一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法，該方法包括外植體消毒、配置培養(yǎng)基、接種和培養(yǎng)步驟，其中培養(yǎng)基以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，1L培養(yǎng)基中溶解2,4-D0.5-1mg、NAA1-2mg、6-BA0.1-0.3mg、KT0.3-0.5mg；本發(fā)明的有益效果是一個(gè)紫薯的莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出12個(gè)芽，誘導(dǎo)效率達(dá)到1200%，顯著提高組培效率；利用一個(gè)紫薯莖尖分生組織誘導(dǎo)出叢生芽，得到大量同質(zhì)無性系，提高紫薯莖尖培養(yǎng)的繁殖系數(shù)，易于工廠化生產(chǎn)紫薯組培苗。
【專利說明】一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法，屬于植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]sMMkSolanum iMertfe?)又叫黑薯,薯肉呈紫色至深紫色。富含蛋白質(zhì)質(zhì)、淀粉、果膠、纖維素、氨基酸、維生素及多種礦物質(zhì)，同時(shí)還富含硒元素和花青素。紫薯營養(yǎng)豐富具特殊保健功能，其中的蛋白質(zhì)、氨基酸都是極易被人體消化和吸收；富含的維生素A可以改善視力和皮膚的粘膜上皮細(xì)胞，維生素C可使膠元蛋白正常合成，防治壞血病的發(fā)生；花青素是天然強(qiáng)效自由基清除劑。紫薯的深加工，主要是提取花青素，花青素是一種天然紫色素添加劑，它安全無毒副作用，雖然比人工合成的色素價(jià)格貴，但仍然暢銷于國際市場；紫紅薯還可去皮烘干粉碎后加工成全粉，色澤美觀，營養(yǎng)豐富，是極好的食品加工原料，可作為各種糕點(diǎn)主料和配料，目前韓國每年要從中國進(jìn)口紫色紅薯全粉500噸左右；另外，以紫紅薯為原料制作的炸薯片、冷凍薯餅和粉絲等，以營養(yǎng)豐富、口感好，頗受市場青睞；紫薯在國際、國內(nèi)市場上十分走俏，發(fā)展前景非常廣闊。
[0003]我國目前已育成的紫色紅薯品種有:濟(jì)薯18號(hào)，該品種為山東省農(nóng)科院作物研究所育成，畝產(chǎn)量3000公斤以上；廣薯135，該品種為廣東省農(nóng)科院育成，畝產(chǎn)量為2000公斤~2500公斤，寧紫4號(hào)。該品種為江蘇省農(nóng)科院糧油作物研究所育成，畝產(chǎn)量為500公斤左右。以上3個(gè)品種還可鮮食，而且均具有抗旱、耐瘠薄、適應(yīng)性強(qiáng)、產(chǎn)量較高、薯塊均勻、薯皮光滑、色澤鮮艷和肉質(zhì)細(xì)膩等特點(diǎn)，適宜廣大紅薯產(chǎn)區(qū)種植。傳統(tǒng)的薯類秧苗育種時(shí)間周期長，育種條件不一控制，而秧苗的質(zhì)量不高，導(dǎo)致畝產(chǎn)量也不高。
[0004]馬鈴薯、甘薯等薯類通過組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行繁殖已經(jīng)是非常成熟的技術(shù)，不但可以在短時(shí)間內(nèi)繁殖出大量的愈傷組織或者叢生芽，且再生的植株與原始植株沒有遺傳差異性；而誘導(dǎo)叢生芽的組織培養(yǎng)方式，繁殖系數(shù)很高，可以達(dá)到事半功倍的效果，是最有效的組織培養(yǎng)技術(shù)。紫薯與馬鈴薯、甘薯同屬于旋花科的植物，但是目前沒有任何紫薯組織培養(yǎng)方面的報(bào)道，是否可以對(duì)紫薯進(jìn)行組織培養(yǎng)技術(shù)快速育種還是一個(gè)全新的課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法，一方面彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)中紫薯組織培養(yǎng)研究的空白，另一方面提供一種紫薯快速的育種方法，可以短時(shí)間內(nèi)繁殖出大量的紫薯叢生芽，大大提高紫薯的繁殖系數(shù)。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法:包括如下步驟:
(1)外植體消毒:以紫薯莖尖為外植體，無菌水清洗干凈后置于50%的乙醇溶液中浸泡20s，取出置于體積分?jǐn)?shù)為1.5%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，最后用無菌水清洗干凈后放于無菌操作臺(tái)內(nèi)；
(2)配置誘導(dǎo)培養(yǎng)基:將2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、萘乙酸NAA、6-芐基嘌呤6-BA、激動(dòng)素KT溶解于基本培養(yǎng)基MS中，高壓滅菌冷卻至室溫后待用，其中各組份用量為:MS1L、2，4~D 0.5-lmg λ NAA l-2mg、6_BA 0.1-0.3mg、KT 0.3-0.5mg ；
(3)接種:在無菌操作臺(tái)內(nèi)，將消毒后的紫薯莖尖接種于培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)皿接種一個(gè)莖尖分生組織；
(4)誘導(dǎo)叢生芽:將接種好的莖尖分生組織在無菌、溫度18-22°C、光強(qiáng)2000-3000Lx、每天光照8小時(shí)的條件下培養(yǎng)3-4周至叢生芽形成。
[0007]進(jìn)一步的，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組分含量為:MS 1L、2，4-D 0.5mg、NAAlmg、6_BA 0.lmg、KT 0.3mg。
[0008]進(jìn)一步的，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組分含量為:MS 1L、2，4-D 0.6mg、NAA
1.2mg、6_BA 0.2mg、KT 0.4mg。
[0009]進(jìn)一步的，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組分含量為:MS 1L、2，4-D lmg.NAA 2mg、6-BA 0.3mg、KT 0.5mg。
[0010]進(jìn)一步的，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組分含量為:MS 1L、2，4-D 0.5mg、NAAlmg、6_BA 0.3mg、KT 0.5mg0
