專利名稱：一種蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法及其培養(yǎng)產(chǎn)物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥用真菌的人工栽培技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法及其培養(yǎng)產(chǎn)物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
蟬花，學(xué)名蟬擬青霉(Paecilomyces cicadae)，是某些蟬若蟲受蟬擬青霉菌寄生后的產(chǎn)物，是一種菌蟲復(fù)合體。此菌于1838年由Miquel定名為蟬棒束孢霉Isaria cicadae。此后出現(xiàn)多種同物異名。如蟬草Cordyc印s cicadae，基生棒束孢Isaria basili, 辛克萊球殼抱Sphaeria sinclairii,叢生蟲殼菌Torrubia caespitosa,辛克萊蟲草 Cordyceps sinclairii,哈里棒束抱 Isaria hariottii,小[Il單駕Cordyceps sobolifera,辛克萊棒束抱Isaria sinclairii,蒙克蘇棒束抱Isaria mokanshawii禾口多枝棒束抱Isaria arbuscu/a等等。醫(yī)學(xué)認(rèn)為蟬花是一種與冬蟲夏草相近的珍貴藥材。蟬擬青霉的有性階段，有學(xué)者認(rèn)為是大蟬草Cordyc印s cicadae。大蟬草子座棒狀或角狀，IO-SOmmX 3-5mm,從寄主頭部發(fā)出，單生或叢生，褐色，子囊殼擬卵狀，埋藏，子囊孢子柱狀。在自然界廣為分布的是蟬擬青霉，大蟬草稀少。蟬花含有肝糖、蟲草酸、多種必需氨基酸、D-甘露醇、多種生物堿、麥角留醇等有效成分。蟬花中所含的17種氨基酸、多糖、甘露醇均與冬蟲夏草相近，且重金屬As、HgJb的含量均比冬蟲夏草低，其中Hg在蟬花未檢出，說明蟬花比冬蟲夏草更具安全性。通過蟬花與冬蟲夏草的成分比較，可以看出蟬擬青霉與冬蟲夏草具有相似的活性成分。人工栽培蟬擬青霉具有不依賴自然條件、培養(yǎng)周期短、產(chǎn)品質(zhì)量有保證、可大批量生產(chǎn)等優(yōu)點，為解決野生蟬花資源短缺問題提供了新途徑，研究表明，人工栽培的蟬花主要活性成分不低于野生蟬花，特別是多糖含量很高，很高的活性成分總量預(yù)示其功效可能會比野生蟬花更好。然而現(xiàn)有技術(shù)中，人工培養(yǎng)蟬擬青霉的方法往往存在培養(yǎng)周期較長，因此成本較高的問題，而且蟬擬青霉有準(zhǔn)性生殖現(xiàn)象，菌株優(yōu)化是生產(chǎn)關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于通過改進現(xiàn)有技術(shù)的培養(yǎng)方法，提供一種蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法及其培養(yǎng)產(chǎn)物的應(yīng)用。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取如下技術(shù)方案一種蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，包括如下步驟1)菌種制備包括斜面種制備和一級種制備過程；其中，斜面種制備包括如下步驟將蟬擬青霉菌株(Paecilomyces cicadae)移植到PSA培養(yǎng)基(馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基)斜面試管中，在22°C 25°C下培養(yǎng)5 7天，挑選長勢好的種保存?zhèn)溆茫凰鱿s擬青霉菌株可采用常規(guī)方法從自然界分離純化獲得，也可以采用現(xiàn)有已保藏或可市購的蟬擬青霉菌株。
一級種制備包括如下步驟將斜面種接入馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液中，在22°C 25°C， 振蕩頻率為130 150r/min的條件下培養(yǎng)3 7天，至錐形瓶內(nèi)出現(xiàn)大量菌絲球后作為一級種備用；2)接種將步驟1)中制得的一級種接入到固體培養(yǎng)基中；3)發(fā)酵接種后的培養(yǎng)盒移至培養(yǎng)室內(nèi)，在20°C 25°C，相對濕度60% 80%的條件下培養(yǎng)30天 50天；4)孢梗束的采收當(dāng)培養(yǎng)物的孢梗束高度達9cm左右、表面有少量分生孢子出現(xiàn)時即可采收。較佳的，步驟1)中，所述PSA培養(yǎng)基中含有如下組分(每IOOOml培養(yǎng)基中含有)馬鈴薯200g、蔗糖20g、瓊脂20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸20min 30min，過濾，加入蔗糖與瓊脂，補足水至1000ml，加熱溶解，然后分裝至試管內(nèi)，裝量為試管長的1/5 1/4，塞上棉塞，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MI^壓力下滅菌 30min，趁熱將試管擺放在斜面板上冷卻。較佳的，步驟1)中，所述馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液中含有如下組分(每IOOOml培養(yǎng)液中含有)馬鈴薯200g、蔗糖20g ；其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml， 煮沸15min 30min，過濾，加入蔗糖，補足水至IOOOml，加熱溶解，然后分裝至錐形瓶內(nèi)，裝量為錐形瓶容量的20 % 30 %，塞上棉塞，再用牛皮紙包裹，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MPa壓力下滅菌30min，取出冷卻至20°C以下。