專利名稱：冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)，具體涉及冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草(Ophiocordysepes sinensis = Cordycepes sinensis (Berk.) Sacc.)
是寄生于蝙蝠蛾幼蟲上的真菌和蟲尸復(fù)合物。冬蟲夏草上的"草"，是該菌的有性器官-子 座，"蟲"，是其寄主蟲尸，內(nèi)為該菌的菌絲體-菌核。冬蟲夏草分離得的菌種，是冬蟲夏草的
無性型，菌種學(xué)名為中國被毛 包(Hirsutella sinensis Liu， Guo， Yu et Zeng)，俗稱冬蟲 夏草菌(真菌學(xué)報(bào)，1988， 8 (1) ， 35-40)。 冬蟲夏草菌的發(fā)酵生產(chǎn)，已有多篇專利報(bào)道。如申請(qǐng)?zhí)?7110448. 4,03131904. 1， 200410019092. 4,200410025517. 2， 200410101728. X， 200710142960. 1等。但上述專利描 述的都是中國被毛孢的液體發(fā)酵法，都需用10-50噸大型發(fā)酵罐，生產(chǎn)中還需不斷壓送無 菌空氣，能源耗損大，且另有廢棄醪液排放，有礙環(huán)境保護(hù)，發(fā)酵終產(chǎn)物為液體醪液，不易貯存。 申請(qǐng)?zhí)枮?3135622. 2的發(fā)明專利，提出了冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵生產(chǎn)法。該專利 用固體發(fā)酵罐來取代液體發(fā)酵罐，讓中國被毛孢在蔗糖、酵母和蠶蛹粉等固體基質(zhì)上生長， 其終產(chǎn)品為固體培養(yǎng)物，易貯存，生產(chǎn)中亦無廢液排放，但該法仍需用發(fā)酵罐，仍然需要向 罐內(nèi)壓送無菌空氣，能源耗損大。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于研究設(shè)計(jì)毋需壓縮空氣，亦無廢液排放，節(jié)能減 排，成本低廉的冬蟲夏草菌生產(chǎn)方法。 本發(fā)明提供了一種冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵生產(chǎn)方法。其特點(diǎn)是用中國被毛孢的液 體菌種，讓它在以谷物為基本料的固體基質(zhì)上發(fā)酵生長。
本發(fā)明方法具體包括下列步驟
—、液體菌種生產(chǎn) (1)菌禾中生產(chǎn)菌禾中為中國被毛抱Hirsutella sinensis Liu， Guo， Yu et Zeng， 可從天然冬蟲夏草分離而得，或從中國科學(xué)院微生物研究所或安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)經(jīng)濟(jì)昆蟲菌物 研究所購得，經(jīng)DNA指紋譜鑒定，應(yīng)與天然冬蟲夏草的相似率為95% -100% ;
(2)液體菌種生產(chǎn) ①.液體母種的培養(yǎng)取在14 1『C下培養(yǎng)2-3月的中國被毛孢菌苔，用無菌手 術(shù)刀切割成小塊，移入盛有100ml液體培養(yǎng)基的250ml錐形瓶中，在轉(zhuǎn)速為80 200rpm的 旋轉(zhuǎn)式或往復(fù)式搖瓶機(jī)上振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為14 18°C ， 2 3周后，即可獲得冬蟲夏草 菌的液體母種； ②.液體菌種的擴(kuò)大生產(chǎn)將冬蟲夏草菌的液體母種，移植到2 3倍量(V/V)的 液體培養(yǎng)基中，在溫度為14 18t:，轉(zhuǎn)速為80 200rpm的旋轉(zhuǎn)式或往復(fù)式搖瓶機(jī)上繼續(xù)振蕩培養(yǎng)6 8天，即得冬蟲夏草菌的液體菌種(圖1)。此液體菌種還可進(jìn)一步擴(kuò)大移植 到2 3倍量(v/v)的液體培養(yǎng)基中。