專利名稱：淡紫擬青霉可濕性粉劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物農(nóng)藥制劑，尤其涉及一種防治根結(jié)線蟲的淡紫擬青霉(P. Iilacinus)可濕性粉劑及其制備方法，屬于淡紫擬青霉生物農(nóng)藥制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
淡紫擬青霉(P. Iilacinus)是一種土壤及多種植物根圍的習(xí)居菌,對南方根結(jié)線蟲的寄生率很高，可達(dá)80%以上。淡紫擬青霉是一種非常重要的植物寄生線蟲卵寄生真菌，目前已廣泛應(yīng)用于防治根結(jié)線蟲、胞囊線蟲等有害植物寄生線蟲。作為防治植物寄生線蟲的重要生防菌之一，淡紫擬青霉孢子快速萌發(fā)可直接影響菌株對寄主的致病力，并且可以大量地減少根結(jié)線蟲卵的孵化。迄今為止，世界上已經(jīng)有了多種以淡紫擬青霉分生孢子為主要有效成分的殺線制劑，其中包括可濕性粉劑、顆粒劑及其微膠囊菌劑等。
農(nóng)藥可濕性粉劑是農(nóng)藥加工制劑中歷史悠久、技術(shù)成熟、使用方便的一種農(nóng)藥制齊U，許多殺菌劑、除草劑和部分殺蟲劑往往加工成可濕性粉劑。1969年至今，可濕性粉劑的產(chǎn)值始終占農(nóng)藥劑型總產(chǎn)值的1/4左右，產(chǎn)量比例占15-20%。可濕性粉劑是用農(nóng)藥原藥、惰性填料和一定量的助劑(潤濕劑、分散劑)，按比例經(jīng)充分混合粉碎后，達(dá)到一定粉粒細(xì)度的劑型。從形狀上看，可濕性粉劑與粉劑無區(qū)別，但是由于加入了濕潤劑、分散劑等助劑，可濕性粉劑加到水中后能被水濕潤、分散、形成懸浮液，可噴灑施用?？蓾裥苑蹌┎皇褂萌軇┖腿榛瘎?，對植物較安全，在果實(shí)套袋前使用，可避免有機(jī)溶劑對果面的刺激。用于制備農(nóng)藥可濕性粉劑的潤濕劑和分散劑的種類非常繁多，但是不同種類的潤濕劑或分散劑對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的影響存在著非常顯著的差異，即便是同一種類的潤濕劑或分散劑，其用量上的差異也會對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲的生長帶來截然相反的效果。在制備淡紫擬青霉可濕性粉劑時，需要對載體、潤濕劑和分散劑的種類和用量進(jìn)行考察和優(yōu)化，篩選出適宜淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的種類及其用量，以提聞制劑的生防效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種防治根結(jié)線蟲的淡紫擬青霉可濕性粉劑；本發(fā)明另外一個目的是提供一種制備所述防治根結(jié)線蟲的淡紫擬青霉可濕性粉劑的方法；本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的一種防治根結(jié)線蟲的淡紫擬青霉可濕性粉劑，包括以下組分淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液，載體、潤濕劑和分散劑。優(yōu)選的，各組分的用量是按質(zhì)量百分比計算，載體O. 5-80 %，潤濕劑O. 05-4%,分散劑O. 05-8%，余量為淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液；進(jìn)一步優(yōu)選的，各組分的用量為載體O. 5-20%,潤濕劑O. 1-3%,分散劑O. 05-5%,余量為淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液。載體能夠起到稀釋和吸附承載活體生物的作用，是加工任何一種生物農(nóng)藥制劑所必需的成分之一。不同種類、不同濃度的載體對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)以及菌絲生長的影響效果存在著顯著性的差異，為了篩選出最適宜的載體，本發(fā)明考察了多種載體(包括不同濃度)對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)以及菌絲生長的影響效果。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同濃度的硅酸、高嶺土、硅藻土和玉米面對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率有一定的促進(jìn)作用；滑石粉，活性炭和蛭石對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率和菌絲生長速率影響較小；而膨潤土和皂土這兩種載體對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率影抑制較大。綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本發(fā)明優(yōu)選采用硅酸、玉米面、高嶺土或硅藻土作為淡紫擬青霉制劑加工載體。本發(fā)明綜合考察了各方面的因素，本發(fā)明最終確定硅藻土作為加工制劑的最佳載體?？紤]到加工成本、生產(chǎn)效能等因素，硅藻土在制劑中的用量優(yōu)選為O. 5-80%，更優(yōu)選為O. 5-20%。潤濕劑能夠降低液-固表面張力，增加液體在固體上的擴(kuò)展性和滲透力，確保原藥加到水中后能被水濕潤或加速潤濕。潤濕劑直接關(guān)系到微生物農(nóng)藥制劑的潤濕性。雖然可供選擇的微生物農(nóng)藥制劑的潤濕劑的種類較多，例如，常用的有陰離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑等潤濕劑，選用這些成分作為生物農(nóng)藥制劑的潤濕劑在一定程度上基本能滿足制劑的潤濕性要求，但是不同種類的潤濕劑、乃至同一種類不同濃度的潤濕劑對于 淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)或菌絲生長效果的影響存在著顯著的差異，其效果是事先難以預(yù)測的。