專利名稱：治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明是一種治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法，屬于中藥的技術領域。
背景技術：
心腦血管疾病如冠心病心絞痛是中老年人的常見病、多發(fā)病。系指冠狀動脈粥樣硬化導致冠狀動脈供血不足，心肌急劇的暫時的缺血缺氧引起的胸骨后疼痛。屬于中醫(yī)的“胸痹”、“心悸”、“真心痛”等范疇。本病常反復發(fā)作，纏綿難愈，嚴重危害著人們的身體健康。為了達到防治目的，許多發(fā)明人及藥品企業(yè)做了大量的研究，也提供了一些治療的產(chǎn)品；如本申請人申請名稱為“治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法和應用”的專利申請，它采用了燈盞、銀杏葉有效部位配伍用于治療心腦血管方面的疾病有確切的療效；但是在深入研究中發(fā)現(xiàn)，采用有效部位的脂質(zhì)體制劑更適合于生物體內(nèi)降解、無毒性和無免疫原性，特別是脂質(zhì)體作為藥物載體，具有靶向性，從而減小藥物劑量，降低毒性，減少副作用等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法和應用；本發(fā)明針對現(xiàn)有技術，根據(jù)心腦血管疾病如冠心病、腦血栓、老年性癡呆等均因血管窄縮、血流量減少等原因致使供血不足引發(fā)疾病的原理，在實驗篩選的基礎上，采用燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體配伍做成制劑，優(yōu)選出最佳的組方及工藝；得到的產(chǎn)品，特別是注射制劑產(chǎn)品能起到活血化淤、通脈舒絡、改善血循環(huán)和代謝作用。例如冠心病是冠狀動脈粥樣硬化導致心肌缺血，缺氧而引起心臟病，兩藥合用，可起到改善心肌代謝作用、增加冠狀動脈血流，改善心肌的血供以緩解心絞痛的作用。本發(fā)明對于治療心腦血管疾病如冠心病、心絞痛、心律失常、腦血栓、老年性癡呆等有較好的療效。而且本發(fā)明為脂質(zhì)體作為藥物載體，具有靶向性，從而減小藥物劑量，降低毒性，減少副作用，其不良反應小、可供病人長期使用。
本發(fā)明是這樣構成的按照重量百分比計算，它是由燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體1～99％和銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體99～1％和適當?shù)妮o料制作而成。優(yōu)選為按照重量百分比計算，它是由燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體20～80％和銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體80～20％和適當?shù)妮o料制作而成。準確的說按照重量百分比計算，它是由燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體40～60％與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體60～40％和適當?shù)妮o料制作而成。
所述組方中的燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在燈盞細辛醇提取物、燈盞細辛水提取物、燈盞細辛水提醇沉提取物、燈盞細辛半仿生提取物、燈盞細辛超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎上制得；銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在銀杏葉醇提取物、銀杏葉水提取物、銀杏葉水提醇沉提取物、銀杏葉半仿生提取物、銀杏葉超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎上制得。
所述的制劑可以是藥劑學上任何可以接受的劑型直接用于注射給藥的注射液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液和用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物以及片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片、舌下片或分散片劑。
按照重量百分比計算，銀杏葉總黃酮中總黃酮的含量不低于50％，銀杏葉總內(nèi)酯中總內(nèi)酯的含量不低于50％，脂質(zhì)體包封率不低于60％。
所述脂質(zhì)體的制備方法是銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體和燈盞花素脂質(zhì)體是采用薄膜法、硫酸銨梯度法、逆相蒸發(fā)法、溶劑注入法、去污劑分散法、鈣融合法、凍結融解法、主動包封法、冷凍干燥法、復乳法、離心法、前體脂質(zhì)體法、制備脂質(zhì)體氣霧劑中的一種或幾種方法制得的。
所述制劑中的脂質(zhì)體這樣制備按主藥∶卵磷脂＝1∶10的比例取卵磷脂，按主藥∶磷脂酰甘油＝1∶1.1的比例取磷脂酰甘油，溶于氯仿一異丙醇的混合溶液中；另取銀杏葉總黃酮或銀杏葉總內(nèi)酯溶于pH5-8的磷酸鹽緩沖液中，兩相混合，水浴式超聲8min后，于旋轉蒸發(fā)儀中除去有機溶劑即得脂質(zhì)體混懸液，同法制備燈盞花素脂質(zhì)體混懸液，與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混懸液混合后以不同的方法制成各種制劑。
所述制劑中的前體脂質(zhì)體這樣制備取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口；將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出；室溫使之溶，重復一次即得燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯前體脂質(zhì)體，將燈盞花素前體脂質(zhì)體和銀杏葉總黃酮前體脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯前體脂質(zhì)體混合后以不同的方法制成各種制劑。