擴(kuò)大培養(yǎng)所用的錐形瓶容量，可達(dá)500至5000ml，培 養(yǎng)條件同上。 冬蟲夏草菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，也可在血清瓶(10升)中進(jìn)行。用血清瓶培養(yǎng)時(shí)所需的 無菌空氣，可由市售的小型空氣壓縮機(jī)經(jīng)空氣過濾器過濾而得。通氣量是液體培養(yǎng)基體積 的0. 2 1. 0/分(v/v); 生產(chǎn)冬蟲夏草菌液體菌種的培養(yǎng)基，由碳源、氮源、礦物質(zhì)、復(fù)合營養(yǎng)成分、維生 素和水組成；其中碳源為下列一種或幾種成分蕈糖、蜂蜜、糖蜜和葡萄糖，含量為2. 0 4. 0% w/v ;氮源為下列一種或多種成分蛋白腺、酵母浸出粉、蠶蛹粉或奶粉，含量為0. 1 3. 0% w/v ;礦物元素為磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀或硫酸鎂，含量為0. 01 0. 1% w/v ;復(fù)合
營養(yǎng)成分為下列一種或多種成分菇蕈、米麩、麥麩、玉米，含量為1. 0 10. 0% W/V ;維生
素為硫胺素，含量為0. 001 0. 01% w/v ;水為飲用水，含量為83 97% w/v。液體培養(yǎng)基 的pH值為6. 0 7. 0 ;
二、固體發(fā)酵生產(chǎn)
(1)固體發(fā)酵的培養(yǎng)基 冬蟲夏草菌固體發(fā)酵的培養(yǎng)基由谷物、輔料和水組成。 所述谷物為大米、小米、玉米、小麥、大麥或蕎麥的一種或多種，含量為固體發(fā)酵培 養(yǎng)基的35 40% w/w ;輔料為下列一種或多種蠶蛹粉、麥麩或玉米粉，含量為固體發(fā)酵培 養(yǎng)基的5 15% w/w ;水為飲用水，含量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基的50 55% w/v ;
(2)滅菌將上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基裝入容器(玻瓶或耐熱塑料袋)內(nèi)，在l. 1KG/ cm2下蒸汽滅菌30-60分鐘； (3)接種將步驟一得到的冬蟲夏草菌液體菌種灌注入上述經(jīng)滅菌並冷卻的固體 發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基干重的10 50%，接種后應(yīng)及時(shí)攪拌或翻動(dòng)，使 液體菌種均勻分散在固體培養(yǎng)基上； 或采用拌種法，即液體菌種和固體發(fā)酵培養(yǎng)料的拌和，是在攪拌器中完成的，所 述攪拌器外形為圓筒形或圓錐形，直徑60cm，長120cm，上有投料口 ，下有出料口 ，可封閉， 可耐1. 1Kg/cm2壓力，能通入蒸汽滅菌，單層或具夾套，攪拌器中央有攪拌軸，能將液體菌 種和固體培養(yǎng)料拌和均勻，并能將此拌和料分批推送至發(fā)酵袋內(nèi)，拌種時(shí)的液體菌種用量 為每100Kg固體發(fā)酵培養(yǎng)料(以濕重計(jì))拌入液體菌種10±2L ; (4)發(fā)酵培養(yǎng)和采收瓶或袋內(nèi)的固體培養(yǎng)料，當(dāng)接入液體菌種后即可移入發(fā)酵 室中進(jìn)行培養(yǎng)。發(fā)酵室的室溫為12 18°C ，相對(duì)濕度為65± 10% ，袋/瓶內(nèi)的品溫為14 16°C。當(dāng)發(fā)酵培養(yǎng)8 12周后，培養(yǎng)物表面的菌絲體色澤由白色轉(zhuǎn)為黃褐色，這時(shí)發(fā)酵培 養(yǎng)已成熟，即可采收。(圖2、圖3) (5)冷凍干燥培養(yǎng)成熟的固體發(fā)酵培養(yǎng)物，可按下列步驟作冷凍真空干燥；干燥 品再經(jīng)粉碎、過篩，即得冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵菌粉。 ①.冷凍將新鮮的固體發(fā)酵培養(yǎng)物在-20 _301:下冷凍1 4h ; ②.升華干燥在真空度為30 60Pa，冷阱溫度為-40 -2(TC下升華干燥，時(shí)間
