專利名稱：一種香根鳶尾馴化苗的組培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種香根鳶尾馴化苗的組培方法，屬于植物組培技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
香根鳶尾(Jri1SLam.)又叫白色花鳶尾,是鳶尾屬為多年生草本植物。地下根莖發(fā)達(dá)，葉劍形，花莖直立，一朵至多朵花，單朵頂生或總狀花序，花由苞內(nèi)抽出，花白色或淡藍(lán)色。原產(chǎn)于歐洲，性喜溫暖，耐寒、耐干旱、耐瘠薄、怕澇。香根鶯尾是極好的園林觀賞花卉，也是名貴的香料植物。其花大而艷麗，可用作切花，也常用用于庭園觀賞。根莖提取的鶯尾硬脂和鶯尾浸膏，是用于高級(jí)化妝品、香皂、香水以及食品的高級(jí)天然香料。隨著香根鳶尾應(yīng)用價(jià)值的進(jìn)一步開發(fā)，香根鳶尾種苗需求也越來越大，如何提高種苗的繁殖能力成為亟待解決的問題。由于香根鶯尾主要靠根莖分生繁殖，不僅對(duì)母本材料要求高，用量大，而且繁殖率低，同時(shí)還受季節(jié)的限制，難以進(jìn)行規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)和優(yōu)·良品種的大面積推廣。

發(fā)明內(nèi)容
為克服現(xiàn)有香根鳶尾種苗繁殖技術(shù)存在材料要求高、用量大、難以規(guī)?；a(chǎn)等問題，本發(fā)明的目的在于提供一種香根鳶尾馴化苗的組培方法，通過改進(jìn)生產(chǎn)流程和培養(yǎng)基配方，來提高增殖率，降低生產(chǎn)成本，同時(shí)將優(yōu)良性狀的種苗固定下來，操作簡變易行，以滿足優(yōu)質(zhì)種苗的大規(guī)模生產(chǎn)需要。本發(fā)明提供的是這樣一種香根鳶尾馴化苗的組培方法，其特征在于經(jīng)過下列步驟
A.將消毒滅菌處理過的根莖嫩芽，在無菌條件下，接入下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS+萘乙酸(NAA) O. 2 O. 5mg/L+6-芐基氨基嘌呤(6-BA) I. O 2. Omg/L+ 蔗糖 30000 mg/L+ 瓊脂6500 mg/L，pH=5. 8 6. 0，在光照強(qiáng)度為2000 30001x，溫度為25±2°C，光照時(shí)間為8 12h/d的條件下，同步進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出O. 5 Icm的幼芽，切下幼芽；
B.將A步驟切下的幼芽轉(zhuǎn)接到新的與A步驟相同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同的培養(yǎng)條件下，重復(fù)該步驟進(jìn)行繼代培養(yǎng)3 5次，每次繼代周期為20 30d ；
C.增殖數(shù)量達(dá)到生產(chǎn)所需量時(shí)，2cm以下的叢生芽返回B步驟進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)，2.Ocm以上的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中1/2 MS+萘乙酸(NAA)O. 2 O. 5mg/L+蔗糖30000 mg/L+瓊脂6500 mg/L，pH=5. 8 6. O，在光照強(qiáng)度為2000 3000 lx，溫度為25 ±2°C，光照時(shí)間為8 12h/d的條件下，生根培養(yǎng)至植株基部長出3 7條細(xì)根；
D.取C步驟的生根植株于室外散射光下進(jìn)行常規(guī)煉苗10 15d，將煉苗取出，按常規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為O. I O. 2%的多菌靈溶液中消毒I 2min后，移栽至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐植土 紅土 珍珠巖=1 1 :1，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長40d后，即得香根鳶尾馴化苗。
所述步驟A中的消毒滅菌處理是將尚未發(fā)芽的香根鳶尾根莖洗凈，在室溫條件下放置于濕潤的苔蘚上，每3天噴一次水以保持濕潤，直至根莖上長出O. 5 2. Ocm的嫩芽，將嫩芽自基部切下，用水沖洗后，再用體積濃度為75%的酒精對(duì)其表面擦拭I 2次，然后再用IOOmL質(zhì)量濃度為O. 05 O. 1%升汞和O. I O. 15mL吐溫的混合溶液浸泡10 20分鐘，用無菌水洗3次，每次2min，然后用無菌濾紙吸干，得到消毒滅菌處理過的根莖嫩芽。本發(fā)明具有下列優(yōu)點(diǎn)和效果本發(fā)明可減少藥品用量，通過同步進(jìn)行芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)，可有效控制變異株的產(chǎn)生，簡化組培程序，縮短了繁育周期，節(jié)約了生產(chǎn)成本，能將香根鳶尾品種的優(yōu)良性狀快速固定并保持下來，解決了常規(guī)繁育體系生產(chǎn)親本用量大，種苗質(zhì)量不穩(wěn)定、種苗繁殖速度慢的難題。I.用試管繁殖技術(shù)在培養(yǎng)室內(nèi)即可實(shí)現(xiàn)周年生產(chǎn)，既節(jié)約了土地資源，又提高了 經(jīng)濟(jì)效益，克服了種苗無法周年進(jìn)行生產(chǎn)的難點(diǎn)；
