專利名稱：：來自水稻的啟動子序列及其應(yīng)用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及到來自水稻的啟動子序列，這個啟動子序列的應(yīng)用方法和含有這個啟動子序列的植物。
背景技術(shù)：
：農(nóng)作物具有對無機氮肥料的依賴性，無機氮主要是以硝酸鹽，銨鹽的形式存在。每年，全世界范圍內(nèi)約有8590MMt含氮肥料加入到土壤中。這個數(shù)量一直在上漲，1930年為1.3麗t，1960年為10.2MMt。到2050年，預(yù)計會增加到240麗t(Tilmanetal.，1999，Proc.Nat.Acad.Sci.USA.96:5995-6000).估計約有利用的氮50%到70%從植物的土壤中流失。因為NO/是可溶的，而且不能在土壤基質(zhì)中保留，過剩的NO:「經(jīng)水浸出后可由微生物利用。改善農(nóng)作物氮利用率是很重要的，原因有兩個。第一，商品肥料的應(yīng)用說明了其中主要消耗與高產(chǎn)農(nóng)作物的生產(chǎn)有關(guān)。第二，減少氮肥料在生態(tài)系統(tǒng)中的流失對環(huán)境有益處。對環(huán)境影響包括土壤質(zhì)量的惡化，污染和丙氨酸是植物中一個很普遍的氨基酸。丙氨酸由可逆反應(yīng)中來自丙酮酸鹽和谷氨酸鹽的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶催化合成的，如圖1所示。丙氨酸是-種可以在其它特定環(huán)境條件下增加的氨基酸，如在干旱和缺氧的情況下(MuenchandGood，1994，PlantMol.Biol.24:417-427;Vanlerbergeetal.，1993，PlantPhysiol.95:655-658)。丙氨酸濃度在厭氧狀態(tài)下的根組織部分大量的增加。例如，在厭氧狀態(tài)下24h后，丙氨酸濃度在大麥根部增加了20倍。在稷中，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶基因是經(jīng)光照誘導(dǎo)，植物由缺氮狀態(tài)恢復(fù)(Sonetal.,1992，Arch.Biochem.Biophys.289:262-266).Vanlerberge等人(1993)指出在缺氮厭氧的藻類中，以氨水形式添加的氮有93X的N15標記直接并入丙氨酸中。因此，丙氨酸是植物應(yīng)激反應(yīng)中一個重要的氨基酸。US6，084，153指出了蕓苔植物根部丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的誘導(dǎo)作用，產(chǎn)生了氮的有效表現(xiàn)型。WO01/55433指出了蕓苔細胞組織膨脹基因-26(btg26)的應(yīng)用。細胞組織膨脹基因-26蛋白最近被命名為遺蛋白。(Tangetal.，2002，F(xiàn)EBSLett.516(1-3):183-186).油菜由含有可操作連接btg26啟動子的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶基因的構(gòu)造轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)基因植物在根組織具有隆起的現(xiàn)象。US2005/0044585顯示出啟動子LeAMTl，LeNRTl，GmNRT2，KDC1，PHT1，GOGAT，OsRAB5和ALF5的應(yīng)用，這些啟動子的基因表達具有對根的專一性，該表達為編碼氮利用蛋白如，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，的基因表達。水稻中氮利用率的增加在技術(shù)中是期望得到的。2006年，世界范圍的種植水稻的栽培面積為151，730，000公頃，氮消耗估計為11，963MMt。因此，水稻中氮利用率的改進不僅僅減少植物生產(chǎn)的成本，而且可以減少氮肥料對于環(huán)境的有害影響，包括由過量氮流失引起的大量藻類的死亡和分解，導(dǎo)致世界上海洋死區(qū)的擴大。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種來自于水稻的啟動子序列，該啟動子序列的應(yīng)用方法和含有這些啟動子序列的植物。在一個實施例中，本發(fā)明提供了一種方法，通過該方法水稻被修飾來表達耙基因或采用可操作連接到編碼區(qū)的一個啟動子序列的目的編碼區(qū)。在另一個實施例中，本發(fā)明也提供了增加生物量和種子量的水稻植物的生產(chǎn)方法。通過增加生物量和種子量，獲得的水稻對環(huán)境有益處，可以維持一個可觀的產(chǎn)量，同時減少了對高濃度氮的需求。離體的的水稻遺蛋白(OsAntl)啟動子序列包含有SEQIDNO:1和它的活性片段。本發(fā)明還提供了一個基因構(gòu)造，這個基因構(gòu)造含有一個OsAntl啟動子序列，這個啟動子序列含有SEQIDNO:和編碼靶蛋白的可操作連接目的編碼區(qū)的活性片段。這個靶蛋白可以是氮利用蛋白，例如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。本發(fā)明提供了一個載體，它含有一個帶有OsAntl啟動子序列的基因構(gòu)造，這個啟動子序列含有SEQIDNO:1和編碼靶蛋白的可操作連接目的編碼區(qū)的活性片段。這個靶蛋白可以是氮利用蛋白，例如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。本發(fā)明描述了水稻植物中耙基因表達的方法。該方法包括接觸和引入一個水稻植物的靶基因，這個靶基因可操作連接到OsAntl啟動子序列，含有SEQIDNO:1和它的活性片段，最后表達耙基因。這個耙基因可以編碼一個氮利用蛋白，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。此外，靶基因的表達可以靶向一個目的組織，例如，植物的根部。本發(fā)明還描述了一種增加水稻植物生物量的方法，該方法包括接觸和引入一個水稻植物的耙基因，這個耙基因可操作連接到0sAntl啟動子序列，含有SEQIDNO:1和它的活性片段，最后表達耙基因。這個耙基因可以編碼一個氮利用蛋白，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。此外，耙基因的表達可以靶向一個目的組織，例如，植物的根部。本發(fā)明描述了一個增加水稻種子量的方法。