專(zhuān)利名稱(chēng)：虎乳靈芝的段木栽培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食藥用菌的人工栽培方法，屬于食藥用菌人工栽培領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
虎乳靈芝rhinocerus (Cooke) Ryvarden,隸屬真菌門(mén) Eumycota,擔(dān)子菌亞門(mén) Basidiomycotin,層菌綱 Hymenomycetes,非裙菌目 Aphyllophorales,多孔菌科Polyporaceae,虎乳靈芝屬Lignosus,也稱(chēng)虎奶，是一種被馬來(lái)西亞原住民廣泛使用的食藥用真菌，大約有400年的應(yīng)用歷史。主要分布于馬來(lái)西亞，菲律賓，斯里蘭卡，澳大利亞和東非等，中國(guó)分布于海南省。菌核是其藥用部位，有止咳定喘、健脾化濕的功效，民間常用于治療哮喘及咳喘，療效極佳。中醫(yī)認(rèn)為它是一種治療肝炎、肝熱、肝癌、胃病的良藥。西醫(yī)出身的馬來(lái)西亞前首相馬哈蒂爾在2002年馬來(lái)西亞國(guó)際生物技術(shù)大會(huì)上提到虎乳靈芝治愈他久咳之病后更是名聲大振。由于亂采亂挖、資源破壞現(xiàn)象嚴(yán)重，目前野生資源逐漸枯竭，市場(chǎng)上虎乳靈芝供應(yīng)不足，價(jià)格昂貴。
目前有關(guān)虎乳靈芝人工栽培的報(bào)道很少，只檢索到一種代料栽培方法的報(bào)道(藥用真菌新品種-虎乳靈芝的人工栽培實(shí)驗(yàn)，中國(guó)食用菌，1999，18(3):8-9)。該法存在的不足主要有:形成菌核無(wú)固定著點(diǎn)，數(shù)量多，個(gè)體小，發(fā)育差，商品價(jià)值較低。究其原因，代料栽培在經(jīng)過(guò)半年的培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中養(yǎng)料已耗光，菌核不可能再長(zhǎng)大?；⑷殪`芝生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，后期營(yíng)養(yǎng)跟不上則沒(méi)法繼續(xù)生長(zhǎng)，因此相比而言，野生虎乳靈芝菌核較大。本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)不足，模仿虎乳靈芝的野生生長(zhǎng)環(huán)境，采用段木栽培方法培養(yǎng)虎乳靈芝，一般新鮮段木兩三年內(nèi)不會(huì)被完全分解，因此可以較長(zhǎng)時(shí)間滿(mǎn)足虎乳靈芝營(yíng)養(yǎng)需求，從而形成優(yōu)質(zhì)、大個(gè)、商品價(jià)值高的菌核。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供虎乳靈芝的段木栽培方法，所要解決的技術(shù)問(wèn)題是:針對(duì)現(xiàn)有的虎乳靈芝人工栽培方法中存在的技術(shù)不成熟，產(chǎn)量低，菌核小等缺陷，提供一種新的人工栽培虎乳靈芝的方法。本發(fā)明摸索出了最適合于虎乳靈芝菌核形成的培養(yǎng)基成分、濕度、溫度等環(huán)境因子，培養(yǎng)出來(lái)的菌核具有質(zhì)量好、商品價(jià)值高的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明目的是提供虎乳靈芝的段木栽培方法。
