專利名稱：一種復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，屬于微生物肥料技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
我國的耕地由于幾十年不良耕作，導(dǎo)致養(yǎng)分流失，耕地質(zhì)量遭到嚴(yán)重破壞，據(jù)國內(nèi) 200個土壤養(yǎng)分檢測點(diǎn)數(shù)據(jù)分析，全國土壤有機(jī)質(zhì)含量偏低，平均為1.8%，大部分不足1%。 近十年來我國有70-80%的耕地養(yǎng)分不足，20-30%耕地的養(yǎng)分過重。長期使用無機(jī)化肥，使土壤板結(jié)、酸化、鹽漬，造成環(huán)境污染。目前歐美發(fā)達(dá)國家在保護(hù)耕地上主要采取如下幾個措施土地休耕、免耕或少耕； 綠肥掩青；增耕有機(jī)肥；施入菌肥和輪作。以上措施雖然在一定程度上取得了成功，但未能從根本上遏制土壤退化的趨勢。我國保護(hù)耕地的方法有如下幾種1、輪作由于人均耕種面積小，造成合理的輪作制度落空。2、增施有機(jī)肥有機(jī)肥料分散、不便于收集且價格高， 往往施入量達(dá)不到技術(shù)要求。3、施入菌肥此方法不被農(nóng)民所接受，原因是肥效持續(xù)性差， 一般是前期有效，后期沒效。4、綠肥掩青，由于農(nóng)民復(fù)種率高且急功近利，難以推廣。上述措施皆難以起效，還加重了農(nóng)民對化肥的依賴心理，要想高產(chǎn)就得多施化肥，逐年的惡性循環(huán)，使得土壤肥害越來越嚴(yán)重，作物的產(chǎn)量增產(chǎn)緩慢，投入多產(chǎn)出少。化肥殘留還含有對人體有害的化學(xué)成分硫氰酸鹽，可引起急性毒性，少量攝入可妨礙機(jī)體對碘的利用，抑制甲狀腺激素合成，惡化碘缺乏癥，是甲狀腺疾病發(fā)生的一個重要的化合物，對胎兒和嬰兒的智力和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育也存在較大風(fēng)險。羊棲菜作為一種保健食品，它含有羊棲多糖、人體所必須的礦物質(zhì)如鈣、鐵、鋅、碘等，羊棲多糖是一種生物多糖，無臭、無味、易溶于水，具有藥肥雙效、營養(yǎng)、防病、調(diào)節(jié)等多種作用，對革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌都有很好的抑制作用，能誘導(dǎo)作物產(chǎn)生多種抗性物質(zhì)，對由病毒、真菌、細(xì)菌等引起的病害都有效，可使水稻對毒素抗性提高35-40倍，對各種蚜蟲有明顯抑制作用，蚜蟲可在4-12小時即死亡，作物發(fā)病率減至40%左右，礦物質(zhì)是人們強(qiáng)身健體、開發(fā)智力、防止老年癡呆癥的有益物質(zhì)，并富含B簇維生素，其中VB12含量最高， VB12是人體內(nèi)核酸合成及紅血球細(xì)胞合成的必需物質(zhì)，也是人體細(xì)胞傳導(dǎo)素，可起到神經(jīng)細(xì)胞傳導(dǎo)作用，對腦血栓起良好的調(diào)節(jié)作用。羊棲菜下腳料中還有一部分營養(yǎng)物質(zhì)如蛋白質(zhì)、氨基酸、礦物質(zhì)微量元素仍余留在作為下腳料的殘?jiān)?，若丟棄不但白白浪費(fèi)，而且還會污染環(huán)境。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，所述的復(fù)合微生物液態(tài)肥料能平衡土壤的PH值，消除土壤板結(jié)，增加肥力，抗病益菌，增強(qiáng)作物的耐寒耐旱的能力，吸附降解土壤毒素，促進(jìn)作物健旺生長。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，其特征在于，具體步驟為第一步將羊棲菜下腳料粉碎至1000-1500目，用水在70 80°C浸煮提取2 池，然后將提取液濃縮，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇的最終體積分?jǐn)?shù)為60 80%，室溫靜置5小時，過濾，得到羊棲菜初提物，羊棲菜初提物中羊棲多糖的重量百分比濃度為20 40%，采用離心分配色譜法分離得到羊棲多糖；
第二步將第一步得到的羊棲多糖加入復(fù)合酶進(jìn)行水解，離心，取上清液，通過超濾膜進(jìn)行超濾得到營養(yǎng)液；
第三步將第二步所得的營養(yǎng)液中接種EM有益菌群，放入籠式通氣攪拌反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行微生物連續(xù)發(fā)酵；
