專利名稱：：單葉省藤無性系組培快繁方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種單葉省藤無性系組培快繁方法，適用于棕櫚科省藤屬植物組培快繁。屬于無性系植物組培
技術領域：
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背景技術：
：單葉省藤(C"/amwsw'w///"yb/z'w:sWei.)是棕櫚科(Palmae)省藤亞科(Calamoideae)省藤族(Calameae)省藤屬(Calamus)的具剌、攀緣、叢生藤本植物，是華南熱帶、南亞熱帶地區(qū)森林特有的伴生植物。藤莖具有良好的工藝特性，是制作家具和工藝品的優(yōu)良原料。藤嫩梢富含人體所需的多種營養(yǎng)成分，可做蔬菜食用。種子質地堅硬，是制作"佛珠"的傳統(tǒng)材料。因此，單葉省藤是具有較高經(jīng)濟價值和開發(fā)前景的多用途珍貴森林植物，也是華南地區(qū)廣泛栽培的主要商品藤種。目前，海南、廣東、廣西、福建等省區(qū)已大面積栽培單葉省藤?，F(xiàn)有技術中，單葉省藤主要采用種子繁殖，有關種子貯藏、播種、容器育苗、苗木病蟲害的防治等均有詳細的研究報道，育苗技術已成功用于造林苗木的培育。但是，單葉省藤種子在常規(guī)室溫條件下不耐貯藏，即使在恒溫(15°C)、恒濕(介質含水率保持在50%65%)的最佳貯藏條件下貯藏六個月，發(fā)芽率也僅能維持在65%左右。單葉省藤的最適采種季節(jié)為每年的10月份12月份，由于該季節(jié)濕度小，室溫條件下種子容易失水，從而迅速失去發(fā)芽能力，給種子繁殖增加了新的難度。而且，種子繁殖只能繁殖常規(guī)苗木，不能繁殖無性系苗木。由于單葉省藤為異花授粉植物，且馴化程度不高，所以天然林和現(xiàn)有人工林中的單葉省藤的雜合程度高，種子繁殖的苗木造林后，在生長、萌蘗、材性等方面分化大，既不利于平均產(chǎn)量的提高，也不利于藤林的集約化經(jīng)營和藤條采收與銷售。由于林木基因組雜合程度高，實生苗造林分化大，林木育種通常是走無性系育種的道路，即從育種群體中選出優(yōu)樹，然后通過無性繁殖的方法繁殖良種?，F(xiàn)有只能以種胚為外植體的組培技術尚無法滿足無性系育種和無性系推廣的要求。如果不解決單葉省藤無性系組培快繁的技術問題，將嚴重制約單葉省藤無性系育種、良種的中試和良種的推廣。上世紀九十年代開始，中國林業(yè)科學研究院熱帶林業(yè)研究所開始研究單葉省藤的組培快繁技術。但棕櫚科植物組培技術研究難度大，經(jīng)過兩個五年計劃的研究，也只能以種胚作外植體才能組培快繁成功，而用頂芽、萌蘗芽、根、葉等無性器官做外植體，則不能組培快繁成功。因而，原有的藤組培技術僅局限于種苗繁殖，即通過組織培養(yǎng)工廠化快繁苗木，但仍然不能繁殖無性系苗木。由于原有組培技術以種胚做外植體，繁殖材料的遺傳.基礎無法完全控制，繁殖的苗木與種子繁殖的苗木相比沒有品質差別，但組培繁育苗木的成本比種子繁育苗木要高，難以與種子繁育的苗木在市場上競爭，因而原有以種胚外植體的組培技術的應用前景不大。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的，是為了克服種子繁殖的苗木造林后，在生長、萌蘗、材性等方面分化大的缺點，提供一種單葉省藤無性系組培快繁方法。本發(fā)明的目的可以通過采取如下措施達到一種單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是利用單葉省藤萌蘗芽等無性器官進行組培快繁，具體步驟如下1)采集萌蘗芽外植體在連續(xù)晴天35天后用鋸將萌蘗芽從母株上鋸下來；在鋸萌蘗芽外植體的過程中，必須防止芽體外傷和芽心震裂；2)外植體的消毒采用兩次消毒法，第一步，首先將外植體清洗干凈，剝去23層葉鞘，用75°/。