所述虎乳靈芝的段木栽培方法，包括如下步驟:購(gòu)買(mǎi)或分離獲得虎乳靈芝菌種；將虎乳靈芝菌種接到母種培養(yǎng)基上擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得虎乳靈芝母種；將虎乳靈芝母種接種于原種培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得原種；原種接種到段木上進(jìn)行段木培養(yǎng)；培養(yǎng)好的段木埋入沙土進(jìn)行菌核培養(yǎng)；菌核采收。所述菌種購(gòu)買(mǎi)自中國(guó)科學(xué)院微生物研究所或三明市真菌研究所； 所述分離，可從海南或馬來(lái)西亞野外采集野生虎乳靈芝菌核，對(duì)其進(jìn)行表面清洗，自來(lái)水沖洗數(shù)分鐘后，干凈紗布揩干后，進(jìn)入超凈工作臺(tái)，用消毒酒精擦洗菌核外皮，無(wú)菌水沖洗幾次，滅菌濾紙片吸干表面水分后，用無(wú)菌解剖刀將野生虎乳靈芝菌核切開(kāi)，接種鏟挖取切取0.4cm左右方塊組織，0.1%升汞消毒3分鐘后用鑷子將菌核組織于培養(yǎng)皿培養(yǎng)基的中央，30°C培養(yǎng)5d后可見(jiàn)由組織塊長(zhǎng)出白色絨毛狀菌，轉(zhuǎn)試管1-2次可獲得純化的虎乳靈芝菌絲； 所述母種培養(yǎng)基，用液體母種培養(yǎng)基，配方為:酵母粉IOg,蛋白胨IOg,葡萄糖20g,磷酸二氫鉀0.3g，七水硫酸鎂0.2g，瓊脂粉15克，蒸餾水IOOOmL, pH6.0,用250ml或500ml三角瓶，裝量為三角瓶容積的40%，121°C滅菌25min，冷卻至室溫后接入虎乳靈芝菌種，在旋轉(zhuǎn)式搖床上旋轉(zhuǎn)，培養(yǎng)10-15天，成為虎乳靈芝液體母種； 所述母種培養(yǎng)基，用固體母種培養(yǎng)基，其配方為每IOOOml上述液體母種培養(yǎng)基添加15克瓊脂粉，121°C滅菌25min，冷卻至室溫后接入虎乳靈芝菌種，培養(yǎng)15-20天，成為虎乳靈芝固體母種； 所述原種培養(yǎng)基配方:闊葉樹(shù)木屑20-50%、棉籽殼28-58%、麥麩20%、蔗糖1%、石膏粉1%，攪拌均勻后加水，最終培養(yǎng)基含水量為50-60%，優(yōu)選培養(yǎng)基配方為闊葉樹(shù)木屑30%、棉籽殼48%、麥麩20%、蔗糖1%、石膏粉1%，攪拌均勻后加水，最終培養(yǎng)基含水量55% ； 所述原種培養(yǎng)基一般可制成500ml-750ml原種瓶； 所述母種、原種均為25°C _38°C恒溫暗室培養(yǎng)，優(yōu)選培養(yǎng)溫度30°C ； 所述虎乳靈芝段木培養(yǎng)生產(chǎn)工藝流程為: 樹(shù)木選擇一切段一裝袋一滅菌一接種一菌絲培養(yǎng)一場(chǎng)地準(zhǔn)備一埋沙土一管理、菌核培養(yǎng)一米收 所述樹(shù)木選擇，樹(shù)種優(yōu)選闊葉樹(shù)，例如橡膠木、櫟樹(shù)、栲樹(shù)、樺樹(shù)、青R木等，砍伐運(yùn)輸過(guò)程中，盡可能保持樹(shù)皮完 整； 所述切段為將所選樹(shù)木切段，切段長(zhǎng)度一般15-30cm，優(yōu)選切段長(zhǎng)度為18-22cm，切面要平，周?chē)饨且髌?，以免刺破塑料袋? 所述裝袋為將段木捆扎，在段木上下表面放含水量40-55%的棉籽皮后裝袋；若段木過(guò)干，則浸水過(guò)夜再裝袋，當(dāng)段木干燥至含水量為35%-45%時(shí)，即可切段裝袋；所述袋為聚丙烯袋，適用于高壓滅菌；或聚乙烯袋，適于常壓滅菌； 所述滅菌為常壓滅菌，保持100°C，10-12h或高壓滅菌121°C，保持1_1.5h ； 所述菌絲培養(yǎng)為將接種后的段木菌袋放暗室培養(yǎng)，溫度22°C -38°C，優(yōu)選30°C ;—般菌絲培養(yǎng)時(shí)間35-50d ;通過(guò)開(kāi)門(mén)窗換氣增加袋內(nèi)氧氣，促進(jìn)菌絲向木質(zhì)部深層生長(zhǎng)； 所述場(chǎng)地準(zhǔn)備:栽培場(chǎng)在晴天翻土 15-25cm，開(kāi)畦，畦高10-15cm，畦寬1.5-1.8m,畦長(zhǎng)按地形決定:畦面四周開(kāi)好排水溝，溝深20-40cm ； 所述埋土:菌木下面放置顆粒較大的粗沙，大小為體積20立方厘米左右，虎乳靈芝為好氣性真菌，容易在阻力較小的空間形成菌核生長(zhǎng)點(diǎn)，并以此為中心而擴(kuò)展菌核；菌木間距4-10cm,行距8-15cm，優(yōu)選為間距6-8cm，行距10-12cm ;菌木上覆沙土深淺厚薄視栽培場(chǎng)濕度大小酌情處理，以菌木不露為標(biāo)準(zhǔn)，上面鋪一層樹(shù)葉，以利保濕或防止曝曬； 所述管理、菌核培養(yǎng)，主要是:(I)溫度虎乳靈芝正常的生長(zhǎng)溫度為15°C_38°C，最適范圍為25°C _32°C，夏天氣溫高時(shí)要注意搭蔭棚降溫，冬天或者初春、深秋氣溫較低時(shí)則需要覆膜保溫。