較佳的，步驟2)中，所述接種的步驟為當(dāng)培養(yǎng)盒中的固體培養(yǎng)基的溫度冷卻至 20°C以下后，在無菌條件下接種，按照3 5%的接種量將一級種接入培養(yǎng)盒中。較佳的，步驟2、中，所述固體培養(yǎng)基中含有的組分名稱及各組分的重量份為基質(zhì)42 46重量份；甘蔗渣2 10重量份；貝殼粉0. 1 0. 5重量份；蠶蛹粉2 5重量份；硝酸鉀0. 1 0. 5重量份；水44 56重量份；其中，所述基質(zhì)選自如下組合中的一種玉米粉、麩皮和蔗糖的混合物；小麥 ’大麥；粟和蔗糖的混合物；大米和蔗糖的混合物；高粱和蔗糖的混合物。優(yōu)選的，所述玉米粉、麩皮和蔗糖的混合物中，以所述玉米粉、麩皮和蔗糖的混合物的總重量計，玉米粉、麩皮和蔗糖的重量百分比分別為玉米粉43% 55%、麩皮44% 55%、蔗糖 2%。優(yōu)選的，所述粟和蔗糖的混合物中，以所述粟和蔗糖的混合物的總重量計，粟和蔗糖的重量百分比分別為粟98% 99%、蔗糖1% 2%。優(yōu)選的，所述大米和蔗糖的混合物中，以所述大米和蔗糖的混合物的總重量計，大米和蔗糖的重量百分比分別為大米98% 99%、蔗糖1% 2%。優(yōu)選的，所述高粱和蔗糖的混合物中，以所述高粱和蔗糖的混合物的總重量計，高粱和蔗糖的重量百分比分別為高粱98% 99%、蔗糖1% 2%。優(yōu)選的，所述固體培養(yǎng)基的制備方法為先將玉米粉、麩皮或小麥、大麥、粟、大米、高粱煮熟，將蔗糖、硝酸鉀在水中溶解，再與甘蔗渣、貝殼粉，蠶蛹粉按照比例混合均勻。優(yōu)選的，所述固體培養(yǎng)基中還含有蛋白胨(魚粉)，且所述蛋白胨(魚粉)的重量份為0. 5重量份。優(yōu)選的，步驟2)中，所述固體培養(yǎng)基的碳氮比為80 98。較佳的，步驟幻中，在固體發(fā)酵后期孢梗束生長階段要求采光，且環(huán)境溫度相較前期菌絲體生長階段需低2 3°C，培養(yǎng)過程中需保持空氣流通。較佳的，步驟4)中，所述采收的具體步驟為去掉透氣封口膜，用工具將培養(yǎng)物取出分離孢梗束，烘干分級，干燥后用薄膜袋真空包裝，菌質(zhì)置于-20°C貯存。本發(fā)明栽培所得的產(chǎn)物由孢梗束、分生孢子、菌絲體與培養(yǎng)基剩余物質(zhì)的混合物三部分組成，可用于制備具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、降血壓、明目、抗輻射、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、滋補強壯、改善腎功能等功能的食品或保健品或藥品或化妝品；所述的食品包括餅干、營養(yǎng)粉等產(chǎn)品，所述的保健品包括保健酒、口服液等產(chǎn)品，所述的藥品包括具有抗腫瘤、增強免疫力等作用的藥物，所述的化妝品包括面膜、洗面奶、防曬霜或油、肥皂、沐浴露、洗發(fā)水等產(chǎn)品。本發(fā)明的方法所制得的培養(yǎng)產(chǎn)物可以用于制備如下物質(zhì)蟬花茶、蟬酒、蟬花醬油、蟬花氨基酸調(diào)味品、蟬花咖啡、蟬花奶制品、蟬花糖果、蟬花蜂制品、蟬花膨化食品、蟬花口香糖、蟬花藥膳、蟬花孢子油、蟬花膠囊、蟬花飲片、蟬花沖劑、蟬花保健化妝品、或蟬花飼料。1、蟬花茶蟬花茶的制備方法是將孢梗束切割成片狀，加適量溫?zé)崴纯蓻_泡成蟬花茶。也可將孢梗束打碎，包裝成茶包式樣，加適量溫?zé)崴疀_泡而成，沖茶時能在較短時間內(nèi)將原料內(nèi)的營養(yǎng)成分充分釋出。除了上述制備方法，還可以用傳統(tǒng)的烘炒等方法制備， 但這種方法易破壞原有的有效成分。2、蟬酒傳統(tǒng)制備酒的方法有滲濾法和冷浸法。冷浸法是將孢梗束直接常溫浸泡在酒基中，一般需要6個月左右，浸出物少，若提高浸泡溫度可減少浸泡時間提高浸出物量，其具體方法孢梗束和菌質(zhì)粉碎_>投入容器_>加入酒基_> 一定溫度熱浸數(shù)小時并不斷攪拌_>換液再次熱浸_>合并浸出液_>加入一定比例的澄清劑_>攪拌均勻_>過濾_> 成品。還可以在熱浸的基礎(chǔ)上超聲波提取，此法比僅熱浸可得到的更多的浸出物有效成分。 具體實施步驟如下孢梗束和菌質(zhì)粉碎_>浸泡于飲用酒中_>超聲波提取_>調(diào)酒。溫度時間、超聲波提取溫度時間和酒基的酒精濃度均需實驗確定其最佳條件。酒基可以是白酒、大麥酒、古道酒、黃酒、紅葡萄酒等，從營養(yǎng)成分、藥用價值考慮認(rèn)為紅葡萄酒為酒基可以與蟬花本身的藥理作用相輔相成。蟬酒制備中還可以添加中藥材，如肉蓯蓉、首烏、元肉、人參、 枸杞、黃芪等。3、調(diào)味品1)蟬花醬油蟬花醬油的制備方法是將已制成的醬油原液與人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)的提取液按一定比例混合，其步驟為①黃豆/豆粕、面粉/小麥/麩皮原料處理_> 接種_>發(fā)酵制得醬油原液。②粉碎后的人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)_>超聲熱水提取_>過濾得提取液；殘渣再進行超聲熱水提取_>過濾得提取液；合并提取液_>真空濃縮③將發(fā)酵制得的醬油原液與濃縮后的提取液按一定比例混合_>焦糖色配料_>加配料甜味劑、增鮮劑_>滅菌_>過濾_>灌裝_>成品。
