專利名稱：一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法，特別涉及通脈制劑質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
通脈制劑原料藥是由丹參、川芎和葛根三味中藥組成，國(guó)內(nèi)有多種劑型上市。但經(jīng)我們研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有通脈制劑存在質(zhì)量控制方法落后，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制地缺點(diǎn)?，F(xiàn)有質(zhì)量控制方法中中并沒(méi)有對(duì)丹參和川芎進(jìn)行鑒別，或?qū)Ω鸶爻煞诌M(jìn)行含量測(cè)定。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制抗栓制劑的質(zhì)量，從而將影響產(chǎn)品的生產(chǎn)和保證質(zhì)量。
為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們建立了制劑的質(zhì)量控制方法，該方法采用照薄層色譜法對(duì)丹參和川芎進(jìn)行鑒別，采用高效液相色譜法葛根素成分的含量。該質(zhì)量控制方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均符合要求，確保產(chǎn)品質(zhì)量的“均一、穩(wěn)定、有效、可控”。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于公開(kāi)通脈制劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明通脈制劑的質(zhì)量控制方法是根據(jù)以下通脈制劑制定的
本發(fā)明通脈制劑由如下重量份的中藥原料制成丹參500份、川芎500份、葛根500份以上組成若以克為單位，可制成藥物制劑1000劑，所述1000劑指，制成的成品藥物制劑，如制成膠囊制劑1000粒，片劑1000片，顆粒劑1000g，液體制劑1000ml等，
以上組成是按重量份作為配比的，在生產(chǎn)時(shí)可按照相應(yīng)比例增大或減少，如大規(guī)模生產(chǎn)可以以公斤為單位，或以噸為單位。
本發(fā)明通脈制劑的制備方法可以采用以下方法
通過(guò)將上述配方的中藥原料經(jīng)過(guò)提取或其他方式加工，制成藥物活性物質(zhì)，隨后，以該物質(zhì)為原料，需要時(shí)加入藥物可接受的載體，按照制劑學(xué)的常規(guī)技術(shù)制成膠囊、片劑、口服液、糖漿、顆粒劑。所述活性物質(zhì)可以通過(guò)選自以下方式的方法得到，如通過(guò)粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過(guò)篩、滲漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、層析等方法得到，這些活性物質(zhì)可以是浸膏形式的物質(zhì)，可以是干浸膏也可以是流浸膏，還可以是高純度提取物，根據(jù)制劑的不同需要決定制成不同的濃度。
本發(fā)明的通脈制劑，在制成制劑時(shí)根據(jù)需要可以加入藥物可接受的載體，這些載體可以是任何適合制成通脈制劑的載體，如苯甲酸或鉀鹽、甘露醇、山梨醇、山梨酸或鉀鹽、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、尼泊爾甲酯、尼泊爾乙酯、尼泊爾丙酯、尼泊爾丁酯、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素A、維生素C、維生素E、維生素D、氮酮、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價(jià)堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、土溫60-80、司盤(pán)-80、蜂蠟、羊毛脂、液體石蠟、十六醇、沒(méi)食子酸酯類、瓊脂、三乙醇胺、堿性氨基酸、尿素、尿囊素、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料等。
優(yōu)選的通脈制劑制備方法為以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入不同輔料，按照不同的方法制成各種制劑。
本發(fā)明是針對(duì)通脈制劑提出質(zhì)量控制方法的，這種通脈制劑包括膠囊、片劑、口服液、糖漿、顆粒劑等口服制劑。優(yōu)選的是顆粒劑。
更為具體地說(shuō)，通脈顆粒劑的制備方法為以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入糖粉適量，制成顆粒，低溫干燥(＜60℃)，制成1000g，即得。
本發(fā)明提供的是針對(duì)以上通脈制劑的質(zhì)量控制方法，為控制通脈制劑的質(zhì)量。針對(duì)的其特點(diǎn)及本發(fā)明配方，我們提供了如下質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法包括以下步驟
對(duì)性狀進(jìn)行觀察，根據(jù)藥典的方法對(duì)內(nèi)容物進(jìn)行檢查，對(duì)內(nèi)容物丹參和川芎進(jìn)行鑒別，對(duì)含有的葛根素進(jìn)行含量測(cè)定。
因此，本發(fā)明的質(zhì)量控制方法主要的步驟是
A.對(duì)本發(fā)明藥物制劑中的丹參和川芎進(jìn)行鑒別；
B.測(cè)定本發(fā)明藥物制劑中葛根素的含量；
其中A鑒別的具體步驟如下
(1)取通脈制劑內(nèi)容物10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸0.5-1.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(5-16∶2-8∶0.9-1.8)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
(2)取通脈制劑內(nèi)容物5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸0.5-1.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(5-16∶2-9∶0.3-1.0)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
其中B測(cè)定含量的具體步驟如下
含量測(cè)定包括以下方法葛根素含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(12-38∶48-96)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250±3nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加40-70％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加40-70％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每袋含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不得少于7.5mg。
以上方法中所述本品是指本發(fā)明的成品藥物如膠囊、片劑、口服液、糖漿、顆粒劑。