該方法包括接觸和引入一個水稻植物的靶基因，這個靶基因可操作連接到OsAntl啟動子序列，含有SEQIDNO:1和它的活性片段，最后表達耙基因。這個耙基因可以編碼氮利用蛋白，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。此外，靶基因蛋白的表達可以靶向一個目的組織，例如，植物的根部。此外，本發(fā)明還描述了一個轉(zhuǎn)化的水稻植物，它含有一個可操作連接到0sAntl啟動子序列靶基因，這個耙基因含有SEQIDNO:1和它的活性段。這個靶基因可以編碼氮利用蛋白，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。本發(fā)明描述了一個水稻種子，它含有一個可操作連接到0sAntl啟動子序列靶基因，這個靶基因含有SEQIDNO:1和它的活性段。這個靶基因可以編碼氮利用蛋白，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。本發(fā)明描述了由水稻獲得的啟動子序列，采用啟動子序列的方法，一種水稻植物和含有啟動子序列的水稻植物的一部分。下面的說明是優(yōu)選的實施例。描述了水稻植物中命令目的編碼區(qū)表達的啟動子序列。這個啟動子序列由含有SEQIDNO:1和它的活性片段的水稻的遺蛋白啟動子序列(OsAntl)分離。"目的編碼區(qū)"包括在一個或多個植物組織中期望表達的任何基因?？稍谒枋龅姆椒ㄖ欣玫哪康木幋a區(qū)的例子，包括編碼一個或多個有關(guān)氮素同化，氮源利用或它們的一個組合的蛋白的核酸序列。其它例子可以是編碼一個或多個有關(guān)氮攝取和利用的蛋白核酸序列。"啟動子"指的是一個DNA分子序列，這個序列可命令下游基因轉(zhuǎn)錄，它可操作連接或當融合了一個目的基因后，被引入一個細胞，這就使得該基因能高水平的表達。其中的啟動子可以是全長啟動子也可以是一個片段。"活性片段"指的是它最少是參考啟動子活性的0.1%，10%更好，最好為25%，其中的啟動子活性的測定是經(jīng)技術(shù)中技工熟知的檢測啟動子活性的方法測試的，例如GUS報道基因水平的測定。DNA序列必須是有活性的，可通過合成不同片段和測試其表達或在某一區(qū)域引入點突變來測試它損失活性的方法來鑒別DNA的活性。啟動子的異源片段或其它啟動子序列可以結(jié)合進來，以介導(dǎo)啟動子序列的活性。例如，CaMV35S啟動子或其它已知啟動子序列可和此處描述的啟動子結(jié)合起來，以介導(dǎo)目的編碼區(qū)的表達。此處描述的基因構(gòu)造可包含所必須的翻譯或轉(zhuǎn)錄的增強子。這些增強子區(qū)域?qū)τ诩夹g(shù)中的技工是熟知的，它含有ATG起始密碼子和毗鄰順序。這個起始密碼子與編碼序列的讀碼框是同相的，以確保整個序列的翻譯。翻譯控制信號和起始密碼子可來自于許多種天然和合成的來源。翻譯起始區(qū)域可由轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域和結(jié)構(gòu)基因提供。序列可來自于選擇表達基因的啟動子，可通過特別的修飾來增強mRNA的翻譯。此處描述的基因構(gòu)造可進一步包括含有能夠影響mRNA加工或基因表達的多腺苷酸化信號和其它調(diào)節(jié)信號的3'不可譯區(qū)(或終止區(qū))。適合的3'區(qū)域的非限制性的例子是3'轉(zhuǎn)錄非翻譯區(qū)，它含有農(nóng)桿菌腫瘤誘導(dǎo)質(zhì)粒(TO基因，如胭脂堿合成酶(Nosgene)，植物基因如大豆儲存蛋白基因，和核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶(ssRUBISCO)基因的小亞基的多腺苷酸化信號。"可操作連接"指的是目的序列的相互作用，直接或間接的執(zhí)行預(yù)期的功能，如基因表達的間介作用和調(diào)節(jié)作用。可操作連接的序列的交互作用可以被介導(dǎo)的，如通過蛋白質(zhì)的可操作連接序列的交互作用。此處核苷酸分子的參考文獻中使用的術(shù)語"外源"指的是來自于植物體外的核苷酸分子。一個外源核苷酸分子可為天然或非天然產(chǎn)生核苷酸序列。技術(shù)中熟練的技工認為一個外源核苷酸分子可為來自于除引入核苷酸分子的植物外的同一植物種或不同植物種的一個異源核苷酸分子。此外，它還可以是來自于非植物如真菌，酵母，細菌或其它非植物生物體的核苷酸分子。因為單子葉植物轉(zhuǎn)基因表達的水平普遍高于當被單子葉植物啟動子而不是雙子葉植物啟動子驅(qū)動的表達，檢測水稻基因組來鑒定btg26水稻同系物。采用blastn分析，蕓苔btg26基因(Stroeheretal.，1995，PlantMol.Biol.27:541-551)的氨基酸序列對比TIGR水稻序列的測定(見例1)。水稻遺蛋白(OsAntl)基因在水稻染色體9被鑒定，0sAntl基因的ATG起始密碼子上游(5')的一個啟動子序列也被鑒定(圖2;SEQIDNO:1)。采用這個啟動子序列驅(qū)動目的編碼區(qū)的表達。植物表達，例如，但不僅僅局限于此，AlaAT在0sAntl啟動子序列的控制之下增加了生物量，種子量和NUE(見例3)。因此，描述了表達一個或多個靶基因或目的編碼區(qū)的水稻植物的產(chǎn)生。進一步提供了增加水稻植物生物量的方法和增加植物種子量的方法。通過此處描述的方法，可能產(chǎn)生具有一個或多個所期望的性狀或性質(zhì)；例如，定向改變植物的遺傳特性或植物的生理性能，或遺傳和生理性能。此外，描述了采用OsAntl啟動子序列，產(chǎn)生具有在一個或多個期望基因或目的編碼區(qū)表達的水稻植物的方法。具有在一個或多個耙基因或目的的編碼區(qū)表達的水稻植物的產(chǎn)生是采用本發(fā)明的0sAntl啟動子序列來完成的，這個啟動子序列可以命令目的編碼區(qū)表達。0sAntl啟動子序列使得水稻植物在一個或多個組織表達耙基因，其中在根組織部分特別適合。技術(shù)中熟練的技工認為0sAntl啟動子序列的修飾在本發(fā)明的方法和構(gòu)造中是有用的，以改進或修飾啟動子序列的活性。OsAntl啟動子序列的選擇區(qū)域可操作連接到一個單個靶編碼區(qū)來改變連接的編碼區(qū)的表達水平，或0sAntl啟動子序列可操作連接到一個或多個耙編碼區(qū)，這樣每個耙編碼區(qū)的表達就可以協(xié)同調(diào)節(jié)。OsAntl啟動子序列可以具有任何適合的大小來作為啟動子發(fā)揮功能。