所述制劑中的分散片這樣制備取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，按主藥∶輔料＝1.4∶1的比例加入磷酸鈣，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入微粉纖維素，以及按主藥∶輔料＝3∶1的交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混和均勻，用70％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，55℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
與現(xiàn)有技術相比，本申請人進行過大量實驗研究，篩選出治療冠心病心絞痛等疾病的處方為燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體，最佳配伍比例為燈盞花素40-60％與銀杏葉總黃酮及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體60-40％。采用本發(fā)明的工藝制備產(chǎn)品外觀良好、質(zhì)量穩(wěn)定。
為證明本發(fā)明提供的藥物具有有效的效果，申請人進行了一系列實驗；實驗例1對不同配比藥效學比較研究我們通過抗血小板聚集試驗、抑制小鼠尾血栓形成試驗和抗缺糖缺氧對體外培養(yǎng)心肌細胞損傷的保護作用試驗，對這燈盞花素脂質(zhì)體銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體按1∶99、20∶80、40∶60、60∶40、80∶20、99∶1共6個組合配伍處方，進行了系統(tǒng)的處方篩選試驗。

由實驗結果可知，燈盞花素脂質(zhì)體銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體最佳配伍比例為燈盞花素脂質(zhì)體40-60％與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體60-40％。
實驗例2脂質(zhì)體制備方法研究2.1脂質(zhì)體的制備方法的考察2.1.1逆向蒸發(fā)法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，置于錐形瓶中。以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，電磁攪拌下，將1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液15mL緩緩滴入錐形瓶中，攪拌使與乙醚形成乳濁液，減壓蒸餾1h將乙醚蒸除，得脂質(zhì)體。
2.1.2乙醚注入法以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，取15mL于錐形瓶中。將大豆卵磷脂100mg、膽固醇60mg溶于6mL乙醚中。電磁攪拌下，緩緩將乙醚溶液用五號針頭(針尖在液面以下)均勻后加熱65℃，揮發(fā)除去乙醚，得脂質(zhì)體。
2.1.3薄膜法大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，加15mL含1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯的pH5-8的磷酸鹽緩沖液，浸泡，攪拌洗脫脂質(zhì)膜，可得脂質(zhì)體。
2.1.4硫酸銨梯度法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，于真空干燥箱中干燥后，加入20mL硫酸銨溶液浸泡洗脫脂質(zhì)膜。將制備的空白脂質(zhì)體用探頭超聲細胞破碎器破碎后，裝入透析袋中(約10mmol·L-1)，放入0.9％氯化鈉溶液中透析48h，取出透析后的空白脂質(zhì)體，加入15mL1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，置于60℃水浴中孵化10min，得脂質(zhì)體。
2.2包封率測定采用透析法測定脂質(zhì)體包封率。各取上述幾種方法制備的脂質(zhì)體5mL置于透析袋中，分別置50mL燒杯中，精密加入磷酸緩沖液45mL浸泡，每隔2h攪拌15min。12h后取浸泡液2.5mL置于25mL容量瓶中，加pH5-8磷酸鹽緩沖液定容。以pH5-8磷酸鹽緩沖液為空白在274nm處測吸收度。同步，取5mL1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液于透析袋中透析，作為空白藥物對比，采用包封率計算公式包封率＝(C總-C游離)/C總×100％其中C總為脂質(zhì)體混懸液中總藥量，C游離為未包入脂質(zhì)體中藥物量。結果見下表。

結果由實驗結果可知，燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體采用逆向蒸發(fā)法的包封率較高，因此確定逆向蒸發(fā)法為本制劑的脂質(zhì)體制備方法。
實驗例3制劑藥效學實驗大鼠冠狀動脈結扎引起心肌梗死的影響取雄性Wistar大鼠50只，隨機分為5組，即假手術對照組、模型對照組、燈盞花素一銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯注射液0.3g/kg組、本發(fā)明口服液0.3g/kg組、本發(fā)明注射劑0.3g/kg組，每組10只，各組分別給藥，每日1次連續(xù)3天。末次給藥后1h，以戊巴比妥麻醉，氣管插管，人工呼吸。于第3～4肋間開胸，距冠狀動脈出口5mm處結扎冠狀動脈左前降支，造成閉塞性冠脈區(qū)心肌梗死。于4h后用電磁流量計測定冠狀動脈血流量，并測定梗死區(qū)面積百分比。結果見下表，用藥組的冠脈流量顯著增加，并且梗死區(qū)面積明顯減小。