第四步將第三步所得的發(fā)酵產(chǎn)物與負(fù)離子水按照重量比40-50 100混合，灌封，經(jīng)消毒后得到復(fù)合微生物液態(tài)肥料。優(yōu)選地，所述第一步中的離心分配色譜法的具體操作條件為取氯仿、甲醇和水按體積比3 2 5置于混合釜中，震動平衡，靜置分出上下兩相，以上相為固定相，下相為流動相，以部分流動相溶解羊棲菜初提物得到羊棲菜初提物溶液，將固定相泵入離心分配色譜儀中，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為600 lOOOr/min，泵入羊棲菜初提物溶液，用剩余流動相洗脫，收集羊棲多糖組分，濃縮至羊棲多糖的重量百分比濃度為60 80%，按體積比1 :20 40加入無水乙醇或乙醇溶液，低溫靜置沉淀，離心、過濾、烘干得羊棲多糖。優(yōu)選地，所述第二步中的羊棲多糖與復(fù)合酶的重量比為30 :1，水解溫度為37°C， 時間為30分鐘，超濾膜的精度為0. 01微米。優(yōu)選地，所述第三步中的營養(yǎng)液與EM有益菌群的重量比為100 0. 1 0. 5，發(fā)酵條件為溫度為28°C，pH值為7. 0，轉(zhuǎn)速為200r/min，時間為24h。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、能夠有效修復(fù)土壤，使土壤板結(jié)、酸化、鹽漬等現(xiàn)象逐步消失，使土壤中有益菌增加，減少有害菌存在；2、在使用本發(fā)明產(chǎn)品處理過的土壤上種植的植物根深葉茂，在植物的正常生長情況下，使用本產(chǎn)品通?？墒棺魑锾崆俺墒?-10天，收獲期延長7-10天，保鮮期延長7-10天；3、富含對人體有益的礦物質(zhì)微量元素，對一些名貴花卉、中草藥及精品蔬菜的培植可通過本產(chǎn)品稀釋后無土栽培；4、安全穩(wěn)定、綠色環(huán)保、無毒無害，不含對人體有害的化學(xué)成份硫氰酸鹽。5、有機(jī)質(zhì)和營養(yǎng)物質(zhì)損失少，腐殖質(zhì)積累多，成分比較齊全，含藥肥雙效的羊棲多糖SFPS并富含可溶性礦物質(zhì)和微量元素，N、P、K、B 族維生素等也以可溶性有機(jī)態(tài)存在，極易被作物吸收轉(zhuǎn)化和利用，加快土壤肥力的恢復(fù)，使土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)始終保持在良好狀態(tài)，并且在干旱地區(qū)使用有助于抵抗干旱。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例來具體說明本發(fā)明。實(shí)施例1-3中采用的離心分配色譜儀是日本制造的LL1-7CPC型離心分配色譜儀，其最高轉(zhuǎn)速可達(dá)到1300r/min，主機(jī)有1040個分配通道。實(shí)施例1
將羊棲菜下腳料粉碎至1000-1500目，用水在80°C浸煮提取池，然后將提取液濃縮，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇的最終體積分?jǐn)?shù)為60%，室溫靜置5小時，過濾，得到羊棲菜初提物，羊棲菜初提物中羊棲多糖的重量百分比濃度為20%，采用離心分配色譜法分離取氯仿 240L、甲醇160L、水400L置于混合釜中，震動平衡，靜置分出上下兩相，以上相為固定相，下相為流動相，將300克羊棲多糖初提物用2500ml的流動相溶劑來溶解過濾備用，將固定相以SOml/min泵入，充滿主機(jī)管狀柱系中，開啟離心分配色譜儀，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速800 r/min, 然后以50ml/min流量泵入上述溶劑的初提物溶液。泵入剩余的流動相洗脫主機(jī)管柱中的羊棲多糖組分，根據(jù)檢測在洗脫的流動相中收集羊棲多糖組分，濃縮至羊棲多糖的重量百分比濃度為60%，按體積比1 :20加入無水乙醇，在溫度4°C條件下靜止12小時，離心、過濾、 烘干得羊棲多糖，HPLC檢測其純度大于95%。將羊棲菜提取物按照重量比30 1加入復(fù)合酶(無錫利得生態(tài)環(huán)境科技有限公司生產(chǎn)LID-B復(fù)合酶)在37°C水解30分鐘，3000rpm轉(zhuǎn)速下離心，取上清液，通過精度為0. 01 微米的超濾膜進(jìn)行超濾得到營養(yǎng)液；
將所得的營養(yǎng)液中按100 0. 1接種EM有益菌群(中日合資 福建益閩生物技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)的EM有益菌群，產(chǎn)品編號為“ASJ-18”)，放入籠式通氣攪拌反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行微生物連續(xù)發(fā)酵，發(fā)酵條件為溫度為^°C，pH值為7. 0，轉(zhuǎn)速為200r/min，時間為Mh ；
將所得的發(fā)酵產(chǎn)物與上海浩美凈水設(shè)備有限公司生產(chǎn)的負(fù)電位能量水按照重量比45 100混合，灌封，消毒后得到復(fù)合微生物液態(tài)肥料。若種植糧食作物，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 100稀釋，每畝土壤施用90g/升；若種植瓜果，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 :100稀釋，每畝土壤施用60g/L ；若種植花卉，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 :300稀釋，每畝土壤施用30g/L。實(shí)施例2