OsAntl啟動子序列可以通過技術(shù)中的標準方法來修飾，例如，不僅僅局限于此，誘變，染色體缺失，插入，置換，或切割，來改變可操作連接編碼區(qū)表達的程度，或通過啟動子序列改變表達的特異性。此外，0sAntl啟動子序列的放置相對于可操作連接的編碼區(qū)是可以調(diào)節(jié)的(例，移動遠一些或近一些)，以獲得啟動子表達的期望水平。假定的0sAntl啟動子序列可在特定的環(huán)境或生理條件下命令目的編碼區(qū)表達。例如，啟動子序列在干旱脅迫，滲透脅迫，鹽脅迫，溫度脅迫，營養(yǎng)素缺失，或在特定發(fā)育條件下(如，但不僅僅局限于此)發(fā)芽，結(jié)果或產(chǎn)生種子時是有活性的s本發(fā)明的目的編碼區(qū)或靶基因可以是水稻植物中期望表達的任何核苷酸序列。本發(fā)明的方法和構(gòu)造中采用的編碼區(qū)的一般種類包括編碼以下蛋白的核苷酸序列編碼結(jié)構(gòu)蛋白；有關(guān)氮運輸?shù)牡鞍?；有關(guān)氮吸收的蛋白；有關(guān)氮運輸和吸收的蛋白；有關(guān)氮利用的酶和蛋白；植物中殺蟲劑和除草劑抗性的有關(guān)蛋白；植物線蟲，病毒，昆蟲或細菌抗性的有關(guān)蛋白；植物應(yīng)激抗性的有關(guān)蛋白，例如，但不僅僅局限于此，滲透性，溫度，pH，或氧氣應(yīng)激性；植物生長刺激和連續(xù)的有關(guān)蛋白；植物修復(fù)的有關(guān)蛋白；具有藥特性或產(chǎn)生具有藥特性化合物的編碼酶的有關(guān)蛋白。例如，目的編碼區(qū)可編碼一個氮利用蛋白，尤其是使氨水同化為氨基酸或在生物合成反應(yīng)中采用形成的氨基酸反應(yīng)的酶。這個蛋白質(zhì)可選擇自，但不僅僅局限于此，硝酸鹽運載體(高或低的親和力)，銨鹽運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶(GS),天冬酰胺合成酶(AS)，谷氨酸合成酶(也叫作谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶GOGAT)，門冬酰胺酶(ANS)，谷氨酸脫氫酶(GDH)，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AspAT)，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlaAT)和其它己知的氨基轉(zhuǎn)換酶。這些蛋白在專利申請?zhí)枮?005/0044585的美國專利中有所描述，這個專利因為整體上引用而被合并于此。靶基因或目的編碼區(qū)可在水稻植物中天然的表達或者它是水稻植物的異源體。這個基因可來自于任何來源，包括病毒，細菌，植物或動物來源。較好的是，目的編碼區(qū)對于OsAntl啟動子序列是異源的，OsAntl啟動子序列是可操作連接的，因為它不是來自于這個基因，是天然可連接的。編碼區(qū)可通過任何適合的途徑被修飾來構(gòu)建一個基因或具有期望特性的水稻植物。編碼區(qū)可被修飾，并在植物系統(tǒng)中轉(zhuǎn)錄的和翻譯。例如，編碼目的蛋白的核苷酸序列可被修飾，這樣它含有所有必須的多腺苷酸化序列，起始位點和終止位點，這些位點允許編碼序列被轉(zhuǎn)錄為mRNA(+f使RNA〉，mRNA再在水稻植物中被翻譯。此外，編碼區(qū)可經(jīng)修飾使得它的密碼子選擇與水稻植物天然基因更加相似(例，可采用優(yōu)化序列的植物)。技術(shù)中已知的技能采用了這個核苷酸序列修飾和方法。此處描述的構(gòu)造包括目的編碼區(qū)的0sAntl啟動子序列通過載體被有效的引入水稻植物，水稻植物細胞或植物原生質(zhì)體中。本發(fā)明適合采用的克隆或表達載體的例子有質(zhì)粒(如pAGOOl)，粘粒，病毒DNA或RNA和微型染色體。適合的植物載體在技術(shù)中是熟知的(見例Clark，M.，ed.(1997)PlantMolecularBiology:ALaboratoryManual.SpringerVerlag,ISBN:3540584056，此文獻通過整體的引用而被合并于此)。載體可含有一個或多個細菌或植物表達可選擇的或可遮的標記或報道基因，這樣，載體合并到水稻植物細胞或原生質(zhì)體就可以被監(jiān)控了。更好的是，這個選擇的或可遮的標記可對照一個易探測的表現(xiàn)型，如其它有毒化合物(例，卡那徽素抗性)或以適合的底物(例，6葡萄糖苷酸酶(GUS)或熒光酶基因)培養(yǎng)植物的比色法或發(fā)光反應(yīng)的抗性。這個報道基因在技術(shù)中是熟知的。此處描述的構(gòu)造可通過任何有用的方法引入到水稻植物或植物細胞中。大量的方法對于植物細胞的傳遞基因是可用的且是熟知的。此處最熟知的方法包括農(nóng)桿菌或相似土壤細菌作為載體的應(yīng)用，其中的農(nóng)桿菌由目的構(gòu)造或含有該構(gòu)造的載體轉(zhuǎn)化而來。植物的靶組織由轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌在植物基因組中插入了目的核苷酸序列，如在U.S.Patent4，940，838(Schilperoortetal.;此專利因為整體上引用而被合并于此)所描述的和Horsch(1985，Science227:1229-1231;此文獻因為整體上引用而被合并于此)等人所描述的。本發(fā)明中有用的選擇性的基因轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)化方法包括但不僅僅局限于此，脂質(zhì)體技術(shù)，電穿孔術(shù)或游離DNA的化學(xué)介導(dǎo)吸收，磷^鈣共沉淀技術(shù)，靶向微粒和微量或大量注射技術(shù)，DNA直接轉(zhuǎn)化技術(shù)，還包括Ti質(zhì)粒，Ri質(zhì)粒或植物病毒載體。這些轉(zhuǎn)化方法在技術(shù)中已經(jīng)被證明。技術(shù)中熟練的技工認為選擇的水稻植物，水稻之物細胞或原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化的方法能夠大量被證明，通過0sAntl啟動子序列一靶序列構(gòu)造，或含有該構(gòu)造的載體的性質(zhì)來證明。此處描述了一個轉(zhuǎn)化的水稻植物包含一個可操作連接啟動子序列的編碼區(qū)。還描述了含有一個可操作連接OsAntl啟動子序列的水稻植物種子。根據(jù)本發(fā)明產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化的水稻植物和種子對于進一歩的育種計劃，具有一個以上期望特性的水稻植物的產(chǎn)生是有用的。