專利名稱：作為形態(tài)學(xué)改變劑的兩親性蛋白質(zhì)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用兩親性蛋白質(zhì)改變固態(tài)有機化合物的形態(tài)學(xué)和/或多晶型 (polymorphism)，例如晶體的大小、習(xí)性(habit)和轉(zhuǎn)變(modification)的方法，兩親性蛋 白質(zhì)的相應(yīng)用途和由本發(fā)明方法可得的改性固體。
背景技術(shù)：
固化、尤其結(jié)晶化在大多數(shù)藥物、食品和特殊化學(xué)品(例如色素)工藝中是關(guān)鍵的 分離和純化單元，并且對總體工藝的效率和收益性具有重要的影響。大多數(shù)藥品含有以結(jié) 晶形式產(chǎn)生的活性成分。因此，結(jié)晶化對工業(yè)具有深遠的重要性。為了有效率的下游操作 (例如過濾、干燥、壓片)和產(chǎn)品效力(例如生物利用度、片劑穩(wěn)定性)，控制晶體純度、粒度 分布和形狀可能是極其重要的。通常，藥用級結(jié)晶產(chǎn)品需要狹窄的粒度分布，這意味著主要生產(chǎn)工藝必須精心設(shè) 計且嚴格控制在最適條件下?？刂凭w的大小和形狀將允許優(yōu)化溶解速度，而這可以使利 益最大化而使副作用最小化。很多藥物可形成呈現(xiàn)多種形態(tài)學(xué)形狀和習(xí)性的晶體，所述形 態(tài)學(xué)形狀和習(xí)性對產(chǎn)品的配制和最終的使用性能是至關(guān)重要的。
背景技術(shù)：
圖9示例了典型結(jié)晶工藝，包括下列步驟(a)有機分子通過擴散過程形成隨機定向的分子簇。(b)這些簇可再次分解成單分子或開始形成稱作晶胚的不穩(wěn)定晶格結(jié)構(gòu)。(c)這些晶胚可再次分解成簇或充分地生長以形成穩(wěn)定的晶核從溶液中沉淀出來 (成核)。該臨界尺寸由操作條件(溫度、過飽和等)規(guī)定。(d)然后這些核生長成較大的微晶，其可繼續(xù)生長成單晶或聚在一起形成微晶聚 集體。(e)這些聚集體可以是可容易分解成初始微晶的軟聚集體(SOftaggregate)至僅 可通過侵入性工藝(例如研磨)分解的硬聚集體(hardaggregate)。過飽和是結(jié)晶化的驅(qū)動力，因此成核和生長的速率由溶液中存在的過飽和驅(qū)動。 過飽和被定義為在給定的溫度條件下超過飽和濃度的溶質(zhì)濃度。一旦失去過飽和，固-液 系統(tǒng)就達到平衡且結(jié)晶過程停止。當(dāng)存在過飽和時，成核和生長繼續(xù)同時發(fā)生。某些溶劑、雜質(zhì)或添加劑的存在、和與進行結(jié)晶的化合物具有類似化學(xué)類型的化 合物可通過改變結(jié)晶過程的過飽和性質(zhì)而極大影響其成核和晶體生長階段。取決于條件，成核或生長可以一者比另一者占優(yōu)勢，因此，獲得具有不同大小、不 同粒度分布和習(xí)性(形狀)的晶體。晶體習(xí)性可以是，例如立方、四方、正交、六方、單斜、三斜和三方的。還可通過結(jié)晶過程中的變化產(chǎn)生不同的多晶型物。多晶型物被定義為在晶格中具有不同的分子的排列和/或構(gòu)象的晶相。這些晶形具有不同的堆積(packing)、熱力學(xué)、光譜、動力學(xué)、表面和力學(xué)性質(zhì)。盡管多晶型物具有相同的元素組成，但是多晶型物顯示不同的物化性質(zhì)和物理技 術(shù)性質(zhì)，例如自由能、熵、熱容量、熔點、升華溫度、溶解性、穩(wěn)定性、溶出速率、生物利用度、 硬度、相容性、流動性、抗張強度和可壓縮性等。為此，多晶型在結(jié)晶產(chǎn)品的工業(yè)生產(chǎn)中是非
常重要的。結(jié)晶過程的性質(zhì)決定于熱力學(xué)和動力學(xué)兩因素，其可能使得結(jié)晶過程的性質(zhì)高度 可變且難以控制。因素例如雜質(zhì)水平、混合方案、容器設(shè)計和降溫曲線對所產(chǎn)生晶體的大 小、數(shù)量和形狀具有很大的影響。晶體大小和性狀的控制不當(dāng)還可導(dǎo)致長得令人難以接受的過濾或干燥時間，或?qū)?致額外的加工步驟(例如重結(jié)晶或研磨)，并且可影響產(chǎn)物的純度，該純度在消費晶體的食 品和藥物工業(yè)中尤其重要。已知，可通過結(jié)晶過程中所用的溶劑影響生物活性物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和大小。例如單 斜晶系對乙酰氨基酚通過從乙醇中結(jié)晶而形成，但是穩(wěn)定性較差的多晶型物-正交晶系對 乙酰氨基酚僅在阻止多重成核時通過從熱水中緩慢結(jié)晶而形成。然而，由于毒性的原因，結(jié) 晶溶劑的選擇被嚴重限制。許多添加劑已用于影響生長期或成核期，導(dǎo)致多晶型物或晶體習(xí)性的改變。在某 些情況下，對乙酰氨基酚在本文用作模型物質(zhì)。合成的(共)聚合物和表面活性劑已被證實可以改變生物活性物質(zhì)的形態(tài)學(xué)，但 是再次由于毒性的原因，這具有有限的商業(yè)價值。W003/033462提出了用于啟動晶體多晶型物生長的聚合物文庫，并描述了使用 某些聚合物以改變對乙酰氨基酚的結(jié)晶通過冷卻對乙酰氨基酚(paracetamol)在熱 水中的溶液而生長晶體。