專利名稱：一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物無性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法。
背景技術(shù)：
地楓皮(Illicium difengpi K. I. B. et K. I. M.)又名楓榔、高山龍,是廣西巖溶石山上的一種特產(chǎn)中藥材，具有祛風(fēng)除濕，行氣止痛等功效，臨床常用于風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、腰肌勞損和跌打損傷等癥狀的治療，療效好，藥用價值高，還是多種中成藥產(chǎn)品的主要原材料。地楓皮分布于廣西壯族自治區(qū)都安、馬山、大化、龍州、大新等石灰?guī)r地區(qū)的山頂或石山疏林下，分布區(qū)狹窄，其莖皮為藥用，市場上大量收購，產(chǎn)區(qū)群眾濫采濫伐，加上石灰?guī)r地區(qū)生態(tài)環(huán)境持續(xù)惡化等外界因素影響，以及自身自然繁殖能力低弱、致使地楓皮野生自然資源逐年減少，已列入《中國植物紅皮書》漸危種。隨著地楓皮的市場需求量越來越大，苗木供應(yīng)緊張，采用種子繁殖，因種皮薄，在干燥時油脂變質(zhì)，過濕時又易腐爛，極易喪失發(fā)芽力，故宜隨采隨播。而采用植物組織培養(yǎng)方法可在短期內(nèi)快速繁殖大量的地楓皮種苗，由于植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖，可以保持原繁殖母株的優(yōu)良性狀，而且還具有繁殖系數(shù)高的優(yōu)點。但在地楓皮組培苗快速繁殖的生根階段，該組培苗生根難，或是伴隨著根部大量愈傷組織的根系，使得組培苗的移栽成活率低，嚴重阻礙了組培苗快速繁殖技術(shù)在地楓皮種苗繁育上的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，該方法操作簡單、生產(chǎn)成本低、穩(wěn)定高效，并能大大縮短育苗周期。實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是
一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，包括以下步驟
(1)在超凈工作臺上，將地楓皮增殖培養(yǎng)得到2 3Cm高的無菌芽，切分成單芽，基部浸泡于滅菌過的生根劑中20 min 90 min ;所述生根劑為NAA 100 1000 mg/L+IAA100 2000 mg/L+CPPU O. 001 O. 01 mg/L +Vc 2. O 10. O mg/L, pH 值為 5. 5 ；
(2)取出步驟(I)的單芽晾放于無菌盤中15 30min，再接種于固態(tài)培養(yǎng)基中，30 50 d幼苗基部長出不定根；所述固態(tài)培養(yǎng)基為1/2MS+活性炭lg/L+蔗糖20 g/L+瓊脂5g/L, pH 值為 7· O ;
(3)將步驟(2)中生長達3 7cm以上的生根組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3 d，取苗時小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，假植于溫度為22 28°C，濕度為75 80%的溫室大棚內(nèi)，消毒過的沙子中30 60 d，之后移栽于腐殖土中，成活率可達83. 5% 94. 6%。所述生根劑優(yōu)選為NAA500 mg/L+IAA 1500 mg/L+CPPU O. 004 mg/L +Vc 8. 0mg/L, pH 值為 5. 5。所述生根培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是培養(yǎng)溫度為25±3°C，光照時間為12h/d，光照強度為2000 Ix。所述生根劑中，NAA為a-萘乙酸，IAA為吲哚_3_乙酸，CPPU為氯吡苯脲，Vc為維生素c,試劑均為分析純,水為超純水。采用本方法，地楓皮組培苗20d左右幼苗基部可長出不定根，45d左右不定根的生長量比較穩(wěn)定，根的數(shù)量達到最大，每株根數(shù)可達18條以上。本發(fā)明的優(yōu)點采用本方法可以縮短地楓皮組培苗的生根時間，組培苗健壯，根系發(fā)達，根的質(zhì)量好，可大大提高組培苗移栽成活率，成活率可達83. 5% 94. 6%。而且本方法操作簡單，生產(chǎn)成本低，可工廠化生產(chǎn)地楓皮種苗，為地楓皮可持續(xù)利用和保護生態(tài)環(huán)境多樣性奠定基礎(chǔ)。
具體實施方式
實施例I :
一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，包括以下步驟
(1)在超凈工作臺上，將地楓皮增殖培養(yǎng)得到2 3Cm高的無菌芽，切分成單芽，基部浸泡于滅菌過的生根劑中60 min ;所述生根劑為NAA 100 mg/L+IAA 500 mg/L+CPPUO. 001 mg/L +Vc 5. 0 mg/L, pH 值為 5. 5 ；
(2)取出步驟(I)的單芽晾放于無菌盤中30min，接種于固態(tài)培養(yǎng)基1/2MS+活性炭Ig/L+蔗糖20 g/L+瓊脂5 8/1，？!1值為7.0中，培養(yǎng)10 d后，基部向上I cm的莖段稍稍膨大，25 d時膨大的莖段和基部開始長出不定根，45 d時不定根的生長量比較穩(wěn)定，根的數(shù)量達到最大，每株根數(shù)約為18. 2條，生根率為100%，根白色細長，但根尖較脆，清洗培養(yǎng)基時易碰斷，不定根的數(shù)量較少且質(zhì)量稍差；
(3)將步驟(2)中生長達3 7cm以上的生根組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3 d，取苗，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，假植于溫度為22 28°C，濕度為75 80%的溫室大棚內(nèi)，消毒過的沙子中30 60 d，之后移栽于腐殖土中，成活率為89. 2%。實施例2:
一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，包括有以下步驟