2)蟬花氨基酸調(diào)味品近年來發(fā)明了具有保健功能的合成味精或復(fù)合調(diào)味品，大多是在谷氨酸鈉味精的基礎(chǔ)上添加微量元素和維生素等，從而改變味精單一的調(diào)味功能， 但大多數(shù)保健功能的調(diào)味品保健功能單一，蟬花氨基酸調(diào)味品從添加單一成分的情況下能起到多種保健功能。技術(shù)方案為粉碎人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)_>于適量水中煎煮過濾，真空濃縮_>得濃縮液后與味精混合攪拌或噴涂干燥_>成品。用混合攪拌或噴涂的方法使?jié)饪s液滲透著附，將白色晶體顆粒味精或粉狀味精研制成蟬花氨基酸調(diào)味品，工藝簡單、成本低，大大增強了其保健功能。4、保健食品1)蟬花咖啡、奶制品和糖果蟬花咖啡、奶制品和糖果的配制方法包括直接制取法、精制提取法。這些產(chǎn)品具有調(diào)節(jié)機體功能，增強體質(zhì)，消除人體代謝廢產(chǎn)物，延緩衰老及美容保健的功效。配制方法如下直接制取法，將人工培養(yǎng)的孢梗束粉碎后與一定比例的咖啡制成品、奶粉和原糖等相復(fù)配，混勻后散裝或袋裝。精制提取法，用乙醇(一定濃度的酒) 熱回流法提取已粉碎人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)，收取回流液至無醇味時，過濾后備用或干燥蒸發(fā)水分后備用，殘渣經(jīng)反復(fù)三次乙醇熱回流提取后收取全部提取液，將殘渣丟棄，將干燥蒸發(fā)水分后的提取物粉碎與咖啡制成品、奶制品和原糖復(fù)配，制成各種袋裝、瓶裝、盒裝的蟬花咖啡、奶粉、奶、酸奶、鈣奶、奶酪、冷飲奶制品和糖果。2)蟬花蜂制品蜂制品即蜂蜜做的，蜂蜜、蜂膠、蜂王漿和花粉等產(chǎn)品統(tǒng)稱蜂制品?，F(xiàn)今市場上蜂蜜的種類除了純蜂蜜外，還有椴樹蜜、紫云英蜜、洋槐蜜等，大多為植物提取物與蜂蜜結(jié)合。本發(fā)明是將中藥成分與蜂蜜結(jié)合，更具有藥食用價值，具有調(diào)節(jié)機體功能、增強體質(zhì)、清除人體代謝廢產(chǎn)物、延緩衰老及美容保健等功效。其配制方法是提取人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)內(nèi)的活性成分，將其以一定比例加入到蜂蜜中，即可得到成品。3)蟬花膨化食品膨化食品松脆香甜、口味多樣，是很多年輕人、尤其是小朋友的最愛。它主要原料是玉米、面粉、小米、馬鈴薯、豌豆等糧食，經(jīng)膨化后表面噴上油脂、鹽和調(diào)味品等配料而制成。若將蟬花活性成分添加到膨化食品內(nèi)，在休閑娛樂時也可以做到養(yǎng)生保健功效。具體方法可以將人工培養(yǎng)蟬花孢梗束和菌質(zhì)中提取的提取物真空濃縮噴涂在膨化食品成品表面后干燥，也可以用上述發(fā)明中蟬花調(diào)味品代替普通調(diào)味品，如蟬花氨基酸調(diào)味品代替一般味精、蟬花醬油代替一般醬油等以一般膨化食品的工藝生產(chǎn)蟬花膨化食
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ΡΠ O4)蟬花口香糖市面上有售的基本大多是果香型而沒有中藥成分的口香糖。若在口香糖中添加中藥成分不僅可以清潔口腔、促進消化、促進血液循環(huán)和鍛煉面部肌肉外，還能起到滋補強壯、抗疲勞抗應(yīng)激、解熱鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)等作用。將人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)中的有效成分提取出來，與樹膠混合，加入糖漿(粉)、薄荷、甜味劑等調(diào)和壓制而成。也有文獻記載，可以將各個有效成分純化后分別制成多糖層、蟲草酸層和核苷酸層，蟲草酸層在中間分別將多糖層和核苷酸層粘合得口香糖成品。5)蟬花藥膳普遍的蟬花藥膳為蟬花杞子豬肝湯，制備方法一般是將野生蟬花、 枸杞等藥材洗凈，按比例放入鍋內(nèi)，加豬肝湯內(nèi)煮沸煎湯，熟爛后加碘鹽即可。由于野生蟬花資源的稀缺，可以用營養(yǎng)價值甚至高于野生的蟬花人工培養(yǎng)品孢梗束代替，除了一般用到的豬肝、枸杞外，還可以與植物類、動物類、藥食兼用類和中藥類配伍。植物類食物包括 海產(chǎn)品類、糧食類半成品、瓜果籽實類、藥用食用菌類、蔬菜類、山野菜類和豆及制品類，動物類包括鼠類、海產(chǎn)品類、如制品類、淡水魚類、山禽類、家禽類、畜產(chǎn)品類、野獸野味類、昆蟲類和蛙類，藥食兼用類有山藥、蕙苡仁、黑芝麻、赤小豆、扁豆、龍眼肉、山楂、大棗等，中藥類包括人參、西洋參、藏紅花、三七、天麻、丹參、白術(shù)等。藥膳所需調(diào)料類除了碘鹽外還有蔥、姜、大蒜、醬油、料酒、胡椒、辣椒、味精、醋和紅糖等。本發(fā)明的蟬花藥膳成本低廉、是集滋補、保健、預(yù)防、治療、美容、護膚、減肥、壯陽于一體的藥膳系列，并具有抗疲勞、抗衰老、 抗病毒、抗輻射、抗缺氧、增強免疫力、增強記憶力、提高生活質(zhì)量、恢復(fù)性功能、雙向調(diào)節(jié)身體器官機能等作用。6)蟬花孢子油蟬花孢子油的制備方法是蟬花人工培養(yǎng)品孢子粉經(jīng)破壁后、萃取孢子粉中有效成分，去除雜質(zhì)及無效成分，即得蟬花孢子油。其有效成分有多糖、總?cè)坪拖佘盏取?、保健藥品蟬花膠囊、飲片、沖劑的制備方法如下將人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)粉碎，凍干干燥后與藥用輔料混合分裝得膠囊劑。從人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)中分離提取有效成分的提取物，與輔料和功能因子混合后得飲片，輔料選擇甜味劑為蔗糖粉、麥芽糖、果糖、飴糖、蛋白糖、海藻糖、乳糖與半乳糖、棉籽糖、木糖醇、蜂蜜、甘露糖醇、甜聚糖、磨芋粉、甘草、山楂、 三七、人參、靈芝；酸味劑為檸檬酸、蘋果酸、酒石酸；其他添加劑為CMC、明膠、瓊脂、糊精、 分子蒸餾單苷酯、蔗糖脂肪酸酯、食用滑石粉；功能因子為植物多糖、核酸、黃酮、維生素C、 鋅、鈣、硒。本發(fā)明具有成本低、食用方便、營養(yǎng)與保健價值高、口感佳等優(yōu)點。沖劑是從人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)中分離提取有效成分的提取物，將過濾后的殘渣烘干粉碎后與提取物混合，再烘干與其他輔料混合后分裝或灌裝，此法能去除原料中無效的成分。6、保健化妝品在洗滌劑和護膚品的制作工藝中加入蟬花人工培養(yǎng)品孢子粉、孢梗束和菌質(zhì)內(nèi)提取的提取液，可減少洗滌劑和護膚品對皮膚的刺激。