4 7h ; ③.解吸干燥在真空度為10 40Pa，冷阱溫度為_20 4(TC下作解吸干燥，直至培養(yǎng)物中的含水量下降至3 5%。 對(duì)冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)物作冷凍真空法干燥，能最大限度地保持冬蟲夏草 菌的生理活性，且含水量低，可長期保藏。 (6)檢驗(yàn)用本發(fā)明生產(chǎn)的固體發(fā)酵菌粉，經(jīng)HPLC檢測，其腺苷Adenosine)、鳥苷 (Guanosine)、肌苷(Inosine)、尿苷(Uridine)和胞苷(Cytidine)的色譜峰，與天然冬蟲夏 草的相應(yīng)色譜峰重疊一致。(圖4) 本發(fā)明取用冬蟲夏草菌的發(fā)酵醪液作液體菌種，利用了液體菌種流動(dòng)性好，培養(yǎng) 時(shí)間短，活力強(qiáng)、污染少的優(yōu)點(diǎn)。同時(shí)，又讓冬蟲夏草菌在谷物等基質(zhì)上進(jìn)行固體發(fā)酵。生 產(chǎn)中無需大型發(fā)酵設(shè)備，亦無廢料排放。節(jié)能減排，友好環(huán)境，成本低廉。
本發(fā)明綜合了液體發(fā)酵和固體發(fā)酵的雙重優(yōu)點(diǎn)，其終產(chǎn)品為富含冬蟲夏草菌的谷 物，可直接用作加工食品的原料。


圖1.冬蟲夏草菌的液體菌種。 圖2.用液體菌種為種子的固體發(fā)酵培養(yǎng)物，瓶裝。
圖3.用液體菌種為種子的固體發(fā)酵培養(yǎng)物，袋裝。 圖4.天然冬蟲夏草(上)和冬蟲夏草菌固體發(fā)酵菌粉(下)的HPLC色譜圖。 兩者的腺苷(Adenosine)、鳥苷(Guanosine)、肌苷(Inosine)、尿苷(Uridine)和胞苷 (Cytidine)色譜峰，完全重疊一致。
具體實(shí)施方式

實(shí)施例1
—.菌種制備 1.菌禾中生產(chǎn)菌禾中為中國被毛孢(Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu et Zeng)，
從中國科學(xué)院微生物研究所或安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)經(jīng)濟(jì)昆蟲菌物研究所等單位購得，經(jīng)DNA檢
測，其RDNA核苷酸序列和天然冬蟲夏草的相似率99% ; 2.菌種的擴(kuò)大繁殖 (1).瓊脂斜面瓊脂斜面培養(yǎng)基配方 蕈糖20g，蛋白胨3g，酵母浸出粉2g，磷酸二氫鉀0. 5g，硫酸鎂0. 3g，瓊脂20g，水
1000ml， p朋.5，待瓊脂溶化后分裝入100ml小三角瓶中，每瓶裝培養(yǎng)基50ml，滅菌121°C，
25分鐘。用中國被毛孢yy0701菌株接種，16。C下培養(yǎng)70天； *蕈糖，又名海藻糖，英文名Trehalose，該糖在昆蟲和藻類中普遍存在 (2).搖瓶培養(yǎng) 培養(yǎng)基配方取香菇100g，麥麩10g，蠶蛹粉10g和玉米粉10g，加水1000ml，煮沸， 維持20分鐘。用布過濾，取濾汁，並定容至1000ml。在上述濾汁中另加蕈糖10g，蛋白胨 5g，酵母浸出粉2g，磷酸二氫鉀0. 5g，硫酸鎂0. 2g及硫胺素15mg。溶解並混和后，用lMol 氫氧化納溶液調(diào)pH至6. 8 ; 分裝和滅菌將上述培養(yǎng)液分裝入500ml園錐瓶內(nèi)，裝量100ml/瓶，滅菌121°C 下30分鐘;
接種與培養(yǎng)取在16t:下已培養(yǎng)70天的中國被毛孢菌苔(約2平方厘米大)，用 手術(shù)刀切割成10 20個(gè)小塊。然后移入上述搖瓶培養(yǎng)基中，在頻率為150rpm，溫度為17°C 下，振蕩培養(yǎng)20天。這時(shí)培養(yǎng)液中已長滿菌絲小球，醪液靜置后不分層，即可作為液體母 種，進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖。方法是將上述液體母種，移植至裝量為200ml的500ml圓錐瓶中，即 總量為300ml的醪液中含液體母種100ml，接種量為33%。培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件同上，振蕩培 養(yǎng)6天后即得冬蟲夏草菌的液體菌種；
