專利名稱：治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法，屬于中藥的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是指血液污染導(dǎo)致動脈粥樣硬化，從而引起心腦缺血引發(fā)的相應(yīng)病變。包括高血壓、動脈粥樣硬化、冠心病(心梗和心絞痛)、腦缺血性病變(腦供血不足、腦血栓形成、腦梗塞)及腦出血。血液污染后導(dǎo)致的動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥是導(dǎo)致死亡的第一殺手。在世界范圍內(nèi)動脈粥樣硬化血栓形成而導(dǎo)致死亡比例占全部死亡人數(shù)的52％，遠遠超過第二位死因的腫瘤(24％)。為了達到更好的防治目的，許多發(fā)明人及藥品企業(yè)做了大量的研究，也提供了一些優(yōu)秀的治療產(chǎn)品；如本申請人申請名稱為“治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法和應(yīng)用”的專利申請，它采用了丹參、燈盞細辛有效部位配伍用于治療心腦血管方面的疾病有確切的療效；但是在深入研究中發(fā)現(xiàn)，采用有效部位的脂質(zhì)體制劑更適合于生物體內(nèi)降解、無毒性和無免疫原性，特別是脂質(zhì)體作為藥物載體，具有靶向性，從而減小藥物劑量，降低毒性，減少副作用等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法和應(yīng)用；本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)，根據(jù)心腦血管疾病如冠心病、腦血栓、老年性癡呆等均因血管窄縮、血流量減少等原因致使供血不足引發(fā)疾病的原理，在實驗篩選的基礎(chǔ)上，采用丹參總酚酸脂質(zhì)體和燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體配伍做成制劑，優(yōu)選出最佳的組方及工藝；得到的產(chǎn)品，特別是注射制劑產(chǎn)品能起到活血化淤、通脈舒絡(luò)、改善血循環(huán)和代謝作用。例如冠心病是冠狀動脈粥樣硬化導(dǎo)致心肌缺血，缺氧而引起心臟病，兩藥合用，可起到改善心肌代謝作用、增加冠狀動脈血流，改善心肌的血供以緩解心絞痛的作用。本發(fā)明對于治療心腦血管疾病如冠心病、心絞痛、心律失常、腦血栓、老年性癡呆等有較好的療效。而且本發(fā)明為脂質(zhì)體作為藥物載體，具有靶向性，從而減小藥物劑量，降低毒性，減少副作用，其不良反應(yīng)小、可供病人長期使用。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的按照重量百分比計算，它是由丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體1～99％和燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體99～1％和適當(dāng)?shù)妮o料制作而成。優(yōu)選為按照重量百分比計算，它是由丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體20～80％和燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體80～20％和適當(dāng)?shù)妮o料制作而成。準(zhǔn)確的說按照重量百分比計算，它是由丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體40～60％與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體60～40％和適當(dāng)?shù)妮o料制作而成。
所述組方中的丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在丹參醇提取物、丹參水提取物、丹參水提醇沉提取物、丹參半仿生提取物、丹參超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎(chǔ)上制得；燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在燈盞細辛醇提取物、燈盞細辛水提取物、燈盞細辛水提醇沉提取物、燈盞細辛半仿生提取物、燈盞細辛超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎(chǔ)上制得。
所述的制劑可以是藥劑學(xué)上任何可以接受的劑型直接用于注射給藥的注射液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液和用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物以及片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片、舌下片或分散片劑。
制劑中含有酚酸類成分和黃酮類成分，以重量百分比計算，制劑中酚酸類成分含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量的總固體量的50％，黃酮類成分含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量的總固體量的50％，脂質(zhì)體包封率不低于60％。
所述脂質(zhì)體的制備方法是燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體和丹參總酚酸脂質(zhì)體是采用薄膜法、硫酸銨梯度法、逆相蒸發(fā)法、溶劑注入法、去污劑分散法、鈣融合法、凍結(jié)融解法、主動包封法、冷凍干燥法、復(fù)乳法、離心法、前體脂質(zhì)體法、制備脂質(zhì)體氣霧劑中的一種或幾種方法制得的。