在缺少聚合物下，預(yù)計這些條件可收獲單斜晶系對乙酰氨基 酚。當(dāng)在存在尼龍或鹵代聚合物下進行結(jié)晶時，明顯偏向于產(chǎn)生正交晶系對乙酰氨基酚。 Rodriguez-Hornedo 等人，JPharm Sci. Q004) 93 O)，449-60 描述了使用表面活性劑十二烷 基硫酸鈉和?；悄懰徕c用于氨甲酰苯革(carbamazepine) 二水合物的結(jié)晶。Garekani 等人，Int. J. of Pharmaceutics 208 QOOO) 87 及其中所引用的文獻報導(dǎo) 了某些通過在存在添加劑下結(jié)晶而改變對乙酰氫基酚晶體習(xí)性的方法。WO 05/115344要求保護在存在結(jié)晶改變劑下重結(jié)晶后所得的對乙酰氨基酚的速 溶形式，所述結(jié)晶改變劑可以是聚合物或蛋白質(zhì)，例如白蛋白、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶。

發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，可通過兩親性蛋白質(zhì)(尤其是疏水蛋白)誘導(dǎo)溶液中的有機物質(zhì)的快 速成核，甚至是在升高的溫度下。也已發(fā)現(xiàn)，此類蛋白質(zhì)在結(jié)晶過程期間改變有機物質(zhì)的 晶體生長行為，產(chǎn)生預(yù)料不到的晶體習(xí)性和晶體粒度分布。兩親性蛋白質(zhì)如疏水蛋白可用 作添加劑用于結(jié)晶期間或之后，例如以便控制有機化合物(例如生物活性物質(zhì)，如用于化 妝品、生物農(nóng)藥、藥學(xué)或醫(yī)學(xué)應(yīng)用(例如化妝品活性成分、活性藥物成分[API]、動物護理產(chǎn) 品、農(nóng)業(yè)化學(xué)品、生物農(nóng)藥、色素、染料))的形態(tài)學(xué)(亞穩(wěn)態(tài)多晶型物的穩(wěn)定)和粒度分布， 或以便穩(wěn)定某些多晶型物。本發(fā)明因此涉及用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的方 法，所述方法包括用一種或多種兩親性蛋白質(zhì)處理固體物質(zhì)或其溶液或分散體。
該方法有利地使用有機物質(zhì)的溶液或分散體和/或蛋白質(zhì)的溶液或分散體而進 行。溶液通常是在極性溶劑、往往是水性溶劑例如水、低級醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙 醇、丁醇、異丁醇)或水和低級醇的混合物、尤其是水中的溶液。本發(fā)明的一個最重要方面是通過在結(jié)晶過程期間采用兩親性蛋白質(zhì)而改變生物 活性物質(zhì)的晶體性質(zhì)。發(fā)現(xiàn)大多數(shù)生物活性物質(zhì)難溶于水，并且已知形成微細顆粒(微米和微米以下) 可提高其生物利用度或溶出速率(由于其表面積增加)。因此，本發(fā)明還涉及包含有機生物活性物質(zhì)和兩親性蛋白質(zhì)、尤其是疏水蛋白的 組合物，例如在本發(fā)明方法中可得的組合物。本發(fā)明的組合物含有有機生物活性物質(zhì)，優(yōu)選 地以細粒的形式，其平均粒度取決于所需的最終用途，范圍為例如0.1-1000微米，或在其 它情況下可通過動態(tài)光散射檢測，為例如5-5000nm，尤其為20-2000nm。此類顆粒可為自由 流動的，分散在液體中、或尤其是聚集的或壓緊的(compacted)。兩親性蛋白質(zhì)在組合物中、 例如在固體顆粒組合物中的量，可覆蓋一個寬范圍，取決于最終用途和所需效應(yīng)，范圍為例 如約0. 0001至約10%、通常為0. 001至約2%、尤其為0. 01至約1%，所有均按最終組合物 的重量計。因此，本發(fā)明方法的一方面涉及包括降低微晶大小的改變。本發(fā)明方法的另一方面涉及包括改變晶體習(xí)性的改變。本發(fā)明方法的又一方面涉及包括改變晶體形態(tài)學(xué)的改變。本發(fā)明還涉及改變有機固體，其包括下述晶體性質(zhì)中的兩種或兩種以上的組合(a)降低微晶大??；(b)改變晶體習(xí)性和(C)改變晶體形態(tài)學(xué)。兩親性蛋白質(zhì)兼具疏水和親水性質(zhì)，可以被稱為“天然表面活性劑”。兩親性的同 義詞是“雙親的(amphipathic) ”。兩親性蛋白質(zhì)可以物理地吸附在固體物質(zhì)的表面上，形成依據(jù)所處理表面的潤濕 性而定向的兼有疏水性和親水性的表面。如果表面是疏水性的，那么該覆蓋層的疏水側(cè)與被覆蓋的該疏水性表面接觸，而 該覆蓋層的外表面是親水性的，由此增加被覆蓋的表面的水可潤濕性?；|(zhì)上蛋白質(zhì)的表面活性性質(zhì)可通過界面張力測量、水包油乳液的表征、和與水 的接觸角來評價。用于本發(fā)明的兩親性蛋白質(zhì)的特征在于，極大降低疏水表面(例如聚烯 烴表面或Teflon 表面)上水的接觸角(WCA)。特別地，用于本發(fā)明的兩親性蛋白質(zhì)的 b.w.水溶液或分散體通常顯示，聚丙烯表面(尤其是PP均聚物類型HCl 15M0，Borealis, 熔體流動速率=4. 