例如，本發(fā)明的兩個轉(zhuǎn)化的水稻植物中，每個含有一個期望轉(zhuǎn)基因，這兩個基因采用己知的方法雜交來產(chǎn)生后代，產(chǎn)生的后代具有這兩個轉(zhuǎn)基因的特征。在這個方法中，可能產(chǎn)生具有在植物中表達的期望性狀的轉(zhuǎn)化水稻植物。此外，技術(shù)中熟練的技工認為不同種類的植物普遍上或多或少都遵守基因操作，因此，對于通過此處描述的方法和構(gòu)造先轉(zhuǎn)化水稻植物的相關(guān)品種是有利的，接著通過雜交育種技術(shù)將靶基因的表達引入水稻植物。這些技術(shù)和相關(guān)的植物品種對于技術(shù)中熟練的技工是熟知的。此處描述了采用技術(shù)中已知的方法收集轉(zhuǎn)化的水稻植物種子，進-一步用f轉(zhuǎn)化植物和雜種的再生長。此處描述的方法和構(gòu)造產(chǎn)生了具有水稻植物中一個或多個期望基因表達的水稻植物和種子。此處描述了植物可能應(yīng)用的廣泛的多樣性，包括但不僅僅局限于此，產(chǎn)生具有增加的應(yīng)激耐受力的水稻植物，改進氮的吸收，改進氮的利用，改進氮的含量，改進期望化合物的氮的營養(yǎng)量和植物修復(fù)性質(zhì)。特定的應(yīng)用下面有進一步的描述。此處描述的植物能夠使缺乏營養(yǎng)的土壤富有營養(yǎng)。技術(shù)上熟知的是某個植物種，特別是農(nóng)作物，吸收了土壤中的必須營養(yǎng)來維持生長，如氮，磷酸鹽和鉀s為了補充缺失的營養(yǎng)-，有必要向土壤中施肥(一個奢侈的環(huán)境破壞的過程)或培養(yǎng)已知的在土壤中沉積所消耗營養(yǎng)的植物(例,三葉草和大豆的有關(guān)氮的消耗)。然而，這些選擇的經(jīng)濟可行性很小。此處描述的方法可使得核苷酸序列靶向表達，包括在組織(例，根或根毛)里吸收營養(yǎng)(例，運輸分子)以改進水稻植物從環(huán)境中吸收營養(yǎng)的能力。此處描述的方法可用來產(chǎn)生水稻植物，來表達異源的或優(yōu)化的天然營養(yǎng)利用基因或使得營養(yǎng)能夠有效的利用編碼區(qū)，這樣，植物的正常生長和發(fā)揮機能就需求少量的營養(yǎng)(例，氮)。此外，采用此處描述的方法，來表達目的編碼區(qū)，包括營養(yǎng)的利用和吸收，由有水稻植物在能直接吸收不同營養(yǎng)(例，根和葉)的植物組織中非正常的利用。在該方法中，產(chǎn)生了能夠吸收不同營養(yǎng)源(如，不同的氮源)而茂盛生長的水稻植物。優(yōu)化了植物氮效率的顯著有用的靶基因包括硝酸鹽運載體(高或低的親和力)，銨鹽運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶(GS)，天冬酰胺合成酶(AS)，谷氨酸合成酶(也叫做谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶和GOGAT)，門冬酰胺酶(ANS)，谷氨酸脫氫酶(GDH)，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AspAT)，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlaAT)，和其它已知的氨基轉(zhuǎn)換酶。這個蛋白在專利申請?zhí)?005/0044585的美國專利中有所描述，這個專利因為整體上引用而被合并于此。此處描述的技術(shù)可用于產(chǎn)生能通過迅速吸收由肥料提供的氮，同時儲存氮以有效利用肥料的水稻植物，從而減少了含氮肥料的損失量等等。這使得對含氮肥料的需求量減少，將其應(yīng)用到水稻來獲得農(nóng)作物產(chǎn)量，可與采用正常培養(yǎng)技術(shù)和根據(jù)本發(fā)明修飾的水稻植物獲得的農(nóng)作物產(chǎn)量做比較。其它農(nóng)學(xué)上的優(yōu)勢還包括快速生長和水稻農(nóng)作物產(chǎn)量，其中，采用一般的農(nóng)作物培養(yǎng)技術(shù)使投入的含氮肥料維持在一定水平上。產(chǎn)生了表達編碼丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlaAT)的可操作連接本發(fā)明0sAntl啟動子序列的寡核苷酸序列的轉(zhuǎn)化的水稻植物。-如SU所示，在OsAntl啟動子序列的控制下，表達AlaAT的轉(zhuǎn)化植物對比對照植物，顯示了較高的生物量干重且增加了種子量。結(jié)果表明，在0sAntl啟動子序列的控制下，表達異源AlaAT的水稻植物能夠優(yōu)化可用氮的利用，從而增加了植物的生物量，種子量或均增加。因此，增加水稻植物生物量的方法包括所描述的提供一個帶有可操作連接0sAntl啟動子序列目的編碼區(qū)的水稻植物。目的編碼區(qū)可編碼包括優(yōu)化植物氮效率的酶，如，它可以編碼丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlaAT)，編碼區(qū)的表達適當?shù)陌l(fā)生在植物根部。還提供了一種方法來增加水稻植物的種子量，包括提供一個帶有可操作連接本發(fā)明所述的0sAntl啟動子序列目的編碼區(qū)的水稻植物。目的編碼區(qū)口J編碼包括優(yōu)化植物氮效率的酶，如，它可以編碼丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlaAT)。以上的描述在任何方法中不局限于本發(fā)明；此外，所討論的特性的組合對于本發(fā)明的結(jié)論不是完全必須的。圖1:植物細胞氮源利用步驟圖2:0sAntl的調(diào)節(jié)區(qū)域；圖3:產(chǎn)生OsAntlpro—Gus構(gòu)造的步驟圖4:產(chǎn)生OsAntlpro—AlaAT構(gòu)造的步驟圖5:由OsAntl啟動子命令的報道基因GUS的表達；圖6:由0sAntlpro—AlaAT轉(zhuǎn)化的水稻植物的平均生物量干重；圖7:由OsAntlpro—AlaAT轉(zhuǎn)化的水稻植物的平均種子重量；圖8:由OsAntlpro—AlaAT轉(zhuǎn)化的水稻植物平均生物量干重和平均種子重量的關(guān)系。以下是對附圖內(nèi)容的解釋，本發(fā)明的特征通過下列描述將變的更加直觀，其中的參考文獻作為附圖圖1顯示的是植物細胞中氮利用的圖示。硝酸鹽(N0:「)被運送到植物細胞中，由硝酸鹽還原酶(NR)轉(zhuǎn)化成亞硝酸鹽(N02—)。