一種野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種棉花抗蚜蟲(chóng)鑒定領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法。所述方法包括步驟：（1）選擇被鑒定野生棉或半野生棉材料的頂部嫩葉；（2）將頂部嫩葉放置在網(wǎng)罩內(nèi)；（3）人工接蚜，每片葉接成蚜30-40頭，封住網(wǎng)袋口；（4）調(diào)查受檢品種和對(duì)照品種蚜蟲(chóng)數(shù)量；（5）計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率。本發(fā)明的方法排除了其他害蟲(chóng)和天敵等因素的干擾，鑒定結(jié)果穩(wěn)定、可靠，實(shí)用性和可操作性強(qiáng)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種棉花抗蚜蟲(chóng)鑒定領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]雖然轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉已經(jīng)有效遏止了棉鈴蟲(chóng)的危害，但培育含有來(lái)自棉屬內(nèi)抗蟲(chóng)基因的自然抗蟲(chóng)棉仍具有重要意義。近年來(lái)，一些科研工作者也在致力于利用野生棉向陸地棉轉(zhuǎn)育有益基因的研究，但未見(jiàn)得到有價(jià)值且性狀穩(wěn)定的種質(zhì)。
[0003]我國(guó)已經(jīng)從亞洲棉、比克氏棉、瑟伯氏棉、斯托克氏棉、異常棉、斯特提棉、索馬里棉、墨西哥半野生棉、鮑莫爾氏棉、闊葉棉、蓬蓬棉等野生種中轉(zhuǎn)育抗棉鈴蟲(chóng)特，從亞洲棉、異常棉、斯托克氏棉、蓬蓬棉等野生種中轉(zhuǎn)育了抗棉蚜特性，育成抗蟲(chóng)外源血緣種質(zhì)共97份，這類(lèi)種質(zhì)資源的抗蟲(chóng)性已經(jīng)達(dá)到了抗級(jí)、有的達(dá)到了高抗水平。它們是培育自然抗蟲(chóng)棉品種的優(yōu)良抗蟲(chóng)基因庫(kù)，也可以用來(lái)改良轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉。綜上所述，我國(guó)棉花遠(yuǎn)緣雜交進(jìn)行種質(zhì)資源創(chuàng)造已經(jīng)進(jìn)入國(guó)際先進(jìn)行列，逐漸達(dá)到了種質(zhì)資源研究利用的實(shí)用階段。遠(yuǎn)緣雜交產(chǎn)生的高代種質(zhì)系、特異種質(zhì)和一些品種或品系組成具有野生棉外源基因的陸地棉種質(zhì)的全部?jī)?nèi)容，無(wú)論從種質(zhì)數(shù)量，還是種質(zhì)質(zhì)量上，它們都將會(huì)對(duì)今后的棉花育種產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。
[0004]現(xiàn)階段對(duì)棉田棉蚜的控制主要依靠化學(xué)殺蟲(chóng)劑，隨著殺蟲(chóng)劑的大量使用勢(shì)必造成棉蚜對(duì)殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生抗性，尋找新的棉蚜控制途徑十分必要。當(dāng)前科學(xué)家還沒(méi)有挖掘和克隆到有效的控制棉蚜的基因，培育轉(zhuǎn)基因抗棉蚜的棉花品種還需較長(zhǎng)的時(shí)間。同時(shí)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的人工馴化和定向培育，使現(xiàn)今的棉花栽培種的遺傳多樣性越來(lái)越狹窄。然而，陸地棉栽培種之外的其他栽培種、野生種系、野生種等遠(yuǎn)緣種屬，由于其分布區(qū)域的環(huán)境及長(zhǎng)期的自然選擇，使它們具有豐富的遺傳多樣性，含有可被棉花育種應(yīng)用的許多優(yōu)良基因，如抗旱、抗病蟲(chóng)、抗寒、種子無(wú)腺體植株 有腺體、雄性不育以及纖維細(xì)強(qiáng)的潛在特性等。而且自然抗蟲(chóng)棉抗蟲(chóng)性來(lái)自棉屬內(nèi)，抗蟲(chóng)穩(wěn)定性強(qiáng)標(biāo)靶害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗蟲(chóng)性，且不會(huì)對(duì)環(huán)境和生物安全產(chǎn)生不利影響。