本發(fā)明分別考察了 SDS(十二烷基硫酸鈉)、DBS-Na(十二烷基苯磺酸鈉)、PEG(聚乙二醇)、PVA (聚乙烯醇)、吐溫-20、0P-10 (辛基酚聚氧乙烯醚)、NP-10 (壬基酚聚氧乙烯醚)、凈洗劑LS (對甲氧基脂肪酰胺基苯磺酸鈉)、2845 (改性磺酸鹽)和W2001 (改性烷基硫酸鹽)等潤濕劑對淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)或菌絲生長的影響效果?？疾旖Y(jié)果發(fā)現(xiàn)，2845，K12、SDS和W2001對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率抑制率幾乎均為100%，它們均不適宜作為淡紫擬青霉生物農(nóng)藥制劑的潤濕劑。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明綜合考察了 DBS-Na、凈洗劑LS、0P-10、PEG、PVA、Tween-20對淡紫擬青霉菌絲生長速率和孢子萌發(fā)率的影響及它們作為潤濕劑的潤濕效果DBS-Na (十二烷基苯磺酸鈉)對淡紫擬青霉菌絲生長速率和孢子萌發(fā)抑制率的影響均為顯著，整體上來看，十二烷基苯磺酸鈉對于淡紫擬青霉菌絲和孢子萌發(fā)呈現(xiàn)出一定的抑制作用。當(dāng)制劑中DBS-Na的用量為O. 05-0. 5%，尤其是O. 05-0. 5%時，其對淡紫擬青霉生長的抑制率較弱，隨著DBS-Na用量的增加，其對淡紫擬青霉生長的抑制率顯著增強(qiáng)，當(dāng)DBS-Na在制劑中的用量達(dá)到2 %時，其抑制率達(dá)到了 100 %，在綜合考慮了淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長以及潤濕效果的情況下，DBS-Na在制劑中的用量優(yōu)選為O. 05-1.0%，更優(yōu)選為 O. 05-0. 5%0凈洗劑LS對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率的影響為極顯著，對于淡紫擬青霉菌絲和孢子萌發(fā)呈現(xiàn)出一定的抑制作用，其中對其菌絲生長抑制率的影響尤為顯著。凈洗劑LS在制劑中的總重量為O. 05%時，其對淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)略有抑制作用，隨著濃度的增力口，凈洗劑LS對淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)均有一定的促進(jìn)作用。但是不同濃度的凈洗劑LS對菌絲生長抑制作用都較大，抑制率均大于50%。在平衡多種因素的情況下，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，凈洗劑LS在制劑中的用量為O. 05%時較為適宜，對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的促進(jìn)作用最為顯著，其對菌絲生長的抑制作用最小。0P-10 (辛基酚聚氧乙烯醚)對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率的影響為顯著，其對菌絲生長抑制率的影響不顯著。當(dāng)制劑中0P-10的用量為O. 1%時，0P-10對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)略有抑制作用，隨著OP-IO的用量的增加，其對淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)表現(xiàn)為促進(jìn)作用且有增大的趨勢。但是不同濃度的0P-10對菌絲生長抑制作用都較大，抑制率均大于60%。本發(fā)明經(jīng)過綜合考察，確定制劑中0P-10的用量優(yōu)選為1.0%。本發(fā)明通過大量的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PEG(聚乙二醇)對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的影響極顯著，對淡紫擬青霉菌絲生長速率的影響顯著。當(dāng)PEG在制劑中的用量為1-2%時，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)呈現(xiàn)出極顯著的促進(jìn)作用，對淡紫擬青霉菌絲生長的抑制僅為5%左右；本發(fā)明最終發(fā)現(xiàn)當(dāng)制劑中PEG的用量為O. 5-2%，尤其是1-2%時，能最為有效促進(jìn)淡紫擬青霉孢子萌發(fā)，對菌絲生長不表現(xiàn)出抑制作用，而且采用2%的用量所制備的可濕性粉劑產(chǎn)品具有較好的潤濕性。本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PVA(聚乙烯醇)對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和其菌絲生長速率的影均為極顯著。制劑中低濃度的PVA對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長均有一定的抑制作用，當(dāng)制劑中PVA的濃度上升為5mg/ml時，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)表現(xiàn)出促進(jìn)作用，隨著PVA濃度的繼續(xù)增加，其對孢子的萌發(fā)促進(jìn)作用更為明顯，此時，其對菌絲生長抑制率 也呈明顯的下降趨勢，對菌絲生長的抑制小于1% ;本發(fā)明進(jìn)一步考察了制劑中不同用量的PVA對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)、菌絲生長以及潤濕效果等影響，最終確定制劑中PVA的用量為O. 5-2%時能有效促進(jìn)淡紫擬青霉孢子萌發(fā)，尤其是2%時，能最為有效促進(jìn)淡紫擬青霉孢子萌發(fā)，對菌絲生長不表現(xiàn)出抑制作用，而且，相比于其它的用量，制劑中PVA的用量為2 %時，所制備的可濕性粉劑的潤濕性較好。TWeen-20(吐溫20)對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率的影響均為極顯著的。隨著Tween-20在制劑中用量的增加，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的抑制率明顯下降，當(dāng)其在制劑中的用量大于O. 