專利名稱：草莓增殖培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種草本植物培養(yǎng)基，更具體的講涉及一種草莓增值培養(yǎng)基，屬于植物生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
草莓以其突出的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)功能在我國得到大面積的推廣種植。而面對(duì)生產(chǎn)需要和現(xiàn)有的生產(chǎn)條件，草莓在產(chǎn)量、品質(zhì)及抗性等方面都有待于進(jìn)一步改良。將生物技術(shù)與常規(guī)育種方法結(jié)合起來進(jìn)行草莓新品種培育，是提高育種草莓效率的有效途徑。傳統(tǒng)的草莓增殖培養(yǎng)基為MSM基本培養(yǎng)基+ 0. I 0. 5mg/L 6-BA + 100 200mg/ L谷氨酰胺+ 20 30 g/L白糖+ 5_9g/L瓊脂，pH值為5. 5 6. O。首先，在 組成上，MSM基本培養(yǎng)基中有機(jī)物的含量比較低，且不含有組分肌醇，不利于植物的助長發(fā)育，其次，組分瓊脂在植物組織培養(yǎng)中具有無法克服的固有缺陷，影響了培養(yǎng)基的整體效果。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種可有效提高草莓增值培養(yǎng)效果的草莓增殖培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
一種草莓增殖培養(yǎng)基，其特征在于，包括1/2改良MS + 0. 2 0. 5mg/L 6-BA + 100 200mg/ L 谷氨酰胺 + 30 50 g/L 白糖 + I. 5 2. 5g/L phytagel, pH 在 5. 5 6. 0 之間。進(jìn)一步，所述的改良MS培養(yǎng)基包括常量營養(yǎng)兀素、微量營養(yǎng)兀素和有機(jī)試劑。其中，所述的常量營養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下
硝酸鉀1850 mg/L ；
硝酸銨1600 mg/L ；
七水硫酸鎂420 mg/L ；
無水磷酸二氫鉀170 mg/L ；
二水氯化鈣450 mg/L ；
乙二胺四乙酸二鈉35. 2 mg/L ；
七水硫酸亞鐵27. 8 mg/Lo所述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下
四水硫酸錳20. 2 mg/L ；
硫酸鋅5. 5 mg/L ；
硼酸5. 0 mg/L ；
碘化鉀0. 83 mg/L ；
鑰酸鈉0. I mg/L ；
硫酸銅0. 025 mg/L ；氯化鈷o. 15 mg/Lo而所述的有機(jī)試劑的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下
鹽酸硫胺素 8 mg/L ；
煙酸2. 5 mg/L ；
鹽酸卩比唆醇 2. 5 mg/L ；
肌醇100mg/L。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明通過選擇改良MS作為草莓培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，大大增加了本發(fā)明所述的培養(yǎng)基的有機(jī)物尤其是肌醇的含量，而通過用phytagel代替瓊脂，有效地克服了傳統(tǒng)瓊脂在植物組織培養(yǎng)中的固有缺陷，有效地克服了草莓高頻體胚再生培養(yǎng)中基因型限制問題，大幅度提高體細(xì)胞胚發(fā)生頻率和再生植株頻率，提高了育種效率。
具體實(shí)施例方式下面將結(jié)合具體實(shí)施例，詳細(xì)說明本發(fā)明的
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例I
1/2改良MS + 0. 2mg/L 6-BA + 150mg/ L谷氨酰胺 + 30g/L 白糖 + I. 5g/L phytagel ,pH在5. 8左右。實(shí)施例2
1/2 改良 MS + 0. 3mg/L 6-BA + IOOmg/ L 谷氨酰胺 + 50 g/L 白糖 + 2. Og/Lphytagel, pH 在 5. 5 左右。實(shí)施例3
1/2 改良 MS + 0. 5mg/L 6-BA + 200mg/ L 谷氨酰胺 + 45g/L 白糖 + 2. 5g/Lphytagel, pH 在 5. 9 左右。實(shí)施例4
1/2 改良 MS + 0. 3mg/L 6-BA + 120mg/ L 谷氨酰胺 + 35 g/L 白糖 + I. 5g/Lphytagel, pH 在 5. 5 左右。實(shí)施例5
1/2 改良 MS + 0. 5mg/L 6-BA + 160mg/ L 谷氨酰胺 + 40g/L 白糖 + 2. 2g/Lphytagel, pH 在 6. 0 左右。在上述實(shí)施例1-5中，改良MS培養(yǎng)基包括常量營養(yǎng)兀素、微量營養(yǎng)兀素和有機(jī)試齊U。其中，所述的常量營養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下硝酸鉀1850 mg/L;硝酸銨1600 mg/L ;七水硫酸鎂420 mg/L ;無水磷酸二氫鉀170 mg/L ;二水氯化韓450 mg/L ;乙二胺四乙酸二鈉35. 2 mg/L;七水硫酸亞鐵27. 8 mg/L。所述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下四水硫酸錳20. 2 mg/L ;硫酸鋅5. 5 mg/L ;硼酸5. 0 mg/L ;碘化鉀0. 83 mg/L ；鑰酸鈉0. I mg/L ;硫酸銅0. 025 mg/L ;氯化鈷0. 15 mg/L。