一種毛囊單位保存培養(yǎng)液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、DMEM培養(yǎng)液、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為5μg/mL～15μg/mL，氫化可的松的濃度為0.2μg/mL～0.6μg/mL，慶大霉素的濃度為30U/mL～50U/mL，人血清白蛋白的濃度為5μg/mL～15μg/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0.1μg/mL～0.3μg/mL。本發(fā)明的保存培養(yǎng)液提高了毛囊單位的成活率，有利于毛囊的持續(xù)、穩(wěn)定生長(zhǎng)延長(zhǎng)，并對(duì)局部受損毛囊的增值再生具有促進(jìn)作用，效果良好，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)液。
【專利說(shuō)明】一種毛囊單位保存培養(yǎng)液

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于人體毛發(fā)移植【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種毛囊單位保存培養(yǎng)液。

【背景技術(shù)】
[0002] 毛發(fā)移植術(shù)中毛囊單位移植術(shù)被臨床廣泛應(yīng)用治療各種原因的禿發(fā)。相對(duì)于其他 方法，該技術(shù)可以獲得最佳的美學(xué)效果。目前毛發(fā)移植術(shù)過(guò)程中存在毛囊分離浪費(fèi)、因毛囊 分離而對(duì)手術(shù)時(shí)間的限制等技術(shù)瓶頸。面對(duì)禿發(fā)較多的患者時(shí)，需要在最短的手術(shù)時(shí)間內(nèi) 顯微分離大量的毛囊單位，且分離出的毛囊單位也會(huì)因有時(shí)間限制而加大損傷。由此導(dǎo)致 手術(shù)時(shí)間延長(zhǎng)，后期局麻效果也越來(lái)越差，患者常因無(wú)法忍受而放棄手術(shù)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種毛囊單位保 存培養(yǎng)液。該保存培養(yǎng)液提高了毛囊單位的成活率，有利于毛囊的持續(xù)、穩(wěn)定生長(zhǎng)延長(zhǎng)，并 對(duì)局部受損毛囊的增值再生具有促進(jìn)作用，效果良好，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)液。
[0004] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特 征在于，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、DMHM培養(yǎng)液、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組 成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為5 μ g/mL?15 μ g/mL，氫化可的松的濃度為0. 2 μ g/ mL?0. 6μ g/mL，慶大霉素的濃度為30U/mL?50U/mL，人血清白蛋白的濃度為5μ g/mL? 15 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 1 μ g/mL?0. 3 μ g/mL。
[0005] 上述的一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度 為8 μ g/mL?12 μ g/mL,氫化可的松的濃度為0. 3 μ g/mL?0. 5 μ g/mL,慶大霉素的濃度 為35U/mL?45U/mL，人血清白蛋白的濃度為8 μ g/mL?12 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為 0· 15 μ g/mL ?25 μ g/mL。
[0006] 上述的一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度 為10μ g/mL，氫化可的松的濃度為0. 4μ g/mL，慶大霉素的濃度為40U/mL，人血清白蛋白的 濃度為10 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 2 μ g/mL。
[0007] 上述的一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，所述DMEM培養(yǎng)液為高糖型DMEM培 養(yǎng)液。
[0008] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0009] 1、本發(fā)明的保存培養(yǎng)液能夠很好的保存培養(yǎng)毛囊單位，提高了毛囊單位的成活 率，有利于毛囊的持續(xù)、穩(wěn)定生長(zhǎng)延長(zhǎng)，并對(duì)局部受損毛囊的增值再生具有促進(jìn)作用，效果 良好，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)液。
[0010] 2、采用本發(fā)明的保存培養(yǎng)液保存培養(yǎng)毛囊單位，毛囊單位的生長(zhǎng)速度明顯加快， 平均生長(zhǎng)天數(shù)延長(zhǎng)至14天以上，最終生長(zhǎng)長(zhǎng)度可達(dá)2. 339±0. 224mm以上，減小了由于保存 帶來(lái)的毛囊單位的損傷，避免了由此導(dǎo)致的手術(shù)時(shí)間延長(zhǎng)，大大減輕了患者的痛苦。
[0011] 下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。

