專利名稱：一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法。
背景技術(shù)：
黃連木O0Z1Siacia chinensis Bunge)雌雄異株,又名偕木、偕樹(shù)等,屬于漆樹(shù)科黃連木屬落葉喬木。它耐干旱、鹽堿、瘠薄，適應(yīng)性強(qiáng)，分布范圍廣，是一種優(yōu)良的綠化、用材、觀賞、藥用和油料樹(shù)種。鮮葉可提取芳香油，具有清熱解毒等藥效。根、莖、葉、樹(shù)皮、葉均可入藥。葉片、種子及樹(shù)皮等富含單寧，是制取栲膠的上好原料。雌雄株具有不同的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，雄株木材堅(jiān)韌致密、紋理細(xì)密、耐腐蝕性強(qiáng)，可作建筑、家具及雕刻用材。雌株果實(shí)含油量35%，種子含油量40%，種仁含油量56%，是制取生物柴油的上佳原料，已被專家列為未來(lái)20年最具有發(fā)展?jié)摿Φ纳锊裼驮蠘?shù)種之一，對(duì)解決目前及將來(lái)的能源危機(jī)具有重要的作用。目前，黃連木主要通過(guò)播種、扦插和嫁接繁殖，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足國(guó)內(nèi)外對(duì)黃連木種苗的巨大需求。黃連木組培快繁技術(shù)的應(yīng)用能夠?yàn)樯a(chǎn)上提供大量?jī)?yōu)質(zhì)的種苗，其中黃連木組培苗生根是黃連木成長(zhǎng)為實(shí)生苗必不可少的步驟，而黃連木組培苗生根的快慢和生根率的高低，標(biāo)志著實(shí)驗(yàn)的成敗。目前學(xué)術(shù)界對(duì)黃連木組培快繁的研究日益增多，比如程世平、施江等采用1/2 WPM +1.0 mg/L IBA + O. 2 mg/L NAA作為生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)35天，生根率達(dá)100%。何敬房等采用1/2 DKff + 6.0 mg/L IBA作為生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)30天，生根率達(dá)91. 15%。郭玉霞等人采用 MS + 10. O mg/L IBA + 3. O mg/L IAA + 30 g/L 蔗糖+ 4 g/L瓊脂作為生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)30天，生根率達(dá)60%以上。然而，其生根質(zhì)量、對(duì)材料的適應(yīng)性、縮短生根時(shí)間方面有待提聞。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于找到一種簡(jiǎn)單、方便且能夠使黃連木快速高效生根的方法。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是，一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法，包括以下步驟
(1)選材選取當(dāng)年九月下旬至十月上旬的成熟飽滿的黃連木種子；
(2)消毒處理先去掉黃連木種子外面的硬殼，然后將種子放在75%的乙醇溶液中浸泡30秒，用無(wú)菌水洗滌3-5次，再將種子放在O. 1%的升汞溶液中浸泡8-10分鐘，期間不停的搖動(dòng)，用無(wú)菌水洗滌3-5次；
(3)接種培養(yǎng)將消毒漂洗后的種子接種在不加任何激素的MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為溫度20-30°C，光照強(qiáng)度1500-2500 lx，光照時(shí)間14 h/d，獲得黃連木無(wú)菌實(shí)生苗；
(4)外植體培養(yǎng)取生長(zhǎng)30天的黃連木無(wú)菌實(shí)生幼苗，在超凈工作臺(tái)上剪下莖尖和莖段，將莖尖和莖段接種在加有WPM中無(wú)機(jī)鹽的1/2、MS中的有機(jī)物、I. O mg/L IBA、0. 2 mg/L NAA、30 g/L蔗糖和6. 8 g/L瓊脂粉的pH為5. 8的生根培養(yǎng)基上，外植體6天即有小白根長(zhǎng)出，培養(yǎng)25天后，生根完成，即得完整的黃連木無(wú)菌幼苗。
本發(fā)明的有益效果是在初代培養(yǎng)過(guò)程中，以WPM為基本的培養(yǎng)基效果很好，MS培養(yǎng)基效果要差很多；在種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)過(guò)程中，MS培養(yǎng)基比WPM培養(yǎng)基好許多。本發(fā)明通過(guò)從WPM和MS培養(yǎng)基中選取有效成分，優(yōu)化配比，再與其它培養(yǎng)基成分混合，結(jié)合了 WPM和MS這兩種培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)，使黃連木的生根時(shí)間進(jìn)一步縮短，得到了一種快速、高效、高質(zhì)、適用范圍廣的黃連木生根方法。


