1.鱉三倍體純系的高效育成方法,包括如下步驟:
(1)他莫昔芬喂養(yǎng)料的配備:取純度為95%以上的他莫昔芬粉劑,加入到鱉常規(guī)飼養(yǎng)飼料中,制成喂養(yǎng)料,其中他莫昔芬含量為8~10g/500g飼料,待用;
(2)投喂:在母鱉產(chǎn)蛋前,按常規(guī)飼料投喂方法對(duì)母鱉進(jìn)行投喂他莫昔芬喂養(yǎng)料,每天三次,早上8:00每100g母鱉投喂15~18g,中午12點(diǎn)每100g母鱉投喂10~15g,下午6:00每100g母鱉投喂5~10g,直至產(chǎn)蛋;
(3)冷休克處理:在一次卵裂時(shí),采用冷休克的方法,把步驟(2)中的受精蛋放入溫度為-1~1℃的冷水箱中,持續(xù)時(shí)間為3~5min,取出待用;
(4)雌激素抑制劑溶液的配制:將氯米芬和睪酮一起溶于80%~90%的乙醇中,再加蒸餾水配制成雌激素抑制劑溶液,其中雌激素抑制劑溶液中氯米芬的濃度為180~250mg/l,睪酮的濃度為100~150mg/l;
(5)用步驟(4)所制備的雌激素抑制劑溶液,放入噴霧器中,對(duì)經(jīng)過(guò)步驟(3)處理的受精蛋進(jìn)行均勻噴霧,用量每100只受精蛋為8~15ml,保持孵化器的溫度28~32℃、濕度40~80%,進(jìn)行孵化;從而獲得鱉的雄性四倍體純系;
(6)取步驟(5)的雄性四倍體作為父本,取普通二倍體作為母本,采用回交的方式,獲得100%三倍體。