專利名稱：下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)學(xué)動物模型，具體是一種下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法。
背景技術(shù)：
在治療下肢深靜脈血栓形成以及肺動脈栓塞的研究中，需要通過動物模型進行核素肺灌注顯像、增強螺旋CT和數(shù)字減影肺動脈造影，并以動物模型病理檢查為標準，比較三種檢查方法的靈敏度和特異性。由于用小型豬模擬更接近人體臨床自然過程的深靜脈血栓形成合并肺栓塞，所以目前下肢深靜脈血栓形成和肺動脈栓塞的動物模型最常用的是實驗用小型豬?，F(xiàn)有文獻報道，應(yīng)用實驗性靜脈血栓形成動物模型有50余年的歷史，約有16種不同的動物被用來制備模型(常用的動物有大鼠、兔和犬等)，目前常用靜脈血栓動物模型的方法有下腔靜脈結(jié)扎法、股靜脈阻斷法(結(jié)扎法)、股靜脈異物法、股靜脈電刺激法等。肺動脈栓塞的動物模型常用的動物有兔、豬、和犬等，由于家兔個體小、血管細操作困難，而犬操作危險性高，所以選用小型豬大小適中并且溫順。血栓制備主要有兩種方式，一種是體內(nèi)血栓形成法，另一種是體外血栓形成法。前者在體內(nèi)原位形成血栓，包括頸靜脈、股靜脈，優(yōu)點是和人體自然血栓形成更相近，但制備的血栓因血管條件的限制，量較少很難造成影像學(xué)檢查能發(fā)現(xiàn)的栓塞，并且在目標血管內(nèi)存留時間短。體外制備法優(yōu)點可以制備更大量的血栓，并且可添加外源性凝血物質(zhì)，栓塞更粗大的血管使影像學(xué)評價更加容易，在目標血管內(nèi)存留時間更長，血栓通常采用頸內(nèi)靜脈或下腔靜脈切開后留置導(dǎo)管經(jīng)導(dǎo)管注入。目前，臨床上下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞的病例增多，單純通過靜脈血栓形成動物模型與肺動脈栓塞的動物模型進行核素肺灌注顯像、增強螺旋CT和數(shù)字減影肺動脈造影病理檢查，其靈敏度和特異性不夠，迫切需要建立一種下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞動物模型，以準確分析這種病例的病理特征。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種科學(xué)合理、操作簡單、靈敏度高、特異性好的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于先制成小型豬后肢深靜脈血栓，再經(jīng)小型豬前肢頭靜脈切開插管，將體外制備的血栓注射入上腔靜脈，經(jīng)心臟循環(huán)將血栓輸送至肺動脈造成肺動脈栓塞，從而建立下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞的小型豬模型。本發(fā)明體外血栓的制備過程中，加入適當比例1:15 20的氨甲苯酸注射液能加快凝血過程，使制備血栓有更好的韌性、彈性；加入適量的可吸收明膠海綿能使肺動脈血栓在CTA檢查中更易顯影，血栓存留時間更長。本發(fā)明通過建立下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型，能為該類疾病模型的病理生理學(xué)研究、臨床藥物研究和外科手術(shù)實踐提供良好的動物模型。本發(fā)明方法具有麻醉操作簡單，效果確切；手術(shù)操作簡單，快速；肺栓塞成功率高，致死率低；檢查手段方便等優(yōu)點。
具體實施例方式一種下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，具體步驟是A、動物麻醉與監(jiān)測麻醉前對實驗小豬稱重，每千克體重采用長托寧O. 02mg、氯胺酮8 IOmg于頸后部肌內(nèi)注射進行基礎(chǔ)麻醉，約5 IOmin小型豬自行臥倒，將其仰臥固定在實驗手術(shù)臺上，給予面罩吸氧。然后于小型豬一側(cè)耳緣靜脈套管針穿刺輸液，輸注平衡液按小豬體重的每千克每小時8 IOml補充基礎(chǔ)和禁食所需。麻醉維持采用丙泊酚(按小豬體重的每千克每小時5mg)、氯胺酮(按小豬體重的每千克每小時5mg);實驗過程中如果實驗豬有明顯體動可追加氯胺酮(按小豬體重的每千克lmg)。實驗中全程用便攜式氧飽和度儀監(jiān)測豬耳部氧飽和度和心率，肉眼觀察呼吸(腹部起伏頻率)。B、制備血栓后肢血栓制成通過結(jié)扎一段長約2 3cm股靜脈并注入氨甲苯酸注射液O. Iml促使后肢深靜脈血栓形成。術(shù)中股靜脈的結(jié)扎采用2-0單絲聚丙烯縫線作為結(jié)扎線，依靠小銀夾夾閉結(jié)扎，結(jié)扎線留一長一短，短段僅過銀夾，以便受牽拉時易脫開。該縫線為單絲聚丙烯不可吸收縫線，較光滑?？