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天然蕓苔素內(nèi)酯在辣椒上的應(yīng)用的制作方法

文檔序號:273303閱讀:1187來源:國知局
專利名稱:天然蕓苔素內(nèi)酯在辣椒上的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明是中國專利第201210026285.7號的繼續(xù)申請,屬于農(nóng)用化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體而言,本發(fā)明涉及栽培辣椒的方法,其中在育苗期和在定植后施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物,尤其施用本發(fā)明的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物。
背景技術(shù)
蕓苔素內(nèi)酯是國際上公認為活性最高的高效、廣譜、無毒的植物生長調(diào)節(jié)劑,生理效益比已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的另外五大類植物激素高,而被稱為世界第六大類植物激素。蕓苔素內(nèi)酯廣泛存在于被子植物、裸子植物和某些低等植物中,從在植物體內(nèi)的分布來看,存在于根、莖、葉、花粉、雌蕊、果實和種子中,如油菜花粉中含有較豐富的蕓苔素內(nèi)酯?;瘜W(xué)合成的蕓苔素內(nèi)酯,如中國專利申請CN1217337A、CN1217338A等所述的,雖然產(chǎn)品較為均一,但是活性成分單一,長期施用效果通常不如天然蕓苔素內(nèi)酯好,這在中國國內(nèi)已經(jīng)廣泛使用的28-表高蕓苔素內(nèi)酯上表現(xiàn)得尤為突出。從植物(如,花粉)或其他天然來源(如,蜂蠟)中提取的蕓苔素內(nèi)酯,其中通常含有多種蕓苔素內(nèi)酯結(jié)構(gòu)類似物,其作為一種綠色的生產(chǎn)資料,其推廣使用更容易為國內(nèi)外用戶所推崇,但是由于提取中工藝的限制,容易產(chǎn)生產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定的情況;如果進一步提純,則制備成本上升較大,不利于產(chǎn)業(yè)化實施,因而阻礙了人們進一步大量純化,并阻礙了人們?nèi)パ芯科渲懈魇|苔素內(nèi)酯類似物是否具有蕓苔素內(nèi)酯的活性。例如,Zhu,W.Μ.等(Synthetic Communications,32(9),1385-1391)和 Suksamaram, A.等(Tetrahedron,58,6033-6037)合成了一些化合物,但僅僅被當(dāng)成昆蟲的蛻皮激素類似物而只啟示其的昆蟲激素應(yīng)用。本發(fā)明人通過長期而艱苦的努力,摸索出了從植物中提取(純化)蕓苔素內(nèi)酯類似物的穩(wěn)定流程,精心研 究了其中的各種提取溶劑,盡管其中需要一定的提純過程,但是只需要一次提取過程,最終可以收集到多種分離的高純度的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物,因而攤薄了提純的成本,有利于產(chǎn)業(yè)化推廣實施;這些分離的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物可以單獨施用,也可以配比混和施用,因而產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定而容易控制。在獲得了大量分離的高純度的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物的基礎(chǔ)上,本發(fā)明人進一步研究,令人意外地發(fā)現(xiàn)了,這些天然蕓苔素內(nèi)酯類似物在植物產(chǎn)量增加和抗低溫等方面均有效用,尤其適合于辣椒這一作物。盡管中國專利申請CN1269140A描述了包含蕓苔素內(nèi)酯的抗植物病害的組合物,但其中沒有提示其單獨的抗低溫的效用,也沒有提示本發(fā)明的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物;盡管中國專利申請CN1930966A描述了包含蕓苔素的殺菌組合物,但其中沒有提示其單獨抗低溫的效用,也沒有提示本發(fā)明的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物;另外,盡管中國專利申請CN102617236A描述了包含蕓苔素內(nèi)酯的殺菌組合物,但其中沒有提示其單獨抗低溫的效用,也沒有提示本發(fā)明的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物,而且更嚴重的是其中所用的蕓苔素內(nèi)酯相對于磷等元素的含量極高,造成蕓苔素內(nèi)酯的浪費以及減效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供了新的栽培辣椒的方法,。