本發(fā)明質(zhì)量控制方法對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量控制更為有效，方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均較高。能較好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，確保了產(chǎn)品質(zhì)量的“均一、穩(wěn)定、有效、可控”。
本發(fā)明各實(shí)驗(yàn)例供試品所用制劑均可采用實(shí)施例1所述的抗栓膠囊制劑，也可用與實(shí)施例1所述的抗栓膠囊劑具有相同原料組成的其他制劑。
實(shí)驗(yàn)例 葛根素的含量測(cè)定方法研究
1.儀器與試藥
1.1儀器 日本島津LC-10ATVP高效液相色譜儀，LC-10ATvp輸液泵；SPD-M10Avp二級(jí)陣列檢測(cè)器；SCL-10Avp系統(tǒng)控制器；CTO-10ASvp恒溫柱箱；CLASS-VP6.1工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；微量進(jìn)樣器(25μl)，HAMILTON公司；超聲波清洗機(jī)(250W，北京市醫(yī)療設(shè)備二廠)。
1.1.2試藥 甲醇(分析純)、水為二次重蒸餾水、葛根素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)0656-200106)；
1.2色譜條件色譜柱Hypersil C18(5um，250×5.0i.d.mm)大連伊利特；流動(dòng)相甲醇-水(25∶75)；檢測(cè)波長(zhǎng)250nm；流速1.0ml/min；柱溫40℃；進(jìn)樣量5μl。
1.3系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
分別取葛根素對(duì)照品對(duì)照品溶液、供試品溶液和缺葛根藥材的陰性供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜。可知葛根素的保留時(shí)間(tR)約為5.8分鐘，陰性樣品色譜圖在葛根素峰位置處無(wú)假陽(yáng)性峰，理論塔板數(shù)以葛根素峰計(jì)算為4000。與其他組分峰分離度＞1.5。
1.4線性關(guān)系考察
1.4.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加50％乙醇溶解制成每1ml含葛根素0.0500mg的溶液。
1.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
精密吸取葛根素對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜(表1)，以峰面積A(μV·s)對(duì)質(zhì)量數(shù)x(μg)進(jìn)行線性回歸計(jì)算，得線性回歸方程為A＝1204680.662×X-800.50，r＝0.9999，精密量取對(duì)照品溶液5μl注入液相色譜儀，所得峰面積為306568，將一供試品溶液進(jìn)樣分析所得峰面積分別用回歸方程和一點(diǎn)法計(jì)算含量，結(jié)果的相對(duì)偏差為0.0162％，故正文采用一點(diǎn)法計(jì)算含量。葛根素線性范圍0.1000μg～0.5000μg。
表1 葛根素線性關(guān)系考察
1.4.2.1提取溶劑的選擇
選擇不同濃度乙醇為提取液，分別以40％乙醇、50％乙醇、60％乙醇、70％乙醇、乙醇提取后測(cè)定含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 不同提取溶劑對(duì)通脈顆粒中葛根素含量測(cè)定的影響(n＝2)
試驗(yàn)結(jié)果表明，用50％乙醇為提取劑能將制劑中葛根素提取完全，因此質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文含量測(cè)定項(xiàng)下選用50％乙醇為提取劑。
1.4.3精密度試驗(yàn)
取本品內(nèi)容物，按本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備供試液，注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積，結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 制劑供試品中葛根素的精密度試驗(yàn)
結(jié)果可見(jiàn)，該法精密度良好。
1.4.4重現(xiàn)性試驗(yàn)
取本品，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)正文中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備5份供試液，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果列入表4，葛根素平均含量為0.7551mg/g，RSD為0.16％。結(jié)果可見(jiàn)，該法重現(xiàn)性良好。
表4 制劑供試品中葛根素的重現(xiàn)性試驗(yàn)
1.4.5供試品溶液中葛根素的穩(wěn)定性試驗(yàn)
取本品，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定項(xiàng)下供試液的制備方法制備供試液，分別于0、2、4、6、8小時(shí)測(cè)定葛根素峰面積(見(jiàn)表5)，結(jié)果表明，供試品溶液中葛根素在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
表5 制劑供試品中葛根素的穩(wěn)定性試驗(yàn)
1.4.6回收率試驗(yàn)
采用加樣回收法，精密稱取已測(cè)定含量的制劑(平均含量0.6439mg/g)適量，研細(xì)，置具塞錐形瓶中，精密加入葛根素對(duì)照品溶液(以50％乙醇為溶劑，0.042mg/ml)20ml，稱定重量，搖勻，再稱定重量，用50％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，制成供試品溶液。分別制備5份，測(cè)定(結(jié)果見(jiàn)表6)，平均回收率為99.82％，RSD為0.165％。
表6 供試品溶液中葛根素測(cè)定回收率試驗(yàn)
1.4.7供試品含量測(cè)定
按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制備供試品溶液和對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣5μl，記錄色譜，測(cè)定峰面積，按下式計(jì)算含量
式中Ai供試品溶液峰面積
As對(duì)照品溶液峰面積
Cs對(duì)照品(葛根素)溶液濃度(mg/ml)
W取樣量(g)
嚴(yán)格按照生產(chǎn)工藝制備3批樣品，測(cè)定樣品中葛根素含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表7。
表7 3批樣品中葛根素含量測(cè)定結(jié)果
根據(jù)樣品測(cè)定結(jié)果可見(jiàn)，三批樣品中葛根素的煎煮收率均在65％以上，最小收率為66.1％，故制劑中葛根素含量限度計(jì)算如下
葛根素含量限度(mg/g)＝制劑含葛根藥材(g/g)×藥材含葛根素限度(藥典規(guī)定)×葛根素收率(％)×103＝(500/10433)×2.4％×65％×103＝0.7476mg/g。以每袋10g計(jì)，故定本品每袋含葛根以葛根素計(jì)不得少于7.5mg。根據(jù)樣品測(cè)定結(jié)果，3批樣品中的葛根素含量均在該限度范圍內(nèi)。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于本發(fā)明的質(zhì)量控制方法保證了本發(fā)明的制劑的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)能夠較全面有效控制制劑的質(zhì)量特征，具有準(zhǔn)確性和先進(jìn)性，可作為質(zhì)量控制和考察工藝的穩(wěn)定性的有效技術(shù)手段。對(duì)提高產(chǎn)品質(zhì)量有重大意義。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合事實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，下列各事實(shí)例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，對(duì)本發(fā)明并無(wú)限制。
