一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法，包括：步驟1)乳酸菌發(fā)酵液的制備，步驟2)包被材料的配制，步驟3)原位包被，步驟4)菌液分離，以及步驟5)包被處理。本發(fā)明將乳酸菌發(fā)酵后進(jìn)行原位包被，提高乳酸菌的耐壓和耐剪切力的能力，降低后處理對(duì)菌體的傷害，保持乳酸菌活性，采用先制備核心顆粒再將乳酸菌噴涂到核心顆粒上，制備乳酸菌顆粒，避免制粒過程中高溫和壓力對(duì)菌體活性的影響。采用復(fù)合材料對(duì)乳酸菌進(jìn)行包被，可以保證菌體順利通過動(dòng)物的胃，在腸道酶的作用下崩解釋放，發(fā)揮益生作用。
【專利說明】一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于飼料添加劑領(lǐng)域，具體地，涉及一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]抗生素作為飼料添加劑長期使用(尤其是濫用)導(dǎo)致的毒性殘留、耐藥性等問題引起人們廣泛的關(guān)注，世界各國的科學(xué)家努力尋求和開發(fā)無毒副作用的新型飼料添加劑。益生菌是最先被提出的新型飼料添加劑。與添加抗生素相比，使用效果相同，有時(shí)甚至更好而且無任何毒、副作用、不在體內(nèi)殘留、不引起耐藥性，因而很快便成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。
[0003]隨著綠色養(yǎng)殖的大力發(fā)展，微生態(tài)制劑在飼料和畜禽養(yǎng)殖業(yè)中得到廣泛應(yīng)用，其中，乳酸菌類微生態(tài)制劑是飼用微生態(tài)制劑中應(yīng)用最廣泛的一種，但是絕大多數(shù)乳酸菌采用冷凍干燥的方式生產(chǎn)，穩(wěn)定性差，一方面儲(chǔ)存溫度升高和接觸空氣，其活性會(huì)大大降低，另一方面在飼料加工中其無法耐受高溫、壓力和剪切力，致使活性大大降低甚至死亡，嚴(yán)重影響了乳酸菌活菌制劑的效價(jià)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明人進(jìn)行了廣泛深入的研究，最終完成本發(fā)明。
[0005]因此，本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法，該方法解決了飼料用乳酸菌穩(wěn)定性差的問題。
[0006]根據(jù)本發(fā)明的目的，提供了一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法，包括:
[0007]步驟I):乳酸菌發(fā)酵液的制備:
[0008]將乳酸菌進(jìn)行活化、培養(yǎng)，得到乳酸菌發(fā)酵液；
[0009]步驟2):包被材料的配制:
[0010]2-1)原位包被材料的配制:配制1-2% (W/V)海藻酸鈉水溶液和冰醋酸溶解的0.1-0.2% (W/V)殼聚糖溶液，備用；
[0011]2-2)后包被材料的配制:
[0012]將蓖麻油加0.2-0.5%乳化劑制成懸濁液，1-2%乙基纖維素和2_3%聚丙烯酸樹脂II號(hào)加95%乙醇制成溶液，將這兩個(gè)溶液混合均勻，備用；
[0013]步驟3):原位包被:
[0014]將步驟2-1)中制得的海藻酸鈉水溶液加入到將步驟I)中制得的乳酸菌發(fā)酵液中，攪拌均勻，加入難溶性0.5-1%鈣鹽顆粒，攪拌均勻，形成懸浮液；按照3-2:1水油比將所述懸浮液加入到液體石蠟油中，攪拌乳化，形成油包水乳濁液；加入冰醋酸降低體系PH值，加入步驟2-1)中制得的殼聚糖溶液，繼續(xù)反應(yīng)，靜置使微膠囊沉降；
[0015]步驟4):菌液分離:
[0016]對(duì)步驟3)中制得的微膠囊進(jìn)行離心分離，得到濃縮的微囊乳酸菌；
[0017]步驟5):包被處理:[0018]5-1):核心材料的配制:將50-60重量份食用淀粉、20-30重量份微晶纖維素、5-10重量份明膠混合均勻，加水30-40重量份攪拌均勻，得到核心材料；