5 %時，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)表現(xiàn)為促進(jìn)作用，但是其對菌絲生長抑制率呈現(xiàn)明顯增加；本發(fā)明綜合考察了各種因素，最終確定Tween-20在制劑中的用量為O. 1-1 %，尤其是O. 5%，該用量對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的促進(jìn)作用最為顯著，對菌絲生長的抑制率為最小。此外，當(dāng)Tween-20在制劑中的用量為O. 5%時，所制備的可濕性粉劑的潤濕性較為事宜。分散劑能夠阻止固-液分散體系中固體粒子的相互凝集，使固體微粒在液相中較長時間保持均勻分散，直接關(guān)系到制劑的懸浮率這一指標(biāo)是否符合要求。目前用于可濕性粉劑中的分散劑有很多種，例如，工業(yè)副產(chǎn)物分散劑、陰離子型表面活性劑分散劑、非離子型表面活性劑分散劑、水溶性高分子物質(zhì)分散劑、無機(jī)分散劑等。同樣的，本發(fā)明農(nóng)藥生物制劑在選用分散劑時，不僅要考慮制劑的懸浮率，還必須要考察所選用的分散劑對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的影響效果，如果所選用的分散劑對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長有較強(qiáng)的抑制效果，盡管該分散劑具有較好的分散效果，也不適合作為本發(fā)明制劑的分散劑。為了篩選到最適宜的分散劑，本發(fā)明考察了拉開粉BX、SP-6、D1002、亞甲基雙磺酸鈉、木質(zhì)素磺酸鈉等多種分散劑對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的影響效果。不同濃度拉開粉BX對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率和菌絲生長抑制率幾乎都為100% ;SP-6對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率和菌絲生長速率的影響均為顯著(P〈0. 05)，盡管SP-6對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)有顯著的促進(jìn)作用，由于其對菌絲生長抑制很明顯，故也無法作為加工淡紫擬青霉可濕性粉劑的分散劑。D1002 (萘磺酸鹽類)對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率和菌絲生長抑制率不顯著，D1002對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)有一定的抑制作用，但是對菌絲生長基本上無影響；本發(fā)明最終發(fā)現(xiàn)，當(dāng)制劑中D1002的用量為O. 05-2%時，尤其為O. 05-0. 1%時，D1002對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)基本沒有抑制作用，對淡紫擬青霉菌絲的生長不表現(xiàn)出抑制作用，相比于其它用量，采用制劑中D1002中的用量為O. 05-0. I %時所制備的可濕性粉劑具有較好的分散效
果O本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，NNO(亞甲基雙磺酸鈉)對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率的影響為顯著，而對淡紫擬青霉菌絲生長速率的影響為不顯著。NNO在制劑中的用量低于1%時，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率較強(qiáng)，隨著NNO在制劑中用量的增加，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率逐漸降低，并表現(xiàn)出一定的促進(jìn)作用。本發(fā)明最終發(fā)現(xiàn)，NNO在制劑中的用量為0.5% -2% (優(yōu)選為1% -2% )時對于淡紫擬青霉孢子具有較好的促進(jìn)作用；其中，當(dāng)NNO在制劑中的用量為I %時，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的促進(jìn)作用最為顯著，而且相比于其它的用量，采用I %用量所制備的可濕性粉劑具有最佳的分散效果。本發(fā)明考察了木質(zhì)素磺酸鈉(也稱“木鈉”)對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生 長的影響效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，木質(zhì)素磺酸鈉對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的影響不顯著，而對菌絲生長速率的影響為極顯著。不同用量的木質(zhì)素磺酸鈉對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的抑制率基本相同，都集中在6%左右，而隨著木質(zhì)素磺酸鈉在制劑中的用量達(dá)到O. 05以上時，其對淡紫擬青霉菌絲生長速率抑制逐漸增強(qiáng)。本發(fā)明在綜合考察了木鈉對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)、菌絲生長及分散劑效果的3個因素的基礎(chǔ)上，最終確定，制劑中木鈉的用量為O. 5-10mg/ml (O. 05-1% )時較為適宜，其中，木鈉的用量10mg/ml(l% )時，對淡紫擬青霉菌絲的生長有良好的促進(jìn)作用且能保證可濕性粉劑的分散效果，所制備的可濕性粉劑的懸浮率最好。紫外線照射對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)有較為顯著的影響，當(dāng)?shù)蠑M青霉孢子遭受紫外線照射大于4min后，其孢子萌發(fā)的抑制率均大于98%，且孢子的致死率變化很小。照射l_2min之間，孢子致死率相差很小。而照射時間在Imin之內(nèi)，照射時間和致死率呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。