0g/10min[230°C /2. 16kg])上的接觸角，比就純水所觀察到的接觸角， 低20度或更多，優(yōu)選30度或更多，更優(yōu)選40度或更多，最優(yōu)選45度或更多，且在某些特 定情況下，低50度或更多(參見圖8 ；所有WCA根據(jù)靜止座滴法(static sessile drop method)測量)。于1991發(fā)現(xiàn)的疏水蛋白是一類小的、分泌型、富含半胱氨酸的兩親性蛋白質(zhì)， 其存在于真菌中且在真菌生長和發(fā)育中行使著廣譜功能。疏水蛋白屬于最具表面活性 的分子，并可以在任何親水-疏水界面自組裝成兩親性膜(Biochimica et Biophysica Acta-Reviews on Biomembranes-1469 卷，第 2 期，2000 年 9 月 18 日，第 79-86 頁)。疏水蛋白通常易溶于水中。疏水蛋白的自發(fā)自組裝導(dǎo)致兩親性層的形成，所述兩親性層顯著降低水的表面張力?？梢栽贘. Biol. Chem.，282卷，第39期，28733-28739, 2007 年9月觀日中找到提議的疏水蛋白的功能機制單體多聚化成二聚體，兩個二聚體形成四 聚體。四聚體可分裂成兩個新二聚體，其中疏水表面區(qū)域?qū)R(aligned)。這些兩親性二聚 體先于在疏水-親水界面上的兩親性單層的形成。在高濃度下，過量疏水蛋白形成原纖維 結(jié)構(gòu)。基于親水模式和生物物理學(xué)性質(zhì)的差異，疏水蛋白被分成兩種類型1類和II類。I類疏水蛋白的例子來自糙皮側(cè)耳(Pleurotusostreatus)的 P0H3 (PO)來自嗜熱籃狀菌(Talaromycesthermophilus)的 TTl (TT)來自裂褶菌(Schizophyllumcommune)的 SC3 (SC)11類疏水蛋白的例子來自里氏木霉(Trichodermareesei)的 HFBI&HFBII (TR)來自黃枝孢(Cladosporium fulvum)的 HCf_6CU(Cerato-ulmin)疏水蛋白的純化和分離在下列參考文獻中描述W0-A-96/41882描述了來自食用菌的疏水蛋白。W0-A-00/58342涉及通過相萃取純化含疏水蛋白的融合蛋白。WO-A-01/57066描述了由于亞硫酸鹽處理而對疏水蛋白的穩(wěn)定、增溶和與此相關(guān) 的改良應(yīng)用。W0-A-01/57076描述了通過吸附到特氟隆珠上和借助于洗滌劑例如吐溫在低溫下 洗脫而純化疏水蛋白。美國專利7，147，912陳述到疏水蛋白屬于最具表面活性的分子。在50微克/ml 具有從72mjm_2至24mjm_2的水表面張力的最大降低，SC3 (裂褶菌)被視為是已知的最具有 表面活性的蛋白質(zhì)。SC3是1類疏水蛋白?？梢杂糜诒景l(fā)明的另外的疏水蛋白及其來源和性質(zhì)尤其述于W096/41882(參見 第1頁第14行至第7頁第20行的段落，和實施例1至5) ；WO 03/10331 (參見第1頁第4 行至第5頁第20行的段落)；或W006/103230 (參見第3頁第6段至第12頁倒數(shù)第3行的 段落)；所提及的具體段落由此并入作為參考。令人驚訝的是，已發(fā)現(xiàn)兩親性蛋白質(zhì)、尤其是疏水蛋白也影響有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué) 性質(zhì)，并且常比使用溶劑、聚合物或合成的表面活性劑時給出更有利的組合物。本發(fā)明方法往往通過下述來進行i)將蛋白質(zhì)在極性溶劑中的溶液或分散體與有機物質(zhì)在可與所述蛋白質(zhì)的溶劑 混溶的極性溶劑中的溶液或分散體混合，或ii)將有機物質(zhì)在極性溶劑中的溶液或分散體與用所述蛋白質(zhì)浸漬的表面接觸。一個實施方案包括(a)將兩親性蛋白質(zhì)溶解或分散于溶劑中；(b)將有機物質(zhì)溶解于可與所述蛋白質(zhì)的溶劑混溶的溶劑中；(c)將(a)和(b)混合；(d)調(diào)節(jié)混合物的物理環(huán)境以允許有機物質(zhì)在兩親性蛋白質(zhì)存在下發(fā)生沉淀/結(jié)
第二實施方案包括(a)將兩親性蛋白質(zhì)溶解或分散于溶劑中；(b)將(a)加到待于其中通過化學(xué)反應(yīng)形成有機物質(zhì)的反應(yīng)容器中；(c)允許化學(xué)反應(yīng)在兩親性蛋白質(zhì)的存在下發(fā)生；(d)調(diào)節(jié)混合物的物理環(huán)境以允許有機物質(zhì)在兩親性蛋白質(zhì)存在下發(fā)生沉淀/結(jié)