[0019]5-2):菌液的制備:將步驟4)中制得的濃縮的微囊乳酸菌用0.8%生理鹽水進(jìn)行稀釋，得到濃度為101(lCfU/ml以上的微囊乳酸菌菌液；
[0020]5-3):核心制粒:利用擠壓制粒，將核心材料制成粒度20-40目的核心顆粒；
[0021]5-4):乳酸菌噴涂和包被:將步驟5-3)的核心顆粒投入包衣機(jī)中，利用熱空氣進(jìn)行干燥至水分含量為5%以下，將步驟5-2)的菌液利用包衣機(jī)的噴頭均勻噴涂到核心顆粒上，使乳酸菌被吸附到核心顆粒中，然后將后包被材料均勻噴涂到含有乳酸菌的核心顆粒上，干燥至含水量為5%以下。
[0022]優(yōu)選地，在所述穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法中，步驟I):乳酸菌發(fā)酵液的制備進(jìn)一步包括: [0023]1-1)乳酸菌一級(jí)種子液制備
[0024]將保存的乳酸菌菌種劃線接種到斜面培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)活化12-24h、將活化好的菌種接種到液體培養(yǎng)基中，150-180r/min，37°C培養(yǎng)10_12h，得到乳酸菌一級(jí)種子液。
[0025]1-2)乳酸菌二級(jí)種子液制備
[0026]將一級(jí)種子液接種到液體培養(yǎng)基中，37°C、70r/min，罐壓0.01Mpa,培養(yǎng)8h，得到乳酸菌二級(jí)種子液。
[0027]1-3)乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn)
[0028]將二級(jí)種子液按接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，37°C、70r/min，罐壓0.01Mpa，用氨水調(diào)節(jié)pH保持在5.8，培養(yǎng)16h，得到乳酸菌發(fā)酵液。
[0029]其中，液體培養(yǎng)基配方為
[0030]
【權(quán)利要求】
1.一種穩(wěn)定化乳酸菌產(chǎn)品的制備方法,包括: 步驟I):乳酸菌發(fā)酵液的制備: 將乳酸菌進(jìn)行活化、培養(yǎng)，得到乳酸菌發(fā)酵液； 步驟2):包被材料的配制: .2-1)原位包被材料的配制:配制1-2% (W/V)海藻酸鈉水溶液和冰醋酸溶解的0.l-ο.2% (W/V)殼聚糖溶液，備用； .2-2)后包被材料的配制: 將蓖麻油加0.2-0.5%乳化劑制成懸濁液，1-2%乙基纖維素和2-3%聚丙烯酸樹脂II號(hào)加95%乙醇制成溶液，將這兩個(gè)溶液混合均勻，備用； 步驟3):原位包被: 將步驟2-1)中制得的海藻酸鈉水溶液加入到將步驟I)中制得的乳酸菌發(fā)酵液中，攪拌均勻，加入難溶性0.5-1%鈣鹽顆粒，攪拌均勻，形成懸浮液；按照3-2:1水油比將所述懸浮液加入到液體石蠟油中，攪拌乳化，形成油包水乳濁液；加入冰醋酸降低體系pH值，加入步驟2-1)中制得的殼聚糖溶液，繼續(xù)反應(yīng)，靜置使微膠囊沉降； 步驟4):菌液分離: 對(duì)步驟3)中制得的微膠囊進(jìn)行離心分離，得到濃縮的微囊乳酸菌； 步驟5):包被處理: .5-1):核心材料的配制:將50-60重量份食用淀粉、20-30重量份微晶纖維素、5_10重量份明膠混合均勻，加水30-40重量份攪拌均勻，得到核心材料； .5-2):菌液的制備:將步驟4)中制得的濃縮的微囊乳酸菌用0.8%生理鹽水進(jìn)行稀釋，得到濃度為101(lCfu/ml以上的微囊乳酸菌菌液； . 5-3):核心制粒:利用擠壓制粒，將核心材料制成粒度20-40目的核心顆粒； .5-4):乳酸菌噴涂和包被:將步驟5-3)的核心顆粒投入包衣機(jī)中，利用熱空氣進(jìn)行干燥至水分含量為5%以下，將步驟5-2)的菌液利用包衣機(jī)的噴頭均勻噴涂到核心顆粒上，使乳酸菌被吸附到核心顆粒中，然后將后包被材料均勻噴涂到含有乳酸菌的核心顆粒上，干燥至含水量為5%以下。