亞硝酸鹽從細胞質(zhì)中易位到葉綠體中，由亞硝酸鹽還原酶(NiR)還原為銨(NH/)。谷氨酰胺合成酶(GS)具有同化某物質(zhì)和循環(huán)利用銨(NH/)的機能。一個酶偶聯(lián)，谷氨酰胺合成酶(GS)/谷氨酸合成酶(GOGAT)，催化了谷氨酰胺(Gln)到谷氨酸(Glu)的基因轉(zhuǎn)變。谷氨酸是許多氨基酸的標準部件。此外，丙氨酸在可逆反應(yīng)中由來自于丙酮酸和谷氨酸的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlaAT)合成。圖2所示的是本發(fā)明OSAntl啟動子的核苷酸序列(SEQIDNO:1)。這個序列采用NCBI數(shù)據(jù)庫中的blastn查詢來分離，采用蕓苔btg26基因(Stroeheretal.，1995，PlantMol.Biol.27:541-551)的核苷酸序列(366-3175bp)來鑒別水稻同源核苷酸序列(登陸號為AF3235S6)。這個序列接下來用在比對TIGR水稻序列的測定(見tigr.org/tdb/e2kl/osa1/)，如例1所示。水稻基因中，假定的TATA盒子由粗體顯示，水稻基因組PCR擴增序列采用的引物有下劃線。圖3所示的是產(chǎn)生基因構(gòu)造OsAntlpro-Gus步驟的圖示，采用報道基因e葡萄糖苷酸酶與例2中描述的方法一致。圖4所示的是產(chǎn)生基因構(gòu)造OsAntlpro-AlaAT步驟的圖示，與例2中描述的方法-一致。圖5所示的是由本發(fā)明0sAntl啟動子命令GUS報道基因的表達。表達發(fā)生在由圖3所示的基因構(gòu)造OsAntlpro-Gus轉(zhuǎn)化的水稻植物的根培養(yǎng)的根尖部分的細胞膨脹區(qū)域內(nèi)(panelA);根培養(yǎng)的根毛部分(panelB)和側(cè)根部分(panelC),與例3中所描述的方法一致。黑色染色區(qū)域表明了GUS報道基因的表達。圖6顯示的是圖4所示的由基因構(gòu)造—OsAntlpro-AlaAT轉(zhuǎn)化的水稻的平均生物量干重值，對比例3給出的在同樣的生長條件下的野生型水稻植物的平均生物量干重值。圖7顯示的是圖4所示的由基因構(gòu)造0sAntlpro-AlaAT轉(zhuǎn)化的水稻的平均種子重量(克)，對比例3給出的在同樣的生長條件下的野生型水稻植物的平均種子重量。圖8所示的是每個轉(zhuǎn)基因植物的生物量干重(克)和總種子重量(克)的關(guān)系。具體實施例方式下面通過實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步具體的說明實施例1:0sAntl啟動子序列的分離和鑒定btg26基因(Stroeheretal.，1995,PlantMol.Biol.27:541-551;登錄號S77096)的核苷酸順序(bp366-3175)用于采用blastn查詢工具在NCBI中搜索核苷酸數(shù)據(jù)庫。水稻序列(登陸號為AF323586)被鑒定，它的核苷酸順序用于搜索TIGR水稻序列的測定(tigr.org/tdb/e2kl/osal/)。b化26的水稻同系物水稻遺蛋白(0sAntl)在水稻染色體9被鑒別(登陸號為AP005570;98524-101189堿基對)。OsAntl的起譯密碼子的973-bp序列上游由圖2顯示(SEQIDNO:1)。OsAntl基因的ATG起譯密碼子的403bps上游(5')序列被選擇用來分析。測定這序列是否可能具有作為一個啟動子的功能，采用http:〃softberry.com/建立的TSSP植物啟動子預(yù)測軟件來分析該序列。分析預(yù)測了該序列是一個植物啟動子序列。還測定了TATA盒子(圖2粗體)和其它啟動子序列要素最有可能存在的區(qū)域。因為設(shè)計的OsAntl啟動子序列根據(jù)softberry分析被預(yù)測含有啟動子元素，所以序列采用信號掃描軟件(Prestridge，1991;http:〃bimas.dcrt.nih.gov/molbio/signal)分析了啟動子基序，啟云力子基序可以是轉(zhuǎn)錄因子的識別位點。0sAnt1啟動子中預(yù)測了五個不同的信號序列，包含ADR1，DBF-A，GAL4,HSTF和RAF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。米用BCMSearchLauncher主頁(searchlauncher,bcm.tmc.edu/)禾口BOXSHADE服務(wù)器(ch.embnet.org/software/BOX—form.html)的ClustalW1.8多序列比對軟件比較btg26啟動子序列的核酸序列和油菜和擬南芥的核酸序列。保守核苷酸序列的檢驗顯示了油菜和擬南芥細胞組織膨脹基因一26啟動子序列與0sAntl序列彼此非常相似。所有三個啟動子的同一個特征是核苷酸序列中存在嘧啶束(CT)。這些嘧啶束范圍在20-22個堿基，存在于所有三個啟動子序列中可能存在的TATA盒子的上游。此外，0sAntl序列在ATG起始密碼子里存在第二個嘧啶束水稻基因組DNA從cv.Kitaake中分離出來。選擇了以下符合0sAntl啟動子區(qū)域的PCR引物(位于圖2所示的帶下劃線部分)引物l:AGGAAGTGATTTTTAGCGTAGCTG(SEQIDNO:2);引物2:ATGGCAGAAGAGAGAGAGAGAGAGG(SEQIDNO:3)。采用基因組DNA和以上引物引導(dǎo)降落PCR。產(chǎn)生一個975-bp片段。擴增的PCR片段連接pCI^11-T0P0載體轉(zhuǎn)化為十大細胞大腸桿菌。最后的質(zhì)粒命名為pT-riceOsAntlpro。序列分析顯示出975-bpPCR片段編碼--個命名為OsAntl的啟動子序列的啟動子序列。比較了OsAntl啟動子和cv.Ni卯onbare(由數(shù)據(jù)庫獲得)的cv,Kitaake，顯示出它們有99.9%相似度。假定的TATA盒子的起始密碼子上游存在145bps。實施例2:含有OsAntl啟動子序列的遺傳構(gòu)造分別通過圖3和圖4所示的步驟產(chǎn)生了驅(qū)動0葡萄糖苷酸酶(GUS)報道基因(OsAntlpro-Gus)或大麥AlaAT基因(OsAntlpro-AlaAT)的含有0sAntl啟動子序列的遺傳構(gòu)造。