酒精消毒2025秒，然后用0.1%氯化汞消毒1012分鐘，用無菌水漂洗1次10分鐘；第二步，再剝去12層葉鞘并修剪至34cm長，用0.1%氯化汞消毒12分鐘，再用無菌水漂洗3次，第人分別為5分鐘，5分鐘，IO分鐘；3)防止褐變采用半光氨酸或抗壞血酸或者二者結合對萌蘗芽外植體萌蘗芽外植體進行抗褐變處理，半光氨酸和抗壞血酸的.濃度分別為3mg/1和10mg/l;4)叢芽誘導與增殖培養(yǎng)外植體采集并消毒后，首先在叢芽誘導培養(yǎng)基上誘導形成叢芽，誘導周期為35個月，中途需要轉接與更換新鮮培養(yǎng)基23次；形成叢芽后，轉接到增殖培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)，一次增殖培養(yǎng)的周期為4550天；將大的叢芽切分成34個芽組成的小芽叢，轉接到新鮮增殖培養(yǎng)基上進行下一次增殖培養(yǎng)，經(jīng)過多次增殖培養(yǎng)即可將無性系苗木擴繁。5)生根培養(yǎng)對高度大于或等于3.0cm的芽苗在生根培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)的時間可以為5060天，一次生根率可達85%以上；對未生根的芽苗在除去12層外層葉鞘和對基部進行修剪后，進行第二次生根培養(yǎng)，即可生根；對高度小于3.0cm的芽苗，先進行壯苗培養(yǎng)，讓芽苗生長至3.0cm或以上高度，再進行生根培養(yǎng)；6)田間移植高度大于8.0cm、根長度大于4.0cm、具有3片以上葉片的苗木最適合移植。適合單葉省藤組培苗移植的介質有細沙、泥炭土和黃心土，也可以將三者按l:1:2的比例混合，作為單葉省藤組培苗的移植介質。移植介質以1/1000的高錳酸鉀溶液消毒，移植后每個星期用1/800的百菌清和多菌靈輪流噴施，防止雜菌滋生。移植后15天開始施肥，采用1/1000的復合肥溶液每1周噴施一次。移植后17天，95%的遮蔭網(wǎng)遮蔭，830天，85%的遮蔭網(wǎng)遮蔭，3160天，70%的遮蔭網(wǎng)遮蔭，隨后采用50%遮蔭網(wǎng)遮蔭，一直管理到苗木出圃造林。移植成活率大于85%。本發(fā)明的目的還可以通過采取如下措施達到本發(fā)明的一種實施方式是第l)步采集萌蘗芽外植的高度可以為2545cm。本發(fā)明的一種實施方式是在第4)步叢芽誘導與增殖培養(yǎng)之后，當芽苗生長不到生根所需要的3.0cm高時，先在壯苗培養(yǎng)基進行壯苗培養(yǎng)，讓芽苗生長到適合生根培養(yǎng)的高度。本發(fā)明的一種實施方式是在進行第4)步叢芽誘導時，將芽傾斜或平放，使之整體接觸培養(yǎng)基，以促進芽的生長，促進二級蘗芽的萌發(fā)，促進增殖。本發(fā)明的一種實施方式是在進行第5)步生根培養(yǎng)時，可以將芽苗高度和大小接近的24個芽切分在同一小芽叢，轉接到生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，移植后即可培育成叢芽苗。本發(fā)明的一種實施方式是可以在311月移植單葉省藤組培苗，其中36月份為單葉省藤組培苗的最佳移植季節(jié)，且溫度、濕度均適合苗木的進一步培養(yǎng)，達到造林高度和要求。.本發(fā)明的一種實施方式是叢芽誘導培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分、植物激素和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、維生素C和半胱氨酸，植物激素包括6-BA、IBA、NAA、KT和2，4-D;各組份的含量參見表l，叢芽誘導培養(yǎng)基的pH值為5.8。本發(fā)明的一種實施方式是增殖培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分、植物激素和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、維生素C和半胱氨酸，植物激素包括6-BA、IBA、NAA、KT和2，4-D;各組份的含量參見表l，增殖培養(yǎng)基的pH值為5.8。