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟I)中乳酸菌發(fā)酵液的制備進(jìn)一步包括: .1-1)乳酸菌一級(jí)種子液制備 將保存的乳酸菌菌種劃線接種到斜面培養(yǎng)基，37°c培養(yǎng)活化12-24h、將活化好的菌種接種到液體培養(yǎng)基中，150-180r/min，37°C培養(yǎng)10_12h，得到乳酸菌一級(jí)種子液。 .1-2)乳酸菌二級(jí)種子液制備 將一級(jí)種子液接種到液體培養(yǎng)基中，37°C、70r/min，罐壓0.01Mpa，培養(yǎng)8h，得到乳酸菌二級(jí)種子液。 .1-3)乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn) 將二級(jí)種子液按接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，37°C、70r/min，罐壓0.01Mpa，用氨水調(diào)節(jié)pH保持在5.8，培養(yǎng)16h，得到乳酸菌發(fā)酵液。 其中，液體培養(yǎng)基配方為
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于， 所述液體培養(yǎng)基配方為:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中包被材料的配制過程為: 2-1)原位包被材料的配制:配制1.5% (W/V)海藻酸鈉水溶液和冰醋酸溶解的0.1%(W/V)殼聚糖溶液，備用； 2-2)后包被材料的配制:將蓖麻油加0.5%吐溫80制成懸濁液，乙基纖維素和聚丙烯酸樹脂II號(hào)加95 %乙醇制成溶液，將這兩個(gè)溶液混合均勻，備用，制成的混合溶液中含有蓖麻油1% (W/V)，乙基纖維素1% (W/V)，聚丙烯酸樹酯2% (W/V)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)的原位包被的過程為: 將步驟2-1)中制得的海藻酸鈉水溶液加入到步驟1-3)中制得的乳酸菌發(fā)酵液中，攪拌均勻，加入難溶性0.5%鈣鹽顆粒，攪拌均勻，形成懸浮液；按照3:1水油比將所述懸浮液加入到含1% Span80液體石臘油中，攪拌乳化,400r/min, 15min,形成油包水乳池液；加入0.002%冰醋酸降低體系pH值，加入步驟2-1)中制得的殼聚糖溶液，繼續(xù)反應(yīng)，靜置使微膠囊沉降。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)中的菌液分離過程為: 對(duì)步驟3)中制得的微膠囊乳酸菌進(jìn)行離心分離，離心機(jī)轉(zhuǎn)速5000r/min，得到濃縮的微囊乳酸菌。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟5)中的包被處理過程為: 5-1):核心材料的配制:將60重量份食用淀粉、30重量份微晶纖維素、10重量份明膠混合均勻，加水40重量份攪拌均勻，得到核心材料； 5-2):菌液的制備:將步驟4)中制得的濃縮微囊乳酸菌0.8%用生理鹽水進(jìn)行稀釋，得到濃度為101(lCfu/ml以上的微囊乳酸菌菌液；5-3):核心制粒:利用擠壓制粒，將核心材料制成粒度20-40目的核心顆粒； 5-4):乳酸菌噴涂和包被:將步驟5-3)的核心顆粒投入包衣機(jī)中，利用90°C熱空氣進(jìn)行干燥至水分含量為5%以下，降低空氣溫度至70°C，將步驟5-2)的菌液利用包衣機(jī)的噴頭均勻噴涂到核心顆粒上，噴涂速度150ml/min，使乳酸菌被吸附到核心顆粒中，然后將后包被材料均勻噴涂到含有乳酸菌的核 心顆粒上，噴涂速度100ml/min，70°C干燥至含水量為5%以下。
【文檔編號(hào)】A23K1/16GK104000025SQ201410258369
【公開日】2014年8月27日 申請(qǐng)日期:2014年6月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月11日
【發(fā)明者】崔東良, 欒新 申請(qǐng)人:北京昕地美飼料科技有限公司