所以在淡紫擬青霉生物農(nóng)藥制劑中加入紫外線保護(hù)劑能夠有效保護(hù)淡紫擬青霉孢子遭受紫外線的危害，顯著提高孢子的萌發(fā)率。本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在遭受紫外線照射時，不同的紫外線保護(hù)劑對于淡紫擬青霉孢子的保護(hù)效果存在著非常顯著的差異，例如，糊精、腐植酸和羥甲基纖維素等紫外線保護(hù)劑對于淡紫擬青霉孢子的紫外照射的保護(hù)效果非常有限，核黃素、熒光素鈉和抗壞血酸這3種紫外保護(hù)劑對于淡紫擬青霉孢子的紫外照射保護(hù)效果較好，其中核黃素的保護(hù)效果最為突出，與其它的紫外保護(hù)劑的保護(hù)效果均有顯著的差異，本發(fā)明最優(yōu)選采用核黃素作為制劑中的紫外線保護(hù)劑。其中，按質(zhì)量百分比計，紫外線保護(hù)劑的用量可以占整個制劑用量的O. 01-2%。為了促進(jìn)淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)，本發(fā)明還從植物生長激素、無機(jī)鹽、誘抗劑等多種促進(jìn)植物根系生長的或提高植物抗病性或提高殺線效果的物質(zhì)中篩選出能夠有效促進(jìn)淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或抑制根結(jié)線蟲卵孵化的增效劑，將所篩選到的增效劑加入到本發(fā)明制劑中能夠更有效促進(jìn)淡紫擬青霉孢子的萌發(fā)、抑制根結(jié)線蟲卵的孵化，從而提高本發(fā)明制劑的根結(jié)線蟲防治效果。所述的增效劑選自植物生長激素、誘抗劑或/和無機(jī)鹽中的任意一種或多種。所述的植物生長激素優(yōu)選為吲哚乙酸、2，4_D或吲哚丁酸中的任意一種或多種；其中，按質(zhì)量百分比計，吲哚乙酸在制劑中的用量優(yōu)選為0.00001-0. 01 %，更優(yōu)選為O. 00001-0. 001% ;2，4-D在制劑中的用量優(yōu)選為O. 00005-0. 005% ;萘乙酸在制劑中的用量優(yōu)選為0.00001-0. ooi%，更優(yōu)選為0.00001-0.0001%; η引哚丁酸在制劑中的用量優(yōu)選為O. 0005%。所述的誘抗劑優(yōu)選為草酸或水楊酸。本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，制劑中含有高濃度的草酸對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)有顯著的促進(jìn)作用，其中，當(dāng)制劑中草酸的用量為O. 05-0. 15%，尤其是O. 05-0. 1%時，其對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的促進(jìn)作用最為顯著。本發(fā)明進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，制劑中水楊酸的用量為0.001-0. 01%時，其對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)抑制率和菌絲日生長速率抑制率的影響均為極顯著(Ρ〈0. 01)。通過LSD多重比較表明，水楊酸各濃度之間存在差異性(Ρ〈0. 05)。各濃度水楊酸對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)菌絲日生長速率均有一定抑制作用，制劑中水楊酸的用量為O. 001-0. 01%時，其對孢子萌發(fā)抑制率較小，隨著濃度的增加其抑制率顯著增高，當(dāng)制劑中水楊酸的用量大于O. 05%時，孢子萌發(fā)抑制率大于50%，菌絲生長速率抑制率達(dá)到了 100%。因此，本發(fā)明制劑中水楊酸的用量優(yōu)選為 O. 001-0. 01%。本發(fā)明還考察了多種無機(jī)鹽對于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的影響效果，試 驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)的無機(jī)鹽對于淡紫擬青霉孢子或萌發(fā)或菌絲生長均有嚴(yán)重的抑制作用，最終發(fā)現(xiàn)CuS04、(NH4)2SO4, NH4Cl和NH4NO3這四種無機(jī)鹽對于淡紫擬青霉孢子或萌發(fā)或菌絲生長具有一定的促進(jìn)作用，可作為淡紫擬青霉的增效劑，其中，N H4Cl對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)有較為顯著的促進(jìn)作用，NH4NO3對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長均有明顯的促進(jìn)作用，這兩種銨鹽不僅對根結(jié)線蟲卵的孵化抑制率很高，對二齡幼蟲表現(xiàn)為半致死濃度的兩種銨鹽對淡紫擬青霉分生孢子寄生卵表現(xiàn)為促進(jìn)作用；無機(jī)鹽在制劑中的用量優(yōu)選是O. 1-2. 2%，本發(fā)明通過更進(jìn)一步的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，制劑中銨鹽的用量為1.0-1. 1%時最有助于淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長。本發(fā)明中所述的淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液可以是任何一種能夠殺滅根結(jié)線蟲的有效濃度的淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液。淡紫擬青霉孢子粉或孢子或發(fā)酵液可通過各種商業(yè)途徑購買得到，本領(lǐng)域所屬技術(shù)人員也可按照文獻(xiàn)中所公開的方法制備得到淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液。作為參考，本領(lǐng)域技術(shù)人員可參考下述方法制備得到淡紫擬青霉孢子粉(I)制備淡紫擬青霉液體發(fā)酵液；(2)從淡紫擬青霉液體發(fā)酵液中回收孢子產(chǎn)物；(3)干燥所回收的淡紫擬青霉孢子產(chǎn)物，即得淡紫擬青霉粉。