本發(fā)明的一種實施方式是壯苗培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H。2、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、維生素C和半胱氨酸；各組份的含量參見表l，壯苗培養(yǎng)基的pH值為5.8。本發(fā)明的一種實施方式是生根培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分、植物激素和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸和肌醇，植物激素包括IBA和NAA;各組份的含量參見表l，生根培養(yǎng)基的pH值為5.8。本發(fā)明具有如下有益效果1、本發(fā)明是利用萌蘗芽等無性器官進行組培快繁，解決單葉省藤無性系組培快繁的技術難題，擴大單葉省藤組培技術的應用范圍，使它能用于單葉省藤的無性系育種和良種苗木的快繁，通過單葉省藤優(yōu)良無性系苗木的快繁，既可促進棕櫚藤人工種植業(yè)的發(fā)展，又可獲取良好的經(jīng)濟效益。2、與原有種子育苗相比，本發(fā)明具有種苗繁殖速度快、種苗生產(chǎn)不易受到季節(jié)影響的優(yōu)點。與已發(fā)表的以種胚為外植體的組培技術相比，本發(fā)明具有能夠繁殖優(yōu)良無性系的優(yōu)點。本方法以萌蘗芽做外植體，可以繁殖經(jīng)過選育和測定的優(yōu)良無性系，生產(chǎn)的是良種的苗木，具有強大的市場競爭力，因而本技術具有廣闊的應用前景，可產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益。具體實施例方式下面結合具體實施例對本發(fā)明進行詳細描述。本發(fā)明涉及的單葉省藤無性系組培快繁，具體方法可以按如下步驟進行1)萌蘗芽外植體的采集采集萌蘗芽外植體的關鍵在于防止芽體外傷和芽心的震裂。如果芽體有傷口，泥土容易進入芽體內部，無法消毒成功。芽心震裂后，傷口處即迅速褐變，易導致芽心的死亡。因而，不能用鋤頭將萌蘗芽挖離母株，也不能用刀砍，必須用鋸將萌蘗芽從母株上鋸下來。萌蘗芽處于土壤之中，必須盡量避免在雨天及雨后13天內采集。否則，污染率明顯上升。適宜的萌蘗芽外植體的大小為2545cm高。萌蘗芽過小，外植體消毒后易死亡，且沒有形成足夠的次級萌蘗芽原基，離體培養(yǎng)后容易出現(xiàn)持續(xù)的單芽高生長但不萌發(fā)次級萌蘗芽的現(xiàn)象。萌蘗芽過大，尤其是超60cm后，萌蘗芽已開始抽莖，莖尖不在基部。要保留莖尖，則外植體過大，養(yǎng)分吸收供應不上，莖尖無法生長，且露出在培養(yǎng)基外面的部分褐變嚴童，最終導致整個芽的死亡。不保留莖尖，外植體因缺乏莖尖，其次級蘗芽難以萌發(fā)。外植體的采集季節(jié)對消毒成功率、芽的生長和叢芽的誘導均有顯著的影響。從2月至9月的各個月采集的外植體表明23月初和9月份采集的外植體，因土壤干燥，容易消毒成功，48月份雨水較多，溫度較高，雨后采集的外植體難以消毒成功。但23月份和9月份采集外植體在培養(yǎng)基上長時間不生長，難以誘導叢芽。盡管48月份采集的難以消毒成功，但外植體容易萌發(fā)，其基部的次級蘗芽也易萌發(fā)，從而容易增殖。因此，46月份適宜于采集萌蘗芽外植體。2)外植體的消毒針對萌蘗芽外植體的芽心被多層葉鞘包裹的特點，采用兩次消毒法。首先，用洗衣粉將外植體清洗干凈，剝去23層葉鞘，75%酒精消毒20~25秒，0.1%氯化汞消毒1012分鐘，無菌水漂洗1次10分鐘，再剝去12層葉鞘并修剪至適合于培養(yǎng)的34cm長，0.1%氯化汞消毒12分鐘，無菌水漂洗3次，分別為5分鐘，5分鐘，IO分鐘。消毒成功率大于35%。3)防止褐變棕櫚藤萌蘗芽外植體消毒后褐變十分嚴重，不加處理會迅速死亡。