由于提取液本身是黃色透明的，因此在制備彩妝基礎(chǔ)油、色膏、珠光等工藝上需要考慮到色彩問題。蟬花的活性成分具有滋補、美容、抗衰老等功效，增進了洗滌劑和護膚品的功效，也降低了愛美人士長期使用彩妝后的產(chǎn)生的膚質(zhì)粗糙、暗沉，有色素沉淀等問題。7、其他產(chǎn)品1)蟬花飼料蟬花飼料的制備方法是將次品菌質(zhì)烘干搗碎后作為添加劑按一定比例直接加入飼料中成蟬花飼料，需要做動物實驗。本法降低了無效成分和成本，不需要提取多糖和濃縮處理。醫(yī)家認(rèn)為蟬花是一種與冬蟲夏草相近的珍貴藥材，用成本低廉的蟬花人工培養(yǎng)品 (孢子粉、孢梗束和菌質(zhì))代替資源稀缺的野生蟬花并開發(fā)其深加工產(chǎn)品，使人們都能享用到勝比野生蟬花且價格相對低廉的人工蟬花帶來的藥食兼用價值。和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點本發(fā)明的所采用的人工栽培蟬擬青霉方法簡便、生產(chǎn)成本低、栽培周期短，所得產(chǎn)品具有質(zhì)量高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。實施例11、菌種的制備和培養(yǎng)(1)菌種制備制備馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基或馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液備用；①斜面種制備從云南三江源頭采集的野生蟬花通過組織分離純化獲得，轉(zhuǎn)管后， 在22°C下培養(yǎng)5天，挑選長勢好的備用；②一級種制備將馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液裝入錐形瓶中，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MI^壓力下滅菌30min，冷卻后在無菌條件下把備用的斜面種接入錐形瓶中，在22°C，振蕩頻率為 130r/min的條件下培養(yǎng)5天，至錐形瓶內(nèi)出現(xiàn)大量菌絲球后備用；本實施方式采用的PSA培養(yǎng)基配比為每IOOOml培養(yǎng)基馬鈴薯200g、蔗糖20g、 瓊脂20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸20min，過濾，加入蔗糖與瓊脂，補足水至1000ml，加熱溶解，然后分裝至試管內(nèi)，裝量為試管長的1/4，塞上棉塞，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15ΜΙ^壓力下滅菌30min，趁熱將試管擺放在斜面板上冷卻。本實施方式采用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液配比為每IOOOml培養(yǎng)液馬鈴薯200g、蔗糖20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸30min，過濾，加入蔗糖，補足水至IOOOml，加熱溶解，然后分裝至錐形瓶內(nèi)，裝量為錐形瓶容量的30 %，塞上棉塞，再用牛皮紙包裹，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15ΜΙ^壓力下滅菌30min，取出冷卻至20°C以下。配料裝盒配制固體培養(yǎng)基，將配好的培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)盒中，裝料量為15%，用透氣封口膜封口 ；本實施方式所述的固體培養(yǎng)基配比為基質(zhì)42重量份，甘蔗渣2重量份，貝殼粉0. 1重量份，蠶蛹粉2重量份，硝酸鉀0. 1重量份，蛋白胨(魚粉)為0. 5重量份，水為 56重量份，其中基質(zhì)由玉米粉、麩皮和蔗糖組成，且以基質(zhì)的總重量計，玉米粉的重量百分比為55%、麩皮的重量百分比為44%、蔗糖的重量百分比為1%。其制備方法為先將玉米粉、麩皮煮熟，將蔗糖、硝酸鉀在水中溶解，再與甘蔗渣、貝殼粉、蠶蛹粉按照比例混合均勻。(2)滅菌將培養(yǎng)盒放入滅菌鍋中，于0. 15MPa壓力下滅菌30min ；(3)接種在固體培養(yǎng)基冷卻至20°C以下后，在無菌條件下接種，每300ml —級種接50-60只培養(yǎng)盒；(4)發(fā)酵接種后的培養(yǎng)盒移至培養(yǎng)室在20°C _25°C，相對濕度60% -80%下培養(yǎng)30d-50d，后期孢梗束生長階段要求采光，且環(huán)境溫度相較前期菌絲體生長階段需低2 3°C，每天需適時通氣，保持培養(yǎng)室內(nèi)空氣新鮮；(5)采收當(dāng)培養(yǎng)物的孢梗束高度達9cm左右、表面有少量分生孢子出現(xiàn)時即可采收；采收時，去掉封口膜，用工具將培養(yǎng)物取出分離孢梗束，烘干分級，冷卻后用薄膜袋真空包裝，菌質(zhì)置于_20°C貯存。2、產(chǎn)量及性質(zhì)檢測本實施例中所得的培養(yǎng)產(chǎn)物由孢梗束、分生孢子、菌絲體與培養(yǎng)基的剩余物質(zhì)混合物三部分組成，產(chǎn)量為孢梗束100g_110g(含水率8%以下)/lkg固體培養(yǎng)基。經(jīng)藥理學(xué)實驗證明，本實施例中蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物具有改善腎功能的作用。與天然蟬花相比，由于天然蟬花對生長環(huán)境要求較高，產(chǎn)量較少，而本實施例的蟬擬青霉在人工可控條件下的培養(yǎng)產(chǎn)品價格相對低廉，因此可用于大規(guī)模蟬擬青霉人工培養(yǎng)。3、培養(yǎng)產(chǎn)物的應(yīng)用