二、固體發(fā)酵生產(chǎn)
1.固體發(fā)酵配方及裝袋 配方秈大米100Kg、玉米粉10Kg，搖瓶培養(yǎng)基80L， 裝瓶將上述配方經(jīng)混和后，分裝入耐熱塑料袋中，裝量每袋2Kg ; 滅菌121。C，35分鐘； 2.接種將上述冬蟲夏草菌液體菌種，用灌注法接入上述已經(jīng)滅菌并冷卻至室溫 的固體發(fā)酵袋中，每袋灌入液體菌種150ml，並隨即將袋內(nèi)培養(yǎng)物倒轉(zhuǎn)或側(cè)向翻動(dòng)5次，使 液體菌種能均勻地分散在米粒基質(zhì)上，然后移入發(fā)酵室中培養(yǎng)。整個(gè)接種和翻動(dòng)可在自動(dòng) 流水綫上進(jìn)行。 3.培養(yǎng)、采收冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵室，其室溫應(yīng)控制在為16士2t:，相對(duì)濕度 在65±10% ;袋內(nèi)品溫在15±2°C。發(fā)酵培養(yǎng)3周后，米?；|(zhì)上已長滿中國被毛孢菌絲 體，培養(yǎng)8周后，培養(yǎng)物表面的菌絲體色澤已由白色轉(zhuǎn)為黃褐色。 4.冷凍真空干燥將上述發(fā)酵成熟的培養(yǎng)物，先在-20 -3(rC下冷凍3h，然后置 真空度為40Pa，冷阱溫度為-3(TC下升華干燥，8h后繼續(xù)在真空度為15Pa下解吸干燥，直至 培養(yǎng)物中的含水量下降到5%。干燥物經(jīng)粉碎並通過3號(hào)藥篩后，即得冬蟲夏草菌的固體發(fā) 酵菌粉100Kg ; 5.檢驗(yàn)將冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵菌粉用HPLC儀測定，其腺苷、鳥苷、胞苷、肌苷、
和尿苷的色譜峰，應(yīng)和天然冬蟲夏草的相應(yīng)色譜峰}疊合一致。
實(shí)施例2 本實(shí)施例中的菌種制備和液體菌種生產(chǎn)方法，均同實(shí)施例1。但在固體發(fā)酵生產(chǎn) 項(xiàng)下的接種方式，采用拌種法，即液體菌種和固體發(fā)酵培養(yǎng)料的拌和，是在攪拌器中完成 的，所述攪拌器外形為圓筒形或圓錐形，直徑60cm，長120cm，上有投料口 ，下有出料口 ，可 封閉，可耐1. 1Kg/cm2壓力，能通入蒸汽滅菌，單層或具夾套，攪拌器中央有攪拌軸，能將液 體菌種和固體培養(yǎng)料拌和均勻，并能將此拌和料分批推送至發(fā)酵袋內(nèi)，拌種時(shí)的液體菌種 用量為每100Kg固體發(fā)酵培養(yǎng)料(以濕重計(jì))拌入液體菌種10±2L ;固體發(fā)酵用的塑料 袋(發(fā)酵袋)大20X40cm，事先應(yīng)用r射線輻照滅菌。拌種后的固體發(fā)酵培養(yǎng)料(拌和料) 裝入發(fā)酵袋的量為5士0，2Kg/袋(以濕重計(jì))。然后扎口，並運(yùn)送至固體發(fā)酵培養(yǎng)室培養(yǎng)， 其培養(yǎng)條件、采收和檢測標(biāo)準(zhǔn)，同實(shí)施例1。 本實(shí)施例因采用拌和法接種，中國被毛孢菌絲體在谷粒培養(yǎng)基上分布更均勻，發(fā) 酵周期比灌注接種法可縮短1 2周。
實(shí)施例3 本實(shí)施例中的菌種制備和固體發(fā)酵生產(chǎn)方法同實(shí)施例2，但液體菌種的擴(kuò)大改用 大容量的血清瓶培養(yǎng)。方法和步驟如下
7