p線長端經(jīng)切口固定于體表，拆除縫線時容易尋找，并且可以通過牽拉縫線使銀夾脫落松解血管恢復(fù)血管腔的連續(xù)性，使血管內(nèi)血栓和血液保持接觸的自然狀態(tài)。在結(jié)扎的小型豬后肢股靜脈外包繞一層相當長度的膨體聚四氟乙烯人造血管或硅膠管，以防與周圍組織粘連，保護形成血栓的股靜脈，方便之后拆除縫線時，血管不受損傷。該操作更加簡單、快速并可減少對血管壁的損傷。體外血栓制備穿刺股動脈抽取動脈血19ml加入氨甲苯酸注射液lm，體外制備血栓備用，靜置冰箱，保持溫度3 4°C。體外血栓的制備過程中加入適當比例1:15 20的氨甲苯酸注射液能加快凝血過程，使制備成的血栓具備更好的韌性和彈性，推注過程中不易碎裂。C、確認后肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞術(shù)后4天打開腹股溝切口，拆除股靜脈結(jié)扎線，確認深靜脈血栓存在。通過一側(cè)前肢頭靜脈切開插管的方法，置入外徑4. Omm內(nèi)徑3. Omm的輸血器將壓縮后的明膠海綿2塊(壓縮前2. OcmX I. OcmXO. 5cm)及體外制備的血栓注入上腔靜脈，經(jīng)血液循環(huán)導(dǎo)致肺動脈栓塞。進行CTA檢查確認肺栓塞存在。本發(fā)明經(jīng)前肢頭臂靜脈置管輸注血栓，相比經(jīng)頸內(nèi)靜脈或下腔靜脈切開置管輸注血栓有以下優(yōu)點①前肢頭臂靜脈位置表淺，局部皮膚清洗后多數(shù)肉眼可見，只需切開皮膚長約O. 5^1. Ocm即可暴露滿意。②經(jīng)前臂頭靜脈切開可較方便的置入外徑約4. Omm,內(nèi)徑約3. Omm的橡膠管，滿足對血栓輸注的要求。③至右心房距離短，只需插管約15cm即可達右心房，減少了血栓在長距離運行過程中的損耗。④操作過程創(chuàng)傷小，術(shù)后恢復(fù)快。
權(quán)利要求
1.一種下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于先制成小型豬后肢深靜脈血栓，再經(jīng)小型豬前肢頭靜脈切開插管，將體外制備的血栓注射入上腔靜脈，經(jīng)心臟循環(huán)將血栓輸送至肺動脈造成肺動脈栓塞，從而建立下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞的小型豬模型。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于小型豬后肢深靜脈血栓通過結(jié)扎小型豬后肢深靜脈形成。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征是通過結(jié)扎一段長約2 3cm股靜脈并注入氨甲苯酸注射液促使后肢深靜脈血栓形成，術(shù)中股靜脈的結(jié)扎采用2-0單絲聚丙烯縫線作為結(jié)扎線，依靠小銀夾夾閉結(jié)扎，結(jié)扎線留一長一短，短段僅過銀夾。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于在結(jié)扎的小型豬后肢股靜脈外包繞一層相當長度的膨體聚四氟乙烯人造血管。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于在結(jié)扎的小型豬后肢股靜脈外包繞一層相當長度的硅膠管。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于體外血栓的制備過程中加入適當比例1:15 20的氨甲苯酸注射液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于體外血栓的制備過程中加入適量的可吸收明膠海綿。
全文摘要
本發(fā)明屬于動物醫(yī)學(xué)模型類，具體是一種下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型的建立方法，其特征在于先制成小型豬后肢深靜脈血栓，再經(jīng)小型豬前肢頭靜脈切開插管，將體外制備的血栓注射入上腔靜脈，經(jīng)心臟循環(huán)將血栓輸送至肺動脈造成肺動脈栓塞，從而建立下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞的小型豬模型，其中體外血栓的制備過程中加入適當比例1:15~20的氨甲苯酸注射液。本發(fā)明通過建立下肢深靜脈血栓形成合并肺栓塞小型豬模型，能為該類疾病模型的病理生理學(xué)研究、臨床藥物研究和外科手術(shù)實踐提供良好的動物模型。本發(fā)明方法具有麻醉操作簡單，效果確切；手術(shù)操作簡單，快速；肺栓塞成功率高，致死率低；檢查手段方便等優(yōu)點。
文檔編號A61D7/00GK102940537SQ20121047043
公開日2013年2月27日 申請日期2012年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月19日
發(fā)明者張 浩 申請人:金華市中心醫(yī)院