晶°第三實施方案包括(a)將兩親性蛋白質(zhì)溶解或分散于溶劑中；(b)將有機物質(zhì)溶解于可與所述蛋白質(zhì)的溶劑混溶的溶劑中；(c)將(a)和(b)混合；(d)在兩親性蛋白質(zhì)的存在下對有機物質(zhì)進行濕磨。第四實施方案包括在添加兩親性蛋白質(zhì)的溶液/分散體之前或之后，將有機物質(zhì)的“晶種”(穩(wěn)定晶 核)加到有機物質(zhì)的溶液中。第五實施方案包括將兩親性蛋白質(zhì)與其它添加劑、尤其是也可影響有機物質(zhì)的結(jié)晶過程的那些添加 劑組合。此類其它的添加劑的例子是鹽(例如氯化鈉、銨鹽)或另外的聚合物(尤其是可 溶性聚合物，包括合成聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮和天然聚合物例如明膠)。在此定義內(nèi)包 括少量溶劑。此外，本發(fā)明包括下列實施方案，每個所述實施方案可彼此組合·用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的方法，所述方法包括用一種或多種 兩親性蛋白質(zhì)處理固體物質(zhì)或其溶液或分散體。 所述方法，其中所用兩親性蛋白質(zhì)的b.w.水溶液或分散體的特征在于，聚丙 烯表面上的接觸角比就純水可觀察到的接觸角低20度或更多。·所述方法，其包括有機物質(zhì)的沉淀、結(jié)晶或固-固相轉(zhuǎn)變?！に龇椒?，其包括將蛋白質(zhì)在極性溶劑中的溶液或分散體與有機物質(zhì)在可與所 述蛋白質(zhì)的溶劑混溶的極性溶劑中的溶液或分散體混合；或?qū)⒂袡C物質(zhì)在極性溶劑中的溶 液或分散體與用所述蛋白質(zhì)浸漬的表面接觸?！に龇椒?，其包括在兩親性蛋白質(zhì)的存在下對有機物質(zhì)進行濕磨?！に龇椒?，其包括在添加兩親性蛋白質(zhì)之前或之后將有機物質(zhì)的晶種加到有機 物質(zhì)的溶液中?！に龇椒ǎ渲兴鋈芤汉辛硗獾奶砑觿?，例如鹽和/或聚合物?！に龇椒?，其中所述有機物質(zhì)是有機化合物，所述有機化合物在0°C為固體并且 溶于、部分溶于或可分散于極性溶劑中，例如以膠體形式?！に龇椒?，其中所述有機物質(zhì)是分子量80-1000g/mol、尤其是100-500g/mol的 有機化合物，其優(yōu)選選自生物活性化合物，例如藥物、藥用和化妝品用成分、農(nóng)藥和殺真菌 劑?！に龇椒?，其用于降低微晶大小、增加無定形部分、改變晶體習(xí)性和/或改變晶體多晶型(polymorphy)。 所述方法，其中所述蛋白質(zhì)為疏水蛋白，例如II類疏水蛋白或尤其是I類疏水蛋白?！に龇椒ǎ渲杏袡C物質(zhì)的沉淀或結(jié)晶通過將其溶液或分散體與兩親性蛋白質(zhì) 的溶液或分散體組合而誘導(dǎo)?！捎H性蛋白質(zhì)、尤其是如任何上述實施方案中所表征的兩親性蛋白質(zhì)，用于改變 有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的用途?！そM合物，其包括固體有機物質(zhì)，尤其是如上所定義或如下所列出的那些有機物 質(zhì)，和兩親性蛋白質(zhì)，尤其是如任何上述實施方案所表征的兩親性蛋白質(zhì)?！に鼋M合物，其包括細顆粒形式的固體有機物質(zhì)，例如平均粒度為0. 1-1000微 米，或為 5-5000nm。因此，本發(fā)明包括·用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的方法，所述方法包括用一種或多種 兩親性蛋白質(zhì)處理固體物質(zhì)或其溶液或分散體； 所述方法，其中所用兩親性蛋白質(zhì)的b.w.水溶液或分散體的特征在于，聚丙 烯表面上的接觸角比就純水可以觀察到的接觸角低20度或更多；·任何所述方法，其包括有機物質(zhì)的沉淀、結(jié)晶或固-固相轉(zhuǎn)變；尤其是用于降低 微晶大小，增加無定形部分，改變晶體習(xí)性和/或改變晶體多晶型；·任何所述方法，其包括i)將蛋白質(zhì)在極性溶劑中的溶液或分散體與有機物質(zhì)在 可與所述蛋白質(zhì)的溶劑混溶的極性溶劑中的溶液或分散體混合，或ii)將有機物質(zhì)在極性 溶劑中的溶液或分散體與用所述蛋白質(zhì)浸漬的表面接觸；·任何所述方法，其包括在兩親性蛋白質(zhì)的存在下對有機物質(zhì)進行濕磨；·任何所述方法，其包括在添加兩親性蛋白質(zhì)之前或之后將有機物質(zhì)的晶種加到 有機物質(zhì)的溶液中；·任何所述方法，其中溶液含有另外的添加劑，例如鹽和/或聚合物； 任何所述方法，其中所述有機物質(zhì)是有機化合物，在0°C為固體并且可溶于、部分 可溶于或可分散于極性溶劑中，例如以膠體形式；·任何所述方法，其中所述有機物質(zhì)是分子量80-1000g/mol、尤其為100_500g/ mol的有機化合物，其優(yōu)選選自生物活性化合物，例如藥物、藥用和化妝品用成分、農(nóng)藥和殺 真菌劑； 任何所述方法，其中所述蛋白質(zhì)為疏水蛋白，例如II類疏水蛋白或尤其是I類疏 水蛋白；·任何所述方法，其中有機物質(zhì)的沉淀或結(jié)晶通過將其溶液或分散體與兩親性蛋 白質(zhì)的溶液或分散體組合而誘導(dǎo)。本發(fā)明還包括兩親性蛋白質(zhì)、尤其是如上所述特征在于降低接觸角的兩親性蛋白 質(zhì)、尤其是如上所述的疏水蛋白，用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的用途；以及組 合物，其包括固體有機物質(zhì)、尤其是在0°c為固體并且可溶、部分可溶或可分散于極性溶劑 中(例如以膠體形式)的有機化合物、和/或分子量80-1000g/mol、尤其為100-500g/mol、 優(yōu)選選自生物活性化合物例如藥物、藥用和化妝品用成分、農(nóng)藥和殺真菌劑的有機化合物，以及兩親性蛋白質(zhì)。所述組合物優(yōu)選包括細顆粒形式的固體有機物質(zhì)。