所述制劑中的脂質(zhì)體這樣制備按主藥∶卵磷脂＝1∶11的比例取卵磷脂，按主藥∶磷脂酰甘油＝1∶1.2的比例取磷脂酰甘油，溶于氯仿—異丙醇的混合溶液中；另取燈盞細辛總黃酮溶于pH5-8的磷酸鹽緩沖液中，兩相混合，水浴式超聲15min后，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中除去有機溶劑即得脂質(zhì)體混懸液，同法制備丹參總酚酸脂質(zhì)體混懸液，與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混懸液混合后以不同的方法制成各種制劑。
所述制劑中的前體脂質(zhì)體這樣制備取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口；將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出；室溫使之溶，重復(fù)一次即得丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮前體脂質(zhì)體，將丹參總酚酸前體脂質(zhì)體和燈盞細辛總黃酮前體脂質(zhì)體混合后以不同的方法制成各種制劑。
所述制劑中的分散片這樣制備取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入磷酸鈣，按主藥∶輔料＝1.3∶1的比例加入微粉纖維素，以及按主藥∶輔料＝2∶1的交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混和均勻，用72％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，50℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請人進行過大量實驗研究，篩選出治療冠心病心絞痛等疾病的處方為丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體，最佳配伍范圍為丹參總酚酸脂質(zhì)體40～60％與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體60～40％。采用本發(fā)明的工藝制備產(chǎn)品外觀良好、質(zhì)量穩(wěn)定。
為證明本發(fā)明提供的藥物具有有效的效果，申請人進行了一系列實驗；實驗例1對不同配比藥效學(xué)比較研究對實驗性犬腦缺血的影響取草犬，隨機分成8組模型組；丹參總酚酸脂質(zhì)體/燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體99/1組簡稱99/1組；丹參總酚酸脂質(zhì)體/燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體80/20組簡稱80/20；丹參總酚酸脂質(zhì)體/燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體60/40組簡稱60/40；丹參總酚酸脂質(zhì)體/燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體40/60組簡稱40/60；丹參總酚酸脂質(zhì)體/燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體20/80組簡稱20/80；丹參總酚酸脂質(zhì)體/燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體1/99組簡稱1/99；陽性對照消心痛組簡稱消心痛，每組5只。腹腔注射3％戊巴比妥鈉1.0ml/kg麻醉，固定于犬手術(shù)臺上，然后在犬右外眼角與右耳根部1/2處(中點)，用電刀切開皮膚，分離肌肉。用手術(shù)專用顱骨鉆鉆開顱骨，以咬骨鉗擴大顱骨孔，切開硬腦膜，找到大腦中動脈。先用多譜勒超聲血流探測儀測定大腦中動脈血流速度，然后靜脈注射給藥，給藥15min后，再次同前法測定大腦中動脈血流速度，隨后立即將大腦中動脈結(jié)扎造成腦缺血。大腦中動脈結(jié)扎6小時后，分離雙側(cè)頸總動脈并夾閉之，即刻從右側(cè)頸總動脈夾閉處的遠心端灌注2.0ml龍膽紫飽和溶液對腦組織進行染色，然后處死動物，開顱取出腦組織，稱全腦重，遂切下未染色的腦組織(即缺血區(qū)腦組織)稱重，求出其占全腦重量的百分率，結(jié)果見下表。

由實驗結(jié)果可知，丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體最佳配伍范圍為丹參總酚酸脂質(zhì)體40～60％與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體60～40％。
實驗例2脂質(zhì)體制備方法研究2.1脂質(zhì)體的制備方法的考察2.1.1逆向蒸發(fā)法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，置于錐形瓶中。以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，電磁攪拌下，將1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液15mL緩緩滴入錐形瓶中，攪拌使與乙醚形成乳濁液，減壓蒸餾1h將乙醚蒸除，得脂質(zhì)體。
2.1.2乙醚注入法以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，取15mL于錐形瓶中。將大豆卵磷脂100mg、膽固醇60mg溶于6mL乙醚中。電磁攪拌下，緩緩將乙醚溶液用五號針頭(針尖在液面以下)均勻后加熱65℃，揮發(fā)除去乙醚，得脂質(zhì)體。
2.1.3薄膜法大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，加15mL含1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮的pH5-8的磷酸鹽緩沖液，浸泡，攪拌洗脫脂質(zhì)膜，可得脂質(zhì)體。