水稻OsAntlpro-GUS構(gòu)造水稻OsAntlpro-GUS構(gòu)造通過采用以下引物，pT-RiceOsAntlpro為模板來產(chǎn)生引物3:EcoRI-OsAntl啟動子序列GGAATTCAGGAAGTGATTTTT(SEQIDNO:4)引物4:Ncol-OsAntl啟動子序列CATGCCATGGATGGCAGAAGA(SEQIDNO:5)最終的PCR片段引入到植物二元載體pCAMBIA1305.1中，被EcoRI和Ncol降解成一個pCAMBIA1305.1-riceOsAntlpro-GUS構(gòu)造。引物3和引物4的末端序列EcoRI和Ncol序列，使得PCR片段插入pCAMBIA1305.1載體，用帶有OsAntl的啟動子序列替代存在的CaMV35s啟動子。NcoI(CCATGG)序列含有一個Met密碼子，ATG，這個構(gòu)成了GUS報道基因和使得GUS報道基因通過OsAntl啟動子序列表達。水稻OsAntlpro-AlaAT構(gòu)造水稻OsAntlpro-AlaAT構(gòu)造通過采用以下引物，pT-RiceOsAntlpro為模板來產(chǎn)生引物3:EcoRI-OsAntl啟動子序列GGAATTCAGGAAGTGATTTTT(SEQIDNO:4)引物5:PstI-OsAntl啟動子序列AACTGCAGATGGCAGAAGA(SEQIDNO:6)最終的PCR片段被EcoRI和Pstl降解引入到植物二元載體pCAMBIA1300，產(chǎn)生了pCAMBIA1300-riceOsAntlpro。AlaAT咖A片段采用pAGOOl作為模板進行PCR擴增。pAGOOl在美國專利No.6,084,153有所描述，其中它被鑒定為pbtg26/AlaAT/nos。它含有連接大麥和膽脂堿合成酶終止子的btg26啟動子。大麥AlaAT/nos基因終止子序列采用以下引物，pAGOOl為模板進行擴增引物6:PstIAlaAT序列AACTGCAGATGGCTGCCACCG(SEQIDNO:7)引物7:HindIII-NOS終止序列CCCAAGCTTCCCGATCTAGTA(SEQIDNO:8)最終的AlaAT/nos片段被Pst和HindIII降解引入到pCAMBIA1300-riceOsAntlpro,產(chǎn)生了pCAMBIA1300-riceOsAntlpro-AlaAT構(gòu)造。實施例3:水稻植物經(jīng)由含有OsAntl的載體的轉(zhuǎn)化pCAMBIA1305.1-riceOsAntlpro-GUS和pCAMBIA1300-riceOsAntlpro-AlaAT通過電穿孔術(shù)(Sambrooketal.1989inMolecularCloning,ALaboratoryManualColdSpringHarbor,N.Y.:ColdSpringHarborLaboratoryPress)被轉(zhuǎn)移到農(nóng)桿菌菌株EHA105中(Hoodetal.，(1993)TransgenicRes.2:208-218)。農(nóng)桿菌細胞在含有50mg/l卡那徽素，28'C培養(yǎng)3天的固體AB培養(yǎng)基中劃平板。由扁平小刀收集細菌，先于水稻組織轉(zhuǎn)化之前，在液態(tài)共培養(yǎng)基(R2-CL,Table1)中采用溫和的漩渦式再懸浮培養(yǎng)。水稻的轉(zhuǎn)化在轉(zhuǎn)化試驗中采用成熟的水稻種子(OryzasativaL.cv.Ni卯onbare)。種子去皮后，在50%加入0.1%吐溫20的漂白劑中滅菌10min，再浸漬在70%(v/v)的乙醇中l(wèi)min，然后用無菌蒸餾水清洗5次。滅菌后，種子在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基(NB,Table1)中28°C避光培養(yǎng)3周。表1.用于愈傷組織誘導(dǎo)，嫁接，共培養(yǎng)，靜息，選擇，再生和生根的培養(yǎng)基<table>complextableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>(過濾消毒)R2S(過濾消毒)NBS選擇培養(yǎng)基-n(過濾消毒)PRN預(yù)再生培養(yǎng)基(過濾消毒)RN再生培養(yǎng)基(過濾消毒)R(高壓滅菌器/過濾消毒)緩沖液，pH5.0+50mM磷酸氫二鉀緩沖液，pH5.0+10mMCaCl2+400mg/1L-半胱氨酸+2.0mg/12，4-D+0.5mg/1落葉素+0.5mg/1BAP+250mg/1頭孢噻月虧，+250mg/1阿莫西林，pH5.0,0.3%固化劑R2主要和次要的鹽，維他命和鐵源+30g/1蔗糖+2.0mg/12，4-D+0.5mg/1落葉素+50mg/1均霉素+250mg/1頭孢噻肟+100mg/1阿莫西林，pH5.8，0.3。/Q固化劑NB培養(yǎng)基+3AA+2.0mg/12，4-D+0.5mg/1落葉素+50mg/1均霉素+250mg/1頭孢噻肟+100mg/1阿莫西林，pH5.8，0.3%固化劑NB培養(yǎng)基+3AA+5mg/1ABA+2mg/1BAP+0.5mg/1NAA+50mg/1均霉素+100mg/1頭孢噻月虧+50mg/1阿莫西林，pH5.8，0.4%固化劑NB培養(yǎng)基+3mg/1BAP+0.5mg/1NAA+50mg/1均霉素+100mg/1頭孢噻肟+50mg/1阿莫西林，pH5.8，0.4%固化劑'AMS(MurashigeandSkoog(1962)Physiol.Plant15:473-497)+50mg/1潮霉素B+100mg/1頭孢噻肟+50mg/1阿莫西林，pH5.8,0.3%固化劑含有1.25mg/1CUSO/NBh可選擇的3周后，將3-5mm長從子葉衍生愈傷組織中釋放到培養(yǎng)基中的胚性結(jié)狀片段浸漬到直徑為飾m的含有25ml含有密度為3-5X109細胞/ml(0D,=1)農(nóng)桿菌細胞的液態(tài)共培養(yǎng)基(R2-CL，Table1)的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)10-15min。胚性片段由已滅菌的濾紙吸干，轉(zhuǎn)移到固態(tài)共培養(yǎng)基(R2-CS,Tablel)中，25°C避光培養(yǎng)3天。共培養(yǎng)的胚性愈傷組織再被轉(zhuǎn)移到靜息培養(yǎng)基(R2-CS,Tablel)中，28。C避光培養(yǎng)l周。1周后，將未污染的胚性片段分別轉(zhuǎn)移到含有均霉素的選擇培養(yǎng)基(R2S，Tablel)中來選擇轉(zhuǎn)化了的組織，28°C避光培養(yǎng)。接下來的3周在R2S培養(yǎng)基中選擇培養(yǎng)，變?yōu)楹稚矣鷤M織表面帶有褐色隆起物的胚性片段被轉(zhuǎn)移到NBS選擇培養(yǎng)基中(表1)。