一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基,由以下組分組成:KNO3:1900mg/L;硝酸銨:1650mg/L;磷酸二氫鉀:170mg/L;七水硫酸鎂:370mg/L;二水氯化鈣:440mg/L;KI:0.60-0.62mg/L;硼酸:4.5-4.8mg/L;四水硫酸錳:25.0-25.3mg/L;七水硫酸鋅:7.0-7.2mg/L;二水合鉬酸鈉:0.20-0.22mg/L;五水硫酸銅:0.025mg/L;六水氯化鈷:0.025mg/L;Na2·EDTA:37.25mg/L;七水硫酸亞鐵:27.85mg/L;肌醇:100mg/L;甘氨酸:2mg/L;鹽酸硫胺素:0.1mg/L;鹽酸吡哆醇:0.5mg/L;煙酸:0.5mg/L;蔗糖:20-22g/L;瓊脂:5-5.2g/L;香蕉汁:30-35g/L;梨汁:3-5g/L;活性炭0.45-0.48g/L;溶劑為去離子水。應用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)蝴蝶蘭,成活率大于96%,染菌率為2.7-2.8%,培養(yǎng)基褐化程度較MS培養(yǎng)基低30-40%。
【專利說明】一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于植物培養(yǎng)【技術領域】,具體涉及一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基。
【背景技術】
[0002]蝴蝶蘭又名蝶蘭(Phalaenopsisamabilis),蘭科(Orchidaceae)蝶蘭屬(Phalaenopsis)多年生附生草本植物,有著“洋蘭皇后”之稱的蝴蝶蘭,由于其花形如彩蝶飛舞,色彩艷麗,體態(tài)輕盈、飄逸,在國內外花卉市場上極受歡迎,一直都是消費者的寵兒。而且蝴蝶蘭除了盆栽之外,還特別適宜用作切花,是藝術插花的高檔花材。
[0003]目前蝴蝶蘭工廠化生產常用的方法是用組織培養(yǎng)無性繁殖,即所謂克隆繁殖,具有繁殖快、數量大和小苗品種純的優(yōu)點。利用蝴蝶蘭花梗側芽、葉片、莖尖等外植體,經消毒處理后接種到培養(yǎng)基上,可誘導出營養(yǎng)牙或原球莖。再進一步于培養(yǎng)基中進行大量增殖、分化培養(yǎng),這樣就可以培養(yǎng)出大量的植株。通過克隆繁殖的蝴蝶蘭苗生長、開花比較整齊一致,可完全保存母株的花色性狀。
[0004]在原球莖的誘導過程中,目前使用的培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基,但是其在使用過程中褐化程度嚴重。
【發(fā)明內容】
[0005]本發(fā)明提供了一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基,應用其進行蝴蝶蘭原球莖的誘導時,褐化程度小。`
[0006]本發(fā)明提供一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基由以下組分組成:
KNO3:1900mg/L ;
NH4NO3:1650mg/L ;
KH2PO4:170mg/L ;
MgSO4.7H20:370mg/L ;
CaCl2.2H20:440mg/L ;
KI:0.60-0.62mg/L ;
H3BO3:4.5-4.8mg/L ;
MnSO4.4H20:25.0-25.3mg/L ;
ZnSO4.7H20:7.0-7.2mg/L ;
Na2MoO4.2H20:0.20-0.22mg/L ;
CuSO4.5H20:0.025mg/L ;
CoCl2.6H20:0.025mg/L ;
Na2.EDTA:37.25mg/L ;
FeSO4.7H20:27.85mg/L ;
肌醇:100mg/L ;
甘氨酸:2mg/L ;鹽酸硫胺素:0.lrng/L ;
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;
煙酸:0.5mg/L ;
蔗糖:20-22g/L ;
瓊脂:5.0-5.2g/L ;
香蕉汁:30-35g/L ;
梨汁:3-5g/L ;
活性炭 0.45-0.48g/L ;
溶劑為去離子水。
[0007]優(yōu)選地,所述培養(yǎng)基由以下組分組成:
KNO3:1900mg/L ;
NH4NO3:1650mg/L ;
KH2PO4:170mg/L ;
MgSO4.7H20:370mg/L ;
CaCl2.2H20:440mg/L ;
KI:0.61mg/L ;
H3BO3:4.6mg/L ;
MnSO4.4H20:25.2mg/L ;
ZnSO4.7H20:7.lmg/L ;
Na2MoO4.2H20:0.2 lmg/L ;
CuSO4.5H20:0.025mg/L ;
CoCl2.6H20:0.025mg/L ;
Na2.EDTA:37.25mg/L ;
FeSO4.7H20:27.85mg/L ;
肌醇:100mg/L ;
甘氨酸:2mg/L ;