2.1.4硫酸銨梯度法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，于真空干燥箱中干燥后，加入20mL硫酸銨溶液浸泡洗脫脂質(zhì)膜。將制備的空白脂質(zhì)體用探頭超聲細胞破碎器破碎后，裝入透析袋中(約10mmol·L-1)，放入0.9％氯化鈉溶液中透析48h，取出透析后的空白脂質(zhì)體，加入15mL1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，置于60℃水浴中孵化10min，得脂質(zhì)體。
2.2包封率測定采用透析法測定脂質(zhì)體包封率。各取上述幾種方法制備的脂質(zhì)體5mL置于透析袋中，分別置50mL燒杯中，精密加入磷酸緩沖液45mL浸泡，每隔2h攪拌15min。12h后取浸泡液2.5mL置于25mL容量瓶中，加pH5-8磷酸鹽緩沖液定容。以pH5-8磷酸鹽緩沖液為空白在274nm處測吸收度。同步，取5mL1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液于透析袋中透析，作為空白藥物對比，采用包封率計算公式包封率＝(C總-C游離)/C總×100％其中C總為脂質(zhì)體混懸液中總藥量，C游離為未包入脂質(zhì)體中藥物量。結(jié)果見下表。
不同方法制備脂質(zhì)體的包封率

結(jié)果由實驗結(jié)果可知，丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體采用逆向蒸發(fā)法的包封率較高，因此確定逆向蒸發(fā)法為本制劑的脂質(zhì)體制備方法。
實驗例3制劑藥效學(xué)實驗對大鼠急性心肌缺血的保護作用取SD大鼠，體質(zhì)量230～250g，雌雄各半，隨機分為模型對照組、丹參總酚酸-燈盞細辛總黃酮注射液0.3g/kg組、本發(fā)明注射劑0.3g/kg組、本發(fā)明口服液0.3g/kg組，每組10只，連續(xù)7天，在末次給藥后1h結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支。于冠脈結(jié)扎3h后心室取血3ml，以3000×g的速度離心5min制備血清，取血清，用超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒分別測定血清中相應(yīng)指標(biāo)。摘取大鼠心臟排出心腔內(nèi)積血，用生理鹽水沖洗并用濾紙吸去水分，剔除脂肪血管等非心肌組織，剪除心房和右心室，留下左心室稱重，計算梗死區(qū)(濕重)占左心室(濕重)百分比。結(jié)果見下表。
對大鼠冠脈結(jié)扎后心肌梗死范圍及血清中SOD、MDA的影響

由實驗結(jié)果可知，本發(fā)明藥物制劑能明顯提高冠脈結(jié)扎大鼠血清中SOD活性，顯著抑制了MDA的生成，明顯減小心肌梗死區(qū)面積，并且在大大降低用量的情況下，療效仍然優(yōu)于丹參總酚酸、燈盞細辛總黃酮普通注射液。
具體的實施方式本發(fā)明的實施例1丹參總酚酸脂質(zhì)體50g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體50g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，將混懸液置于-20℃冰箱中預(yù)凍12h，最后經(jīng)冷凍干燥后即得凍干粉針劑。靜脈注射，一日一次，一次一支。
本發(fā)明的實施例2丹參總酚酸脂質(zhì)體40g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體60g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，濾過，加注射用水，分裝到安剖瓶，封口滅菌，即得注射液和注射用濃溶液。
本發(fā)明的實施例3丹參總酚酸脂質(zhì)體50g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體50g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，將所得混懸液填充在軟膠囊中，即得軟膠囊。
本發(fā)明的實施例4丹參總酚酸脂質(zhì)體60g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體40g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，將所得混懸液與預(yù)膠化淀粉混合，用聚乙吡咯烷酮的乙醇液為粘合劑制粒，干燥后整粒，再與適量聚乙二醇6000混合均勻，壓片即為片劑。
本發(fā)明的實施例5丹參總酚酸脂質(zhì)體30g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體70g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，按主藥∶輔料＝1.4∶1的比例加入磷酸鈣，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入微粉纖維素，以及按主藥∶輔料＝3∶1的交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混和均勻，用70％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，55℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
本發(fā)明的實施例6∶丹參總酚酸脂質(zhì)體20g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體80g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，加入2.5倍量糊精，0.4％的甜菊甙，1.5％的微晶纖維素，用適量乙醇溶液制軟材，制粒，65℃鼓風(fēng)干燥，制粒，整粒，即得顆粒劑。