共培養(yǎng)5周后，小隆起物發(fā)展成褐色球狀組織，然后將它從愈傷組織中輕輕的挑起，在密封的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)2周。2周后，這些球狀組織便成了圓形的，緊密的淡黃色的愈傷組織。將假定的轉(zhuǎn)基因植物，抗均霉素愈傷組織輕輕的挑選出來，轉(zhuǎn)移到再生培養(yǎng)基(PRN，Table1)中再培養(yǎng)1周。所有的來自于單一共培養(yǎng)胚性結(jié)狀片段的抗性愈傷組織被一起放入PRN皿中。帶有光滑千燥表面奶白色分裂的愈傷組織被轉(zhuǎn)移到再生培養(yǎng)基(RN，Tablel)中，避光培養(yǎng)2天，然后在光強度55taol/m/sec的12/12-h(白天/黑夜)光周期條件下培養(yǎng)3周。在被轉(zhuǎn)移到生長室的盆中之前，將從抗性愈傷組織中再生的綠芽分割開在含有生根培養(yǎng)基(R，Table1)的試管中再培養(yǎng)l一2周來促進根和分蘗的生長。轉(zhuǎn)基因植物在含有無污染盆栽混合物的直徑為16cm的盆中生長為成熟期的植物。將植物在28。C和14/10h白天/黑夜光周期的條件下的生長室中培養(yǎng)。種植在盆中2周后，開始施肥，一周兩次。混合肥料包括225g20/20/20肥料，50g植物微量營養(yǎng)素，6.1gCuS04.5H20，140gFeEDTA，13.8gZnS04.7H20,260gMgS04.7H20，3.7g,03，共重712.4g.。將2g的混合肥料溶解在8L的水中，一周向24株植物施肥兩次。由OsAntl啟動子序列命令表達的分析由OsAntl啟動子序列命令表達的誘導(dǎo)作用采用由OsAntlpro-GUS構(gòu)造轉(zhuǎn)化的水稻植物來檢測。植物在鹽基品紅瓶中無菌條件下發(fā)芽水培。第2周齡的植物經(jīng)過體內(nèi)GUS活性染色，是通過在生根培養(yǎng)基注射含有0.2mMX—glue(5-bromo-4-chloro-3-indoly1-beta-glucuronicacid)的5mls50mM磷酸鹽緩沖液(pH7.5)并在該培養(yǎng)基中培養(yǎng)1-24h來進行的。在生物解剖顯微鏡下觀察根組織并拍攝照片，如圖5所示。圖5黑色區(qū)域顯示的是GUS報道基因的表達。這個表達不是由根尖OsAntl啟動子驅(qū)動的GUS報道基因表達的；而是在根尖后面的細胞擴張區(qū)域開始快速表達的。OsAntl啟動子序列命令GUS報道基因也在根毛處表達。離根尖很遠處的許多成熟根部中，主根沒有表達，但是側(cè)根著色很重，說明了OsAntl在這些側(cè)根中命令表達了。含有AlaAT構(gòu)造的轉(zhuǎn)化植物的分析產(chǎn)生了58株OsAntl/AlaAT/NOS轉(zhuǎn)基因植物，測定它們成熟期的開花，分蘗數(shù)，種子量和生物量，記錄為TO代植物。測定成熟期的OsAntl/AlaAT植物和對照植物的生物量干重，數(shù)據(jù)由圖6表示。轉(zhuǎn)基因OsAntl/AlaAT植物的平均生物量高于對照植物的平均生物收集來自于成熟階段的OsAntl/AlaAT植物和對照植物的種子，并測定種子總量。結(jié)果由圖7表示，表明來自O(shè)sAntl/AlaAT植物的高于對照植物的種子量。圖8所示的是每個轉(zhuǎn)基因植物的生物量干重和種子總量的關(guān)系。顯示出了本質(zhì)上的線性相關(guān)性，表明了在OsAntl/AlaAT植物中增加生物量能相應(yīng)的增加了種子量。這些結(jié)果表明OsAntl/AlaAT轉(zhuǎn)基因植物能夠優(yōu)化可用的營養(yǎng)素的利用，因此增加了植物的生物量，種子量或均增加。此處列出的所有文獻通過整體上的引用而被合并于此。本發(fā)明描述了相關(guān)的一個或多個實施例。然而，許多變異和修飾不能脫離本發(fā)明的范圍，這對于技術(shù)上熟練的技工來說是很顯而易見的。權(quán)利要求1.一種離體的水稻遺蛋白(OsAnt1)啟動子序列，其中含有SEQIDNO1或它的活性片段。2.—種基因構(gòu)造，其中含有權(quán)利要求1所述的可操作的連接到編碼序列的靶蛋白0sAntl啟動子序列。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因構(gòu)造，其特征在于，所述的耙蛋白是一個氮利用蛋白。4.根據(jù)權(quán)利要求3中所述的基因構(gòu)造，其特征在于，所述的氮利用蛋白有以下選擇，包括高親和力的硝酸鹽運載體，低親和力硝酸鹽運載體，銨運載體，氨水運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶，天冬酰胺合成酶，谷氨酸合成酶，谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶，門冬酰胺酶，谷氨酸脫氫酶，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基因構(gòu)造，其特征在于，所述的氮利用蛋白為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。6.—種含有權(quán)利要求2所述的基因構(gòu)造的載體。7.—種在水稻植物中命令耙基因表達的方法，其包括采用可操作連接一個含有SEQIDNO:1或它的活性片段的0sAntl啟動子序列的耙基因接觸水稻植物，將含有SEQIDNO:1或它的活性片段的0sAntl啟動子序列的靶基因引入到植物中，其中0sAntl啟動子序列在植物中命令耙序列表達。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的在水稻植物中命令耙基因表達的方法，其特征在于，所述的靶基因編碼一個氮利用蛋白有以下選擇包括高親和力的硝酸鹽運載體，低親和力硝酸鹽運載體，銨運載體，氨水運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶，天冬酰胺合成酶，谷氨酸合成酶，谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶，門冬酰胺酶，谷氨酸脫氫酶，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的在水稻植物中命令靶基因表達的方法，其特征在于，所述的氮利用蛋白為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的在水稻植物中命令耙基因表達的方法，其特征在于，所述的植物由權(quán)利要求5所述的基因構(gòu)造轉(zhuǎn)化。