淡紫擬青霉液體發(fā)酵液的制備方法已在各種文獻(xiàn)中公開(例如周靖等.淡紫擬青霉(P. Iilacinus)培養(yǎng)條件的優(yōu)化.微生物學(xué)雜志.2007年3月第27卷第2期.45-48 ；毛成利等，淡紫擬青霉的研究開發(fā).化學(xué)工程師.2004年7月.63-64.)，本領(lǐng)域所屬技術(shù)人員可按照文獻(xiàn)中所公開的各種方法制備得到淡紫擬青霉液體發(fā)酵液；例如，采用三級培養(yǎng)方法制備得到淡紫擬青霉菌發(fā)酵液。本發(fā)明另外一個目的是提供一種制備所述淡紫擬青霉生物農(nóng)藥制劑的方法，包括將淡紫擬青霉孢子粉、載體、潤濕劑和分散劑混合均勻后粉碎；將粉碎后的產(chǎn)物混合均勻后磨細(xì)，混合均勻，即得；或者是將淡紫擬青霉發(fā)酵液用載體進(jìn)行吸附；將吸附有淡紫擬青霉孢子液的載體與潤濕劑和分散劑混合均勻后粉碎；將粉碎后的產(chǎn)物混合均勻后磨細(xì)，混合均勻，即得。
本發(fā)明對現(xiàn)有的潤濕劑和分散劑進(jìn)行篩選和優(yōu)化，獲得促進(jìn)淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的特定種類及最適宜用量，最大限度的避免了助劑和載體對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的負(fù)面作用。此外，本發(fā)明進(jìn)一步篩選獲得保護(hù)淡紫擬青霉孢子避免紫外傷害的紫外保護(hù)劑以及促進(jìn)淡紫擬青霉孢子萌發(fā)或菌絲生長的增效劑，有效提高了本發(fā)明可濕性粉劑的生防效果。如無特別說明，本發(fā)明中所述的百分比均為質(zhì)量百分比。


圖I不同種類或不同用量的載體對淡紫擬青霉孢子或菌絲生長的影響。圖2不同種類或不同用量的分散劑對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的影響。圖3不同種類或不同用量的分散劑對淡紫擬青霉菌絲生長速率的影響。 圖4不同種類或不同用量的潤濕劑對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的影響。圖5不同種類或不同用量的潤濕劑對淡紫擬青霉菌絲生長速率的影響。圖6不同種類或不同用量的植物生長激素對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)的影響試驗(yàn)結(jié)果O圖7不同種類或不同用量的植物生長激素對淡紫擬青霉菌絲生長的影響試驗(yàn)結(jié)果O圖8不同種類或不同用量的誘抗劑對淡紫擬青霉孢子生長速率的影響試驗(yàn)結(jié)果。圖9不同種類或不同用量的誘抗劑對淡紫擬青霉菌絲萌發(fā)的影響試驗(yàn)結(jié)果。圖10不同種類或不同用量的無機(jī)鹽對淡紫擬青霉孢子生長的影響試驗(yàn)結(jié)果。圖11不同種類或不同用量的無機(jī)鹽對淡紫擬青霉菌絲生長的影響試驗(yàn)結(jié)果。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會隨著描述而更為清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)施例I可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)94. 45、硅藻土 5、PEG O. 5、D1002 O. 05 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PEG和D1002混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。采用GB/T5451檢測產(chǎn)品的潤濕性；采用GB/T14825-2006檢測產(chǎn)品的懸浮率；采用GB/T1600-2001檢測產(chǎn)品的水分；采用GB/T16150檢測產(chǎn)品的細(xì)度；采用GB/T1601-93檢測產(chǎn)品的熱貯穩(wěn)定性；經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間112秒；懸浮率78% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例2可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)93. 9、硅藻土 5、PEG O. I、D1002 I. O ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PEG和D1002混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間102秒；懸浮率82%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例3可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)91. O、硅藻土 5、PEG 2、D1002 2 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PEG和D1002混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間91秒；懸浮率87%;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例4可濕性粉劑的制備 (I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)94、硅藻土 5、PVA O. 5、NNO O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和N NO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間115秒；懸浮率82% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例5可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92、硅藻土 5、PVA I、NNO 