本發(fā)明涉及刺激響應(yīng)載體領(lǐng)域，尤其涉及一種光響應(yīng)脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

納米技術(shù)的突破對(duì)多個(gè)行業(yè)產(chǎn)生了重要的影響，尤其是對(duì)材料科學(xué)、生物技術(shù)和藥物治療。不同的納米載體，如脂質(zhì)體、聚合物、膠束和碳基納米材料正逐漸應(yīng)用到醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，例如治療性藥物大分子的運(yùn)輸(藥物和基因)。但是，目前治療性藥物大分子的運(yùn)輸仍面臨著很大的挑戰(zhàn)，因?yàn)槲覀兯枰乃幬镞\(yùn)輸體系最好能夠?qū)崿F(xiàn)藥物的定時(shí)、定點(diǎn)和定量釋放。對(duì)用于藥物運(yùn)輸體系，目前已經(jīng)有一定的研究，例如：通過(guò)智能化微米/納米粒子(MNPs)來(lái)實(shí)現(xiàn)。所述MNPs是指能夠以某種具體的方式響應(yīng)外部/內(nèi)部刺激，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)內(nèi)部藥物的可控釋放的微米/納米粒子的總稱。光照由于其強(qiáng)度、波長(zhǎng)、照射時(shí)間等參數(shù)可以精確調(diào)節(jié)，并且對(duì)生物體是非侵入性的，所以，能夠?qū)獯碳みM(jìn)行響應(yīng)的MNPs具有廣闊的應(yīng)用前景。

因此，需要一種能夠?qū)獯碳みM(jìn)行響應(yīng)的光響應(yīng)脂質(zhì)體。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供了一種光響應(yīng)脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用，所述光響應(yīng)脂質(zhì)體能夠?qū)獯碳みM(jìn)行響應(yīng)。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種光響應(yīng)脂質(zhì)體，所述光響應(yīng)脂質(zhì)體包括磷脂、膽固醇和含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物；所述磷脂、膽固醇和含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的摩爾比為：1～2：1～2：1～2；

所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式如下：

其中，R₁為C1～6的直鏈烷基；R₂為C12～16的直鏈?zhǔn)杷酝榛?；X為COO或CONH。

其中，所述光響應(yīng)脂質(zhì)體還包括：包封在所述光響應(yīng)脂質(zhì)體內(nèi)的藥物。

其中，所述藥物為阿霉素。

為了進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)發(fā)明目的，本發(fā)明還提供了一種上述光響應(yīng)脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：

A、將摩爾比為：1～2：1～2：1～2的磷脂、膽固醇和含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物溶于有機(jī)溶劑中，旋干，得脂質(zhì)薄膜；

B、加入水化試劑，然后進(jìn)行超聲處理，得光響應(yīng)脂質(zhì)體。

其中，所述有機(jī)溶劑為按2:1體積比配置的氯仿和甲醇混合液。

其中，所述水化試劑為pH＝7.4的檸檬酸溶液或pH＝7.4的磷酸緩沖液。

其中，所述步驟B具體為：

在瓶壁上有脂質(zhì)薄膜的瓶中加入適量水化試劑，用探頭式超聲波細(xì)胞破碎儀超聲10～40min，然后靜置于25～42℃環(huán)境中，得光響應(yīng)脂質(zhì)體懸液。

其中，所述光響應(yīng)脂質(zhì)體的制備方法還包括以下步驟：

C、利用pH梯度法，將阿霉素包封在光響應(yīng)脂質(zhì)體中，得內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體。

其中，所述步驟C具體為：

將阿霉素加入至光響應(yīng)脂質(zhì)體懸液中，充分溶解，然后用NaOH調(diào)pH值至7.4，8 000～12 000g離心，所得上層液體即為內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體。

為了進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明還提供了上述光響應(yīng)脂質(zhì)體在制備藥物過(guò)程中的應(yīng)用。

本發(fā)明的光響應(yīng)脂質(zhì)體能夠?qū)ψ贤夤膺M(jìn)行響應(yīng)，當(dāng)所述光響應(yīng)脂質(zhì)體包封有藥物時(shí)，可通過(guò)紫外線的照射來(lái)實(shí)現(xiàn)該光響應(yīng)脂質(zhì)體內(nèi)部藥物的可控釋放，從而減輕藥物的副作用，提高治療效果。本發(fā)明的光響應(yīng)脂質(zhì)體的制備方法簡(jiǎn)單，效率高。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明第一具體制備實(shí)施例制備所得含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式。

圖2是本發(fā)明第二具體制備實(shí)施例制備所得含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式。

圖3是本發(fā)明第三具體制備實(shí)施例制備所得含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式。