由實驗結果可知，本發(fā)明藥物制劑對冠狀動脈閉塞引起心肌缺血情況可以顯著增加冠脈流量，明顯減小心肌梗死區(qū)面積，并且在大大降低用量的情況下，療效仍然優(yōu)于燈盞花素、銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯普通注射液。
具體的實施方式本發(fā)明的實施例1燈盞花素脂質(zhì)體10g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體45g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體45g取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，將混懸液置于-20℃冰箱中預凍12h，最后經(jīng)冷凍干燥后即得凍干粉針劑。靜脈注射，一日一次，一次一支。
本發(fā)明的實施例2燈盞花素脂質(zhì)體40g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體30g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體30g取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，濾過，加注射用水，分裝到安剖瓶，封口滅菌，即得注射液和注射用濃溶液。
本發(fā)明的實施例3燈盞花素脂質(zhì)體90g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體5g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體5g取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，將所得混懸液填充在軟膠囊中，即得軟膠囊。
本發(fā)明的實施例4燈盞花素脂質(zhì)體1g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體44g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體45g取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，將所得混懸液與預膠化淀粉混合，用聚乙吡咯烷酮的乙醇液為粘合劑制粒，干燥后整粒，再與適量聚乙二醇6000混合均勻，壓片即為片劑。
本發(fā)明的實施例5燈盞花素脂質(zhì)體60g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體20g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體20g取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，按主藥∶輔料＝1.4∶1的比例加入磷酸鈣，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入微粉纖維素，以及按主藥∶輔料＝3∶1的交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混和均勻，用70％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，55℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
本發(fā)明的實施例6燈盞花素脂質(zhì)體20g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體40g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體40g將燈盞花素脂質(zhì)體與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合均勻，加入4.5％的交聯(lián)聚維酮PVPP和1.5％甘露醇，壓制成片，即得口崩片。
本發(fā)明的實施例7燈盞花素脂質(zhì)體80g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體10g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體10g將燈盞花素脂質(zhì)體與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合均勻，將與主藥比例是1.5∶1的聚乙二醇4000置不銹鋼容器內(nèi)，加入提取物，混合均勻，加熱至80-90℃，待全部熔融后，70-80℃保溫，機械高速攪拌10min至均勻，轉移至貯液瓶中，70～80℃保溫，調(diào)節(jié)滴液閥門，滴入30～40℃的二甲基硅油中，滴距5～6cm，滴速40～45滴/分，將形成的滴丸瀝盡并擦除二甲基硅油，包裝，即得滴丸劑。
本發(fā)明的實施例8燈盞花素脂質(zhì)體99g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體0.5g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體0.5g將燈盞花素脂質(zhì)體與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合均勻，按主藥∶輔料＝1∶1的比例加入硫酸鈣，按主藥∶輔料＝1∶1的比例加入微晶纖維素，混和均勻，用60％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，60℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
本發(fā)明的實施例9燈盞花素脂質(zhì)體1g、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體45g、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體44g將燈盞花素脂質(zhì)體與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合均勻，加入2倍量淀粉，0.8％的甜菊甙，2％的微晶纖維素，用適量聚乙烯吡咯烷酮k30的醇溶液制軟材，制粒，70℃鼓風干燥，制粒，整粒，即得顆粒劑。