2.繁殖速度快，2(Γ30天為一個(gè)周期，繁殖倍數(shù)可達(dá)3 5倍；
3.解決了常規(guī)繁育體系生產(chǎn)的種苗親本來源復(fù)雜，種苗質(zhì)量不穩(wěn)定的難題，通過本發(fā)明，使種苗性狀穩(wěn)定，種苗來源單一，易于標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化操作，有效地提高了種苗質(zhì)量，可為市場提供統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的優(yōu)良種苗；
4.本發(fā)明在外植體的選擇方面，選擇優(yōu)良株系，通過本發(fā)明中的快速繁殖方法將抗性強(qiáng)的香根鳶尾品種優(yōu)良種性快速地固定并保持下來，有效縮短了繁育周期；
5.對(duì)整個(gè)香根鳶尾種苗生產(chǎn)技術(shù)流程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行優(yōu)化整合，采用MS基本培養(yǎng)液和大量元素減半的1/2MS培養(yǎng)液，減少藥品用量，節(jié)約成本，同步進(jìn)行芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)，簡化了組培技術(shù)的培養(yǎng)程序，只需兩種配方的培養(yǎng)基，不經(jīng)過愈傷組織的形成，直接長成新芽，減少不定芽發(fā)生變異的機(jī)率，可有效控制變異株的產(chǎn)生，利于安排生產(chǎn)計(jì)劃；
6.無菌生根苗直接移栽進(jìn)入育苗袋中，省去了組培苗營養(yǎng)缽移栽的環(huán)節(jié)，移栽成活的種苗便于運(yùn)輸，摘去育苗袋后直接栽種。
具體實(shí)施例方式為了更好地說明本發(fā)明，下面給出本發(fā)明的實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅限于此。實(shí)施例I
Α.將尚未發(fā)芽的香根鳶尾根莖洗凈，在室溫條件下放置于濕潤的苔蘚上，每3天噴一次水以保持濕潤，直至根莖上長出O. 5cm的嫩芽，將嫩芽自基部切下，用水沖洗后，再用體積濃度為75%的酒精對(duì)其表面擦拭2次，然后再用IOOmL質(zhì)量濃度為O. 05%升汞和O. 15mL吐溫的混合溶液浸泡20分鐘，用無菌水洗3次，每次2min，然后用無菌濾紙吸干，得到消毒滅菌處理過的根莖嫩芽；在無菌條件下，接入下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS+萘乙酸(NAA) O. 3mg/L+6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 2. Omg/L+ 蔗糖 30000 mg/L+ 瓊脂 6500 mg/L, pH=5. 8，在光照強(qiáng)度為20001x，溫度為23°C，光照時(shí)間為8h/d的條件下，同步進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出O. 5cm的幼芽，切下幼芽；
B.將A步驟切下的幼芽轉(zhuǎn)接到新的與A步驟相同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同的培養(yǎng)條件下，重復(fù)該步驟繼代培養(yǎng)3次，每次繼代周期為30d，增殖倍數(shù)可達(dá)3倍；
C.增殖數(shù)量達(dá)到生產(chǎn)所需量時(shí)，2cm以下的叢生芽返回B步驟繼續(xù)培養(yǎng)，2.Ocm以上的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)1/2 MS+萘乙酸(NAA)O. 3mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂6500 mg/L, pH=6. 0，在光照強(qiáng)度為2500 lx，溫度為25°C，光照時(shí)間為12h/d的條件下，生根培養(yǎng)至植株基部長出3條細(xì)根；