圖4是本發(fā)明第三具體制備實(shí)施例制備所得含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物在經(jīng)紫外光照射后的紫外-可見(jiàn)吸收光譜變化圖。

圖5是本發(fā)明第四具體制備實(shí)施例制備所得內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體的光控釋放曲線。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的解釋，本發(fā)明并不局限于以下實(shí)施例。

在本發(fā)明的第一實(shí)施例中，一種含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物，結(jié)構(gòu)式如下所示：

其中，R₁為C1～6的直鏈烷基；R₂為C12～16的直鏈?zhǔn)杷酝榛?；X為COO或CONH。

本發(fā)明的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的一端的直鏈?zhǔn)杷酝榛溎軌虿迦胫|(zhì)體的磷脂雙分子層中，另一端的親水性陽(yáng)離子季銨鹽基團(tuán)則能朝向磷脂雙分子層膜外的水溶液，從而在脂質(zhì)體中形成規(guī)律性的排布，當(dāng)本發(fā)明的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物受到紫外光照射下時(shí)，其構(gòu)象發(fā)生可逆改變。

優(yōu)選的，所述R₁為C2～4的直鏈烷基，即，乙烷基、丙烷基或正丁烷基。

優(yōu)選的，所述R₂為C12、C14或C16的直鏈?zhǔn)杷酝榛?/p>

在本發(fā)明的第二實(shí)施例中，一種制備上述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的方法，包括以下步驟：

A、使化合物1和化合物2反應(yīng)，得化合物3；

B、將化合物3和N-溴代琥珀酰亞胺在惰性氣體氛圍下溶于四氯甲烷并在過(guò)氧化苯甲酰的催化下發(fā)生溴化反應(yīng)，得化合物4；

C、使化合物4與第一底物反應(yīng)，得所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物；

所述化合物1的結(jié)構(gòu)式如下：

所述化合物2的結(jié)構(gòu)式如下：

X₂-R₂；

所述化合物3的結(jié)構(gòu)式如下：

所述化合物4的結(jié)構(gòu)式如下：

所述X₁為COOH或COCl；

所述X₂為OH或NH₂；

所述第一底物的結(jié)構(gòu)式為：

需要說(shuō)明的是，所述惰性氣體包括氦氣、氬氣、氖氣或氙氣中的至少一種。

在本發(fā)明的一具體實(shí)施例中，所述X₁為COCl；所述X₂為NH₂；所述步驟A包括以下步驟：

A1、將化合物1溶于二氯甲烷，然后加入三乙胺，得第一反應(yīng)溶液；

A2、將化合物2溶于二氯甲烷，得第二反應(yīng)溶液；

A3、將第二反應(yīng)溶液滴入第一反應(yīng)溶液中，常溫?cái)嚢柽^(guò)夜；

A4、除去步驟A3的產(chǎn)物中的二氯甲烷，得固體；

A5、將固體溶于二氯甲烷，并通過(guò)柱層析進(jìn)行分離純化，所述流動(dòng)相為按1:1體積比配制的石油醚和二氯甲烷混合液，得化合物3。

需要說(shuō)明的是，在所述步驟A中，二氯甲烷主要作為反應(yīng)溶劑，三丁胺為催化劑；步驟A4可通過(guò)真空干燥或旋蒸實(shí)現(xiàn)。另外，在本方案中，化合物1中的COCl和化合物2中的NH₂反應(yīng)，從而生成化合物3，這種方法與通過(guò)化合物1中的COOH和化合物2中的OH或NH₂反應(yīng)生成化合物3的方法相比，反應(yīng)效率更高，制備得到化合物3的得率更高。

在上一具體實(shí)施例的基礎(chǔ)上，本發(fā)明提出另一具體實(shí)施例，所述步驟A還包括以下步驟：

A0、將化合物5加入氯化亞砜，加熱至60-70℃，攪拌過(guò)夜，進(jìn)而除去未反應(yīng)的氯化亞砜，得化合物2；

所述化合物5的結(jié)構(gòu)式如下：

其中，10≤n≤14。

需要說(shuō)明的是，步驟A0中可通過(guò)真空干燥或旋蒸等方法除去氯化亞砜。

在本發(fā)明的另一具體實(shí)施例中，所述步驟B包括以下步驟：

B1、將化合物3、N-溴代琥珀酰亞胺和過(guò)氧化苯甲酰在氬氣氛圍下溶于四氯甲烷，加熱回流反應(yīng)12-72小時(shí)；

B2、將反應(yīng)體系冷卻至0℃，抽濾得粉末；

B3、用乙醚洗滌粉末，得化合物4。

需要說(shuō)明的是，步驟B1中的過(guò)氧化苯甲酰為催化劑；步驟B2抽濾所得粉末為化合物4的粗產(chǎn)物；步驟B3中用乙醚洗滌粉末，主要是通過(guò)乙醚將未反應(yīng)的雜質(zhì)去除，從而起到純化的作用。