將羊棲菜下腳料粉碎至1000-1500目，用水在80°C浸煮提取池，然后將提取液濃縮，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇的最終體積分?jǐn)?shù)為70%，室溫靜置5小時，過濾，得到羊棲菜初提物，羊棲菜初提物中羊棲多糖的重量百分比濃度為30%，采用離心分配色譜法分離取氯仿 240L、甲醇160L、水400L置于混合釜中，震動平衡，靜置分出上下兩相，以上相為固定相，下相為流動相，將300克羊棲多糖初提物用2500ml的流動相溶劑來溶解過濾備用，將固定相以SOml/min泵入，充滿主機(jī)管狀柱系中，開啟離心分配色譜儀，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速800 r/min, 然后以50ml/min流量泵入上述溶劑的初提物溶液。泵入剩余的流動相洗脫主機(jī)管柱中的羊棲多糖組分，根據(jù)檢測在洗脫的流動相中收集羊棲多糖組分，濃縮至羊棲多糖的重量百分比濃度為70%，按體積比1 :30加入無水乙醇，在溫度4°C條件下靜止12小時，離心、過濾、 烘干得羊棲多糖，HPLC檢測其純度大于95%。將羊棲菜提取物按照重量比30 1入復(fù)合酶(無錫利得生態(tài)環(huán)境科技有限公司生產(chǎn)LID-B復(fù)合酶)在37°C水解30分鐘，3000rpm轉(zhuǎn)速下離心，取上清液，通過精度為0. 01微米的超濾膜進(jìn)行超濾得到營養(yǎng)液；
將所得的營養(yǎng)液中按100 0. 5接種EM有益菌群(中日合資 福建益閩生物技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)的EM有益菌群，產(chǎn)品編號為“ASJ-18”)，放入籠式通氣攪拌反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行微生物連續(xù)發(fā)酵，發(fā)酵條件為溫度為^°C，pH值為7. 0，轉(zhuǎn)速為200r/min，時間為Mh ；
將所得的發(fā)酵產(chǎn)物與上海浩美凈水設(shè)備有限公司生產(chǎn)的負(fù)電位能量水按照重量比50 100混合，灌封，經(jīng)消毒后得到復(fù)合微生物液態(tài)肥料。若種植糧食作物，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 100稀釋，每畝土壤施用90g/升；若種植瓜果，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 :100稀釋，每畝土壤施用60g/L ；若種植花卉，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 :300稀釋，每畝土壤施用30g/L。實(shí)施例3
將羊棲菜下腳料粉碎至1000-1500目，用水在80°C浸煮提取池，然后將提取液濃縮，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇的最終體積分?jǐn)?shù)為80%，室溫靜置5小時，過濾，得到羊棲菜初提物；羊棲菜初提物中羊棲多糖的重量百分比濃度為40%，采用離心分配色譜法分離取氯仿 240L、甲醇160L、水400L置于混合釜中，震動平衡，靜置分出上下兩相，以上相為固定相，下相為流動相，將300克羊棲多糖初提物用2500ml的流動相溶劑來溶解過濾備用，將固定相以SOml/min泵入，充滿主機(jī)管狀柱系中，開啟離心分配色譜儀，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速800 r/min, 然后以50ml/min流量泵入上述溶劑的初提物溶液。泵入剩余的流動相洗脫主機(jī)管柱中的羊棲多糖組分，根據(jù)檢測在洗脫的流動相中收集羊棲多糖組分，濃縮至羊棲多糖的重量百分比濃度為80%，按體積比1 :40加入無水乙醇，在溫度4°C條件下靜止12小時，離心、過濾、 烘干得羊棲多糖，HPLC檢測其純度大于95% ；
將羊棲菜提取物按照重量比30 1入復(fù)合酶(無錫利得生態(tài)環(huán)境科技有限公司生產(chǎn) LID-B復(fù)合酶)在37°C水解30分鐘，3000rpm轉(zhuǎn)速下離心，取上清液，通過精度為0. 01微米的超濾膜進(jìn)行超濾得到營養(yǎng)液；
將所得的營養(yǎng)液中按100 0. 3接種EM有益菌群(中日合資 福建益閩生物技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)的EM有益菌群，產(chǎn)品編號為“ASJ-18”)，放入籠式通氣攪拌反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行微生物連續(xù)發(fā)酵，發(fā)酵條件為溫度為^°C，pH值為7. 0，轉(zhuǎn)速為200r/min，時間為Mh ；