(2)濕度保持菌木及沙土的濕度，既不能澇又不能旱，維持在含水量35-50%左右，較優(yōu)為40-45%。段木栽培埋土 5個(gè)月后可采收菌核，可維持近2年年采收3茬。根據(jù)我們幾年的栽培數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，以IOOOkg干木材計(jì)，第一茬可收獲45-66kg，第二茬收獲32-43kg，第三茬 9-15kg ；本發(fā)明方法是申請(qǐng)人對(duì)培養(yǎng)基、菌絲培養(yǎng)條件、菌核培養(yǎng)條件等影響因素及各因素之間相互影響關(guān)系進(jìn)行多次優(yōu)選組合而得到的，該方法簡(jiǎn)便易行，投資小、見(jiàn)效快，易于推廣；本發(fā)明方法菌核個(gè)大、質(zhì)量好、商品價(jià)值高?；⑷殪`芝菌核在治療哮喘及咳喘具有極佳療效，又在治療肝炎、肝熱、肝癌方面有顯著效果；同時(shí)虎乳靈芝無(wú)毒副作用，可以作為膳食纖維補(bǔ)充人體需要。目前市場(chǎng)上野生虎乳靈芝不能滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，價(jià)格昂貴，菌類(lèi)學(xué)家認(rèn)為虎乳靈芝是最有開(kāi)發(fā)前途的藥用真菌之一，市場(chǎng)前景廣闊。人工栽培有望產(chǎn)生顯著的經(jīng)濟(jì)效.、Mo具體實(shí)施方式
以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
實(shí)施例1 虎乳靈芝菌種購(gòu)自三明真菌研究所，將虎乳靈芝菌種擴(kuò)大培養(yǎng)于固體母種培養(yǎng)基上15d獲得虎乳靈芝母種，再接種于原種培養(yǎng)基培養(yǎng)40d，待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后接種到段木袋上培養(yǎng); 固體母種培養(yǎng)基配方為:酵母粉1Og,蛋白胨IOg,葡萄糖20g,磷酸二氫鉀0.3g,七水硫酸鎂0.2g，瓊脂粉15g，蒸餾水lOOOmL，pH6.0,121°C滅菌30min。原種培養(yǎng)基:闊葉樹(shù)木屑80%、麥麩18%、蔗糖1%、石膏粉1%，攪拌均勻后加水，使培養(yǎng)基含水量達(dá)55 60% ;原種培養(yǎng)基用500mL原種瓶，裝量不超過(guò)400ml，以保證充足的空氣；將固體母種挑一小塊接入原種培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
母種、原種培養(yǎng)條件為30°C恒溫暗室培養(yǎng)；浙江省杭州地區(qū)安排生產(chǎn)，母種培養(yǎng)安排在I月中旬；原種安排在2月中上旬；段木菌袋培養(yǎng)開(kāi)始于3月上旬，下地安排在3月中下旬； 段木培養(yǎng)工藝流程: 樹(shù)木選擇一切段一裝袋一滅菌一接種一菌絲培養(yǎng)一場(chǎng)地準(zhǔn)備一脫袋、埋土一管理、菌核生長(zhǎng)一米收； 所述樹(shù)木選擇，樹(shù)種優(yōu)選闊葉樹(shù)，例如橡膠木、櫟樹(shù)、栲樹(shù)、樺樹(shù)、懸鈴木等； 所述切段為將所選樹(shù)木切段，切段長(zhǎng)度一般15-30cm，優(yōu)選切段長(zhǎng)度為18-22cm ;切面要平，周?chē)饨且髌剑? 