以下發(fā)明實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述效果。
實(shí)施例1通脈顆粒
處方丹參500g 川芎500g葛根500g
制法以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入糖粉適量，制成顆粒，低溫干燥(＜60℃)，制成1000g，即得。
鑒別(1)取本品10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(10∶4∶1.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(2)取本品5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(12∶5∶0.6)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(25∶75)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加50％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加50％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)(0.45μm)，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每袋含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不得少于7.5mg。
實(shí)施例2通脈制劑
處方丹參500g 川芎500g葛根500g
制法以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入不同輔料，按照不同的方法制成各種制劑。
鑒別1.取通脈制劑內(nèi)容物10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸0.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸5∶2∶0.9為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
2.取通脈制劑內(nèi)容物5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸0.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸5∶2∶0.3為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水12∶48為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為247nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加40％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加40％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
實(shí)施例3通脈制劑
處方丹參500g 川芎500g葛根500g
制法以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入不同輔料，按照不同的方法制成各種制劑。
鑒別1.取通脈制劑內(nèi)容物10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸16∶8∶1.8為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
2.取通脈制劑內(nèi)容物5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液。再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸16∶9∶0.31.0為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水38∶96為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為253nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加70％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加70％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
實(shí)施例4通脈膠囊
處方丹參500g 川芎500g葛根500g
制法以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入糖粉適量，制成顆粒，低溫干燥(＜60℃)，裝膠囊，制成膠囊1000粒，即得。
質(zhì)量控制方法鑒別、含量測(cè)定方法同實(shí)施例1，其中含量本品每粒含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不得少于7.5mg。
實(shí)施例5通脈片
處方丹參500g 川芎500g葛根500g
制法以上三味，加10倍量水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.08，趁熱濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.38～1.40的清膏，加入糖粉適量，制成顆粒，低溫干燥(＜60℃)，過(guò)篩，混勻，整粒，經(jīng)常規(guī)制成片劑，制成片劑1000片，即得。
質(zhì)量控制方法鑒別、含量測(cè)定方法同實(shí)施例1，其中含量本品每片含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不得少于7.5mg。
權(quán)利要求
1、一種通脈制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于，包括對(duì)性狀進(jìn)行觀察，根據(jù)藥典的方法對(duì)內(nèi)容物進(jìn)行檢查，對(duì)內(nèi)容物丹參和川芎進(jìn)行鑒別，對(duì)含有的葛根素進(jìn)行含量測(cè)定。
2、權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述通脈制劑是口服制劑。
3、權(quán)利要求2的方法，其特征在于，所述口服制劑是膠囊、片劑、口服液、糖漿或顆粒劑。
4、權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述通脈制劑由如下重量份的中藥原料制成丹參500份、川芎500份、葛根500份。
5、權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述對(duì)內(nèi)容物丹參和川芎進(jìn)行鑒別經(jīng)過(guò)以下步驟