取在16t:下巳培養(yǎng)90天的中國被毛孢菌苔(約3平方厘米大)，用手術(shù)刀切割成 10 20個(gè)小塊，移入裝有200ml液體培養(yǎng)基的500ml園錐瓶中，經(jīng)搖瓶培養(yǎng)得中國被毛孢 的液體母種； 2.取上述兩瓶500ml園錐瓶中的400ml液體母種，移入內(nèi)裝液體培養(yǎng)基1000ml 的1500ml大園錐瓶中.接種量為28% .然后置往復(fù)式搖床上振蕩培養(yǎng)，振幅8cm，頻率為 80 100次/分；培養(yǎng)溫度為16士2t:，振蕩培養(yǎng)6 7天后，每瓶大園錐瓶中即可得中國 被毛孢搖瓶種子1. 4L ; 3.上述搖瓶種子可進(jìn)一步在容量為10升的血清瓶中擴(kuò)大培養(yǎng).每10L容量的 血清瓶中裝液體培養(yǎng)基6L，用2瓶振蕩培養(yǎng)所得的液體菌種(共2. 8L)接種，即接種量為 32%。 4.將上述接種了液體菌種的血清瓶，移入室溫為16士2t:，相對(duì)濕度為65±10% 的培養(yǎng)室內(nèi)，並向血清瓶內(nèi)通入無菌空氣。無菌空氣是由醫(yī)用小型空氣壓縮機(jī)將空氣經(jīng)空 氣過濾器除菌后獲得的。每臺(tái)小型空氣壓縮機(jī)可為3 10個(gè)血清瓶提供無菌空氣。通氣 量為醪液體積的0. 5 1. 0(v/v)/min。通氣培養(yǎng)6 8天后，每個(gè)血清瓶即可生產(chǎn)得冬蟲 夏草菌液體菌種8. 8L.每5 6個(gè)血清瓶的液體菌種生產(chǎn)量，相當(dāng)于一只100立升種子罐 的液體菌種生產(chǎn)量，可足夠供應(yīng)生產(chǎn)冬蟲夏草菌固體發(fā)酵菌粉300Kg。
權(quán)利要求
一種冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵法，其特征在于該方法包括下列步驟一、液體菌種生產(chǎn)(1)菌種生產(chǎn)菌種為中國被毛孢Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu etZeng；菌種經(jīng)DNA指紋譜鑒定，與天然冬蟲夏草的相似率為95％-100％；(2)液體菌種生產(chǎn)①液體母種的培養(yǎng)取在14～18℃下培養(yǎng)2-3月的中國被毛孢菌苔，切成小塊，移入盛有100ml液體培養(yǎng)基的250ml錐形瓶中，在轉(zhuǎn)速為80～200rpm的旋轉(zhuǎn)式或往復(fù)式搖瓶機(jī)上振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為14～18℃，2～3周后，即可獲得冬蟲夏草菌的液體母種；②液體菌種的擴(kuò)大生產(chǎn)將冬蟲夏草菌的液體母種，移植到2～3倍量v/v的液體培養(yǎng)基中，繼續(xù)在溫度為14～18℃，轉(zhuǎn)速為80～200rpm的旋轉(zhuǎn)式或往復(fù)式搖瓶機(jī)上振蕩培養(yǎng)6～8天，即得冬蟲夏草菌的液體菌種；所述液體培養(yǎng)基由碳源、氮源、礦物質(zhì)、復(fù)合營養(yǎng)成分、維生素和水組成；其中碳源為下列一種或多種成分蕈糖、蜂蜜、糖蜜和葡萄糖，含量為2.0～4.0％w/v；氮源為下列一種或多種成分蛋白胨、酵母浸出粉、蠶蛹粉或奶粉，含量為0.1～3.0％w/v；礦物元素為磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀或硫酸鎂，含量為0.01～0.1％w/v；復(fù)合營養(yǎng)成分為下列一種或多種成分菇蕈、米麩、麥麩、玉米，含量為1.0～10.0％w/v；維生素為硫胺素，含量為0.001～0.01％w/v；水為飲用水，含量為83～97％w/v；液體培養(yǎng)基的pH值為6.0～7.0；二、固體發(fā)酵生產(chǎn)(1)固體發(fā)酵的培養(yǎng)基固體發(fā)酵的培養(yǎng)基由谷物、輔料和水組成；所述谷物為大米、小米、玉米、小麥、大麥或蕎麥的一種或多種，含量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基的35～40％w/w；輔料為下列一種或多種蠶蛹粉、麥麩或玉米粉，含量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基的5～15％w/w；水為飲用水，含量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基的50～55％w/v；(2)滅菌將上述