本發(fā)明的實施例7丹參總酚酸脂質(zhì)體95g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體5g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，將與主藥比例是1.8∶1的硬脂酸鈉置不銹鋼容器內(nèi)，混合均勻，加熱至80-85℃，待全部熔融后，70-75℃保溫，機械高速攪拌15min至均勻，轉(zhuǎn)移至貯液瓶中，70～75℃保溫，調(diào)節(jié)滴液閥門，滴入30～35℃的煤油中，滴距5～6cm，滴速40～45滴/分，將形成的滴丸瀝盡并擦除煤油，包裝，即得滴丸劑。
本發(fā)明的實施例8丹參總酚酸脂質(zhì)體5g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體95g
取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，將混懸液置于-20℃冰箱中預(yù)凍12h，最后經(jīng)冷凍干燥后即得凍干粉針劑。
本發(fā)明的實施例9丹參總酚酸脂質(zhì)體80g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體20g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，濾過，加注射用水，分裝到安剖瓶，封口滅菌，即得注射液和注射用濃溶液。
本發(fā)明的實施例10丹參總酚酸脂質(zhì)體20g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體80g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，加入5％的的低取代羥丙基纖維素和1.0％甘露醇，壓制成片，即得口崩片。
本發(fā)明的實施例11丹參總酚酸脂質(zhì)體30g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體70g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，將與主藥比例是1.4∶1的聚乙二醇6000置不銹鋼容器內(nèi)，加入提取物，混合均勻，加熱至85-90℃，待全部熔融后，75-80℃保溫，機械高速攪拌15min至均勻，轉(zhuǎn)移至貯液瓶中，75～80℃保溫，調(diào)節(jié)滴液閥門，滴入30～35℃的液狀石蠟中，滴距5～6cm，滴速40～45滴/分，將形成的滴丸瀝盡并擦除液狀石蠟，包裝，即得滴丸劑。
本發(fā)明的實施例12丹參總酚酸脂質(zhì)體70g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體30g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入碳酸鈣，按主藥∶輔料＝1.4∶1的比例加入微晶纖維素，以及按主藥∶輔料＝3∶1的交聯(lián)羧甲基纖維素鈉，混和均勻，用75％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，55℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
本發(fā)明的實施例13丹參總酚酸脂質(zhì)體1g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體99g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，加入2倍量淀粉，0.6％的甜菊甙，1.4％的微晶纖維素，用適量乙醇溶液制軟材，制粒，70℃鼓風(fēng)干燥，制粒，整粒，即得顆粒劑。
本發(fā)明的實施例14丹參總酚酸脂質(zhì)體99g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體1g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，加入等量的淀粉，混合均勻，制粒，裝膠囊，即得膠囊劑。
本發(fā)明的實施例15丹參總酚酸脂質(zhì)體10g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體90g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，加入等量的淀粉，混合均勻，制粒，即得顆粒劑。
本發(fā)明的實施例16丹參總酚酸脂質(zhì)體90g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體10g取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體，加入適量注射用水溶解，加入規(guī)定量的葡萄糖或氯化鈉，混合溶解后按體積加入0.5％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷濾過，濾液加注射用水至規(guī)定量，再用飽和氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7.0～7.5，煮沸，4℃冷藏過夜，粗濾、精濾，加注射用水，分裝，滅菌即得葡萄糖或氯化鈉靜脈輸液。
本發(fā)明的實施例17丹參總酚酸脂質(zhì)體65g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體35g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，加入5％的交聯(lián)聚維酮PVPP和1.4％甘露醇，壓制成片，即得口崩片。
本發(fā)明的實施例18丹參總酚酸脂質(zhì)體55g燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體45g將丹參總酚酸脂質(zhì)體與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合均勻，按主藥∶輔料＝1.3∶1的比例加入硫酸鈣，按主藥∶輔料＝1.1∶1的比例加入微晶纖維素，以及按主藥∶輔料＝3∶1的交聚維酮，混和均勻，用75％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，50℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