所述裝袋，在兩個(gè)切面放置含水量40-55%的棉籽皮后裝袋，可以避免刺破塑料袋，又有利于原種接入后的菌絲快速吃料滲透；若段木過(guò)干，則浸水過(guò)夜再裝袋；當(dāng)段木含水量為35% 45%時(shí)，即可切段裝袋；所述袋，聚丙烯袋，適用于高壓滅菌；聚乙烯袋，適用于常壓滅菌； 所述滅菌為常壓滅菌，保持100°C，10h或高壓滅菌121°C，保持1.5h ； 所述接種為將一湯匙左右原種接入到滅菌后的段木袋中； 所述栽培場(chǎng)地準(zhǔn)備:栽培場(chǎng)在晴天翻土 15-25cm，開(kāi)畦，畦高10-15cm，畦寬L 5-1.8m，畦長(zhǎng)按地形決定:畦面四周開(kāi)好排水溝，溝深20-40cm ；所述埋土:菌木下面放置顆粒較大的粗沙，大小為體積20立方厘米左右，虎乳靈芝為好氣性真菌，容易在阻力較小的空間形成菌核生長(zhǎng)點(diǎn)，并以此為中心而擴(kuò)展菌核；菌木間距4-10cm,行距8-15cm，優(yōu)選為間距6-8cm，行距10-12cm ;菌木上覆沙土深淺厚薄視栽培場(chǎng)濕度大小酌情處理，以菌木不露為標(biāo)準(zhǔn)，上面鋪一層樹(shù)葉，以利保濕或防止曝曬； 所述管理、菌核培養(yǎng)，主要是:(I)溫度虎乳靈芝正常的生長(zhǎng)溫度為15°C_38°C，最適范圍為25°C _32°C，夏天氣溫高時(shí)要注意搭蔭棚降溫，冬天或者初春、深秋氣溫較低時(shí)則需要覆膜保溫。(2)濕度保持菌木及沙土的濕度，既不能澇又不能旱，一般維持在含水量35-50%左右，較優(yōu)為40-45%。段木栽培埋土 5個(gè)月后可采收菌核，可維持近2年年采收3茬。根據(jù)我們幾年的栽培數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，以IOOOkg干木材計(jì)，第一茬可收獲55-76kg，第二茬收獲32-43kg，第三茬9-15kg。
實(shí)施例2 虎乳靈芝菌種購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，將虎乳靈芝菌種在液體培養(yǎng)基上擴(kuò)大培養(yǎng)10-15d獲得虎乳靈芝母種。
母種培養(yǎng)基選用液體培養(yǎng)基:酵母粉10g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀0.3g,七水硫酸鎂0.2g,蒸餾水IOOOmL, ρΗ6.0,121 °C濕熱滅菌25min。用250ml或500ml三角瓶，裝量IOOml或200ml，121°C滅菌30min，冷卻至室溫后接種虎乳靈芝菌種，在旋轉(zhuǎn)式搖床上旋轉(zhuǎn)，培養(yǎng)10-15天，成為虎乳靈芝液體母種。原種培養(yǎng)基采用櫟樹(shù)木屑80%、麥麩18%、蔗糖1%、石膏粉1%，攪拌均勻后加水，使培養(yǎng)基含水量達(dá)50 55% ;原種培養(yǎng)基裝在750mL原種瓶，裝量不超過(guò)450ml，以保證充足的空氣；液體母種接種到原種培養(yǎng)基上，吃料較快，一般25-30d后可以長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基。
其他操作方式同實(shí)施例1。
實(shí)施例3 虎乳靈芝菌種，從海南野生虎乳靈芝菌核分離得到，先對(duì)采集的野生虎乳靈芝菌核進(jìn)行表面清洗，自來(lái)水沖洗數(shù)分鐘后，干凈紗布揩干后，進(jìn)入超凈工作臺(tái)，用消毒酒精擦洗菌核外皮，無(wú)菌水沖洗幾次，滅菌濾紙片吸干表面水分后，用無(wú)菌解剖刀將野生虎乳靈芝菌核切開(kāi)，接種鏟挖取切取0 .4cm左右方塊組織，0.1%升汞消毒3分鐘后用鑷子將菌核組織于培養(yǎng)皿培養(yǎng)基的中央，30°C培養(yǎng)5d后可見(jiàn)由組織塊長(zhǎng)出白色絨毛狀菌，轉(zhuǎn)試管1-2次可獲得純化的虎乳靈芝菌絲。
海南省安排生產(chǎn)，一年四季均可進(jìn)行。