[0005]轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉大面積種植后，棉田害蟲(chóng)的地位發(fā)生演化，棉蚜等次要害蟲(chóng)上升為主要害蟲(chóng)，其為害呈日益嚴(yán)重的趨勢(shì)。由于以前棉蚜并非主要害蟲(chóng)，且大部分研究抗性鑒定方法圍繞著栽培品種進(jìn)行，對(duì)野生棉或半野生棉這種原生態(tài)的抗性?xún)?nèi)屬性利用較少，甚至是空白。栽培棉花品種是一年生植物，而且種植資源非常豐富，可根據(jù)需要任何時(shí)間任何地點(diǎn)如田間、網(wǎng)室種植后，以葉片危害級(jí)別及蚜害減退率為鑒定指標(biāo)是完全可以的，但野生棉和半野生棉是常年生或多年生的珍貴的棉花種質(zhì)資源，不可能有大量的實(shí)驗(yàn)樣本用來(lái)進(jìn)行抗蚜性鑒定；野生棉和半野生棉均是通過(guò)盆栽種植在溫室中或?qū)嶒?yàn)室附近，不適宜蚜蟲(chóng)自然發(fā)生，無(wú)法進(jìn)行自然整株鑒定；同時(shí)由于其珍貴性即使有蚜蟲(chóng)發(fā)生也不可能等到葉片被蚜蟲(chóng)危害至全部卷縮才能進(jìn)行指標(biāo)的調(diào)查；自然狀態(tài)下我國(guó)野生棉和半野生棉屬種均分布在云貴高原和華南棉區(qū)，這些棉區(qū)不是我國(guó)棉花產(chǎn)區(qū)，蚜蟲(chóng)發(fā)生量本身就低，樣本及其珍貴，要了解其抗蚜蟲(chóng)性，我們需在不破壞種植資源的情況下進(jìn)行鑒定。
[0006]本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，采用常規(guī)方法鑒定栽培棉花品種的抗蚜性，以蚜指減退率為判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果表明216份材料中，中抗材料5份，抗性材料211份，無(wú)其他抗性級(jí)別。因此由結(jié)果可看出，常規(guī)栽培種棉花的抗蚜性鑒定方法不適用于野生棉和半野生棉的抗蚜性鑒定方法，加之野生棉極其珍貴、生長(zhǎng)環(huán)境特殊等方面，以單葉鑒定方法和蚜蟲(chóng)增長(zhǎng)倍率為判定指標(biāo)更科學(xué)。
[0007]因此致力于利用野生棉或半野生棉中篩選抗棉蚜品種材料，并通過(guò)分子標(biāo)記方法，聚合創(chuàng)造新材料，提供給育種家使用，已經(jīng)成為迫在眉睫的工作。因此，急需研究適用于野生棉或半野生棉抗棉蚜的鑒定方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是提供一種野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法。
[0009]因此，根據(jù)野生棉和半野生棉自身的特有特點(diǎn)，本發(fā)明率先研究了野生棉或半野生棉對(duì)棉蚜的控制作用，并通過(guò)比較田間小區(qū)試驗(yàn)、網(wǎng)室試驗(yàn)試驗(yàn)，研究提出了野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法。
[0010]根據(jù)本發(fā)明的野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法包括以下步驟:
[0011](I)選擇被鑒定野生棉或半野生棉材料的頂部嫩葉；如果選擇的葉片不合適，會(huì)影響蚜蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖，從而引起鑒定誤差；
[0012](2)將頂部嫩葉放置在適宜大小的網(wǎng)罩內(nèi)，阻止害蟲(chóng)及天敵的侵入；網(wǎng)袋的孔徑需要100目，孔徑太小，影響 葉片正常生長(zhǎng)，從而引起葉片生理變化，引起蚜蟲(chóng)取食變化，引起鑒定誤差；孔徑太大，蚜蟲(chóng)會(huì)逃逸；
[0013](3)人工接蚜，每片葉接成蚜30-40頭，封住網(wǎng)袋口，防止蚜蟲(chóng)逃逸；接蟲(chóng)數(shù)量是關(guān)鍵，不宜太多，太多繁殖太多，調(diào)查誤差大；蚜蟲(chóng)接入太少，繁殖量不夠；
[0014](4)接蚜后第6天，調(diào)查受檢品種和對(duì)照品種蚜蟲(chóng)數(shù)量；
[0015](5)計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率，分析統(tǒng)計(jì)不同材料上蚜蟲(chóng)數(shù)量,并計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率,蚜蟲(chóng)繁殖倍率均為10株棉花上蚜蟲(chóng)數(shù)量的平均值；計(jì)算公式如公式(I):