a.取通脈制劑內(nèi)容物10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸0.5-1.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸5-16∶2-8∶0.9-1.8為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
b.取通脈制劑內(nèi)容物5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸0.5-1.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液；再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸5-16∶2-9∶0.3-1.0為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
所述對(duì)含有的葛根素進(jìn)行含量測(cè)定經(jīng)過(guò)以下步驟
照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測(cè)定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水12-38∶48-96為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250±3nm；理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加40-70％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加40-70％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得；
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；
5、權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述對(duì)內(nèi)容物丹參和川芎進(jìn)行鑒別經(jīng)過(guò)以下步驟
a.取通脈顆粒制劑內(nèi)容物10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸10∶4∶1.5為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
b.取通脈顆粒制劑內(nèi)容物5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液；再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸12∶5∶0.6為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
6、權(quán)利要求1的方法，其特征在于，所述對(duì)含有的葛根素進(jìn)行含量測(cè)定是對(duì)取通脈顆粒制劑進(jìn)行的，經(jīng)過(guò)以下步驟
照高效液相色譜法測(cè)定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水25∶75為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm；理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；
對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加50％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得；
供試品溶液的制備取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加50％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每袋含葛根以葛根素C21H20O9計(jì)，不得少于7.5mg。
7.權(quán)利要求1的方法，其特征在于，該方法包括以下方法鑒別
a.取通脈顆粒制劑內(nèi)容物10g，加水30ml溶解，用鹽酸調(diào)pH值至2，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取丹參對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自調(diào)pH值至2起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸10∶4∶1.5為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3％三氯化鐵乙醇溶液，立即觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
b.取通脈顆粒制劑內(nèi)容物5g，加溫水30ml溶解，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，用5％碳酸氫鈉提取2次，每次30ml，取碳酸氫鈉提取液，用鹽酸調(diào)pH值至1～2，加乙醚提取2次，每次30ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，加水50ml加熱至沸，并保持微沸1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液自加醋酸乙酯提取2次起，余下步驟同供試品操作方法，制成對(duì)照藥材溶液；再取阿魏酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸12∶5∶0.6為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；
含量測(cè)定照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水25∶75為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm；理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取葛根素對(duì)照品適量，加50％乙醇制成每1ml含50μg的溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備取裝量項(xiàng)下的本品，研細(xì)，精密稱取約1g，置具塞錐形瓶中，精密加50％乙醇溶液20ml，振搖溶解，搖勻，取上清液濾過(guò)0.45μm，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品每袋含葛根以葛根素C21H20O9計(jì)，不得少于7.5mg。
全文摘要
通脈制劑原料藥是由丹參、川芎和葛根三味中藥組成，國(guó)內(nèi)有多種劑型上市。為有效控制制劑質(zhì)量，本發(fā)明公開(kāi)了通脈制劑的質(zhì)量控制方法，該方法采用照薄層色譜法對(duì)丹參和川芎進(jìn)行鑒別，采用高效液相色譜法葛根素成分的含量。該質(zhì)量控制方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均符合要求，確保產(chǎn)品質(zhì)量的“均一、穩(wěn)定、有效、可控”。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1785255SQ20051000331
公開(kāi)日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2005年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月9日
發(fā)明者葉湘武, 王澤坤 申請(qǐng)人:貴州益佰制藥股份有限公司