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ;
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;
煙酸:0.5mg/L ;
鹿糖:21g/L ;
瓊脂:5.lg/L ;
香蕉汁:32g/L ;
梨汁:4g/L ;
活性炭0.46g/L ;
溶劑為去離子水。
[0008]應用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)蝴蝶蘭,成活率大于96%,染菌率為2.7-2.8%,培養(yǎng)基褐
化程度較MS培養(yǎng)基低30-40%。
【具體實施方式】[0009]以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明,但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗方法,如無特殊說明,均為常規(guī)方法。
[0010]實施例1
本發(fā)明提供的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方如下:
本發(fā)明的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基的基礎上改良而成,具體配方如
下:
KNO3:1900mg/L ;
NH4NO3:1650mg/L ;
KH2PO4:170mg/L ;
MgSO4.7H20:370mg/L ;
CaCl2.2H20:440mg/L ;
KI:0.6lmg/L ;
H3BO3:4.6mg/L ;
MnSO4.4H20:25.2 mg/L ;
ZnSO4.7H20:7.lmg/L ;
Na2MoO4.2H20:0.2 lmg/L ;
CuSO4.5H20:0.025mg/L ;
CoCl2.6H20:0.025mg/L ;
Na2.EDTA:37.25mg/L ;
FeSO4.7H20:27.85mg/L ;
肌醇:100mg/L ;
甘氨酸:2mg/L ;
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ;
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;
煙酸:0.5mg/L ;
鹿糖:21g/L ;
瓊脂:5.lg/L ;
香蕉汁:32g/L ;
梨汁:4g/L ;
活性炭0.46g/L ;
溶劑為去離子水。
[0011]實施例2
本發(fā)明提供的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方如下:
本發(fā)明的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基的基礎上改良而成,具體配方如
下:
KNO3:1900mg/L ;
NH4NO3:1650mg/L ;
KH2PO4:170mg/L ;
MgSO4.7H20:370mg/L ;CaCl2.2H20:440mg/L ;
KI:0.6lmg/L ;
H3BO3:4.6mg/L ;
MnSO4.4H20:25.0mg/L ;
ZnSO4.7H20:7.0mg/L ;
Na2MoO4.2H20:0.20mg/L ;
CuSO4.5H20:0.025mg/L ;
CoCl2.6H20:0.025mg/L ;
Na2.EDTA:37.25mg/L ;
FeSO4.7H20:27.85mg/L ;
肌醇:100mg/L ;
甘氨酸:2mg/L ;
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ;
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;
煙酸:0.5mg/L ;·
鹿糖:20g/L ;
瓊脂:5.0g/L ;
香蕉汁:30g/L ;
梨汁:3g/L ;
活性炭0.45g/L ;
溶劑為去離子水。
[0012]實施例3
本發(fā)明提供的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基配方如下:
本發(fā)明的一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基的基礎上改良而成,具體配方如
下:
KNO3:1900mg/L ;
NH4NO3:1650mg/L ;
KH2PO4:170mg/L ;
MgSO4.7H20:370mg/L ;
CaCl2.2H20:440mg/L ;
KI:0.6lmg/L ;
H3BO3:4.6mg/L ;
MnSO4.4H20:25.3mg/L ;
ZnSO4.7H20:7.2mg/L ;
Na2MoO4.2H20:0.22mg/L ;
CuSO4.5H20:0.025mg/L ;
CoCl2.6H20:0.025mg/L ;
Na2.EDTA:37.25mg/L ;