實施例19以上丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體可以是市售的或是用以下方法制備的(1)逆向蒸發(fā)法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，置于錐形瓶中。以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，電磁攪拌下，將1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液15mL緩緩滴入錐形瓶中，攪拌使與乙醚形成乳濁液，減壓蒸餾1h將乙醚蒸除，得脂質(zhì)體；(2)溶劑注入法(乙醚注入法)以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮，取15mL于錐形瓶中。將大豆卵磷脂100mg、膽固醇60mg溶于6mL乙醚中。電磁攪拌下，緩緩將乙醚溶液用五號針頭(針尖在液面以下)注入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液中。攪拌均勻后加熱至65℃，揮發(fā)除去乙醚，得脂質(zhì)體；(3)薄膜法大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，加15mL含1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮的pH5-8的磷酸鹽緩沖液，浸泡，攪拌洗脫脂質(zhì)膜，可得脂質(zhì)體；(4)硫酸銨梯度法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，于真空干燥箱中干燥后，加入20mL硫酸銨溶液浸泡洗脫脂質(zhì)膜。將制備的空白脂質(zhì)體用探頭超聲細胞破碎器破碎后，裝入透析袋中(約10mmol·L-1)，放入0.9％氯化鈉溶液中透析48h，取出透析后的空白脂質(zhì)體，加入15mL1％丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，置于60℃水浴中孵化10min，得脂質(zhì)體；
(5)凍結(jié)融解法取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口。將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出。室溫使之溶，重復(fù)一次即得；(6)冷凍干燥法取豆磷脂2.0g，膽固醇0.5g用適量乙醇在80℃熔融，加入pH5-8磷酸鹽緩沖液，待乙醇自然揮盡后轉(zhuǎn)移至組織搗碎機中，高速攪拌10min，過濾，火菌，超聲15min，在無菌條件下，加入滅菌丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮注射原料1.0g及滅菌甘露醇2.0g溶解，灌裝于安瓶中，冷凍干燥成凍干脂質(zhì)體；(7)鈣融合法7umol的磷脂酰絲氨酸(PS)制成薄膜后，用1.5ml生理鹽水水合，超聲波處理5min。取出0.25ml加入到20mmol/L的等量的氯化鈣溶液中混合，37℃孵育80min。生成的卷桶狀物1800g離心10min，取沉淀加入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液后孵育15min。隨后加入45mmol/L含有EDTA的生理鹽水緩沖液0.25ml孵育50min，即得脂質(zhì)體；(8)主動包封法以pH為4的300mmol/L枸櫞酸水溶液為介質(zhì)，采用逆相蒸發(fā)法或薄膜法制備空白脂質(zhì)體。用1mol/L的氫氧化鈉或碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體混懸液的pH至7.8，使脂質(zhì)體膜內(nèi)外形成質(zhì)子的梯度，即得到脂質(zhì)體膜的內(nèi)部為酸性，外部為堿性的脂質(zhì)體。將丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液pH5-8的磷酸鹽緩沖液溶解，65℃孵育。在65℃孵育條件下，將脂質(zhì)體混懸液與丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液混合并輕搖，孵育12min即得；(9)復(fù)乳法按摩爾比為7∶2.2∶1.5取磷脂酰膽堿(PC)、膽固醇(Ch)和磷脂酸(PA)，將它溶于有機溶劑，加入一定的丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，置高速組織搗碎機(10000r/min)乳化10min，再加入磷酸鹽緩沖液(pH5-8)，再一次高速乳化(8000r/min)，得乳狀液。在減壓通氮條件下，除去有機溶液，即得；(10)離心法將80mg磷脂溶于5ml二丁醚中，加入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液的氯化鈉溶液0.2ml。超聲處理得透明溶液，移置有20ml相同滲透壓的氯化鈉溶液的離心管中，用3000r/min離心30min，除去上層有機溶劑，下層則為含有脂質(zhì)體的氯化鈉溶液。經(jīng)大孔樹脂吸附未包封的丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮，即得脂質(zhì)體；(11)制備脂質(zhì)體氣霧劑5ml丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液，280mg/ml卵磷脂乙醇液及6.0g的二氯二氟甲烷混合成有機相，含有7％乙醇50ml水為水相，每次閥門放出50ul有機相及水相，即得。