另外,本發(fā)明還提供了配比穩(wěn)定的農(nóng)用組合物,其中包含天然蕓苔素內(nèi)酯類似物,其中在育苗期和在定植后施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物,尤其施用本發(fā)明的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物。具體而言,在第一方面,本發(fā)明提供了栽培辣椒的方法,其包括育苗和定植過程,其特征在于,(a)在育苗期施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物;并且(b)在定植后施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物。栽培(即,種植)辣椒的過程是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的,通常包括在播種后進行育苗,待長到一定程度后, 進行定植。由于辣椒屬于不耐低溫的作物,因此對越冬或者早春種植的辣椒進行防凍工作是必不可少的。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn),蕓苔素內(nèi)酯或其類似物對植物的抗低溫性的增強有一定效用,盡管不能代替目前的防凍措施(如,溫室大棚和防凍劑等),但是在結(jié)合現(xiàn)有常規(guī)辣椒栽培手段后,能進一步提高辣椒產(chǎn)量并能縮短育苗期和收獲期。本發(fā)明發(fā)現(xiàn),大量施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物并不能提高其效用,甚至可能會減效,因此優(yōu)選控制在中低濃度進行施用,如以0.0001-0.1ppm的濃度進行施用,優(yōu)選以0.001-0.0lppm的濃度進行施用。本發(fā)明第一方面的方法尤其適合越冬或者早春種植的辣椒。因此優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的方法中,育苗是在溫室大棚中育苗;和/或,定植是在早春定植。另外也優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的方法中,在定植后還施用防凍劑。本發(fā)明第一方面的方法中,可以施用蕓苔素內(nèi)酯,也可以施用蕓苔素內(nèi)酯類似物。經(jīng)過本發(fā)明進行研究,發(fā)現(xiàn)了一系列效用確準的蕓苔素內(nèi)酯類似物(在本文中也稱天然蕓苔素內(nèi)酯類似物)。因此優(yōu)選在本發(fā)明第一方面的方法中,蕓苔素內(nèi)酯類似物是分離的如式BR6、BR1、BR2、BR3、BR4和/或BR5所示的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物或它們的混合物,優(yōu)選所述混合物是成分配比穩(wěn)定的農(nóng)用組合物
權(quán)利要求
1.栽培辣椒的方法,其包括育苗和定植過程,其特征在于, (a)在育苗期施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物;并且 (b)在定植后施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物。
2.權(quán)利要求1所述的方法,其中育苗是在溫室大棚中育苗;和/或,定植是在早春定植。
3.權(quán)利要求2所述的方法,其中在定植后還施用防凍劑。
4.權(quán)利要求1、2或3所述的方法,其中蕓苔素內(nèi)酯類似物是分離的如式BR6、BRl、BR2、BR3、BR4和/或BR5所示的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物或它們的混合物,優(yōu)選所述混合物是成分配比穩(wěn)定的農(nóng)用組合物
5.權(quán)利要求4所述的方法,其中蕓苔素內(nèi)酯類似物是通過如下提取方法制備的: (1)用80 100%(V/V)乙醇水溶液提取破碎的油菜花粉,固液分離后保留濾液(任選其中濾液進一步濃縮),獲得醇溶性提取液; (2)將醇溶性提取液與O 60%(V/V)乙醇水溶液混合,然后加入乙酸乙酯萃取,保留乙酸乙酯層并加入酯酶和糖化酶進行不完全反應(yīng),然后干燥,獲得酯溶性提取物; (3)酯溶性提取物上樣于硅膠色譜柱,用甲醇和乙酸乙酯的混和液洗脫,收集含有天然蕓苔素內(nèi)酯類似物的洗脫液,干燥并溶解于甲醇中,獲得硅膠柱純化液; (4)將硅膠柱純化液上樣于C18反相色譜柱,用乙腈和水的混和液洗脫,分別收集含有如式BR6、BR1、BR2、BR3、BR4和/或BR5所示的蕓苔素內(nèi)酯類似物的洗脫液;和 (5)任選將如式BR6、BR1、BR2、BR3、BR4和/或BR5所示的蕓苔素內(nèi)酯類似物的洗脫液混合。