FeSO4.7H20:27.85mg/L ;肌醇:100mg/L ;
甘氨酸:2mg/L ;
鹽酸硫胺素:0.lmg/L ;
鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;
煙酸:0.5mg/L ;
庶糖:22g/L ;
瓊脂:5.2g/L ;
香蕉汁:35g/L ;
梨汁:5g/L ;
活性炭0.48g/L ;
溶劑為去離子水。
[0013]應用上述培養(yǎng)基對蝴蝶蘭進行組織培養(yǎng):
(1)切下蝴蝶蘭帶芽莖段,長約2-3cm,用自來水清洗干凈,在飽和漂白粉上清液中浸泡15min ;
(2)浸泡時不斷攪動,浸泡后的莖段用流水沖洗干凈,置于超凈工作臺上,先用75%的酒精消毒30s,無菌水清洗I次,再用0.1%的升汞浸泡IOmin ;
(3)經無菌水沖洗數次,將帶芽莖段接種到培養(yǎng)基上,調pH為4.5,在每天光照12小時,光強1600Lux,溫度25°C下培養(yǎng);
(4)按照35天一個周期不斷進行轉接,每次轉接都會有平均3倍的增殖,每天光照12小時,光強1600Lux,溫度250C ;
(5)將苗分成單株,將其接種至壯苗生根培養(yǎng)基中培養(yǎng),使其長高長大,同時長出發(fā)達的根系,最終培養(yǎng)成為一棵有根有葉的完整植株,每天光照12小時,光強1600LUX,溫度25。。。
[0014]實驗結果:應用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)蝴蝶蘭,成活率大于96%,染菌率為
2.7-2.8%,培養(yǎng)基褐化程度較MS培養(yǎng)基低30-40%。
[0015]最后應說明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已,并不用于限制本發(fā)明,盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明,對于本領域的技術人員來說,其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改,或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內,所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種蝴蝶蘭組織培養(yǎng)培養(yǎng)基,其特征在于:所述培養(yǎng)基由以下組分組成:KN03:1900mg/L ;NH4N03:1650mg/L ;KH2P04:170mg/L ;MgS04.7H20:370mg/L ;CaCl2.2H20:440mg/L ;KI:0.60-0.62mg/L ;H3BO3:4.5-4.8mg/L ;MnS04.4H20:25.0-25.3mg/L ;ZnS04.7H20:7.0-7.2mg/L ;Na2Mo04.2H20:0.2 0-0.22mg/L ;CuS04.5H20:0.025mg/L ;CoCl2.6H20:0.025mg/L ;Na2.EDTA:37.25mg/L ;FeS04.7H20:27.85mg/L ;肌醇:100mg/L ;甘氨酸:2mg/L ;鹽酸硫胺素:0.lmg/L ;鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;煙酸:0.5mg/L ;蔗糖:20-22g/L ;瓊脂:5.0-5.2g/L ; 香蕉汁:30-35g/L ;梨汁:3-5g/L ;活性炭 0.45-0.48g/L ;溶劑為去離子水。
2.根據權利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于:所述培養(yǎng)基由以下組分組成:KN03:1900mg/L ;NH4N03:1650mg/L ;KH2P04:170mg/L ;MgS04.7H20:370mg/L ;CaCl2.2H20:440mg/L ;KI:0.6lmg/L ;H3BO3:4.6mg/L ;MnS04.4H20:25.2mg/L ;ZnS04.7H20:7.lmg/L ;Na2Mo04.2H20:0.2 lmg/L ;CuS04.5H20:0.025mg/L ;CoCl2.6H20:0.025mg/L ;Na2.EDTA:37.25mg/L ;FeS04.7H20:27.85mg/L ;肌醇:100mg/L ;甘氨酸:2mg/L ;鹽酸硫胺素:0.lmg/L ;鹽酸批卩多醇:0.5mg/L ;煙酸:0.5mg/L ;鹿糖:21g/L ;瓊脂:5.lg/L ;香蕉汁:32g/L ;梨汁:4g/L ;活性炭0.46g/L ;溶劑為去 離子水。
【文檔編號】A01H4/00GK103704133SQ201310669090
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月11日 優(yōu)先權日:2013年12月11日
【發(fā)明者】李道強, 李培泰 申請人:柳州賽特生物科技研發(fā)中心