經(jīng)過系列研究發(fā)現(xiàn)，采用暗處理、附加活性碳等方法難以達到預期效果，使用聚乙烯吡咯垸酮則會導致外植體產(chǎn)生嚴重的白色分泌物，采用半光氨酸和抗壞血酸可以有效地抑制芽外植體的褐變，二者結合效果更好。適宜于防止萌蘗芽外植體抗褐變的半光氨酸和抗壞血酸的濃度分別為3mg/1和10mg/l。4)叢芽誘導與增殖培養(yǎng)外植體采集并消毒后，首先在叢芽誘導培養(yǎng)基上誘導形成叢芽，誘導周期為35個月，中途需要轉接與更換新鮮培養(yǎng)基23次，外植體的叢芽誘導率約15%。形成叢芽后，轉接到增殖培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)的周期為4550天，增殖倍數(shù)為34倍。將大的叢芽切分成34個芽組成的小芽叢，轉接到新鮮增殖培養(yǎng)基上進行下一次增殖培養(yǎng)，經(jīng)過多次增殖培養(yǎng)即可將無性系苗木擴繁。叢芽誘導培養(yǎng)基的配方和增殖培養(yǎng)基的配方見表1。叢芽誘導時，接種與培養(yǎng)方法對萌蘗芽外植體的叢芽誘導也有一定的影響。外植體消毒后，基部0.20.5cm因殺傷和褐變而死亡，死亡部分嚴重影響營養(yǎng)的吸收，必須將芽傾斜或平放，使之整體接觸培養(yǎng)基，可顯著提促進芽的生長，促進二級蘗芽的萌發(fā)，從而促進增殖。5)壯苗培養(yǎng)在增殖培養(yǎng)基上，大部分的芽苗生長不到生根所需要的3.0cm高，因此對于高度小于3.0cm的芽苗需要進行壯苗培養(yǎng)，讓芽苗生長到適合生根培養(yǎng)的高度。壯苗培養(yǎng)基的配方見表1。壯苗培養(yǎng)的時間需要4550天，經(jīng)過1次壯苗培養(yǎng)后75%以上的芽苗可達到生根培養(yǎng)所需要的高度。未達到生根培養(yǎng)高度的芽苗需要進行第二次壯苗培養(yǎng)。6)生根培養(yǎng)高度大于3.0cm的芽苗最為適合生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基的配方見表1。生根培養(yǎng)的時間需要50~60天，生根率可達85%以上。未生根的芽苗在除去12層外層葉鞘和對基部進行修剪后，進行第二次生根培養(yǎng)，即可生根。如果想培育叢芽苗，可以將芽苗高度和大小接近的24個芽切分在同一小芽叢，轉接到生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，移植后即可培育成叢芽苗。7)田間移植高度大于8.0cm、根長度大于4.0cm、具有3片以上葉片的苗木最適合移植。適合單葉省藤組培苗移植的介質有細沙、泥炭土和黃心土，也可以將三者按l:1:2的比例混合，作為單葉省藤組培苗的移植介質。移植介質以1/1000的高錳酸鉀溶液消毒，移植后每個星期用1/800的百菌清和多菌靈輪流噴施，防止雜菌滋生。移植后15天開始施肥，采用1/1000的復合的遮蔭網(wǎng)遮蔭，隨后采用50%遮蔭網(wǎng)遮蔭，一直管理到苗木.出圃造林。移植成活率大于85%。在田間移植時，在311月均可移植單葉省藤組培苗，其中36月份為單葉省藤組培苗的最佳移植季節(jié)，且溫度、濕度均適合苗木的進一步培養(yǎng)，達到造林高度和要求。79月份，溫度過高，移植成活率略低，通過強度施肥，苗木可以達到造林高度。1011月份能夠移植成活，但苗木生長季節(jié)已過，次年春季苗木尚無法達到造林高度。表1單葉省藤萌蘗芽組培快繁的培養(yǎng)基配方<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>本發(fā)明要求保護的快速繁殖還可包括其他實施例子。