本實施例中制得的培養(yǎng)產(chǎn)物用于制備蟬花茶，蟬花茶的制備方法是將孢梗束切割成片狀，加適量溫?zé)崴纯蓻_泡成蟬花茶。實施例21、菌種的制備和培養(yǎng)(1)菌種制備制備馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基或馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液備用；①斜面種制備從云南三江源頭采集的野生蟬花通過組織分離純化獲得，轉(zhuǎn)管后， 在25°C下培養(yǎng)7天，挑選長勢好的備用；②一級種制備將馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液裝入錐形瓶中，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MI^壓力下滅菌30min，冷卻后接入錐形瓶中，在25°C，振蕩頻率為150r/min的條件下培養(yǎng)3天，至錐形瓶內(nèi)出現(xiàn)大量菌絲球后備用；本實施方式采用的PSA培養(yǎng)基配比為每IOOOml培養(yǎng)基馬鈴薯200g、蔗糖20g、 瓊脂20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸20min-30min， 過濾，加入蔗糖與瓊脂，補足水至1000ml，加熱溶解，然后分裝至試管內(nèi)，裝量為試管長的 1/5-1/4，塞上棉塞，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15ΜΙ^壓力下滅菌30min，趁熱將試管擺放在斜面板上冷卻。本實施方式采用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液配比為每IOOOml培養(yǎng)液馬鈴薯200g、蔗糖20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸15min-30min，過濾， 加入蔗糖，補足水至1000ml，加熱溶解，然后分裝至錐形瓶內(nèi)，裝量為錐形瓶容量的20% 30%，塞上棉塞，再用牛皮紙包裹，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MPa壓力下滅菌30min，取出冷卻至 20°C以下。(2)配料裝盒配制固體培養(yǎng)基，將配好的培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)盒中，裝料量為 15% _25%，用封口膜封口 ；本實施方式所述的固體培養(yǎng)基配比為基質(zhì)46重量份，甘蔗渣5 重量份，貝殼粉0. 4重量份，蠶蛹粉2. 5重量份，硝酸鉀0. 1重量份，水為44重量份；其中基質(zhì)為小麥。其制備方法為先將小麥煮熟，將蔗糖、硝酸鉀在水中溶解，再與甘蔗渣、貝殼粉， 蠶蛹粉按照比例混合均勻。(3)滅菌將培養(yǎng)盒放入滅菌鍋中，于0. 15MPa壓力下滅菌30m in_60min ；(4)接種在固體培養(yǎng)基冷卻至20°C以下后，在無菌條件下接種，每300ml —級種接50-60只培養(yǎng)盒；(5)固體發(fā)酵接種后的培養(yǎng)盒移至培養(yǎng)室在20°C -25°C，相對濕度60% -80%下培養(yǎng)30d-50d，前期菌絲體生長階段需遮光，后期孢梗束生長階段要求采光，且環(huán)境溫度相較前期菌絲體生長階段需低2 3°C，每天需適時通氣，保持培養(yǎng)室內(nèi)空氣新鮮；(6)采收當(dāng)蟬花培養(yǎng)物的孢梗束高度達9cm左右、表面有少量分生孢子出現(xiàn)時即可采收；采收時，去掉封口膜，用工具將培養(yǎng)基培養(yǎng)物取出分離孢梗束，烘干分級，冷卻后用薄膜袋真空包裝，菌質(zhì)置于-20°C貯存。本發(fā)明的所采用的人工栽培蟬擬青霉方法簡便、生產(chǎn)成本低、栽培周期短，所得產(chǎn)品具有質(zhì)量高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。2、產(chǎn)量及性質(zhì)檢測本實施例中所得的培養(yǎng)產(chǎn)物由孢梗束、分生孢子、菌絲體與培養(yǎng)基的剩余物質(zhì)混合物三部分組成，產(chǎn)量為孢梗束100g_110g(含水率8%以下)/lkg固體培養(yǎng)基。經(jīng)藥理學(xué)實驗證明，本實施例中蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、降血壓、明目、抗輻射、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、滋補強壯、改善腎功能的作用。與天然蟬花相比，由于天然蟬花對生長環(huán)境要求較高，產(chǎn)量較少，而本實施例的蟬擬青霉在人工可控條件下的培養(yǎng)產(chǎn)品價格相對低廉，因此可用于大規(guī)模蟬擬青霉人工培養(yǎng)。3、培養(yǎng)物的應(yīng)用本實施例中制得的培養(yǎng)產(chǎn)物用于制備蟬花膠囊，其制備方法如下將人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)粉碎，凍干干燥后與藥用輔料混合分裝得膠囊劑。