實施例16以上丹參總酚酸前體脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮前體脂質(zhì)體可以是市售的或是用以下方法制備的(1)凍融法取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口。將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出。室溫使之溶，重復(fù)一次即得；(2)噴霧干燥法將精確稱取的丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮、大豆磷脂和膽固醇共同溶于氯仿中，過濾，濾液收集于圓底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去氯仿成薄膜，真空干燥后，加入pH5-8的磷酸鹽緩沖液，浸泡2-8h，然后在氮氣流保護下高速攪拌，一定時間后，向其中緩慢滴加同樣緩沖液溶解的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和蔗糖溶液，繼續(xù)攪拌，并補足緩沖液至150mL，然后將脂質(zhì)體混懸液用微孔濾膜過濾，濾液在氮氣保護下罐封，即得丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體。采用噴干法，實驗條件為進風(fēng)溫度125℃，進料速度60mL/min，旋風(fēng)分離器壓差55mmH20，霧化盤轉(zhuǎn)速2700r/min；(3)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法分別稱取卵磷脂、膽固醇、VE，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等溶于適量氯仿并收集于茄形燒瓶中，置水浴上，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓揮去氯仿成膜后加丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮磷酸緩沖液。浸泡薄膜后。在頻率35kHz、強檔工作狀態(tài)下超聲，即得丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混懸液。取甘露醇等置于150ml茄形燒瓶中，持續(xù)減壓蒸發(fā)至干燥，取出置于真空干燥器中室溫減壓過夜，徹底干燥后氮氣下分裝，即得。
實施例20丹參總酚酸、燈盞細辛總黃酮可以是市售的，或是用以下方法制備的(1)取丹參，粗粉碎后加入4～15倍量的水，浸泡2～12小時，加熱提取1～5次，每次0.5～2小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮，加入1％～8％的明膠溶液，攪勻，冷藏過夜，濾過，濾液濃縮，加入1～4倍體積乙酸乙酯萃取1～5次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑，真空干燥得丹參總酚酸；(2)取丹參，粉碎成過10目篩的粗粉，加入6～10倍體積50％～90％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～4小時，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入2～4倍藥材體積的水溶解，過濾，濾液過D-101型大孔吸附樹脂，用3～10倍樹脂體積水沖洗雜質(zhì)，然后用2～8倍樹脂體積的20％～50％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，得丹參總酚酸；(3)燈盞細辛藥材，加入5～15倍體積50～80％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～2.5小時，合并提取液，減壓回收溶劑至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入1～4倍量乙酸乙酯，振搖萃取1～8次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得燈盞細辛總黃酮；(4)燈盞細辛藥材，加入5～15倍體積50～80％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～2.5小時，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入1-5倍藥材體積的水加熱溶解，過濾，濾液以0.3-0.8ml/g藥材.min的速度過AB-8型大孔吸附樹脂，依次用1-10倍樹脂體積水和1-6倍樹脂體積5-15％乙醇沖洗雜質(zhì)，然后用1-7倍樹脂體積的30-70％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得燈盞細辛總黃酮。
權(quán)利要求
1.一種治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，它是由丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體1～99％和燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體99～1％和適當(dāng)?shù)妮o料制作而成。
2.按照權(quán)利要求1所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，它是由丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體20～80％和燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體80～20％和適當(dāng)?shù)妮o料制作而成。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，它是由丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體40～60％與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體60～40％和適當(dāng)?shù)妮o料制作而成。