固體形式可通過本發(fā)明方法被改變的生物活性有機物質(zhì)的例子包括下列有機物 質(zhì)藥用成分(API)阿卡波糖、乙酰水楊酸、阿夫唑嗪、阿利吉侖(aliskiren)、 安貝生坦(ambrisentan)、氨氯地平、阿莫西林、阿那曲唑(Anastrozole)、阿哌沙班 (apixaban)、阿瑞吡坦(apr印itant)、阿立哌唑(aripiprazole)、阿扎那韋(atazanavir)、 阿替洛爾(atenolol)、阿托西汀(atomoxetine)、阿托伐他汀(atorvastatin)、阿奇霉 素(azithromycin), EL多昔芬(bazedoxifene),貝普禾1J (benazepril), bicalutamide, 比沙可啶(bisacodyl)，布地奈德(budesonide)，丁基茛菪胺(butylscopolamine)， 坎地沙坦(candesartan),卡培他濱(capecitabine)，氨甲酉先苯革(carbamazepine), carisbamate, +會11 (carvedilol), casopitant,s1 (celecoxib), H #^lJ (cetirizine)，氯喹(chloroquine)，西那卡塞(cinacalcet)，環(huán)丙沙星(ciprofloxacin), 克拉維酸(clavulanic acid)，氯屈膦酸鹽(clodronate)，可樂定(clonidine)，氯吡格 雷(clopidogrel),醋酸環(huán)丙孕麗(cyproterone acetate)，達泊西汀(dapoxetine), 達如那韋(darunavir)，達沙替尼(dasatinib)，地拉羅司(deferasirox)，右美 ^ 芬(dextromethorphan), M U B. (diclofenac), ft 1 ^ S (dienogest),雙 嘧達莫(dipyridamole)，多西紫杉醇(docetaxel)，多奈哌齊(don印ezil)，屈螺 if (drospirenone)， it H tT (duloxetine)， 1 ^ (efavirenz), 1 5ft ft fi (eletriptan),依那普禾丨J (enalapril),恩他卡朋(entacapone),恩替卡韋(entecavir), enzastaurin,埃羅替尼(erlotinib), ±矣索美拉唑(esomeprazole),艾司佐匹克隆 (eszopiclone)，塊雌酉享(ethinylestradiol)，艾托考昔(etoricoxib)，etravirine, 依維莫司(everolismus),依西美坦(exemestane),非索非那定(fexofenadine),非 那雄胺(finasteride)，氟西汀(fluoxetine)，氟替卡松(fluticasone)，丙酸氟替卡 松(fluticasone propionate)，氣伐他汀(fluvastatin)，福莫特羅(formoterol)， 更昔洛韋(ganciclovir),吉非替尼(gefitinib)，格列美脲(glim印iride)，氫 可酮(hydrocodone)，伊班膦酸(ibandronic acid)，布洛芬(ibuprofen)，茚地 那韋(indinavir)，異丙托銨(ipratropium)，厄貝沙坦(irbesartan)，拉莫三嗪 (Iamotrigine)，蘭索拉唑(lansoprazole)，拉帕替尼(Iapatinib)，來曲唑(Ietrozole), 左炔諾孕酮(Ievonorgestrel)，利奈唑胺(Iinezolid)，賴諾普利(Iisinopril)， 氯沙坦(Iosartan)， maraviroc,美洛昔康(meIoxicam)，二 甲雙狐(metformin)， 哌醋甲酯(methylphenidate)，美托洛爾(metoprolol)，莫昔克丁(moxidectin)， 麥考酚酸(mycophenolic acid)，萘普生(naproxen)，那格列胺(nateglinide)，奈 韋拉平(nevirapine)，尼可地爾(nicorandil)，硝苯地平(nifedipine)，尼洛替尼 (nilotinib),奧氣平(olanzapine)，奧美拉唾(omeprazole),奧禾0 司他(orlistat)， 奧司他韋(oseltamivir)，奧沙利鉬(oxaliplatin)，奧卡西平(oxcarbaz印ine)，巾白潘 立酮(paliperidone),泮托拉唑(pantoprazole),對乙酰氨基酚(paracetamol),帕羅 西汀(paroxetine)，吡格列酮(pioglitazone),普拉克索(pramipexole),普伐他汀 (pravastatin), ^gJfnf (pregabalin), [11 5P (quetiapine), If 1/1 (rabeprazole), 雷洛昔芬(raloxifene)，雷米普利(ramipril)，瑞波西汀(reboxetine)，利塞膦酸鈉(risedronate sodium),利伐沙班(rivaroxaban),禾 Ij 其Jf 的明(rivastigmine),利扎曲普坦 (rizatriptan)，羅格列酮(rosiglitazone)，ruboxistaurin，沙美特羅(salmeterol)，枸 