本發(fā)明的實施例10燈盞花素脂質(zhì)體60g銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體15g銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體25g將燈盞花素脂質(zhì)體與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合均勻，加入等量的淀粉，混合均勻，制粒，裝膠囊，即得膠囊劑。
實施例11以上燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體可以是市售的或是用以下方法制備的(1)逆向蒸發(fā)法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，置于錐形瓶中。以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，電磁攪拌下，將1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液15mL緩緩滴入錐形瓶中，攪拌使與乙醚形成乳濁液，減壓蒸餾1h將乙醚蒸除，得脂質(zhì)體；(2)溶劑注入法(乙醚注入法)以pH5-8的磷酸鹽緩沖液為溶劑配制1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯，取15mL于錐形瓶中。將大豆卵磷脂100mg、膽固醇60mg溶于6mL乙醚中。電磁攪拌下，緩緩將乙醚溶液用五號針頭(針尖在液面以下)注入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液中。攪拌均勻后加熱至65℃，揮發(fā)除去乙醚，得脂質(zhì)體；(3)薄膜法大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，加15mL含1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯的pH5-8的磷酸鹽緩沖液，浸泡，攪拌洗脫脂質(zhì)膜，可得脂質(zhì)體；(4)硫酸銨梯度法取大豆卵磷脂100mg，膽固醇60mg溶于20mL乙醚中，用旋轉蒸發(fā)儀減壓除去有機溶劑，在梨形瓶中形成均勻的磷脂膜，于真空干燥箱中干燥后，加入20mL硫酸銨溶液浸泡洗脫脂質(zhì)膜。將制備的空白脂質(zhì)體用探頭超聲細胞破碎器破碎后，裝入透析袋中(約10mmol·L-1)，放入0.9％氯化鈉溶液中透析48h，取出透析后的空白脂質(zhì)體，加入15mL1％燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，置于60℃水浴中孵化10min，得脂質(zhì)體；(5)凍結融解法取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口。將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出。室溫使之溶，重復一次即得；(6)冷凍干燥法取豆磷脂2.0g，膽固醇0.5g用適量乙醇在80℃熔融，加入pH5-8磷酸鹽緩沖液，待乙醇自然揮盡后轉移至組織搗碎機中，高速攪拌10min，過濾，火菌，超聲15min，在無菌條件下，加入滅菌燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯注射原料1.0g及滅菌甘露醇2.0g溶解，灌裝于安瓶中，冷凍干燥成凍干脂質(zhì)體；(7)鈣融合法7umol的磷脂酰絲氨酸(PS)制成薄膜后，用1.5ml生理鹽水水合，超聲波處理5min。取出0.25ml加入到20mmol/L的等量的氯化鈣溶液中混合，37℃孵育80min。生成的卷桶狀物1800g離心10min，取沉淀加入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液后孵育15min。隨后加入45mmol/L含有EDTA的生理鹽水緩沖液0.25ml孵育50min，即得脂質(zhì)體；(8)主動包封法以pH為4的300mmol/L枸櫞酸水溶液為介質(zhì)，采用逆相蒸發(fā)法或薄膜法制備空白脂質(zhì)體。用1mol/L的氫氧化鈉或碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體混懸液的pH至7.8，使脂質(zhì)體膜內(nèi)外形成質(zhì)子的梯度，即得到脂質(zhì)體膜的內(nèi)部為酸性，外部為堿性的脂質(zhì)體。將燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液pH5-8的磷酸鹽緩沖液溶解，65℃孵育。在65℃孵育條件下，將脂質(zhì)體混懸液與燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液混合并輕搖，孵育12min即得；(9)復乳法按摩爾比為7∶2.2∶1.5取磷脂酰膽堿(PC)、膽固醇(Ch)和磷脂酸(PA)，將它溶于有機溶劑，加入一定的燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，置高速組織搗碎機(10000r/min)乳化10min，再加入磷酸鹽緩沖液(pH5-8)，再一次高速乳化(8000r/min)，得乳狀液。在減壓通氮條件下，除去有機溶液，即得；(10)離心法將80mg磷脂溶于5ml二丁醚中，加入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液的氯化鈉溶液0.2ml。超聲處理得透明溶液，移置有20ml相同滲透壓的氯化鈉溶液的離心管中，用3000r/min離心30min，除去上層有機溶劑，下層則為含有脂質(zhì)體的氯化鈉溶液。經(jīng)大孔樹脂吸附未包封的燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯，即得脂質(zhì)體；(11)制備脂質(zhì)體氣霧劑5ml燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液，280mg/ml卵磷脂乙醇液及6.0g的二氯二氟甲烷混合成有機相，含有7％乙醇50ml水為水相，每次閥門放出50ul有機相及水相，即得。