權利要求1、單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是利用單葉省藤萌蘗芽等無性器官進行組培快繁，具體步驟如下1)采集萌蘗芽外植體，在晴天時用鋸將萌蘗芽從母株上鋸下來；在鋸萌蘗芽外植體的過程中，必須防止芽體外傷和芽心震裂；2)外植體的消毒，采用兩次消毒法，第一步，首先將外植體清洗干凈，剝去外層葉鞘，用75％酒精消毒，然后用0.1％氯化汞消毒，再用無菌水漂洗；第二步，再剝去中層葉鞘并修剪至合適的長度，用0.1％氯化汞消毒，再用無菌水漂洗若干次；3)防止褐變，采用半光氨酸或抗壞血酸或者二者結合對萌蘗芽外植體萌蘗芽外植體進行抗褐變處理，半光氨酸和抗壞血酸的濃度分別為3mg/l和10mg/l；4)叢芽誘導與增殖培養(yǎng)，外植體采集并消毒后，首先在叢芽誘導培養(yǎng)基上誘導形成叢芽，誘導周期為3～5個月，中途需要轉接與更換新鮮培養(yǎng)基2～3次；形成叢芽后，轉接到增殖培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)，一次增殖培養(yǎng)的周期為45～50天；將大的叢芽切分成3～4個芽組成的小芽叢，轉接到新鮮增殖培養(yǎng)基上進行下一次增殖培養(yǎng)，經(jīng)過多次增殖培養(yǎng)即可將無性系苗木擴繁。5)生根培養(yǎng)，對高度達到要求的芽苗在生根培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng)，第一次生根培養(yǎng)的時間可以為50～60天；對經(jīng)過第一次生根培養(yǎng)后還未生根的芽苗，除去1～2層外層葉鞘和對基部進行修剪后，進行第二次生根培養(yǎng)；對高度未達到要求的芽苗，先進行壯苗培養(yǎng)，讓芽苗生長至高度達到要求后，再進行生根培養(yǎng)；6)田間移植，將生根培養(yǎng)后高度大于或等于8.0cm、根長度大于或等于4.0cm、具有至少3片葉片的苗木進行田間移植；進行田間移植的介質可以為細沙、泥炭土和黃心土，或者將細沙、泥炭土和黃心土按1∶1∶2的比例混合，作為單葉省藤組培苗的移植介質；移植介質以1/1000的高錳酸鉀溶液消毒，移植后每個星期用滅菌劑噴施，防止雜菌滋生；移植后若干天開始每1周施肥一次，移植后即需要遮陰，一直管理到苗木出圃造林。2、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是第1)步采集萌蘗芽外植的高度可以為2545cm;剝去外層23層葉鞘，用75%酒精消毒2025秒，然后用0.1%氯化汞消毒1012分鐘，再用無菌水漂洗l次IO分鐘；第二步，再剝去12層葉鞘并修剪至合適的長度34cm長，用0.1%氯化汞消毒12分鐘，再用無菌水漂洗若干次13次，各次分別為5分鐘，5分鐘，IO分鐘；第2)所用的汞濃度為0.1%升。3、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是在第4)步叢芽誘導與增殖培養(yǎng)之,后，當芽苗生長不到生根所需要的3.0cm高時，先在壯苗培養(yǎng)基進行壯苗培養(yǎng)，讓芽苗生長到適合生根培養(yǎng)的高度。4、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是在進行第4)步叢芽誘導時，將芽傾斜或平放，使之整體接觸培養(yǎng)基，以促進芽的生長，促進二級蘗芽的萌發(fā)，促進增殖。5、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是在進行第5)步生根培養(yǎng)時，將芽苗高度和大小接近的24個芽切分在同一小芽叢，轉接到生根培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，移植后即可培育成叢芽苗；高度達到要求指大于或等于3.0cm，進行第二次生根培養(yǎng)，對高度未達到要求指小于3.0cm的芽苗，高度達到要求指大于或等于3.0cm高度的芽苗。6、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是第6)田間移植，移植后15天后開始施肥，采用1/1000的復合肥溶液每1周噴施一次、移植后17天，95°/。