圖I為采用本發(fā)明的黃連木組培苗30天生根情況。
具體實(shí)施例方式下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例做詳細(xì)說(shuō)明本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法，包括以下步驟
(1)選材選取成熟飽滿的黃連木種子；
(2)消毒處理先去掉黃連木種子外面的硬殼，然后將種子放在75%的乙醇溶液中浸泡30秒，用無(wú)菌水洗滌4次，再將種子放在O. 1%的升汞溶液中浸泡9分鐘，期間不停的搖動(dòng)，用無(wú)菌水洗滌4次；
(3)接種培養(yǎng)將消毒漂洗后的種子接種在不加任何激素的MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為溫度25°C，光照強(qiáng)度2000 lx，光照時(shí)間14 h/d，獲得黃連木無(wú)菌實(shí)生苗；
(4)外植體培養(yǎng)取生長(zhǎng)30天的黃連木無(wú)菌實(shí)生幼苗，在無(wú)菌臺(tái)上剪下莖尖和莖段，將莖尖和莖段接種在加有1/2 WPM無(wú)機(jī)、MS有機(jī)、I. O mg/L ΙΒΑ、0· 2 mg/L NAA、30 g/L蔗糖和6. 8 g/L瓊脂粉的pH為5. 8的生根培養(yǎng)基上，外植體6天即有小白根長(zhǎng)出，培養(yǎng)25天后，生根完成，即得完整的黃連木無(wú)菌幼苗，25天統(tǒng)計(jì)生根率即達(dá)100%，達(dá)到了快速高效生根的目的。
圖I為采用本發(fā)明的黃連木組培苗30天生根情況。上述實(shí)施例結(jié)果表明本發(fā)明是一種有效的黃連木快速高效生根方法，采用本發(fā)明培養(yǎng)的黃連木具有生根快、生根率高的優(yōu)勢(shì)。
權(quán)利要求
1.一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法，包括選材，消毒處理，接種培養(yǎng)和外植體培養(yǎng)四個(gè)步驟，其特征在于接種培養(yǎng)的具體操作是將消毒漂洗后的種子接種在不加任何激素的MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為溫度20-30°C，光照強(qiáng)度1500-2500 Ix,光照時(shí)間14 h/d;外植體培養(yǎng)的具體操作是取生長(zhǎng)30天的黃連木無(wú)菌實(shí)生幼苗，在超凈工作臺(tái)上剪下莖尖和莖段，將莖尖和莖段接種在加有1/2 WPM無(wú)機(jī)鹽、MS有機(jī)物、I. O mg/L IBA、O.2 mg/L NAA、30 g/L蔗糖和6. 8 g/L瓊脂粉的pH為5. 8的生根培養(yǎng)基上。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法，其特征在于所述消毒處理具體操作是，先去掉黃連木種子外面的硬殼，然后將種子放在75%的乙醇溶液中浸泡30秒，用無(wú)菌水洗滌3-5次，再將種子放在O. 1%的升汞溶液中浸泡8-10分鐘，期間不停的搖動(dòng)，用無(wú)菌水洗滌3-5次。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以莖尖和莖段為外植體的黃連木快速高效生根方法。在本發(fā)明中，接種培養(yǎng)的具體操作是將消毒漂洗后的種子接種在不加任何激素的MS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為溫度20-30℃，光照強(qiáng)度1500-2500lx，光照時(shí)間14h/d；外植體培養(yǎng)的具體操作是取黃連木無(wú)菌實(shí)生幼苗，將超凈工作臺(tái)上剪下的莖尖和莖段接種在加有1/2WPM無(wú)機(jī)鹽、MS有機(jī)物、1.0mg/LIBA、0.2mg/LNAA、30g/L蔗糖和6.8g/L瓊脂粉的pH為5.8的生根培養(yǎng)基上。通過(guò)采用本發(fā)明使黃連木的生根時(shí)間進(jìn)一步縮短，得到了一種快速、高效、高質(zhì)、適用范圍廣的黃連木生根方法。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102907324SQ201210437288
公開(kāi)日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月6日
發(fā)明者施江, 辛莉, 王小燕, 馬香麗, 郭倩, 史國(guó)安 申請(qǐng)人:河南科技大學(xué)