而所述的有機(jī)試劑的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下鹽酸硫胺素8 mg/L ;煙酸2. 5 mg/L ;鹽酸批卩多醇2. 5 mg/L ;肌醇IOOmg/L0將380個(gè)外植體分別在5個(gè)實(shí)施例所述的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程如下割取草莓I. 5 3. 0高的草莓無菌苗接種到上述的5個(gè)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為在室溫27±2°C，16小時(shí)光照，光照強(qiáng)度10 30Mm2. s—1 ;在溫度為20±2°C，暗培養(yǎng)8 10小時(shí)，上述光照和暗培養(yǎng)交替進(jìn)行。結(jié)果為2 3周后得到了大量不定牙，增殖倍數(shù)為8-15倍，莖葉伸展，葉片嫩綠，植株健壯。而傳統(tǒng)的增殖培養(yǎng)基的增殖倍數(shù)在5 10倍，且容易出現(xiàn)基因型障礙，不能正長增殖，或者出現(xiàn)葉片發(fā)黃，植株畸形化的問題。因此可以得出通過選擇適宜外植體、改良基本培養(yǎng)基及成分、調(diào)整培養(yǎng)條件等配套措施，有效地克服了苜蓿高頻體胚再生培養(yǎng)中不同品種及基因型障礙問題，大幅度提高體細(xì)胞胚胎發(fā)生頻率和再生植株頻率的結(jié)論。本發(fā)明通過選擇改良MS作為草莓培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，大大增加了本發(fā)明所述的培養(yǎng)基的有機(jī)物尤其是肌醇的含量，而通過用phytagel代替瓊脂，有效地克服了傳統(tǒng)瓊脂在植物組織培養(yǎng)中的固有缺陷，有效地克服了草莓高頻體胚再生培養(yǎng)中基因型限制問題，大幅度提高體細(xì)胞胚發(fā)生頻率和再生植株頻率，提高了育種效率。
以上已以較佳實(shí)施例公開了本發(fā)明，然其并非用以限制本發(fā)明，凡采用等同替換或者等效變換方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.ー種草莓增殖培養(yǎng)基，其特征在于，包括1/2改良MS + O. 2 O. 5mg/L 6-BA +100 200mg/ L 谷氛酸胺 + 30 50 g/L 白糖 + I. 5-2. 5g/L phytagel,pH 在 5. 5 6. O之間。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的草莓增殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述的改良MS培養(yǎng)基包括常量營養(yǎng)兀素、微量營養(yǎng)兀素和有機(jī)試劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的草莓增殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述的常量營養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下 硝酸鉀1850 mg/L ； 硝酸銨1600 mg/L ； 七水硫酸鎂420 mg/L ； 無水磷酸ニ氫鉀170 mg/L ； ニ水氯化鈣450 mg/L ； こニ胺四こ酸ニ鈉35. 2 mg/L ； 七水硫酸亞鐵27. 8 mg/L ο
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的草莓增殖培養(yǎng)基，其特征在干，所述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下 四水硫酸錳20. 2 mg/L ； 硫酸鋅5. 5 mg/L ； 硼酸5. O mg/L ； 碘化鉀O. 83 mg/L ； 鑰酸鈉O. I mg/L ； 硫酸銅O. 025 mg/L ； 氯化鈷O. 15 mg/L ο
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的草莓增殖培養(yǎng)基，其特征在于，所述的有機(jī)試劑的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度如下 鹽酸硫胺素 8 mg/L ； 煙酸2. 5 mg/L ； 鹽酸卩比B多醇 2. 5 mg/L ； 肌醇100mg/L。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種草莓增殖培養(yǎng)基，包括1/2改良MS+0.2～0.5mg/L6-BA+100～200mg/L谷氨酰胺+30～50g/L白糖+0.35%phytagel，pH在5.5～6.0之間。本發(fā)明通過選擇改良MS作為草莓培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，大大增加了本發(fā)明所述的培養(yǎng)基的有機(jī)物尤其是肌醇的含量，而通過用phytagel代替瓊脂，有效地克服了傳統(tǒng)瓊脂在植物組織培養(yǎng)中的固有缺陷，有效地克服了草莓高頻體胚再生培養(yǎng)中基因型限制問題，大幅度提高體細(xì)胞胚發(fā)生頻率和再生植株頻率，提高了育種效率。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102668987SQ20121017472
公開日2012年9月19日 申請(qǐng)日期2012年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月31日
發(fā)明者唐山遠(yuǎn), 朱延慶, 朱靜, 笪榮根, 紀(jì)榮喜 申請(qǐng)人:句容市白兔鎮(zhèn)云兔草莓專業(yè)合作社