11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的在水稻植物中命令耙基因表達的方法，其特征在于，所述的靶基因的表達發(fā)生在植物的根部。12.—種增加水稻植物生物量的方法，其包括采用可操作連接一個含有SEQIDNO:1或它的活性片段的OsAntl啟動子序列的耙基因接觸水稻植物，將含有SEQIDNO:1或它的活性片段的OsAntl啟動子序列的靶基因引入到植物中，其中OsAntl啟動子序列在植物中命令靶序列表達來獲得增加生物量的水稻植物。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的增加水稻植物生物量的方法，其特征在于，所述的靶基因編碼一個氮利用蛋白有以下選擇包括高親和力的硝酸鹽運載體，低親和力硝酸鹽運載體，銨運載體，氨水運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶，天冬酰胺合成酶，谷氨酸合成酶，谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶，門冬酰胺酶，谷氨酸脫氫酶，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的增加水稻植物生物量的方法，其特征在于，所述的氮利用蛋白為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的增加水稻植物生物量的方法，其特征在于，所述的植物由權(quán)利要求5所述的基因構(gòu)造轉(zhuǎn)化。16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的增加水稻植物生物量的方法，其特征在于，所述的耙基因的表達發(fā)生在植物的根部。17.—種增加水稻植物種子量的方法，其包括采用可操作連接一個含有SEQIDNO:1或它的活性片段的OsAntl啟動子序列的靶基因接觸水稻植物，將含有SEQIDNO:1或它的活性片段的OsAntl啟動子序列的靶基因引入到植物中，其中OsAntl啟動子序列在植物中命令靶序列表達來獲得增加種子量的水稻植物。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的增加水稻植物種子量的方法，其特征在于，所述的靶基因編碼一個氮利用蛋白有以下選擇包括高親和力的硝酸鹽運載體，低親和力硝酸鹽運載體，銨運載體，氨水運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶，天冬酰胺合成酶，谷氨酸合成酶，谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶，門冬酰胺酶，谷氨酸脫氫酶，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的增加水稻植物種子量的方法，其特征在f，所述的氮利用蛋白為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。20.根據(jù)權(quán)利要求17所述的增加水稻植物種子量的方法，其特征在于，所述的植物由權(quán)利要求5所述的基因構(gòu)造轉(zhuǎn)化21.根據(jù)權(quán)利要求17所述的增加水稻植物種子量的方法，其特征在于，所述的靶基因的表達發(fā)生在植物的根部。22.—種轉(zhuǎn)化的水稻植物，包含一個耙基因，其可操作連接到OsAntl啟動子序列，含有SEQIDNO:1或它的活性片段。23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的轉(zhuǎn)化的水稻植物，其特征在于，所述的耙基因編碼一個氮利用蛋白有以下選擇包括高親和力的硝酸鹽運載體，低親和力硝酸鹽運載體，銨運載體，氨水運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶，天冬酰胺合成酶，谷氨酸合成酶，谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶，門冬酰胺酶，谷氨酸脫氫酶，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的轉(zhuǎn)化的水稻植物，其特征在于，所述的氮利用蛋白為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。25.—種水稻植物種子，包含一個含有SEQIDNO:1和它的活性片段的可操作連接到0sAntl啟動子序列的靶基因。26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的水稻植物種子，其特征在于，所述的靶基因編碼一個氮利用蛋白有以下選擇包括高親和力的硝酸鹽運載體，低親和力硝酸鹽運載體，銨運載體，氨水運載體，氨基酸運載體，丙氨酸脫氫酶，谷氨酰胺合成酶，天冬酰胺合成酶，谷氨酸合成酶，谷氨酸2:酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶，門冬酰胺酶，谷氨酸脫氫酶，硝酸鹽還原酶，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的水稻植物種子，其特征在于，所述的氮利用蛋白為丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。全文摘要采用本發(fā)明提供的方法，水稻植物和它的種子可以被修飾通過可操作連接到編碼區(qū)的啟動子序列來表達目的編碼區(qū)。其中的啟動子序列是一個含有SEQIDNO1的離體水稻遺蛋白(OsAnt1)啟動子序列。其中的目的編碼區(qū)可編碼一個氮利用蛋白，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶。本發(fā)明還指出開發(fā)水稻植物的這些方法可增加水稻植物的生物量和種子量。此外，產(chǎn)生的水稻植物可保持一個可觀的生產(chǎn)量，同時減少了高水平氮利用的需要。文檔編號A01H5/00GK101346061SQ200680048697公開日2009年1月14日申請日期2006年12月21日優(yōu)先權(quán)日2005年12月23日發(fā)明者瑪麗·迪堡,艾倫·G·戈德,阿莎克·K·施瓦特申請人:阿凱迪亞生物科學(xué)公司