實施例12以上燈盞花素前體脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮前體脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯前體脂質(zhì)體可以是市售的或是用以下方法制備的(1)凍融法取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口。將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出。室溫使之溶，重復一次即得；(2)噴霧干燥法將精確稱取的燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯、大豆磷脂和膽固醇共同溶于氯仿中，過濾，濾液收集于圓底燒瓶中，旋轉蒸發(fā)揮去氯仿成薄膜，真空干燥后，加入pH5-8的磷酸鹽緩沖液，浸泡2-8h，然后在氮氣流保護下高速攪拌，一定時間后，向其中緩慢滴加同樣緩沖液溶解的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和蔗糖溶液，繼續(xù)攪拌，并補足緩沖液至150mL，然后將脂質(zhì)體混懸液用微孔濾膜過濾，濾液在氮氣保護下罐封，即得燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體。采用噴干法，實驗條件為進風溫度125℃，進料速度60mL/min，旋風分離器壓差55mmH20，霧化盤轉速2700r/min；(3)旋轉蒸發(fā)法分別稱取卵磷脂、膽固醇、VE，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等溶于適量氯仿并收集于茄形燒瓶中，置水浴上，用旋轉蒸發(fā)器減壓揮去氯仿成膜后加燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯磷酸緩沖液。浸泡薄膜后。在頻率35kHz、強檔工作狀態(tài)下超聲，即得燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混懸液。取甘露醇等置于150ml茄形燒瓶中，持續(xù)減壓蒸發(fā)至干燥，取出置于真空干燥器中室溫減壓過夜，徹底干燥后氮氣下分裝，即得。
實施例13燈盞花素、銀杏葉總黃酮及銀杏葉總內(nèi)酯可以是市售的，或是用以下方法制備的(1)燈盞細辛藥材，加入5～15倍體積50～80％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～2.5小時，合并提取液，減壓回收溶劑至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入1～4倍量乙酸乙酯，振搖萃取1～8次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得燈盞花素；(2)燈盞細辛藥材，加入5～15倍體積50～80％乙醇回流提取1～4次，每次0.5～2.5小時，合并提取液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，加入1-5倍藥材體積的水加熱溶解，過濾，濾液以0.3-0.8ml/g藥材.min的速度過AB-8型大孔吸附樹脂，依次用1-10倍樹脂體積水和1-6倍樹脂體積5-15％乙醇沖洗雜質(zhì)，然后用1-7倍樹脂體積的30-70％乙醇解吸，收集解吸液，減壓回收乙醇至60℃時測定相對密度為1.05～1.15，干燥得燈盞花素；(3)銀杏葉，加入3～12倍量的40％～80％的乙醇，回流提取1～5次，每次0.5～3小時，合并回流液，過濾，濾液回收乙醇濃縮，加入1～4倍體積乙酸乙酯萃取1～6次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑，真空干燥得銀杏葉總黃酮；(4)銀杏葉，加入3～12倍量的40％～80％的乙醇，回流提取1～5次，每次0.5～3小時，合并回流液，過濾，濾液回收乙醇濃縮，加入注射用水溶解，濾過，濾液過大孔吸附樹脂柱或聚酰胺柱和硅膠柱，用0～15％乙醇洗脫雜質(zhì)，再用2～8倍樹脂重量的40～90％乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇濃縮，真空干燥，得銀杏葉總黃酮；(5)銀杏葉，加入3～12倍量的40％～80％的乙醇，回流提取1～5次，每次0.5～3小時，合并回流液，過濾，濾液回收乙醇濃縮，加入1～4倍體積乙酸乙酯萃取1～6次，合并乙酸乙酯液，減壓回收溶劑，真空干燥得銀杏葉總內(nèi)酯；(6)銀杏葉，加入3～12倍量的40％～80％的乙醇，回流提取1～5次，每次0.5～3小時，合并回流液，過濾，濾液回收乙醇濃縮，加入注射用水溶解，濾過，濾液過大孔吸附樹脂柱或聚酰胺柱和硅膠柱，用0～15％乙醇洗脫雜質(zhì)，再用2～8倍樹脂重量的40～90％乙醇洗脫，洗脫液回收乙醇濃縮，真空干燥，得銀杏葉總內(nèi)酯。
權利要求
1.一種治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，它是由燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體1～99％和銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體99～1％和適當?shù)妮o料制作而成。
2.按照權利要求1所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，它是由燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體20～80％和銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體80～20％和適當?shù)妮o料制作而成。