實施例31、菌種的制備和培養(yǎng)(1)菌種制備制備馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基或馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液備用；①斜面種制備從云南三江源頭采集的野生蟬花通過組織分離純化獲得，轉(zhuǎn)管后， 在22°C下培養(yǎng)5天，挑選長勢好的備用；②一級種制備將馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液裝入錐形瓶中，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MI^壓力下滅菌30min，冷卻后接入錐形瓶中，在23°C，振蕩頻率為130r/min的條件下培養(yǎng)5天，至錐形瓶內(nèi)出現(xiàn)大量菌絲球后備用；本實施方式采用的馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基配比為每IOOOml培養(yǎng)基馬鈴薯 200g、蔗糖20g、瓊脂20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸 20min-30min,過濾，加入蔗糖與瓊脂，補足水至IOOOml，加熱溶解，然后分裝至試管內(nèi)，裝量為試管長的1/5-1/4，塞上棉塞，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15ΜΙ^壓力下滅菌30min，趁熱將試管擺放在斜面板上冷卻。本實施方式采用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)液配比為每IOOOml培養(yǎng)液馬鈴薯200g、蔗糖 20g，其制備方法為將去皮馬鈴薯切丁置于容器內(nèi)加水1000ml，煮沸15min-30min，過濾，加入蔗糖，補足水至IOOOml，加熱溶解，然后分裝至錐形瓶內(nèi)，裝量為錐形瓶容量的20 %，塞上棉塞，再用牛皮紙包裹，置于滅菌鍋內(nèi)0. 15MPa壓力下滅菌30min，取出冷卻至20°C以下。(2)配料裝盒配制固體培養(yǎng)基，將配好的培養(yǎng)基裝入培養(yǎng)盒中，裝料量為15%， 用封口膜封口 ；本實施方式所述的固體培養(yǎng)基配比為基質(zhì)46重量份，甘蔗渣10重量份，貝殼粉0. 5重量份，蠶蛹粉5重量份，硝酸鉀0. 5重量份，水為44重量份；其中基質(zhì)為粟和蔗糖(以粟和蔗糖的總重量計，粟的重量百分比為98%，蔗糖的重量百分比為2%)。其制備方法為先將粟煮熟，將蔗糖、硝酸鉀在水中溶解，再與甘蔗渣、貝殼粉、蠶蛹粉按照比例混合均勻。(3)滅菌將培養(yǎng)盒放入滅菌鍋中，于0. 15MPa壓力下滅菌30min ；(4)接種在固體培養(yǎng)基冷卻至20°C以下后，在無菌條件下接種，每300ml —級種接80只培養(yǎng)盒；(5)固體發(fā)酵接種后的培養(yǎng)盒移至培養(yǎng)室在25°C，相對濕度80%下培養(yǎng)50天， 后期孢梗束生長階段要求采光，且環(huán)境溫度相較前期菌絲體生長階段需低2 3°C，每天需適時開窗通氣，保持培養(yǎng)室內(nèi)空氣新鮮；(6)采收當(dāng)蟬花培養(yǎng)物的孢梗束高度達9cm左右、表面有少量分生孢子出現(xiàn)時即可采收；采收時，去掉封口膜，用工具將培養(yǎng)基培養(yǎng)物取出分離孢梗束，烘干分級，冷卻后用CN 102242070 A
說明書
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薄膜袋真空包裝，菌質(zhì)置于-20°C貯存。2、產(chǎn)量及性質(zhì)檢測本實施例中所得的培養(yǎng)產(chǎn)物由孢梗束、分生孢子、菌絲體與培養(yǎng)基的剩余物質(zhì)混合物三部分組成，產(chǎn)量為孢梗束100g-110g(含水率8%以下)/lkg固體培養(yǎng)基。經(jīng)藥理學(xué)實驗證明，本實施例中蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、降血壓、明目、抗輻射、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、滋補強壯、改善腎功能的作用。與天然蟬花相比，由于天然蟬花對生長環(huán)境要求較高，產(chǎn)量較少，而本實施例的蟬擬青霉在人工可控條件下的培養(yǎng)產(chǎn)品價格相對低廉，因此可用于大規(guī)模蟬擬青霉人工培養(yǎng)。3、培養(yǎng)物的應(yīng)用本實施例中制得的培養(yǎng)產(chǎn)物用于制備蟬酒，其制備方法如下人工培養(yǎng)的孢梗束和菌質(zhì)粉碎_>投入容器_>加入酒基_> 一定溫度熱浸數(shù)小時并不斷攪拌_>換液再次熱浸_>合并浸出液_>加入一定比例的澄清劑_>攪拌均勻_>過濾_>成品實施例4實施例1-3中制得的培養(yǎng)產(chǎn)物中多糖含量的測定1、試劑A液0. 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液精確稱量烘干后葡萄糖0. lg，用蒸餾水定容到100ml，濃度為0. 1%。B液5%苯酚溶液。精取稱取5g重蒸酚，用蒸餾水定容到100ml。2、樣品的前處理精確稱取野生蟬花、實施例1-3中制得的人工培養(yǎng)蟬擬青霉孢梗束各0. 5g，加入 IOml蒸餾水，超聲萃取lOmin，然后放入90°C水浴鍋，熱水浸提ai，4000r/min離心lOmin， 獲得上清液。重復(fù)上述步驟一次，合并上清液，用于多糖檢測。3、樣品多糖測定1)樣液稀釋12. 5倍。2)用加樣搶精確吸取Iml稀釋后樣液，加入Iml蒸餾水，再加入5%苯酚溶液，搖勻。加入5ml98%濃硫酸。搖勻。冷卻至室溫后檢測。3)采用紫外可見分光光度計檢測，波長490nm。4、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精確吸取0. 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(A 液)0. 0，0. 1，0. 2,0. 3,0. 4,0. 5,0. 6,0. 7,0. 8， 0.9，1.0ml到試管中，試管編號為1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，其中1號試管為空白對照液。 分別加水至2. 0ml，分別精確加入5%苯酚溶液1. 0ml，搖勻迅速加入濃硫酸5. 0ml，搖勻，冷卻至室溫，用紫外可見分光光度法在490nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，葡萄糖的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程:y = 0. 1475 *x+0. 0226，R2 = 0. 9915。 質(zhì)量濃度在0. 1-0. 6mg/ml范圍內(nèi)相關(guān)性較好.5、計算公式多糖含量=a.C.V/Wa 稀釋倍數(shù)，C 由回歸方程計算得到的浸提液中糖濃度(mg ·πι 。)，V 體積(ml)； W:為樣品的重量(mg)。6、檢測結(jié)果