2 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間98秒；懸浮率84% ；產(chǎn)品水分小于3% ;p H值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例6可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92、硅藻土 5、PVA 2、NNO I ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間89秒；懸浮率96% ；產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例7可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92、硅藻土 5、PVA I、NNO 2 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間97秒；懸浮率85% ；產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。
實(shí)施例8可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92、硅藻土 5、PVA I. 5、NNO I. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間101秒；懸浮率83% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例9可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92. 5、硅藻土 5、PVA O. 5、NNO 2 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間104秒；懸浮率81% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮 率和潤濕性均合格。實(shí)施例10可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)90. 5、硅藻土 5、PVA 2. 5、NNO 2 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間98秒；懸浮率82% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例11可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)90. O、硅藻土 5. O、PVA 3. O、NNO 2. O ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間94秒；懸浮率80% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例12可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92. 9、硅藻土 5. O、PVA O. I、NNO 2. O ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PVA和NNO混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間128秒；懸浮率80%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例13可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)94. 45、硅藻土 5、木鈉O. 05、Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間95秒；懸浮率89%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例14可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)93. 5、硅藻土 5、木鈉I. O,Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間89秒；懸浮率94% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3-6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格，有效成分含量與貯前含量相差在允許范圍內(nèi)，失活率不超過5% ;每克可濕性粉劑中含有淡紫擬青霉活孢子數(shù)為I. OX 109(1. OX 109CFU/g)以上。·
實(shí)施例15可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)94. 4、硅藻土 5、木鈉O. I、Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間94秒；懸浮率82%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例16可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)94. O、硅藻土 5、木鈉O. 5、Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間93秒；懸浮率84%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例17可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)94. 49、硅藻土 5、木鈉O. O K Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間95秒；懸浮率76%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例18可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)93. O、硅藻土 5、木鈉I. 5、Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間92秒；懸浮率91%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑:3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。