的遮蔭網(wǎng)遮蔭，830天，.85%的遮蔭網(wǎng)遮蔭，3160天，70%的遮蔭網(wǎng)遮蔭，隨后采用50°/。遮蔭網(wǎng)遮蔭開始遮陰。7、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是叢芽誘導培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分、植物激素和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、維生素C和半胱氨酸，植物激素包括6-BA、IBA、NAA、KT和2，4-D;各組份的含量參見表1，叢芽誘導培養(yǎng)基的pH值為5.8。8、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是增殖培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分、植物激素和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045HO2、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、維生素C和半胱氨酸，植物激素包括6-BA、IBA、NAA、KT和2，4-D;各組份的含量參見表l，增殖培養(yǎng)基的pH值為5.8。9、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是壯苗培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、維生素C和半胱氨酸；各組份的含量參見表l，壯苗培養(yǎng)基的pH值為5.8。10、如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是生根培養(yǎng)基由大量元素、微量元素、有機成分、植物激素和蔗糖、卡拉膠組成，大量元素包括NH4N03、KN03、KH2P04、MgS04、CaCl2，微量元素包括MnS044H02、ZnS047H02、H3B03、Na2Mo042H02、FeS047H02、NaEDTA、KI、CuS045H02、CoCL26H02，有機成分包括氨基乙酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆醇、煙酸和肌醇，植物激素包括IBA和NAA;各組份的含量參見表l，生根培養(yǎng)基的pH值為5.8。全文摘要本發(fā)明涉及一種單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是利用單葉省藤萌蘗芽等無性器官進行組培快繁，具體步驟如下1)在晴天時用鋸將萌蘗芽從母株上鋸下來，防止芽體外傷和芽心震裂；2)對萌蘗芽外植體的消毒；3)對萌蘗芽外植體進行抗褐變處理，以防止褐變；4)在叢芽誘導培養(yǎng)基上誘導形成叢芽，形成叢芽后，轉接到增殖培養(yǎng)基上進行增殖和擴繁；5)對高度達到要求的芽苗在生根培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng)，對高度未達到要求的芽苗，先進行壯苗培養(yǎng)，讓芽苗生長至高度達到要求后再進行生根培養(yǎng)；6)將苗木進行田間移植，移植后用滅菌劑噴施和采用遮蔭網(wǎng)遮蔭，直到苗木出圃造林。本發(fā)明解決單葉省藤無性系組培快繁的技術難題，用于單葉省藤的無性系育種和良種苗木的快繁，既可促進棕櫚藤人工種植業(yè)的發(fā)展，又可獲取良好的經(jīng)濟效益。文檔編號A01H4/00GK101167441SQ20071003178公開日2008年4月30日申請日期2007年11月28日優(yōu)先權日2007年11月28日發(fā)明者英劉,尹光天,曾炳山,李湘陽,裘珍飛申請人:中國林業(yè)科學研究院熱帶林業(yè)研究所