【具體實(shí)施方式】
[0012] 實(shí)施例1
[0013] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、DMEM培養(yǎng)液、 人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為5yg/mL，氫化可 的松的濃度為〇. 2μ g/mL，慶大霉素的濃度為50U/mL，人血清白蛋白的濃度為15μ g/mL，表 皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 1 μ g/mL。
[0014] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液的制備方法為：在無(wú)菌操作臺(tái)上，將胰島素、氫化 可的松、慶大霉素、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子加入DMHM培養(yǎng)液中，混合均勻后置于4°C 下儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?br> [0015] 實(shí)施例2
[0016] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、高糖型DMEM 培養(yǎng)液、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為15yg/ mL，氫化可的松的濃度為0. 6 μ g/mL，慶大霉素的濃度為30U/mL，人血清白蛋白的濃度為 5 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 3 μ g/mL。
[0017] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液的制備方法與實(shí)施例1相同。
[0018] 實(shí)施例3
[0019] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、高糖型DMEM 培養(yǎng)液、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為i〇yg/ mL，氫化可的松的濃度為0. 4 μ g/mL，慶大霉素的濃度為40U/mL，人血清白蛋白的濃度為 10 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 2 μ g/mL。
[0020] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液的制備方法與實(shí)施例1相同。
[0021] 實(shí)施例4
[0022] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、DMEM培養(yǎng)液、 人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為12μ g/mL，氫化可 的松的濃度為〇. 5μ g/mL，慶大霉素的濃度為45U/mL，人血清白蛋白的濃度為12μ g/mL，表 皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 25 μ g/mL。
[0023] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液的制備方法與實(shí)施例1相同。
[0024] 實(shí)施例5
[0025] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、高糖型DMEM 培養(yǎng)液、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為8 μ g/mL， 氫化可的松的濃度為〇. 3μ g/mL，慶大霉素的濃度為35U/mL，人血清白蛋白的濃度為8μ g/ mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 15 μ g/mL。
[0026] 本實(shí)施例的毛囊單位保存培養(yǎng)液的制備方法與實(shí)施例1相同。
[0027] 對(duì)比例1
[0028] 本對(duì)比例的毛囊單位保存培養(yǎng)液由胰島素、氫化可的松和高糖型DMEM培養(yǎng)液組 成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為10 μ g/mL，氫化可的松的濃度為0. 4 μ g/mL ;制備方 法與實(shí)施例1相同。
[0029] 對(duì)比例2
[0030] 本對(duì)比例的毛囊單位保存培養(yǎng)液由胰島素、氫化可的松、人血清白蛋白和高糖 型DMEM培養(yǎng)液組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為10 μ g/mL，氫化可的松的濃度為 0. 4 μ g/mL，人血清白蛋白的濃度為10 μ g/mL ;制備方法與實(shí)施例1相同。
[0031] 對(duì)比例3
[0032] 本對(duì)比例的毛囊單位保存培養(yǎng)液為傳統(tǒng)的Williams E培養(yǎng)基，WilliamsE 培養(yǎng)基（Gibco)加谷氨酰胺2mmol/L，Hepes2mmol/L，氫化可的松10ng/mL，牛胰島素 (Sigma)lOy g/mL,轉(zhuǎn)鐵蛋白（Sigma)lOy g/mL,亞硒酸鈉 10ng/mL,青霉素 100U/mL,鏈霉素 100 μ g/mL ;制備方法與實(shí)施例1相同。
[0033] 分別采用本發(fā)明實(shí)施例1?5以及對(duì)比例1?3的毛囊單位保存培養(yǎng)液保存毛囊 單位，方法為：毛囊單位來(lái)源于8?36歲不同年齡的男女患者，無(wú)菌環(huán)境下，在倒置顯微鏡 下選取結(jié)構(gòu)完整的生長(zhǎng)期毛囊單位，將毛囊單位小心轉(zhuǎn)移至72孔板內(nèi)，每孔1根，然后向每 孔加儲(chǔ)存?zhèn)溆玫谋４媾囵B(yǎng)液〇. 25mL，置于37°C，5% C02培養(yǎng)箱中懸浮培養(yǎng)，每3d換液1次， 每次換液50 %左右。
[0034] 觀測(cè)指標(biāo)：毛囊的生長(zhǎng)速度及可生長(zhǎng)天數(shù)：每天在裝有目鏡測(cè)微尺的倒置顯微鏡 下測(cè)量毛囊的長(zhǎng)度直至毛囊不再延長(zhǎng)，記錄下毛囊的可生長(zhǎng)天數(shù)和最終生長(zhǎng)長(zhǎng)度，并計(jì)算 出前5天的生長(zhǎng)速度。
[0035] 生長(zhǎng)速度只統(tǒng)計(jì)第1天即有明顯生長(zhǎng)（彡0. 1_)的毛囊單位，其它均視為非生長(zhǎng) 期毛囊或有嚴(yán)重?fù)p傷的毛囊。結(jié)果見表1。
[0036] 表1不同保存培養(yǎng)液中毛囊單位的生長(zhǎng)情況
[0037]

【權(quán)利要求】
1. 一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，由胰島素、氫化可的松、慶大霉素、DMEM培 養(yǎng)液、人血清白蛋白和表皮生長(zhǎng)因子組成；所述保存培養(yǎng)液中胰島素的濃度為5 μ g/mL? 15 μ g/mL，氫化可的松的濃度為0. 2 μ g/mL?0. 6 μ g/mL，慶大霉素的濃度為30U/mL? 50U/mL，人血清白蛋白的濃度為5 μ g/mL?15 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 1 μ g/mL? 0·3 μ g/mL。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，所述保存培養(yǎng)液中 胰島素的濃度為8 μ g/mL?12 μ g/mL，氫化可的松的濃度為0. 3 μ g/mL?0. 5 μ g/mL，慶大 霉素的濃度為35U/mL?45U/mL，人血清白蛋白的濃度為8 μ g/mL?12 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因 子的濃度為 〇. 15 μ g/mL ?0. 25 μ g/mL。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，所述保存培養(yǎng)液中 胰島素的濃度為10 μ g/mL，氫化可的松的濃度為0. 4 μ g/mL，慶大霉素的濃度為40U/mL，人 血清白蛋白的濃度為10 μ g/mL，表皮生長(zhǎng)因子的濃度為0. 2 μ g/mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種毛囊單位保存培養(yǎng)液，其特征在于，所述DMEM培 養(yǎng)液為高糖型DMEM培養(yǎng)液。
【文檔編號(hào)】A01N1/02GK104195101SQ201410455208
【公開日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年9月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月9日
【發(fā)明者】武斌, 楊喜明, 馮登超, 高東東, 李明, 薛宏斌 申請(qǐng)人:武斌, 楊喜明, 馮登超