櫞酸西地那非(sildenafil citrate)，辛伐他汀(simvastatin)，西羅莫司(sirolimus), sitagliptin，索拉非尼(sorafenib)，舒馬普坦(sumatriptan)，舒尼替尼(sunitinib)， surinabant,他達拉 __ (tadalafil), fi 洛新(tamsulosin),他噴他多(tapentadol), telbivudine,替米夕少fi (telmisartan),鹽酸特比蔡芬(terbinafine hydrochloride), 特立氟胺(teriflunomide)，噻托溴銨(tiotropium)，托特羅定(tolterodine)，托吡酯 (topiramate),鹽酸戊卡色林(vabicaserin hydrochloride),伐昔洛韋(valaciclovir), 纈更昔洛韋(valganciclovir)，纈沙坦(valsartan)，凡德他尼(vandetanib)，伐 地那非(vardenafil)，伐侖克林(varenicline)，文拉法辛(venlafaxine)，維達 列汀(vildagliptin)，伏立康唑(voriconazole),華法林(warfarin)，齊拉西酮 (ziprasidone),佐米曲普坦(zolmitriptan),唑口比坦(Zolpidem)。另外的藥物乙酰丙嗪(ac印romazine)、阿莫西林(amoxicillin)、氨 芐西林(ampicillin)、安普霉素(apramycin)、貝那普利(benaz印ril)、倍他米 松(betamethasone)、丁 溴東茛菪堿(buscopan)、卡洛芬(carprofen)、頭孢匹 林(cefapirin)、克侖特羅(clenbuterol)、克林霉素(clindamycin)、氯唑西 林(cloxacillin)、環(huán)抱霉素 A(cyclosporine A)、環(huán)丙馬秦(cyromazine)、地拉 考昔(deracoxib)、dichlorvos、dicyclanil、二 氟沙星(difloxacin)、恩氟沙星 (enrofloxacin)、依托度酸(etodolac)、芬苯達唑(fenbendazole)、framycetin、呋 塞米(furosemide)、griseofulvin、海他西林(hetacillin)、潮霉素(hygromycin)、 imidacloprid、左旋咪唑(Ievamisole)、左甲狀腺素(Ievothyroxine)、氯芬奴 隆(Iufenuron) > 美洛昔康(meIoxicam)、美貝霉素月虧(milbemycin oxime)、莫能 星(monensin)、莫昔克丁 (moxidectin)、narasin、尼卡巴辛(nicarbazin)、尼藤口比 藍(nitenpyram)、竹桃霉素(oleandomycin)、奧芬達唑(oxfendazole)、羥氯扎胺 (oxyclozanide)、paramectin> EL 龍 β 素(paromomycin)、撲滅司林(permethrin)、苯 ￥ TMSII (phenylbutazone)、口比 Rf If (praziquantel)、普魯卡因節(jié)青霄素(procaine benzylpenicillin)、普魯卡因青霉素(procaine penicillin)、雙羥萘酸噻嘧啶(pyrantel pamoate)、spinosad、sulphadiazine、噻蟲嗪(thiamethoxam)、硫姆林(tiamulin)、曲安西 龍(triamcinolone)、三氯苯達唑(triclabendazole)、甲氧節(jié)唆(trimethoprim)、泰洛星 (tylosin)。農(nóng)業(yè)化學(xué)品例如農(nóng)藥和殺真菌劑阿巴克丁(abamectin)、溴鼠靈 (brodifacoum)、環(huán)丙馬秦(cyromazine)、依馬菌素(emamectin)、苯氧威(fenoxycarb)、抗 蟲牙威(pirimicarb)、口比蟲牙酮(pymetrozine)、噻蟲嗪(thiamethoxam)?；瘖y品成分例如UV過濾物質(zhì)(例如(+/-)-1，7，7_三甲基-3-K4-甲基苯基)亞甲基]二環(huán) [2.2.1]庚-2-酮；1，7，7-三甲基-3-(苯基亞甲基)二環(huán)[2.2.1]庚_2_酮；(2-羥 基-4-甲氧基苯基M4-甲基苯基)甲酮；2，4_ 二羥基二苯甲酮；2，2' ,4,4'-四羥基二 苯甲酮；2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮；2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸；2，2' -二 羥基-4，4' - 二甲氧基二苯甲酮；2，2' - 二羥基-4-甲氧基二苯甲酮；α-(2_氧代龍腦-3-亞基)甲苯-4-磺酸及其鹽；1-[4- (1，1- 二甲基乙基)苯基]-3- (4-甲氧基苯基) 丙-1，3-二酮；N，N，N-三甲基-4-K4，7，7-三甲基-3-氧代二環(huán)[2，2，1]庚_2_亞基) 甲基]苯胺硫酸甲酯；3，3，5_三甲基環(huán)己基-2-羥基苯甲酸酯；對甲氧基肉桂酸異戊酯； ο-氨基苯甲酸薄荷酯；水楊酸薄荷酯；2-氰基-3，3- 二苯基丙烯酸2-乙基己酯；4-( 二 甲基氨基)苯甲酸2-乙基己酯；4-甲氧基肉桂酸2-乙基己酯；水楊酸2-乙基己酯；苯 甲酸，4，4'，4〃 -(1，3，5_三嗪-2，4，6-三基三亞氨基)三_，三乙基己基)酯；2， 4，6_三苯胺基-(對碳-2'-乙基己基-Γ -氧代)-1，3，5_三嗪；4-氨基苯甲酸；苯甲 酸，4-氨基-，乙酯，與環(huán)氧乙烷的聚合物；2-苯基-IH-苯并咪唑-5-磺酸；2-丙烯酰胺， Ν-[[4-[(4，7，7-三甲基-3-氧代二環(huán)[2.2. 