D.取C步驟的生根植株于室外散射光下進(jìn)行常規(guī)煉苗10d，將煉苗取出，按常規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為O. 1%的多菌靈溶液中消毒2min后，移栽至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐植土 紅土 珍珠巖=1 1 :1，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長40d后，SP得香根鳶尾馴化苗。實(shí)施例2
A.將尚未發(fā)芽的香根鳶尾根莖洗凈，在室溫條件下放置于濕潤的苔蘚上，每3天噴一次水以保持濕潤，直至根莖上長出I. Ocm的嫩芽，將嫩芽自基部切下，用水沖洗后，再用體積濃度為75%的酒精對(duì)其表面擦拭I次，然后再用IOOmL質(zhì)量濃度為O. 1%升汞和O. 12mL吐溫的混合溶液浸泡15分鐘，用無菌水洗3次，每次2min，然后用無菌濾紙吸干，得到消毒滅菌處理過的根莖嫩芽；在無菌條件下，接入下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS+萘乙酸(NAA) O. 2mg/ L+6-芐基氨基嘌呤出-BA) I. 5mg/L+蔗糖30000 mg/L+瓊脂6500 mg/L, pH=6. 0，在光照強(qiáng)度為30001x，溫度為25°C，光照時(shí)間為10h/d的條件下，同步進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出O. 8cm的幼芽，切下幼芽；
B.將A步驟切下的幼芽轉(zhuǎn)接到新的與A步驟相同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同的培養(yǎng)條件下，重復(fù)該步驟繼代培養(yǎng)5次，每次繼代周期為20d，增殖倍數(shù)可達(dá)5倍；
C.增殖數(shù)量達(dá)到生產(chǎn)所需量時(shí)，約2cm以下的叢生芽返回B步驟繼續(xù)培養(yǎng)，2.Ocm以上的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)1/2 MS+萘乙酸(NAA)O. 2mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂6500 mg/L，pH=5. 8，在光照強(qiáng)度為20001x，溫度為23°C，光照時(shí)間為10h/d的條件下，生根培養(yǎng)至植株基部長出5條細(xì)根；
D.取C步驟的生根植株于室外散射光下進(jìn)行常規(guī)煉苗15d，將煉苗取出，按常規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為O. 2%的多菌靈溶液中消毒Imin后，移栽至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐植土 紅土 珍珠巖=1 1 :1，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長40d后，SP得香根鳶尾馴化苗。實(shí)施例3
A.將尚未發(fā)芽的香根鳶尾根莖洗凈，在室溫條件下放置于濕潤的苔蘚上，每3天噴一次水以保持濕潤，直至根莖上長出2. Ocm的嫩芽，將嫩芽自基部切下，用水沖洗后，再用體積濃度為75%的酒精對(duì)其表面擦拭2次，然后再用IOOmL質(zhì)量濃度為O. 08%升汞和O. ImL吐溫的混合溶液浸泡10分鐘，用無菌水洗3次，每次2min，然后用無菌濾紙吸干，得到消毒滅菌處理過的根莖嫩芽；在無菌條件下，接入下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS+萘乙酸(NAA) O. 5mg/L+6-芐基氨基嘌呤(6-BA) I. Omg/L+ 蔗糖 30000 mg/L+ 瓊脂 6500 mg/L, pH=6. 0，在光照強(qiáng)度為22001x，溫度為27°C，光照時(shí)間為12h/d的條件下，同步進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出Icm的幼芽，切下幼芽；
B.將A步驟切下的幼芽轉(zhuǎn)接到新的與A步驟相同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同的培養(yǎng)條件下，重復(fù)該步驟繼代培養(yǎng)4次，每次繼代周期為25d，增殖倍數(shù)可達(dá)4倍；
C.增殖數(shù)量達(dá)到生產(chǎn)所需量時(shí)，約2cm以下的叢生芽返回B步驟繼續(xù)培養(yǎng)，2.Ocm以上的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)1/2 MS+萘乙酸(NAA) O. 5mg/L+蔗糖30000 mg/L+瓊脂6500 mg/L，pH=6. 0，在光照強(qiáng)度為3000 lx，溫度為27°C，光照時(shí)間為8h/d的條件下，生根培養(yǎng)至植株基部長出7條細(xì)根；