表1樣品測試結(jié)果
樣品吸光度稀釋倍數(shù)多糖含量(mg/g)標(biāo)準(zhǔn)差野生蟬花1.368，1.724， 1.75912.51221.6蟬擬青霉孢梗束2.961，3.122， 3.20212.52310.9表1中的結(jié)果證明本實施例中制得的蟬花培養(yǎng)產(chǎn)物中的多糖含量比野生蟬花高，且產(chǎn)物質(zhì)量穩(wěn)定，具有很高的實際應(yīng)用價值。實施例5、蟬擬青霉人工培養(yǎng)培養(yǎng)物對5/6腎切除大鼠模型的腎功能影響受試物實施例1的培養(yǎng)物(人工蟬花)。陽性對照藥科素亞，杭州默沙東制藥有限公司生產(chǎn)；天然蟬花，產(chǎn)地為浙江。實驗動物SPF級雄性SD大鼠70只，2月齡，體重200 士 10g，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。分組與造模SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機分成2組空白組(假手術(shù)組)8只和實驗組(手術(shù)組)62只。采用5/6腎大部分切除方法建立實驗大鼠模型第1次手術(shù)，手術(shù)組大鼠左腎總切除腎皮質(zhì)重量占左腎重量的2/3 ；7d后進行第2次手術(shù)，右腎全切。兩次手術(shù)供切除兩腎總重量的5/6。假手術(shù)組SD大鼠采用同樣步驟暴露腎臟，分離腎包膜，但不予腎切除。手術(shù)組動物存活M只，假手術(shù)組全部存活8只。于第2次手術(shù)后2周，所有動物行目內(nèi)眥動靜脈叢采血，進行血肌酐(kr)檢測。并將M只手術(shù)組大鼠，根據(jù)Scr分層隨機分成5組模型對照組(模型組)12只，科素亞組10只，天然蟬花組11只，人工蟬花大劑量組(A組)10 只，人工蟬花小劑量組(B組)11只?？扑貋喗M，天然蟬花組，人工蟬花大劑量組(A組)，人工蟬花小劑量組(B組)大鼠在第2次手術(shù)后4周開始喂藥，治療時間為42d。實驗結(jié)束時大鼠存活44只，假手術(shù)組、人工蟬花大劑量組(A組)各8只，模型組、科素亞組、天然蟬花組、人工蟬花小劑量組(B組)各7只。給藥劑量天然蟬花組、人工蟬花大劑量組(A組)大鼠按Ag^1-Cf1用量，人工蟬花小劑量組(B組)按2g · kg—1 · Cf1用量，加入飼料中給藥，并每日用生理鹽水灌胃1次；科素亞組大鼠采用灌胃法，按30mg · kg"1 · Cf1用量，溶于生理鹽水中，每日灌胃1次。所有大鼠分組分籠飼養(yǎng)，每籠4-5只大鼠，實驗期間全部大鼠自由飲水，進食市售塊狀顆粒普通飼料。測試儀器及方法實驗結(jié)束時檢測所有大鼠的kr、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)；收集24h尿液，測定尿蛋白定量。以上指標(biāo)采用日立7170型自動生化分析儀測定。以HE染色和PAS染色腎組織病理片檢查腎小球硬化，其中，腎小球硬化定義為毛細(xì)血管腔塌陷和/或玻璃樣變。采用Rajj等的半定量方法只評估腎小球硬化程度。在光鏡(X200)視野下，每張切片至少觀察40個腎小球，根據(jù)腎小球硬化灶所占腎小球比例分為0-++++，0表示腎小球無硬化，+表示1個腎小球的25%受損，++表示-50%受損， +++表示51% -75%受損，++++表示76% -100%受損。然后計算腎小球硬化指數(shù)(GSI)。采用SPSS Version 11. 0 for Windows進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(表示，組間比較采用One-Way ANOVA分析，統(tǒng)計顯著性水平為P < 0. 05。試驗結(jié)果結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠的kr、BUN值，各治療組較模型組顯著降低(P < 0. 05)，人工蟬花各組(大劑量組、小劑量組)與天然蟬花相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P >0.05)，大鼠的血白蛋白值，假手術(shù)組、科素亞組、天然蟬花組、人工蟬花大劑量組(A組)顯著升高(P<0. 05)，而人工蟬花大劑量組(A組)與天然蟬花組及假手術(shù)組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.(^)；大鼠的 24h尿蛋白量，各組與假手術(shù)組相比，均明顯增加(P <0.05)，但科素亞組、天然蟬花組、人工蟬花大劑量組(A組)與模型組相比較，則有明顯減少(P<0.05)。見表1。表1模型大鼠血液學(xué)及尿液檢測結(jié)果比較(無
權(quán)利要求
1.一種蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，包括如下步驟1)菌種制備包括斜面種制備和一級種制備過程；2)接種將步驟1)中制得的一級種接入到固體培養(yǎng)基中；3)發(fā)酵接種后的培養(yǎng)盒移至培養(yǎng)室內(nèi)，在20°C 25°C，相對濕度60% 80%的條件下培養(yǎng)30天 50天；4)孢梗束和菌質(zhì)的采收。