1]庚_2_亞基)甲基]苯基]甲基]-，均聚 物；三乙醇胺水楊酸酯；3，3' -(1，4-亞苯基二亞甲基)二 [7，7-二甲基-2-氧代-二環(huán) [2.2. 1]庚烷-1-甲磺酸]；2,2'-亞甲基-二-[642Η-苯并三唑-2-基)-4-(1，1，3，
3-四甲基丁基)-苯酚];2，4-二 114- (2-乙基己基氧基)-2-羥基]-苯基} -6- (4-甲氧 基苯基)-(1，3，5)-三嗪；IH-苯并咪唑-4，6-二磺酸，2，2' -(1，4_亞苯基)二-，二鈉鹽； 苯甲酸，4，4' -[[6-[[4-[[(1，1_ 二甲基乙基)氨基]羰基]苯基]氨基]1，3，5_三嗪-2，
4-二基]二亞氨基]二_，二 O-乙基己基)酯；苯酚，2-(2H-苯并三唑-2-基)-4-甲 基-6-[2-甲基-3-[l，3，3，3-四甲基-1-[(三甲基甲硅烷基)氧基]二硅氧烷基]丙基] Dimethicodiethylbezalmalonate ；苯磺酸，3- (2H-苯并三唑 _2_ 基)~4~ 羥基-5-(1-甲基 丙基)_，單鈉鹽；苯甲酸，2-[4- ( 二乙基氨基)-2-羥基苯甲?；鵠_，己酯；1-十二烷基銨， N-[3-K4-( 二甲基氨基)苯甲?；鵠氨基]丙基]N，N-二甲基-，與4-甲基苯磺酸的鹽 (1 1) ；N，N，N-三甲基-3-[(l-氧代-3-苯基-2-丙烯基)氨基]-1-丙基氯化銨；IH-苯并 咪唑-4，6-二磺酸，2，2' -(1，4-亞苯基)二-1，3，5-三嗪，2，4，6-三0-甲氧基苯基)-;1， 3，5-三嗪，2，4，6-三[4-[(2-乙基己基)氧基]苯基]-；1_丙基銨，3-[ [3-[3-QH-苯并三 唑-2-基)-5- (1，1-二甲基乙基)-4-羥基苯基]-1-氧代丙基]氨基]-N，N- 二乙基-N-甲 基_，甲基硫酸(鹽)；2-丙烯酸，3- (1H-咪唑-4-基)-；苯甲酸，2-羥基-，[4-(1-甲基乙 基)苯基]甲酯；1，2，3_丙三醇，1-(4-氨基苯甲酸酯)；苯乙酸，3，4_ 二甲氧基-a-氧代 2-丙烯酸，2-氰基-3，3- 二苯基-，乙酯；鄰氨基苯甲酸，對薄荷-3-基酯；2，2’ -二(1， 4-亞苯基)-IH-苯并咪唑-4，6- 二磺酸單鈉鹽或苯基二苯并咪唑四磺酸二鈉或Heliopan AP)；抗蟲活性成分(驅(qū)蟲劑(impellent)；例如二乙基甲苯酰胺(DEET)；或可在 "Pflegekosmetik" (W. Raab 禾口 U.Kindl, Gustav-Fischer-VerlagStuttgart/New York, 1991)，第161頁中發(fā)現(xiàn)的其它常見驅(qū)蟲劑)；具有角質(zhì)促成作用(keratoplastic effect)的活性成分(例如過氧苯甲酰、視黃 酸、膠態(tài)硫和間苯二酚)；抗微生物劑(例如三氯生(triclosan)或季銨化合物)；抗氧化劑；有機色素類例如酞菁類、偶氮類等；有機染料例如溶劑染料，直接染料等。本發(fā)明并不限于上列有機物質(zhì)。下述測試方法和實施例僅用于舉例說明的目的，不應(yīng)解釋為以任何方式限制本發(fā)明。室溫(r. t.或RT)描述了 20-25°C的溫度；過夜表示12-16小時。除非另有說明，百分 比是按重量計的，溫度是按攝氏度(攝氏溫度)計。 在實施例或別處使用的縮寫 ACN 乙腈 API 活性藥用成分 BSA 牛血清白蛋白(Fluka) IPA 異丙醇 PO 來自糙皮側(cè)耳的I類疏水蛋白 PP 聚丙烯 RT 室溫 SC 來自裂褶菌的I類疏水蛋白 TR 來自里氏木霉的II類疏水蛋白 TT 來自嗜熱籃狀菌的I類疏水蛋白 WCA PP片上的水接觸角(靜止座滴法) w/w 按重量計相對于總重的份數(shù)或百分比 疏水蛋白的制備 疏水蛋白溶液使用含有IOmg蛋白質(zhì)/ml溶液的水溶液。在大腸桿菌中重組地制備疏水蛋白；這些疏水蛋白是 I類疏水蛋白 來自糙皮側(cè)耳的P0、 來自嗜熱籃狀菌的TT、來自裂褶菌的SC; 和II類疏水蛋白來自里氏木霉的TR。來自里氏木霉的疏水蛋白也可通過野生型的深層發(fā)酵和后處
理而得 應(yīng)用實施例實施例1 對乙酰氨基酚在疏水蛋白的存在下的結(jié)晶 疏水蛋白溶液通過將IOmg凍干粉末(蛋白質(zhì)含量為至少60-80%)溶解于ImL純 水中而制得。不溶性殘渣通過離心除去。將15g API (對乙酰氨基酚，Sigma)溶解于150mL純水中。將所得溶液的IOmL等 份試樣轉(zhuǎn)移到15mL可密封聚丙烯管中，該聚丙烯管已預(yù)熱至95°C以防結(jié)晶起始。為確保均 一溫度，將各管在熱混合器(EppendorfThermomixer Comfort)上在95°C和750rpm下振搖 15-30分鐘，然后于95°C在持續(xù)的混合下加入IOOyL疏水蛋白溶液；樣品中的最終蛋白質(zhì) 濃度為lOOppm。在1-aiiin后，將各管撤出熱混合器以允許在RT和無振搖下冷卻。以相同 方法處理對照樣品，除了加入100 μ L純水而不是疏水蛋白溶液，或不存在API。目測評價結(jié) 晶行為；結(jié)果匯總于下表中。表權(quán)利要求