[0011]本發(fā)明所述的紫薯叢生芽誘導(dǎo)方法，一個(gè)紫薯的莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出12個(gè)芽，誘導(dǎo)效率達(dá)到1200%，顯著提高組培效率。利用一個(gè)紫薯莖尖分生組織誘導(dǎo)出叢生芽，得到大量同質(zhì)無性系，提高 紫薯莖尖培養(yǎng)的繁殖系數(shù)，易于工廠化生產(chǎn)紫薯組培苗。
【具體實(shí)施方式】
[0012]以下通過實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的有益效果:
實(shí)施例1:
(1)外植體消毒:以紫薯莖尖為外植體，無菌水清洗干凈后置于50%的乙醇溶液中浸泡20s，取出置于體積分?jǐn)?shù)為1.5%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，最后用無菌水清洗干凈后放于無菌操作臺(tái)內(nèi)；
(2)配置誘導(dǎo)培養(yǎng)基:將2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、萘乙酸NAA、6-芐基嘌呤6-BA、激動(dòng)素KT溶解于基本培養(yǎng)基MS中，高壓滅菌冷卻至室溫后待用，其中各組份用量為:MS 1L、2，4-D 0.5mg、NAA lmg、6_BA 0.lmg、KT 0.3mg ；
(3)接種:在無菌操作臺(tái)內(nèi)，將消毒后的紫薯莖尖接種于培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)皿接種一個(gè)莖尖分生組織；
(4)誘導(dǎo)叢生芽:將接種好的莖尖分生組織在無菌、溫度18-22°C、光強(qiáng)2000-3000Lx、每天光照8小時(shí)的條件下培養(yǎng)3-4周至叢生芽形成。一個(gè)紫薯的莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出9個(gè)芽誘導(dǎo)效率達(dá)到900%。
[0013]實(shí)施例2:
與實(shí)施例1操作基本相同，所不同的是，步驟2中，培養(yǎng)基的配方為MS 1L、2，4-D
0.6mg、NAA 1.2mg、6_BA 0.2mg、KT 0.4mg，一個(gè)紫薯的莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出12個(gè)芽誘導(dǎo)效率達(dá)到1200%。
[0014]實(shí)施例3:
與實(shí)施例1操作基本相同，所不同的是，步驟2中，培養(yǎng)基的配方為MS 1L、2，4-D lmg、NAA 2mg、6-BA 0.3mg、KT 0.5mg，一個(gè)紫薯的莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出10個(gè)芽誘導(dǎo)效率達(dá)到 1000%O[0015]實(shí)施例4:
與實(shí)施例1操作基本相同，所不同的是，步驟2中，培養(yǎng)基的配方為MS 1L、2，4-D
0.5mg、NAA lmg,6-BA 0.3mg、KT 0.5mg，一個(gè)紫薯的莖尖分生組織可以誘導(dǎo)出9個(gè)芽誘導(dǎo)效率達(dá)到900%。
[0016]上述實(shí)例只是為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思以及技術(shù)特點(diǎn)，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù) 范圍。凡根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)所做的等效變換或修飾，都應(yīng)該涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種紫薯叢生芽的誘導(dǎo)方法:其特征在于，包括如下步驟: (1)外植體消毒:以紫薯莖尖為外植體，無菌水清洗干凈后置于50%的乙醇溶液中浸泡20s，取出置于體積分?jǐn)?shù)為1.5%的次氯酸鈉溶液中消毒5min，最后用無菌水清洗干凈后放于無菌操作臺(tái)內(nèi)； (2)配置誘導(dǎo)培養(yǎng)基:將2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、萘乙酸NAA、6-芐基嘌呤6-BA、激動(dòng)素KT溶解于基本培養(yǎng)基MS中，高壓滅菌冷卻至室溫后待用，其中各組份用量為:MS 1L、2，4-D 0.5-1mgλ NAA l-2mg、6-BA 0.1-0.3mg、KT 0.3-0.5mg ； (3)接種:在無菌操作臺(tái)內(nèi)，將消毒后的紫薯莖尖接種于培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)皿接種一個(gè)莖尖分生組織； (4)誘導(dǎo)叢生芽:將接種好的莖尖分生組織在無菌、溫度18-22°C、光強(qiáng)2000-3000Lx、每天光照8小時(shí)的條件下培養(yǎng)3-4周至叢生芽形成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫薯叢生芽誘導(dǎo)方法，其特征在于，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組份含量為:MS 1L、2，4-D 0.5mg、NAA lmg,6-BA 0.lmg, KT 0.3mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫薯叢生芽誘導(dǎo)方法，其特征在于，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組份含量為:MS 1L、2，4-D 0.6mg、NAA 1.2mg、6_BA 0.2mg、KT 0.4mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫薯叢生芽誘導(dǎo)方法，其特征在于，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組份含量為:MS 1L、2，4-D lmg, NAA 2mg、6_BA 0.3mg、KT 0.5mg。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紫薯叢生芽誘導(dǎo)方法，其特征在于，步驟2中所述的培養(yǎng)基中，各組份含量為:MS 1L、2，4-D 0.5mg、NAA lmg,6-BA 0.3mg、KT 0.5mg。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103598094SQ201310525705
【公開日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】張亞麗 申請(qǐng)人:張亞麗