(1)在超凈工作臺上，將地楓皮增殖培養(yǎng)得到2 3cm高的無菌芽，切分成單芽，基部浸泡于滅菌過的生根劑中30 min ;所述生根劑為NAA 800 mg/L+IAA 2000 mg/L+CPPUO. 01mg/L +Vc 2. Omg/L, pH 值為 5. 5 ；
(2)取出步驟(I)的單芽晾放于無菌盤中15min，接種于固態(tài)培養(yǎng)基1/2MS+活性炭Ig/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L，pH值為7.0中，培養(yǎng)5 d后，基部向上I cm的莖段稍稍膨大，18d時膨大的莖段和基部開始長出不定根，50 d時不定根的生長量比較穩(wěn)定，根的數(shù)量達到最大，每株根數(shù)約為23. 5條，生根率為100%，根為淡淡黃色，稍較粗硬，估計是根有一定程度木質(zhì)化；
(3)將步驟(2)中生長達3 7cm以上的生根組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3 d，取苗，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，假植于溫度為22 28°C，濕度為75 80%的溫室大棚內(nèi)，消毒過的沙子中30 60 d，之后移栽于腐殖土中，成活率為83. 5%。實施例3
一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，包括有以下步驟(1)在超凈工作臺上，將地楓皮增殖培養(yǎng)得到2 3Cm高的無菌芽，切分成單芽，基部浸泡于滅菌過的生根劑中45 min ;所述生根劑為NAA500 mg/L+IAA1500 mg/L+CPPUO. 004mg/L +Vc8. 0 mg/L, pH 值為 5. 5 ；
(2)取出步驟(I)的單芽晾放于無菌盤中20min，接種于固態(tài)培養(yǎng)基1/2MS+活性炭lg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L，pH值為7. O中，培養(yǎng)5d后，基部向上Icm的莖段稍稍膨大，20d時膨大的莖段和基部開始長出不定根，45d時不定根的生長量比較穩(wěn)定，根的數(shù)量達到最大，每株根數(shù)約為31. 3條，生根率為100%，根系白色細長且柔軟，根數(shù)多，質(zhì)量好；
(3)將步驟(2)中生長達3 7cm以上的生根組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3d，取苗，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，假植于溫度為22 28°C，濕度為75 80%的溫室大棚內(nèi)，消毒過的沙子中30 60 d，之后移栽于腐殖土中，移栽于腐殖土中，成活率為94. 6%。·
權(quán)利要求
1.一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，其特征在于包括以下步驟 (1)在超凈工作臺上，將地楓皮增殖培養(yǎng)得到2 3Cm高的無菌芽，切分成單芽，基部浸泡于滅菌過的生根劑中20 90 min ;所述生根劑為NAA 100 1000 mg/L+IAA 500 2000 mg/L+CPPU O. 001 O. 01 mg/L +Vc 2. O 10. O mg/L, pH 值為 5. 5 ； (2)取出步驟(I)的單芽晾放于無菌盤中15 30min，再接種于固態(tài)培養(yǎng)基中，30 50d幼苗基部長出不定根；所述固態(tài)培養(yǎng)基為1/2MS+活性炭lg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L，pH 值為 7.0 ； (3)將步驟(2)中生長達3 7cm以上的生根組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3 d，取苗時小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，假植于溫度為22 28°C，濕度為75 80%的溫室大棚內(nèi)，消毒過的沙子中30 60 d，之后移栽于腐殖土中。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的促進地楓皮組培苗快速生根的方法，其特征在于所述生根劑優(yōu)選為NAA 500 mg/L+IAA 1500 mg/L+CPPU O. 004 mg/L +Vc 8.0 mg/L，pH 值為 5· 5。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的促進地楓皮組培苗快速生根的方法，其特征在于所述生根培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是培養(yǎng)溫度為25±3°C，光照時間為12 h/d,光照強度為2000 lx。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種促進地楓皮組培苗快速生根的方法，包括以下步驟將地楓皮增殖培養(yǎng)得到2～3cm高的無菌芽，切分成單芽，基部浸泡于滅菌過的生根劑中20～90min；取出單芽晾放于無菌盤中15～30min，再接種于固態(tài)培養(yǎng)基中，30～50d幼苗基部長出不定根；將生長達3～7cm以上的生根組培苗移出培養(yǎng)室，室內(nèi)煉苗3d，假植于溫度為22～28℃，濕度為75～80%的溫室大棚內(nèi)，消毒過的沙子中30～60d，之后移栽于腐殖土中，成活率可達83.5%～94.6%。本方法操作簡單，生產(chǎn)成本低，可工廠化生產(chǎn)地楓皮種苗，為地楓皮可持續(xù)利用和保護生態(tài)環(huán)境多樣性奠定基礎(chǔ)。
文檔編號A01H4/00GK102884983SQ20121043248
公開日2013年1月23日 申請日期2012年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月2日
發(fā)明者石云平, 趙志國, 唐輝, 付傳明, 黃寧珍, 唐鳳鸞 申請人:廣西壯族自治區(qū)中國科學(xué)院廣西植物研究所