1.用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的方法，所述方法包括用一種或多種兩親 性蛋白質(zhì)處理固體物質(zhì)或其溶液或分散體，所述兩親性蛋白質(zhì)的特征在于，其b.W.水 溶液或分散體顯示在聚丙烯表面上的接觸角比就純水能觀察到的接觸角低20度或更多。
2.權(quán)利要求1的方法，其包括所述有機物質(zhì)的沉淀、結(jié)晶或固-固相轉(zhuǎn)變；尤其是用于 降低微晶大小，增加無定形部分，改變晶體習(xí)性和/或改變晶體的多晶型；優(yōu)選其中所述有 機物質(zhì)的沉淀或結(jié)晶通過將其溶液或分散體與兩親性蛋白質(zhì)的溶液或分散體組合而誘導(dǎo)。
3.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其包括i)將所述蛋白質(zhì)在極性溶劑中的溶液或分散體與所述有機物質(zhì)在可與所述蛋白質(zhì)的 溶劑混溶的極性溶劑中的溶液或分散體混合，或 )將所述有機物質(zhì)在極性溶劑中的溶液或分散體與用所述蛋白質(zhì)浸漬的表面接觸。
4.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其包括在所述兩親性蛋白質(zhì)的存在下對所述有機物 質(zhì)進行濕磨。
5.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其包括在添加所述兩親性蛋白質(zhì)之前或之后將所述 有機物質(zhì)的晶種加到有機物質(zhì)的溶液中。
6.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其中溶液含有另外的添加劑，例如鹽和/或聚合物。
7.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其中所述有機物質(zhì)是有機化合物，在0°C為固體，并 且可溶、部分可溶或可分散于極性溶劑中，例如以膠體的形式。
8.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其中所述有機物質(zhì)是分子量80-1000g/mol、尤其為 100-500g/mol的有機化合物，其優(yōu)選選自生物活性化合物，例如藥物、藥用和化妝品用成 分、農(nóng)藥和殺真菌劑。
9.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其用于降低微晶大小，增加無定形部分，改變晶體習(xí) 性和/或改變晶體的多晶型。
10.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其中所述蛋白質(zhì)為疏水蛋白，例如II類疏水蛋白 或尤其是I類疏水蛋白。
11.根據(jù)任何前述權(quán)利要求的方法，其中所述有機物質(zhì)的沉淀或結(jié)晶通過將其溶液或 分散體與兩親性蛋白質(zhì)的溶液或分散體組合而誘導(dǎo)。
12.如權(quán)利要求1或10中所表征的兩親性蛋白質(zhì)用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多 晶型的用途。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的用途，其用于改變?nèi)鐧?quán)利要求5和/或6中所表征的有機物質(zhì) 的形態(tài)學(xué)和/或多晶型。
14.組合物，其包括固體有機物質(zhì)，尤其如權(quán)利要求5或6中所定義的有機物質(zhì)、和如權(quán) 利要求1、或尤其是權(quán)利要求7中所表征的兩親性蛋白質(zhì)，其中所述固體有機物質(zhì)是細顆粒 形式的有機生物活性物質(zhì)，平均粒度，取決于所需的最終用途，為例如0. 1-1000微米，或在 其它情況下可通過動態(tài)光散射檢測，為例如5-5000nm，尤其是20-2000nm。
15.權(quán)利要求14的組合物，其中所述顆粒是自由流動的，分散在液體中的，或尤其是聚 集的或壓緊的。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于改變有機物質(zhì)的形態(tài)學(xué)和/或多晶型的方法，所述方法包括用一種或多種兩親性蛋白質(zhì)處理固體物質(zhì)或其溶液或分散體。
文檔編號C07K14/37GK102089051SQ200980126793
公開日2011年6月8日 申請日期2009年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月11日
發(fā)明者A·哈夫納, A·布斯, F·考夫曼, G·布拉德雷, P·A·范德沙夫 申請人:巴斯夫歐洲公司