3.按照權利要求1或2所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，它是由燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體40～60％與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體60～40％和適當?shù)妮o料制作而成。
4.按照權利要求1～3任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述組方中的燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在燈盞細辛醇提取物、燈盞細辛水提取物、燈盞細辛水提醇沉提取物、燈盞細辛半仿生提取物、燈盞細辛超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎上制得；銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體及銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可以是在銀杏葉醇提取物、銀杏葉水提取物、銀杏葉水提醇沉提取物、銀杏葉半仿生提取物、銀杏葉超臨界萃取物或者以上各提取物的精制品的基礎上制得。
5.按照權利要求1～4任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述的制劑為直接用于注射給藥的注射液、直接供靜脈滴注的靜脈輸液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液和用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末和無菌塊狀物以及片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、丸劑、軟膠囊劑、口服液體制劑、口腔崩解片、舌下片或分散片劑。
6.按照權利要求4所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于按照重量百分比計算，銀杏葉總黃酮中總黃酮的含量不低于50％，銀杏葉總內(nèi)酯中總內(nèi)酯的含量不低于50％，脂質(zhì)體包封率不低于60％。
7.如權利要求1～5中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體和燈盞花素脂質(zhì)體是采用薄膜法、硫酸銨梯度法、逆相蒸發(fā)法、溶劑注入法、去污劑分散法、鈣融合法、凍結融解法、主動包封法、冷凍干燥法、復乳法、離心法、前體脂質(zhì)體法、制備脂質(zhì)體氣霧劑中的一種或幾種方法制得的。
8.如權利要求1～7中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述制劑中的脂質(zhì)體這樣制備按主藥∶卵磷脂＝1∶10的比例取卵磷脂，按主藥∶磷脂酰甘油＝1∶1.1的比例取磷脂酰甘油，溶于氯仿-異丙醇的混合溶液中；另取銀杏葉總黃酮或銀杏葉總內(nèi)酯溶于pH5-8的磷酸鹽緩沖液中，兩相混合，水浴式超聲8min后，于旋轉蒸發(fā)儀中除去有機溶劑即得脂質(zhì)體混懸液，同法制備燈盞花素脂質(zhì)體混懸液，與銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混懸液混合后以不同的方法制成各種制劑。
9.如權利要求1～7中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑，其特征在于所述制劑中的前體脂質(zhì)體這樣制備取磷脂和輔料加一定量無水乙醇溶解，在恒溫攪拌的條件下以一定速度注入燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯溶液中，繼續(xù)恒溫攪拌，降至室溫，勻漿，膜過濾，灌裝，充氮氣，封口；將所得脂質(zhì)體放入液氮中，冷凍后取出；室溫使之溶，重復一次即得燈盞花素或銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯前體脂質(zhì)體，將燈盞花素前體脂質(zhì)體和銀杏葉總黃酮前體脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯前體脂質(zhì)體混合后以不同的方法制成各種制劑。
10.按照權利要求1～9中任意一項所述的治療心腦血管疾病的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的分散片這樣制備取燈盞花素脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體混合，按主藥∶輔料＝1.4∶1的比例加入磷酸鈣，按主藥∶輔料＝1.2∶1的比例加入微粉纖維素，以及按主藥∶輔料＝3∶1的交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混和均勻，用70％乙醇適量制軟材，過20目篩制顆粒，55℃干燥，取出，過30目篩整粒，加入適量滑石粉、微粉硅膠，混和均勻，壓片，即得分散片。
全文摘要
本發(fā)明提供了治療心腦血管疾病的中藥制劑及其制備方法，它用燈盞花素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體、銀杏葉總黃酮脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體、銀杏葉總內(nèi)酯脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體與輔料制作成注射制劑或口服制劑。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明采用燈盞花素、銀杏葉總黃酮、銀杏葉總內(nèi)酯的脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體作為藥物載體，具有靶向性，藥物用量少，毒性低，副作用小。
文檔編號A61P9/00GK1994312SQ200610000249
公開日2007年7月11日 申請日期2006年1月6日 優(yōu)先權日2006年1月6日
發(fā)明者于文風 申請人:北京奇源益德藥物研究所