固體發(fā)酵培養(yǎng)基裝入容器內(nèi)，在1.1KG/cm2下蒸汽滅菌30～60分鐘；(3)接種將步驟一所得的冬蟲夏草菌液體菌種，灌注入上述已經(jīng)滅菌並冷卻的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為固體發(fā)酵培養(yǎng)基干重的10～50％v/w；(4)發(fā)酵培養(yǎng)和采收冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)，其室溫控制在12～18℃，料溫控制在14～18℃，相對(duì)濕度在65±10％，經(jīng)8～12周發(fā)酵培養(yǎng)后，培養(yǎng)物表面的菌絲體色澤由白色轉(zhuǎn)為黃褐色，這時(shí)發(fā)酵培養(yǎng)已成熟，即可取出作冷凍真空干燥；(5)冷凍干燥冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)物，可用冷凍真空干燥法干燥，干燥物經(jīng)粉碎、過篩，即得冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵菌粉。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其中步驟一 (2)冬蟲夏草菌液體菌種的生產(chǎn)，用血清瓶作通氣培養(yǎng)，通氣量為i : o.2 i : lv/v。
3. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，所述步驟二 (3)采用拌種法，即液體菌種和固體發(fā)酵 培養(yǎng)料的拌和，是在攪拌器中完成的；所述攪拌器外形為圓筒形或圓錐形，上有投料口 ，下 有出料口 ，可封閉，可耐1. 1Kg/cm2壓力，能通入蒸汽滅菌，單層或具夾套，攪拌器中央有攪 拌軸，能將液體菌種和固體培養(yǎng)料拌和均勻，并能將此拌和料分批推送至發(fā)酵袋內(nèi)；拌種時(shí) 的液體菌種用量為每100Kg固體發(fā)酵培養(yǎng)料以濕重計(jì)拌入液體菌種10士2L。
4.根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其中步驟二 (4)，固體發(fā)酵培養(yǎng)物的冷凍真空干燥，通過下列步驟依次進(jìn)行(1) 冷凍將新鮮的固體發(fā)酵培養(yǎng)物在-20 -3(TC下冷凍，時(shí)間1 4h ;(2) 升華干燥在真空度為30 60Pa，冷阱溫度為-40 -2(TC下升華干燥，時(shí)間4 7h ;(3) 解吸干燥在真空度為10 40Pa，冷阱溫度為-20 4(TC下作解吸干燥，直至培 養(yǎng)物中的含水量下降至3 5%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種冬蟲夏草菌的固體發(fā)酵法。本法采用生產(chǎn)菌種為中國被毛孢Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu et Zeng的液體發(fā)酵醪液作液體菌種，通過灌注或拌和接種，讓冬蟲夏草菌在以谷物為基質(zhì)的固體培養(yǎng)基上發(fā)酵生產(chǎn)。本法綜合了液體發(fā)酵和固體發(fā)酵的雙重優(yōu)點(diǎn)。既有菌種培養(yǎng)時(shí)間短、活力強(qiáng)、流動(dòng)性好、發(fā)育點(diǎn)多的優(yōu)點(diǎn)，又具有生產(chǎn)設(shè)備投資小、能耗低、無廢液排放、產(chǎn)品易貯存等特點(diǎn)。本發(fā)明的終產(chǎn)品，為富含冬蟲夏草菌的谷物?？芍苯幼鳛楸＝∈称返脑蠎?yīng)用。
文檔編號(hào)C05G1/00GK101695257SQ20091019795
公開日2010年4月21日 申請(qǐng)日期2009年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月30日
發(fā)明者楊慶堯 申請(qǐng)人:上海芝草生物技術(shù)有限公司;