將所得的發(fā)酵產(chǎn)物與上海浩美凈水設(shè)備有限公司生產(chǎn)的負(fù)電位能量水按照重量比45 100混合、灌封，經(jīng)消毒后得復(fù)合微生物液態(tài)肥料。若種植糧食作物，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 100稀釋，每畝土壤施用90g/升；若種植瓜果，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 :100稀釋，每畝土壤施用60g/L;若種植花卉，將本發(fā)明方法制得的復(fù)合微生物液態(tài)肥料用水按重量比1 :300稀釋，每畝土壤施用30g/L。以下田間試驗(yàn)結(jié)果表明此復(fù)合微生物液態(tài)肥料不僅可調(diào)節(jié)土壤理化性質(zhì)，還可改善土壤的微生物環(huán)境，具有良好的抗病、抗逆能力，能顯著提高農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量，并能有效防治農(nóng)作物的病害。表例宜春東升農(nóng)場種植有限公司農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量主要監(jiān)測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，其特征在于，具體步驟為第一步將羊棲菜下腳料粉碎至1000-1500目，用水在70 80°C浸煮提取2 池，然后將提取液濃縮，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇的最終體積分?jǐn)?shù)為60 80%，室溫靜置5小時，過濾，得到羊棲菜初提物，羊棲菜初提物中羊棲多糖的重量百分比濃度為20 40%，采用離心分配色譜法分離得到羊棲多糖；第二步將第一步得到的羊棲多糖加入復(fù)合酶進(jìn)行水解，離心，取上清液，通過超濾膜進(jìn)行超濾得到營養(yǎng)液；第三步將第二步所得的營養(yǎng)液中接種EM有益菌群，放入籠式通氣攪拌反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行微生物連續(xù)發(fā)酵；第四步將第三步所得的發(fā)酵產(chǎn)物與負(fù)離子水按照重量比40-50 100混合，灌封，經(jīng)消毒后得到復(fù)合微生物液態(tài)肥料。
2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，其特征在于，所述第一步中的離心分配色譜法的具體操作條件為取氯仿、甲醇和水按體積比3 2 5混合，震動平衡， 靜置分出上下兩相，以上相為固定相，下相為流動相，以部分流動相溶解羊棲菜初提物得到羊棲菜初提物溶液，將固定相泵入離心分配色譜儀中，調(diào)整主機(jī)轉(zhuǎn)速為600 lOOOr/min， 泵入羊棲菜初提物溶液，用剩余流動相洗脫，收集羊棲多糖組分，濃縮至羊棲多糖的重量百分比濃度為60 80%，按體積比1 :20 40加入無水乙醇或乙醇溶液，低溫靜置沉淀，離心、 過濾、烘干得羊棲多糖。
3.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，其特征在于，所述第二步中的羊棲多糖與復(fù)合酶的重量比為30 :1，水解溫度為37°C，時間為30分鐘，超濾膜的精度為 0. 01微米。
4.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，其特征在于，所述第三步中的營養(yǎng)液與EM有益菌群的重量比為100 0. 1 0.5，發(fā)酵條件為溫度為^°C，pH值為 7. 0，轉(zhuǎn)速為200r/min,時間為24h。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復(fù)合微生物液態(tài)肥料的制備方法，其特征在于，具體步驟為將羊棲菜下腳料粉碎至1000-1500目，用水浸煮提取，然后將提取液濃縮，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇的最終體積分?jǐn)?shù)為60～80%，室溫靜置5小時，過濾，得到羊棲菜初提物，羊棲菜初提物中羊棲多糖的重量百分比濃度為20～40%，采用離心分配色譜法分離得到羊棲多糖；將羊棲多糖加入酶水解，離心，超濾得到營養(yǎng)液；將營養(yǎng)液放入籠式通氣攪拌反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行微生物連續(xù)發(fā)酵；將發(fā)酵產(chǎn)物與負(fù)電位能量水混合得到復(fù)合微生物液態(tài)肥料。本發(fā)明能夠有效修復(fù)土壤，使土壤板結(jié)、酸化、鹽漬等現(xiàn)象逐步消失，使土壤中有益菌增加，減少有害菌存在。
文檔編號C05F11/08GK102311293SQ201110252719
公開日2012年1月11日 申請日期2011年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月30日
發(fā)明者李平英, 馬永明, 黃順勇 申請人:異優(yōu)坊(上海)生物科技有限公司