實(shí)施例19可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)92. 5、硅藻土 5、木鈉2. O、Tween-20 O. 5 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉和Tween-20混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間91秒；懸浮率89%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑:3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例20可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)91. 5、硅藻土 5、木鈉I. O、Tween-20 O. 5、核黃素2. O ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉、Tween-20和核黃素混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕 性全部潤濕時間88秒；懸浮率97% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例21可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)91. 5、硅藻土 5、木鈉I. O、Tween-20 O. 5、熒光素鈉2. O ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉、Tween-20和熒光素鈉混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間89秒；懸浮率97%;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例22可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)91. 499、硅藻土 5、木鈉I. O、Tween-20 O. 5、熒光素鈉2. O、吲哚乙酸O. 001 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉、Tween-20、熒光素鈉和吲哚乙酸混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間89秒；懸浮率97%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例23可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)91. 4995、硅藻土 5、木鈉 I. O、Tween-20 O. 5、熒光素鈉 2. O、吲哚丁酸 O. 0005 ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉、Tween-20、熒光素鈉和吲哚丁酸混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間89秒；懸浮率95%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例24可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)91. 4995、硅藻土 5、木鈉 I. O、Tween-20 O. 5、熒光素鈉 2. 0、2，4_D 0.0005;(2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與木鈉、Tween-20、熒光素鈉和2，4_D混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間90秒；懸浮率94.8% ;產(chǎn)品水分小于3% ;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。實(shí)施例25可濕性粉劑的制備(I)按以下重量稱取各原料(單位kg):淡紫擬青霉孢子粉(1.0X10nCFU/g以上)90. 9、硅藻土 5、PEG 2、D1002 2、草酸O. I ； (2)將淡紫擬青霉孢子粉和硅藻土混合均勻后粉碎過325目篩；將粉碎后的產(chǎn)物與PEG、草酸和D1002混合均勻后用氣流磨磨細(xì)，混合均勻，即得。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的可濕性粉劑的各項(xiàng)性能如下潤濕性全部潤濕時間91秒；懸浮率87%;產(chǎn)品水分小于3%;pH值6-8 ;平均粒徑3_6微米；穩(wěn)定性54±2°C存放14天，懸浮率和潤濕性均合格。試驗(yàn)例I淡紫擬青霉制劑所用載體種類和濃度的優(yōu)化試驗(yàn)配制含有不同濃度不同載體的PDA平板，取O. ImL濃度為IO3個孢子/mL的淡紫擬青霉孢子懸浮液，涂布在含不同濃度不同載體的平板上。以不含載體的PDA平板為對照。每個處理設(shè)置3個重復(fù)，考察載體對淡紫擬青霉分生孢子萌發(fā)率的影響。在含有不同濃度不同載體的PDA平板上接種蘸有淡紫擬青霉孢子懸浮液的直徑為6mm的濾紙片，以不含載體為對照，每個處理重復(fù)3次，每隔3d測量菌落的生長直徑，計算菌落直徑日增長量。從圖I中可以看出，制劑中硅酸，高嶺土，硅藻土和玉米面在兩種用量下對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率都略有促進(jìn)作用；滑石粉，活性炭和蛭石對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率和菌絲生長速率影響較??；而膨潤土和皂土這兩種載體對淡紫擬青霉孢子萌發(fā)和菌絲生長速率影抑制較大。所以可以考慮選擇硅酸，玉米面，高嶺土或硅藻土作為淡紫擬青霉制劑加工的載體。根據(jù)LSD多重比較中可以看出高嶺土和硅藻土對淡紫擬青霉的影響是無差異性，加之高嶺土的吸附性遠(yuǎn)小于硅藻土，所以選擇硅藻土作為最佳的載體。