[0016]A = —Kl)
a
[0017]公式(I)中:
[0018]A為蚜蟲(chóng)在野生棉或半野生棉上繁殖的倍率；
[0019]X為蚜蟲(chóng)在野生棉或半野生棉上調(diào)查時(shí)的數(shù)量，單位為“頭”。
[0020]a為接種蚜蟲(chóng)數(shù)量，單位為“頭”。
[0021]根據(jù)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，所述野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法包括:
[0022](I)試驗(yàn)單葉進(jìn)行，分別選擇每個(gè)材料的頂部嫩葉，每個(gè)單葉記為一次重復(fù)，共10
次重復(fù)；
[0023](2)將鑒定棉花該嫩葉放置在適宜大小的網(wǎng)罩內(nèi)(100目)，阻止害蟲(chóng)及天敵的侵A ；
[0024](3)人工接蚜，每片葉接成蚜30-40頭，封住網(wǎng)袋口，防止蚜蟲(chóng)逃逸；
[0025](4)接蚜后第6天，調(diào)查受檢品種和對(duì)照品種蚜蟲(chóng)數(shù)量；[0026](5)計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率；
[0027](6)分析統(tǒng)計(jì)不同材料上蚜蟲(chóng)數(shù)量，并計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率；蚜蟲(chóng)繁殖倍率均為10株棉花上蚜蟲(chóng)數(shù)量的平均值；計(jì)算公式如公式(I):
[0028]A =—⑴
a
[0029]公式(I)中:
[0030]A為蚜蟲(chóng)在野生棉或半野生棉上繁殖的倍率；
[0031]X為蚜蟲(chóng)在野生棉或半野生棉上調(diào)查時(shí)的數(shù)量，單位為“頭”。
[0032]a為接種蚜蟲(chóng)數(shù)量，單位為“頭”。
[0033](7)根據(jù)不同材料上蚜蟲(chóng)繁殖倍率判別鑒定品種的抗性級(jí)別。
[0034]表1野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性性判定標(biāo)準(zhǔn)
[0035]
【權(quán)利要求】
1.一種野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: (1)選擇被鑒定野生棉或半野生棉材料的頂部嫩葉； (2)將頂部嫩葉放置在適宜大小的網(wǎng)罩內(nèi)，阻止害蟲(chóng)及天敵的侵入； (3)人工接蚜，每片葉接成蚜30-40頭，封住網(wǎng)袋口，防止蚜蟲(chóng)逃逸； (4)接蚜后第6天，調(diào)查受檢品種和對(duì)照品種蚜蟲(chóng)數(shù)量； (5)計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率，分析統(tǒng)計(jì)不同材料上蚜蟲(chóng)數(shù)量,并計(jì)算蚜蟲(chóng)繁殖倍率,蚜蟲(chóng)繁殖倍率均為10株棉花上蚜蟲(chóng)數(shù)量的平均值；計(jì)算公式如公式(1):A=X/a
(1)
公式(1)中: A為蚜蟲(chóng)在野生棉或半野生棉上繁殖的倍率； X為蚜蟲(chóng)在野生棉或半野生棉上調(diào)查時(shí)的數(shù)量，單位為“頭”。 a為接種蚜蟲(chóng)數(shù)量，單位為“頭”。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法，其特征在于，在步驟(1)中，每個(gè)單葉記為一次重復(fù),共10次重復(fù)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生棉或半野生棉抗蚜蟲(chóng)性鑒定方法，其特征在于，在步驟(2)中，將頂部嫩葉放置在100目大小的網(wǎng)罩內(nèi)。
【文檔編號(hào)】A01G1/00GK103460923SQ201310361478
【公開(kāi)日】2013年12月25日 申請(qǐng)日期:2013年8月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月19日
【發(fā)明者】雒珺瑜, 崔金杰, 馬艷, 辛慧江, 王春義, 張帥, 呂麗敏, 李春花 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所