6.權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,在步驟(I)中, 乙醇水溶液的濃度為85 98% (V/V),優(yōu)選為90 97% (V/V),更優(yōu)選為93 96%(V/V),最優(yōu)選為 95% (V/V); 油菜花粉:乙醇水溶液的重量體積比為50 200克:200 500mL,優(yōu)選為80 150克:250 450mL,更優(yōu)選為90 120克:280 350mL,最優(yōu)選為100克:300mL ; 步驟(I)進一步包括,固液分離后得到的濾渣用80 100% (V/V)乙醇水溶液提取,然后進行固液分離,保留濾液并與步驟(I)中獲得的濾液合并; 濃縮是減壓干燥濃縮,優(yōu)選為以65 80°C和0.08 0.09Mpa的真空度干燥濃縮,最優(yōu)選為以75°C和0.085Mpa的真空度干燥濃縮;和/或 醇溶性提取液:步驟(2)中的乙醇水溶液的體積比為0.5 2: I 3,優(yōu)選為0.8 1.5: 1.5 2.5,最優(yōu)選為1: 2。
7.權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,在步驟(2)中, 乙醇水溶液的濃度為30 55% (V/V),優(yōu)選為40 53% (V/V),更優(yōu)選為45 52%(V/V),最優(yōu)選為 50% (V/V); 乙醇水溶液:乙酸乙酯的體積比為I 3: 3 8,優(yōu)選為1.5 2.5: 4 6,最優(yōu)選為2: 5; 步驟(2)進一步包括,萃取后得到的非乙酸乙酯層加入乙酸乙酯萃取,保留乙酸乙酯層并與步驟(2)中獲得的乙酸乙酯層合并; 酯酶是提取自細菌的酯酶,而且糖化酶是提取自真菌的糖化酶; 不完全反應(yīng)是在35 42°C反應(yīng)0.5 2小時,優(yōu)選是在37 41°C反應(yīng)0.75 1.5小時,最優(yōu)選在40°C反應(yīng)I小時;和/或 干燥是減壓干燥,優(yōu)選為以65 80°C和0.08 0.09Mpa的真空度干燥,最優(yōu)選為以75°C和0.085Mpa的真空度干燥。
8.權(quán)利要求5所述的提取方法,其特征在于,在步驟(3)中, 硅膠色譜柱中的填料是200 300目硅膠,最優(yōu)選是300目硅膠; 混和液中甲醇:乙酸乙酯的體積比為3 8: 0.5 1.5,優(yōu)選為4 7: 0.8 1.3,最優(yōu)選為5: I ;和/或 干燥是減壓干燥,優(yōu)選為以65 80°C和0.08 0.09Mpa的真空度干燥,最優(yōu)選為以75°C和0.085Mpa的真空度干燥。
9.權(quán)利要求5所述的提取方法,其特征在于,在步驟(4)中, 混和液中乙腈:水的體積比為60 90: 10 40,優(yōu)選為70 80: 20 30,最優(yōu)選為75: 25 ;和/或 如式BR6、BRl、BR2、BR3、BR4和/或BR5所示的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物的純度大于90 %,優(yōu)選大于95 %,更優(yōu)選大于98 % ,最優(yōu)選大于99 %。
10.分離的如式BR6、BR1、BR2、BR3、BR4和/或BR5所示的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物在促進辣椒生長、提高辣椒產(chǎn)量(尤其是早期產(chǎn)量)、縮短辣椒育苗期和/或縮短辣椒收獲期中的應(yīng)用,或者在栽 培育苗期縮短、收獲期縮短和/或產(chǎn)量(尤其是早期產(chǎn)量)提高的辣椒中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然蕓苔素內(nèi)酯在辣椒上的應(yīng)用,具體提供了栽培辣椒的方法,其中在育苗期和在定植后施用蕓苔素內(nèi)酯或其類似物,尤其施用配比穩(wěn)定的天然蕓苔素內(nèi)酯類似物。另外,本發(fā)明還提供了天然蕓苔素內(nèi)酯類似物的應(yīng)用等。
文檔編號A01P21/00GK103141251SQ20131006332
公開日2013年6月12日 申請日期2013年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月28日
發(fā)明者何其明 申請人:成都新朝陽作物科學(xué)有限公司
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