi)花前一天輕輕夾住花瓣尾部約0.5cm處；鋁片剪成0.3×5.0cm的長(zhǎng)條，在雌花和雄花開(kāi)花前一天纏繞花瓣中尾部；網(wǎng)室大棚在苦瓜種植前和開(kāi)花前分別用核酸多角體和吡蟲啉等進(jìn)行蟲害的殺滅工作，并在棚內(nèi)掛黃板，保證棚內(nèi)無(wú)昆蟲進(jìn)行授粉。
1.3雜交授粉：在母本盛花期每天早上8：00～10：00進(jìn)行雜交授粉，授粉后再用相應(yīng)的隔離工具進(jìn)行隔離，如授粉后的雌花再用錫箔紙包好。每一種隔離方法做20朵，分2天進(jìn)行，掛標(biāo)簽，標(biāo)簽上明確標(biāo)明授粉日期、品種和隔離方法。種子成熟后計(jì)算單果種子數(shù)、種子百粒重、小區(qū)種子產(chǎn)量。
不同隔離方法生產(chǎn)的雜交種子進(jìn)行大田種植，每種種植30m2，3次重復(fù)，觀察記錄品種特征，計(jì)算第一雌花節(jié)位，測(cè)量果長(zhǎng)、果徑、單果重，記錄各小區(qū)采收產(chǎn)量，觀察計(jì)算雜株數(shù)量，計(jì)算雜交一代純度。
1.4父母本的種植管理：父本1月20日浸種催芽，比母本提早15天，苗期35天，種植株行距為80×150cm，母本株行距為50×150cm，采用人字架栽培。父本種植50株，母本種植250株。父畝本100cm以下側(cè)枝摘除，父本100cm以上側(cè)枝任其生長(zhǎng)，母本則選留2-3條健壯的側(cè)枝和主蔓，其余側(cè)枝摘除。雜交授粉前，根據(jù)父母本的特征進(jìn)行一次檢查，去除雜株。
病蟲害管理主要預(yù)防枯萎病、霜霉病、白粉病和瓜實(shí)蠅、桔小實(shí)蠅、蚜蟲等。定植時(shí)用98％惡霉靈可濕性粉劑3000-4000倍液灌根，以防枯萎病的發(fā)生。用多·硫懸浮液、醚菌酯等防治白粉病、炭疽病。用烯酰·錳鋅、冠路、烯酰嗎啉等防治霜霉病。用果蔬實(shí)蠅引誘劑誘殺瓜實(shí)蠅和桔小實(shí)蠅，及時(shí)摘除被害瓜并深埋。
2試驗(yàn)結(jié)果
2.1不同隔離方法對(duì)雜交授粉效率的影響
采用不同工具隔離，操作效率有所不同，詳見(jiàn)表1。硫酸紙袋套袋過(guò)程較繁瑣，用時(shí)最多；鋁片用時(shí)較長(zhǎng)，鋁片操作時(shí)固定較難，松時(shí)易脫落，緊可能傷到花蕾；錫箔紙相對(duì)簡(jiǎn)單，用時(shí)較短；嫁接夾操作簡(jiǎn)單，用時(shí)短，但雜交后進(jìn)行隔離時(shí)，花瓣容易斷，操作要特別小心。在采用4種不同的隔離工具的授粉過(guò)程中，嫁接夾、鋁片、本發(fā)明均存在少量未隔離的雌花或隔離后未授粉的雌花；硫酸紙袋則存在少量未隔離的雌花，不存在隔離后未授粉的雌花，標(biāo)識(shí)較明顯。
表1、不同隔離工具對(duì)雜交授粉效率的影響
2.2不同隔離方法對(duì)雜交授粉結(jié)實(shí)率的影響
不同隔離方法對(duì)雜交授粉后的結(jié)實(shí)率的影響不同，見(jiàn)表2，硫酸紙袋隔離的種子較多，種子百粒重也相對(duì)高一些，嫁接夾和本發(fā)明隔離的種子和種子百粒重居中，鋁片較低。
表2、不同隔離工具對(duì)雜交授粉后苦瓜結(jié)實(shí)率的影響
2.3不同隔離方法對(duì)雜交一代田間純度的影響
4種不同隔離方法生產(chǎn)的漳綠1號(hào)苦瓜田間表現(xiàn)為硫酸紙袋、嫁接夾、鋁片、本發(fā)明的雜株率均為0，即純度為100％，均有好的隔離效果；不同方法生產(chǎn)的漳綠1號(hào)性狀見(jiàn)表3，在第一雌花節(jié)位、果色、平均果長(zhǎng)、平均果徑方面表現(xiàn)基本一致，在平均單果重方面、平均小區(qū)產(chǎn)量方面不存在顯著性差異。
表3、不同隔離方法生產(chǎn)的漳綠1號(hào)苦瓜性狀和產(chǎn)量表現(xiàn)
以上所述，僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，故不能依此限定本發(fā)明實(shí)施的范圍，即依本發(fā)明專利范圍及說(shuō)明書內(nèi)容所作的等效變化與修飾，皆應(yīng)仍屬本發(fā)明涵蓋的范圍內(nèi)。