2.如權(quán)利要求1中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，步驟幻中，所述接種的步驟為當(dāng)培養(yǎng)盒中的固體培養(yǎng)基的溫度冷卻后，在無菌條件下接種，按照3 5%的接種量將一級種接入培養(yǎng)器皿中。
3.如權(quán)利要求1中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，步驟2)中，所述固體培養(yǎng)基中含有的組分名稱及各組分的重量份為基質(zhì) 42 46重量份；甘蔗渣 2 10重量份；貝殼粉 0.1 0.5重量份；蠶蛹粉 2 5重量份；硝酸鉀 0. 1 0. 5重量份；水44 56重量份；其中，所述基質(zhì)選自如下組合中的一種玉米粉、麩皮和蔗糖的混合物；小麥；大麥；粟和蔗糖的混合物；大米和蔗糖的混合物；高粱和蔗糖的混合物。
4.如權(quán)利要求3中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述玉米粉、麩皮和蔗糖的混合物中，以所述玉米粉、麩皮和蔗糖的混合物的總重量計，玉米粉、麩皮和蔗糖的重量百分比分別為玉米粉43% 55%、麩皮44% 55%、蔗糖1% 2%。
5.如權(quán)利要求3中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述粟和蔗糖的混合物中，以所述粟和蔗糖的混合物的總重量計，粟和蔗糖的重量百分比分別為粟98% 99%、蔗糖 2%。
6.如權(quán)利要求3中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述大米和蔗糖的混合物中，以所述大米和蔗糖的混合物的總重量計，大米和蔗糖的重量百分比分別為大米 98% 99%、蔗糖1% 2%。
7.如權(quán)利要求3中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述高粱和蔗糖的混合物中，以所述高粱和蔗糖的混合物的總重量計，高粱和蔗糖的重量百分比分別為高粱 98% 99%、蔗糖1% 2%。
8.如權(quán)利要求3-7中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述固體培養(yǎng)基的碳氮比為80 98。
9.如權(quán)利要求3-7中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述固體培養(yǎng)基中還含有蛋白胨，且所述蛋白胨的重量份為0. 5重量份。
10.如權(quán)利要求3-7中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，所述固體培養(yǎng)基的制備方法為先將玉米粉、麩皮或小麥、大麥、粟、大米、高粱煮熟，將蔗糖、硝酸鉀在水中溶解，再與甘蔗渣、貝殼粉，蠶蛹粉按照比例混合均勻。
11.如權(quán)利要求1中所述的蟬擬青霉人工培養(yǎng)的方法，其特征在于，步驟3)中，在固體發(fā)酵后期孢梗束生長階段要求采光，且環(huán)境溫度相較前期菌絲體生長階段需低2 3°C，培養(yǎng)過程中需保持空氣流通。
12.—種蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物，由蟬擬青霉經(jīng)權(quán)利要求1 11中任一權(quán)利要求中所述方法培養(yǎng)制得。
13.權(quán)利要求12中所述的蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物在制備食品、保健品、藥品和化妝品中的應(yīng)用。
14.權(quán)利要求13中所述蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物的應(yīng)用，其特征在于，所述食品、保健品、 藥品和化妝品包括蟬花茶、蟬酒、蟬花醬油、蟬花氨基酸調(diào)味品、蟬花咖啡、蟬花奶制品、蟬花糖果、蟬花蜂制品、蟬花膨化食品、蟬花口香糖、蟬花藥膳、蟬花孢子油、蟬花膠囊、蟬花飲片、蟬花沖劑、蟬花保健化妝品或蟬花飼料。
15.如權(quán)利要求13或14中任一權(quán)利要求中所述蟬擬青霉的培養(yǎng)產(chǎn)物的應(yīng)用，其特征在于，所述食品、保健品、藥品和化妝品具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、降血壓、明目、 抗輻射、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、滋補強壯或改善腎功能的功能。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蟬擬青霉人工栽培的方法及其培養(yǎng)物的應(yīng)用，經(jīng)過菌種制備、配料裝盒、滅菌、接種、固體發(fā)酵、采收等步驟大規(guī)模人工培養(yǎng)蟬擬青霉，采用玉米粉、麩皮、小麥、大麥、大米、粟、高粱等谷物與甘蔗渣、蔗糖、貝殼粉、蠶蛹粉、硝酸鉀為培養(yǎng)基培養(yǎng)蟬擬青霉，就地取材節(jié)約了大量生產(chǎn)成本，縮短了培養(yǎng)周期，而且培養(yǎng)所得的蟬花具有質(zhì)量高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。本發(fā)明所得的培養(yǎng)物可用于制備具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、降血壓、明目、抗輻射、解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、滋補強壯、改善腎功能等功能的食品、保健品、藥品、化妝品等。
文檔編號A23K1/16GK102242070SQ201110122468
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月14日
發(fā)明者孫長勝, 李成, 趙偉, 陳祝安 申請人:浙江泛亞生物醫(yī)藥股份有限公司