一種訶子再生植株的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種訶子再生植株的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽等步驟，本發(fā)明方法所制備的訶子再生植株品質(zhì)優(yōu)良，性狀穩(wěn)定，再生成活率高，短期內(nèi)可以提供大量的訶子幼苗，并能有效降低生產(chǎn)成本。
【專利說明】
一種訶子再生植株的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及組培條件下訶子再生植株的培養(yǎng)，屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]訶子，Terminalia chebula Retz.,又稱訶黎勒、訶黎、訶梨、隨風(fēng)子，使君子科，喬木，產(chǎn)云南西部和西南部；廣東、廣西有栽培。分布于東南亞大部。生于海拔800-1840米的疏林中，常成片分部。喜高溫潤氣候。耐旱、耐霜。喜陽光充足。多生于海拔950-1850m之間，年雨量在1000-1500mm左右，對土壤要求不甚嚴(yán)格，但宜選疏松肥沃、排水良好的壤土栽培，產(chǎn)云南西部和西南部，廣東、廣西(南寧)有栽培。分布于越南(南部)、老撾、柬埔寨、泰國、緬甸、馬來西亞、尼泊爾、印度。藥用效果:斂肺；澀腸；下氣；利咽；收斂、止瀉；抗病原微生物；解痙，久瀉；久痢；脫肛；喘咳痰嗽；久咳失音，治療大葉性肺炎，細(xì)菌性痢疼，治療白喉帶菌者。目前主要用種子和嫁接繁殖，組培技術(shù)應(yīng)用于訶子的繁殖尚未見報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供訶子再生植株的快速繁殖方法，本發(fā)明方法所制備的訶子再生植株品質(zhì)優(yōu)良，性狀穩(wěn)定，再生成活率高，短期內(nèi)可以提供大量的訶子幼苗，并能有效降低生產(chǎn)成本。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案:
取訶子的葉片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗為25min，超凈工作臺上氯化汞處理9min，無菌水沖洗5遍，消毒處理過的訶子葉片放入_4°C液氮罐中低溫處理12h，取出接入培養(yǎng)基配方為VR+2，4-D0.5mg/L+ZT4mg/l的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度26°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基VR+NAA0.lmg/L+TDZ0.lmg/L+ABA5mg/L進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度26°C，取長約3cm的芽苗從培養(yǎng)瓶中取出浸潤在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培養(yǎng)液30min，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔一周噴施80%的疫霜靈800倍溶液，溫度25°C，濕度90%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)生根情況。
[0005]采用本發(fā)明制備的訶子生長速度快，生根率高，操作簡單，能耗小，污染小。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取訶子的葉片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗為25min，超凈工作臺上氯化汞處理9min，無菌水沖洗5遍，消毒處理過的訶子葉片放入_4°C液氮罐中低溫處理12h，取出接入培養(yǎng)基配方為VR+2，4-D 0.5mg/L+ZT4mg/l的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度26°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基VR+NAA0.lmg/L+TDZ0.lmg/L+ABA3mg/L進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度26°C，取長約3cm的芽苗從培養(yǎng)瓶中取出浸潤在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培養(yǎng)液30min，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔一周噴施80%的疫霜靈800倍溶液，溫度25°C，濕度90%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)生根情況，生根率91%。
[0008]實(shí)施例2
取訶子的葉片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗為25min，超凈工作臺上氯化汞處理9min，無菌水沖洗5遍，消毒處理過的訶子葉片放入_4°C液氮罐中低溫處理12h，取出接入培養(yǎng)基配方為VR+2，4-D 0.5mg/L+ZT4mg/l的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度26°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基VR+NAA0.15mg/L+TDZ0.2mg/L+ABA5mg/L進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度26°C，取長約3cm的芽苗從培養(yǎng)瓶中取出浸潤在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培養(yǎng)液30min，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔一周噴施80%的疫霜靈800倍溶液，溫度25°C，濕度90%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)生根情況，生根率90%。
[0009]實(shí)施例3
取訶子的葉片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗為25min，超凈工作臺上氯化汞處理9min，無菌水沖洗5遍，消毒處理過的訶子葉片放入_4°C液氮罐中低溫處理12h，取出接入培養(yǎng)基配方為VR+2，4-D 0.5mg/L+ZT4mg/l的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度26°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基VR+NAA0.lmg/L+TDZ0.2mg/L+ABA4mg/L進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，光照20001x，溫度26°C，取長約3cm的芽苗從培養(yǎng)瓶中取出浸潤在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培養(yǎng)液30min，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔一周噴施80%的疫霜靈800倍溶液，溫度25°C，濕度90%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)生根情況，生根率93%。
【權(quán)利要求】
1.本發(fā)明研究了一種訶子再生植株的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽等，主要步驟如下: (1)取訶子幼嫩的葉片，按照常規(guī)的消毒方法對其進(jìn)行消毒處理； (2)將步驟(I)消毒處理過的訶子葉片放入-4°C液氮罐中低溫處理12h，取出接入培養(yǎng)基配方為VR+2，4-D0.5mg/L+ZT4mg/l的培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，ρΗ5.8，暗室培養(yǎng)，溫度 26 0C ； (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基VR+NAA0.1-0.15mg/L+TDZ0.1-0.2mg/L+ABA3-5mg/L進(jìn)行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，PH5.8，光照20001x，溫度26 °C ； (4)取步驟(3)分化出來的芽苗進(jìn)行野外生根誘導(dǎo)。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種訶子再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述訶子無菌葉片的獲得為，取訶子的葉片，在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污潰，流水沖洗為25min,超凈工作臺上氯化萊處理9min,無菌水沖洗5遍。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種訶子再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中所述野外生根誘導(dǎo)的方法為取長約3cm的芽苗從培養(yǎng)瓶中取出浸潤在1/2MS+NAA0.5mg/L配制而成的培養(yǎng)液30min，用雙層黑色遮蔭網(wǎng)覆蓋，定時(shí)澆水除草，每隔一周噴施80%的疫霜靈800倍溶液，溫度25°C，濕度90%，一個(gè)月后統(tǒng)計(jì)生根情況。
【文檔編號】A01H4/00GK104221870SQ201410540406
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司