專利名稱：葡萄幼果兩刀取胚法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及園藝生物技術(shù)領(lǐng)域。具體的說，本發(fā)明涉及一種葡萄幼果取胚的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)葡萄胚挽救技術(shù)中，葡萄無菌胚的剝?nèi)∮袃煞N方法。一是摘取果粒，用自來水沖洗干凈，用無菌的鑷子和手術(shù)刀剝出胚珠，放置于無菌操作臺內(nèi)，將胚珠先用70 %乙醇消毒、無菌水沖洗，再用0. 升汞消毒、無菌水沖洗，得到無菌胚，但胚珠成活率和胚珠發(fā)育率低。二是摘取幼果，用自來水沖洗，再用70%乙醇浸潤后用無菌水沖洗一次，在超凈工作臺上倒入0. 升汞浸泡并振蕩幾次，之后用無菌水漂洗，用無菌的鑷子和手術(shù)刀在培養(yǎng)皿中將果粒剖開，取出胚珠，但取胚效率不高，易污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的就是針對目前傳統(tǒng)葡萄胚挽救技術(shù)中采用葡萄無菌胚的剝?nèi)》椒ù嬖诘呐咧槌苫盥屎团咧榘l(fā)育率低，以及取胚效率不高，易污染的技術(shù)現(xiàn)狀。本發(fā)明提供一種葡萄幼果取胚方法，具有無污染，胚珠成活率及發(fā)育率高等特點(diǎn)， 提高了效率，節(jié)約了資源。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的通過在無菌操作臺內(nèi)將葡萄幼果用75%乙醇消毒，雙手消毒，左手抓緊果梗及果實(shí)基部，右手持手術(shù)刀第一刀從中部靠胚一側(cè)約果粒 2/5處橫割一圈，深度不傷及胚，用手輕輕掰開，看清胚著生部位，第二刀從中豎切一刀成兩半，最后用刀尖將胚珠沾出或挑出。本發(fā)明提供了一種葡萄幼果兩刀取胚的方法，包括以下步驟(1)帶柄剪下葡萄幼果，去除傷殘、畸形果，在流動自來水下沖洗干凈；(2)在無菌操作臺內(nèi)，將果粒浸入裝有75%乙醇的燒杯中，用玻璃棒攪動10圈，用無菌水沖洗3次，稍濾干待用；(3)雙手消毒并戴無菌手套，左手抓緊果梗及果實(shí)基部，右手持無菌手術(shù)刀第一刀用刀刃的后部從果粒中部靠胚一側(cè)果粒2/5處橫割一圈，深度不傷及胚，用雙手輕輕掰開；(4)看清胚著生部位，第二刀用手術(shù)刀中部從中豎切一刀成兩半；(5)將1/5果粒果皮朝下放在托盤上，另1/5果粒用手捏住，用刀尖輕剝果肉，將胚珠沾出或挑出，直接用刀尖將胚珠接種至胚珠發(fā)育培養(yǎng)基。本發(fā)明中，所用器皿、器械及雙手均需消毒，每一瓶培養(yǎng)基接種完畢應(yīng)將刀片消
ο通過實(shí)施本發(fā)明具體的發(fā)明內(nèi)容，可以達(dá)到以下效果因在無菌臺內(nèi)操作，稍感不便，本發(fā)明提供的方法適于葡萄果粒轉(zhuǎn)色變軟前的取胚，消毒直接作用于果皮而非幼胚，整個(gè)取胚過程僅刀尖接觸幼胚，具有無污染，胚珠成活率及發(fā)育率高的特點(diǎn)，總體上提高了效率，節(jié)約了資源。