4.按照權(quán)利要求1～3任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述組方中的丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在丹參醇提取物、丹參水提取物、丹參水提醇沉提取物、丹參半仿生提取物、丹參超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎(chǔ)上制得；燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在燈盞細辛醇提取物、燈盞細辛水提取物、燈盞細辛水提醇沉提取物、燈盞細辛半仿生提取物、燈盞細辛超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎(chǔ)上制得。
5.按照權(quán)利要求1～4任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述的制劑為直接用于注射給藥的注射液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液和用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物以及片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片、舌下片或分散片劑。
6.按照權(quán)利要求1～5中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于制劑中含有酚酸類成分和黃酮類成分，以重量百分比計算，制劑中酚酸類成分含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量的總固體量的50％，黃酮類成分含量不低于制劑中扣除輔料量和水分量的總固體量的50％，脂質(zhì)體包封率不低于60％。
7.如權(quán)利要求1～5中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體和丹參總酚酸脂質(zhì)體是采用薄膜法、硫酸銨梯度法、逆相蒸發(fā)法、溶劑注入法、去污劑分散法、鈣融合法、凍結(jié)融解法、主動包封法、冷凍干燥法、復(fù)乳法、離心法、前體脂質(zhì)體法、制備脂質(zhì)體氣霧劑中的一種或幾種方法制得的。
8.如權(quán)利要求1～7中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述制劑中的脂質(zhì)體這樣制備按主藥∶卵磷脂＝1∶11的比例取卵磷脂，按主藥∶磷脂酰甘油＝1∶1.2的比例取磷脂酰甘油，溶于氯仿-異丙醇的混合溶液中；另取燈盞細辛總黃酮溶于pH5-8的磷酸鹽緩沖液中，兩相混合，水浴式超聲15min后，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中除去有機溶劑即得脂質(zhì)體混懸液，同法制備丹參總酚酸脂質(zhì)體混懸液，與燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混懸液混合后以不同的方法制成各種制劑。
9.如權(quán)利要求1～7中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述制劑中的前體脂質(zhì)體這樣制備取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口；將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出；室溫使之溶，重復(fù)一次即得丹參總酚酸或燈盞細辛總黃酮前體脂質(zhì)體，將丹參總酚酸前體脂質(zhì)體和燈盞細辛總黃酮前體脂質(zhì)體混合后以不同的方法制成各種制劑。
10.按照權(quán)利要求1～9中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的分散片這樣制備取丹參總酚酸脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體混合，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入磷酸鈣，按主藥∶輔料＝1.3∶1的比例加入微粉纖維素，以及按主藥∶輔料＝2∶1的交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混和均勻，用72％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，50℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
全文摘要
本發(fā)明提供了治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法，它用丹參總酚酸脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體、燈盞細辛總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體與輔料制作成注射制劑或口服制劑。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用丹參總酚酸和燈盞細辛總黃酮的脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體作為藥物載體，具有靶向性，藥物用量少，毒性低，副作用小。
文檔編號A61P9/10GK1994371SQ20061000025
公開日2007年7月11日 申請日期2006年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月6日
發(fā)明者于文風(fēng) 申請人:北京奇源益德藥物研究所