表I不同載體及用量對淡紫擬青霉生長影響的多重比較結(jié)果(P〈0. 05)
載體用量多重比較差異性標(biāo)注(LSD )
類型__( mg/ml) 孢子萌發(fā)抑制率菌絲生長抑制率
木屑5ba
娃酸5bc
玉米面5bc
活性碳I5 Ibd
權(quán)利要求
1.一種防治根結(jié)線蟲的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于，包括以下成分淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液，載體，潤濕劑和分散劑。
2.按照權(quán)利要求I所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于，按質(zhì)量百分比計算，各成分的用量是載體O. 5-80%,潤濕劑O. 05-4%,分散劑O. 05-8%,余量為淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液；優(yōu)選的，各組分的用量為，載體O. 5-20%，潤濕劑O. 1-3%，分散劑O. 05-5%,余量為淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液。
3.按照權(quán)利要求I或2所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于所述的潤濕劑選自聚乙二醇，聚乙烯醇或Tween-20中的任意一種或多種。
4.按照權(quán)利要求3所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于按質(zhì)量百分比計，聚乙二醇占可濕性粉劑總量的O. 5-2. 0%，優(yōu)選為I. 0-2. 0% ;聚乙烯醇占可濕性粉劑總量的O.5-2. 0%，優(yōu)選為2. 0% ;Tween-20占可濕性粉劑總量的O. 1-1. 0%，優(yōu)選為O. 5%0
5.按照權(quán)利要求I或2所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于所述的分散劑選自萘磺酸鹽類，亞甲基雙磺酸鈉或木質(zhì)素磺酸鈉中的任意一種或多種。
6.按照權(quán)利要求5所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于按質(zhì)量百分比計，萘磺酸鹽類占可濕性粉劑總量的O. 05-2%，優(yōu)選為O. 05-0. 1% ;亞甲基雙磺酸鈉占可濕性粉劑總量的O. 5-2. 0%，優(yōu)選為I. 0-2. 0%，最優(yōu)選為I. 0% ;木質(zhì)素磺酸鈉占可濕性粉劑總量的O.05-1. 0%，優(yōu)選為 I. 0%。
7.按照權(quán)利要求I或2所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于含有紫外線保護(hù)劑；優(yōu)選的，所述紫外線保護(hù)劑選自核黃素，熒光素鈉或抗壞血酸中的任意一種或多種。
8.按照權(quán)利要求I或2所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于還含有增效劑；所述的增效劑選自植物生長激素，誘抗劑或/和無機(jī)鹽中的任意一種或多種。
9.按照權(quán)利要求8所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑，其特征在于所述的植物生長激素選自吲哚乙酸，2，4-D或吲哚丁酸中的任意一種或多種；其中，按質(zhì)量百分比計，吲哚乙酸占可濕性粉劑總量的O. 00001-0. 01 %，優(yōu)選為O. 00001-0. 001 % ;2，4-D占可濕性粉劑總量的O. 00005-0. 005% ;萘乙酸占可濕性粉劑總量的O. 00001-0. 001%，更優(yōu)選為O.00001-0. 0001% ;吲哚丁酸占可濕性粉劑總量的O. 0005% ； 所述的誘抗劑優(yōu)選為草酸或水楊酸；其中，草酸占可濕性粉劑總量的O. 05-0. 15%，優(yōu)選為O. 05-0. 1% ;水楊酸占可濕性粉劑總量的O. 001-0. 01% ； 所述無機(jī)鹽選自CuS04、(NH4)2SO4, NH4Cl或NH4NO3中的任意一種或多種；其中，無機(jī)鹽占可濕性粉劑總量的O. 1-2. 2%，優(yōu)選為I. 0-1. 1%。
10.一種制備權(quán)利要求I或2所述的淡紫擬青霉可濕性粉劑的方法，其特征在于，包括以下步驟將淡紫擬青霉孢子粉、載體、潤濕劑和分散劑混合均勻后粉碎；將粉碎后的產(chǎn)物混合均勻磨細(xì)，再混合均勻，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種淡紫擬青霉可濕性粉劑及其制備方法和應(yīng)用。包括以下組分淡紫擬青霉孢子粉或發(fā)酵液，載體，潤濕劑和分散劑；所述潤濕劑選自PEG、PVA或吐溫-20中的任意一種或多種；所述的分散劑選自D1002、NNO或木鈉中任意一種或多種。本發(fā)明可濕性粉劑中還可含有紫外線保護(hù)劑或/和增效劑。本發(fā)明對現(xiàn)有的潤濕劑和分散劑進(jìn)行篩選和優(yōu)化，獲得對淡紫擬青霉生長影響較小的特定種類及用量。此外，本發(fā)明進(jìn)一步篩選獲得保護(hù)淡紫擬青霉孢子避免紫外傷害的紫外保護(hù)劑以及促進(jìn)植物生根或者增加殺線效果的增效劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供了淡紫擬青霉可濕性粉劑的制備方法以及該可濕性粉劑在防治植物根結(jié)線蟲中的應(yīng)用。
文檔編號A01N25/14GK102894012SQ201210425998
公開日2013年1月30日 申請日期2012年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月29日
發(fā)明者樸春根, 汪來發(fā), 王曦茁, 郭志斌, 李永, 郭民偉 申請人:中國林業(yè)科學(xué)研究院森林生態(tài)環(huán)境與保護(hù)研究所