其他操作方式同實(shí)施例1。
權(quán)利要求
1.虎乳靈芝的段木栽培方法，其特征在于，包括:將虎乳靈芝菌絲接到母種培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得虎乳靈芝母種；將母種接于原種培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得原種；原種接種到段木上培養(yǎng)獲得段木栽培種；將段木栽培種埋沙土，管理，收獲菌核。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述虎乳靈芝的段木栽培方法，其特征在于，母種培養(yǎng)基配方為:酵母粉10g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀0.3g，七水硫酸鎂0.2g，蒸餾水IOOOmL,pH6.0，為液體母種培養(yǎng)基，若加瓊脂粉15g，則為固體培養(yǎng)基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述虎乳靈芝的段木栽培方法，其特征在于，原種培養(yǎng)基的配方:闊葉樹(shù)木屑20-50%、棉籽殼28-58%、麥麩20%、蔗糖1%、石膏粉1%，攪拌均勻后加水，最終培養(yǎng)基含水量為50-60%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述虎乳靈芝的段木栽培方法，其特征在于，所述母種、原種培養(yǎng)條件均為22°C 38°C恒溫暗室培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述虎乳靈芝的段木栽培方法，其特征在于，所述段木栽培種工藝流程為: 樹(shù)木選擇一切段一裝袋一滅菌一接種一菌絲培養(yǎng)一場(chǎng)地準(zhǔn)備一脫袋、埋土一管理、菌核培養(yǎng)一米收； 所述滅菌為常壓滅菌，保持100°C，8 12h或高壓滅菌121°C，保持I 1.5h ; 所述菌絲培養(yǎng)為將接種后段木菌袋放暗室培養(yǎng)，溫度25°C 38°C ； 所述栽培場(chǎng)地準(zhǔn)備:栽培場(chǎng)應(yīng)在晴天翻土 15 25cm，開(kāi)畦，畦高10 15cm，畦寬1.5 ·1.8m,畦長(zhǎng)按地形決定；畦面四周開(kāi)好排水溝，溝深20 40cm ； 所述埋土:菌木下面放置的沙土為顆粒較大的粗沙；菌木間距4-lOcm，行距8-15cm ;覆沙土深淺厚薄應(yīng)視栽培場(chǎng)濕度大小酌情處理，以菌木不露為標(biāo)準(zhǔn)，上面鋪一層樹(shù)葉； 所述管理、菌核培養(yǎng):(I)溫度虎乳靈芝正常的生長(zhǎng)溫度為15°C _38°C，夏天高溫時(shí)搭蔭棚降溫，冬天或初春、深秋氣溫較低時(shí)覆膜保溫(2)濕度要保持菌木及沙土的濕度，既不能澇又不能旱，維持 在含水量35-50%。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了虎乳靈芝的段木栽培方法。該方法包括虎乳靈芝母種、原種和段木栽培種制作，選地整地、段木栽培種埋土、田間管理和采收。本發(fā)明克服以前技術(shù)不足，模仿虎乳靈芝的野生生長(zhǎng)環(huán)境，采用段木栽培方法培養(yǎng)虎乳靈芝，滿(mǎn)足虎乳靈芝菌核營(yíng)養(yǎng)需求，從而形成優(yōu)質(zhì)菌核。
文檔編號(hào)A01G1/04GK103168617SQ201310012530
公開(kāi)日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2013年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月14日
發(fā)明者吳吉安, 陳向東, 鐘耀強(qiáng), 曾念開(kāi) 申請(qǐng)人:杭州益禾農(nóng)業(yè)科技有限公司