D.取C步驟的生根植株于室外散射光下進(jìn)行常規(guī)煉苗12d，將煉苗取出，按常規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為O. 2%的多菌靈溶液中消毒2min后，移栽至裝有下列質(zhì)量比基 質(zhì)的育苗袋中腐植土 紅土 珍珠巖=1 1 :1，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長40d后，SP得香根鳶尾馴化苗。
權(quán)利要求
1.一種香根鳶尾馴化苗的組培方法，其特征在于經(jīng)過下列步驟 A.將消毒滅菌處理過的根莖嫩芽，在無菌條件下，接入下列誘導(dǎo)培養(yǎng)基中MS+萘乙酸(NAA) O. 2 O. 5mg/L+6-芐基氨基嘌呤(6-BA) I. O 2. Omg/L+ 蔗糖 30000 mg/L+ 瓊脂6500 mg/L，pH=5. 8 6. O，在光照強(qiáng)度為2000 30001x，溫度為25±2°C，光照時(shí)間為8 12h/d的條件下，同步進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出O. 5 Icm的幼芽，切下幼芽； B.將A步驟切下的幼芽轉(zhuǎn)接到新的與A步驟相同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，并在與A步驟相同的培養(yǎng)條件下，重復(fù)該步驟進(jìn)行繼代培養(yǎng)3 5次，每次繼代周期為20 30d ； C.增殖數(shù)量達(dá)到生產(chǎn)所需量時(shí)，2cm以下的叢生芽返回B步驟進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)，2.Ocm以上的健壯植株接種到下列培養(yǎng)基中1/2 MS+萘乙酸(NAA)O. 2 O. 5mg/L+蔗糖30000 mg/L+瓊脂6500 mg/L，pH=5. 8 6. O，在光照強(qiáng)度為2000 3000 lx，溫度為25 ±2°C，光照時(shí)間為8 12h/d的條件下，生根培養(yǎng)至植株基部長出3 7條細(xì)根； D.取C步驟的生根植株于室外散射光下進(jìn)行常規(guī)煉苗10 15d，將煉苗取出，按常規(guī)洗凈苗上的培養(yǎng)基，放入質(zhì)量濃度為O. I O. 2%的多菌靈溶液中消毒I 2min后，移栽至裝有下列質(zhì)量比基質(zhì)的育苗袋中腐植土 紅土 珍珠巖=1 1 :1，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長40d后，即得香根鳶尾馴化苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于所述步驟A的消毒滅菌處理是將尚未發(fā)芽的香根鳶尾根莖洗凈，在室溫條件下放置于濕潤的苔蘚上，每3天噴一次水，直至根莖上長出O. 5 2. Ocm的嫩芽，將嫩芽自基部切下，用水沖洗后，再用體積濃度為75%的酒精對(duì)其表面擦拭I 2次，然后再用IOOmL質(zhì)量濃度為O. 05 O. 1%升汞和O. I O. 15mL吐溫的混合溶液浸泡10 20分鐘，用無菌水洗3次，每次2min，然后用無菌濾紙吸干，得到消毒滅菌處理過的根莖嫩芽。
全文摘要
本發(fā)明提供一種香根鳶尾馴化苗的組培方法，通過將消毒滅菌處理的香根鳶尾外植體接入誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)基中，同步進(jìn)行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)至外植體萌發(fā)分化出幼芽；繼代培養(yǎng)多次至所需種苗數(shù)量后，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)至植株基部長出3～7條根；移栽至育苗袋中，按常規(guī)進(jìn)行澆水、施肥管理，生長40d后，即得香根鳶尾馴化苗。本發(fā)明可減少藥品用量，通過同步進(jìn)行芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)，可有效控制變異株的產(chǎn)生，簡化組培程序，縮短了繁育周期，節(jié)約了生產(chǎn)成本，能將香根鳶尾品種的優(yōu)良性狀快速固定并保持下來，解決了常規(guī)繁育體系生產(chǎn)親本用量大，種苗質(zhì)量不穩(wěn)定、種苗繁殖速度慢的難題。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102893872SQ201210432708
公開日2013年1月30日 申請日期2012年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月3日
發(fā)明者段青, 吳麗芳, 崔光芬, 王繼華, 王祥寧, 賈文杰, 馬璐琳, 趙培飛 申請人:云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所