具體實(shí)施例方式下面，舉實(shí)施例說明本發(fā)明，但是，本發(fā)明并不限于下述的實(shí)施例。另外，在下述的說明中，如無特別說明，％皆指m/m質(zhì)量百分比。本發(fā)明中選用的所有試劑、工具和儀器都為本領(lǐng)域熟知選用的，但不限制本發(fā)明的實(shí)施，其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本發(fā)明以下實(shí)施方式的實(shí)施。實(shí)施例通過在無菌操作臺內(nèi)將葡萄幼果用75%乙醇消毒，雙手消毒，左手抓緊果梗及果實(shí)基部，右手持手術(shù)刀第一刀從中部靠胚一側(cè)約果粒2/5處橫割一圈，深度不傷及胚，用手輕輕掰開，看清胚著生部位，第二刀從中豎切一刀成兩半，最后用刀尖將胚珠沾出或挑出。本發(fā)明因采用在無菌臺內(nèi)操作，稍感不便，該方法適于葡萄果粒轉(zhuǎn)色變軟前的取胚，具有無污染，胚珠成活率及發(fā)育率高的特點(diǎn)，總體上提高了效率，節(jié)約了資源。葡萄幼果兩刀取胚法也可用于無需消毒和無菌操作的果實(shí)取胚，效率更高。實(shí)施例(1)將帶柄剪下葡萄幼果，去除傷殘、畸形果，在流動自來水下沖洗干凈；(2)將果粒浸入裝有75%乙醇的燒杯中，置于無菌操作臺內(nèi)，用玻璃棒攪動10圈， 用無菌水沖洗2-3次，稍濾干待用；(3)雙手消毒并戴無菌手套，左手抓緊果梗及果實(shí)基部，右手持無菌手術(shù)刀第一刀用刀刃的后部從果粒中部靠胚一側(cè)果粒2/5處橫割一圈，深度不傷及胚，用雙手輕輕掰開；(4)看清胚著生部位，第二刀用手術(shù)刀中部從中豎切一刀成兩半；(5)將1/5果粒果皮朝下放在托盤上，另1/5果粒用手捏住，用刀尖輕剝果肉，將胚珠沾出或挑出，直接用刀尖將胚珠接種至胚珠發(fā)育培養(yǎng)基。
權(quán)利要求
1. 一種葡萄幼果兩刀取胚的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟(1)帶柄剪下葡萄幼果，去除傷殘、畸形果，在流動自來水下沖洗干凈；(2)在無菌操作臺內(nèi)，將果粒浸入裝有75%乙醇的燒杯中，用玻璃棒攪動10圈，用無菌水沖洗3次，稍濾干待用；(3)雙手消毒并戴無菌手套，左手抓緊果梗及果實(shí)基部，右手持無菌手術(shù)刀第一刀用刀刃的后部從果粒中部靠胚一側(cè)果粒2/5處橫割一圈，深度不傷及胚，用雙手輕輕掰開；(4)看清胚著生部位，第二刀用手術(shù)刀中部從中豎切一刀成兩半；(5)將1/5果粒果皮朝下放在托盤上，另1/5果粒用手捏住，用刀尖輕剝果肉，將胚珠沾出或挑出，直接用刀尖將胚珠接種至胚珠發(fā)育培養(yǎng)基。
全文摘要
本發(fā)明公開一種葡萄幼果兩刀取胚的方法。通過在無菌操作臺內(nèi)將葡萄幼果用75％乙醇消毒，雙手消毒，左手抓緊果梗及果實(shí)基部，右手持手術(shù)刀第一刀從中部靠胚一側(cè)約果粒2/5處橫割一圈，深度不傷及胚，用手輕輕掰開，看清胚著生部位，第二刀從中豎切一刀成兩半，最后用刀尖將胚珠沾出或挑出。本發(fā)明提供的方法適于葡萄果粒轉(zhuǎn)色變軟前的取胚，消毒直接作用于果皮而非幼胚，具有無污染，胚珠成活率及發(fā)育率高的特點(diǎn)，提高了效率，節(jié)約了資源，具有廣泛的實(shí)用性。
文檔編號A01H4/00GK102349447SQ20111025249
公開日2012年2月15日 申請日期2011年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月30日
發(fā)明者伍新宇, 夏培蓓, 梅新娣, 潘明啟, 羅淑萍 申請人:新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝作物研究所