在本發(fā)明的另一具體實(shí)施例中，所述步驟C包括以下步驟：

C1、將化合物4溶于乙醇，再加入第一底物，回流反應(yīng)6-48小時(shí)；

C2、將步驟C1的產(chǎn)物蒸干，再用按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液溶解，過(guò)濾收集固體沉淀。

需要說(shuō)明的是，步驟C2中，可通過(guò)旋蒸將步驟C1的產(chǎn)物蒸干；步驟C2所得固體沉淀為本發(fā)明所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的粗產(chǎn)物。

基于上一具體實(shí)施例，本發(fā)明提出另一具體實(shí)施例，所述步驟C還包括以下步驟：

C3、用按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液洗滌固體沉淀，得所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物。

需要說(shuō)明的是，所述按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液能夠溶解未發(fā)生反應(yīng)的雜質(zhì)，從而起到提純的作用。

在本發(fā)明的第一具體制備實(shí)施例中，所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式如圖1所示，該偶氮苯衍生物的制備方法包括以下步驟：

S01、使化合物1(4-甲基-4’羧基偶氮苯)與化合物2(正十四烷醇)在濃硫酸的催化和加熱條件下發(fā)生脂化反應(yīng)，生成化合物3(4-甲基-4’正十四烷醇羰基偶氮苯)；

S02、將4-甲基-4’正十四烷醇羰基偶氮苯、N-溴代琥珀酰亞胺和過(guò)氧化苯甲酰在氬氣氛圍下溶于四氯甲烷，加熱回流反應(yīng)24小時(shí)；

S03、將步驟S02的反應(yīng)體系冷卻至0℃，抽濾得粉末；

S04、用乙醚洗滌步驟S03所得粉末，除去未反應(yīng)的雜質(zhì)，得化合物4(4-溴甲基-4’正十四烷醇羰基偶氮苯)；

S05、將4-溴甲基-4’正十四烷醇羰基偶氮苯溶于乙醇，然后加入三乙胺，回流反應(yīng)12小時(shí)；

S06、將溶液蒸干，再用按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液溶解，過(guò)濾收集固體沉淀，即得圖1所示含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物，即4-(N,N,N-三乙胺甲基溴化物)-4’-正十四烷醇羰基偶氮苯。

在本發(fā)明的第二具體制備實(shí)施例中，所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式如圖2所示，該偶氮苯衍生物的制備方法包括以下步驟：

S01、使化合物1(4-甲基-4’羧基偶氮苯)與化合物2(正十六烷醇)在濃硫酸的催化以及加熱條件下發(fā)生脂化反應(yīng)，生成化合物3(4-甲基-4’-正十六烷醇羰基偶氮苯)；

S02、將4-甲基-4’-正十六烷醇羰基偶氮苯、N-溴代琥珀酰亞胺和過(guò)氧化苯甲酰在氬氣氛圍下溶于四氯甲烷，加熱回流反應(yīng)48小時(shí)；

S03、將步驟S02的反應(yīng)體系冷卻至0℃，抽濾得粉末；

S04、用乙醚洗滌步驟S03所得粉末，除去未反應(yīng)的雜質(zhì)，得化合物4(4-溴甲基-4’-正十六烷醇羰基偶氮苯)；

S05、將4-溴甲基-4’-正十六烷醇羰基偶氮苯溶于乙醇，然后加入三甲胺，回流反應(yīng)24小時(shí)；

S06、將溶液蒸干，再用按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液溶解，過(guò)濾收集固體沉淀，即粗產(chǎn)物。

S07、用按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液洗滌固體沉淀3次，得圖2所示含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物，即4-(N,N,N-三甲胺甲基溴化物)-4’-正十六烷醇羰基偶氮苯。

在本發(fā)明的第三具體制備實(shí)施例中，所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)構(gòu)式如圖3所示，該偶氮苯衍生物的制備方法包括以下步驟：

S01、將2.4g 4-甲基-4’羧基偶氮苯加入10mL氯化亞砜中，65℃攪拌過(guò)夜，旋蒸出去未反應(yīng)得氯化亞砜，得到2g無(wú)色油狀粗產(chǎn)物，即化合物2(4-甲基-4’-酰氯偶氮苯)；

S02、將0.56g化合物1(正十二胺)溶于20mL二氯甲烷，然后加入0.59g三乙胺，得第一反應(yīng)溶液；

S03、將1.15g無(wú)色油狀粗產(chǎn)物(4-甲基-4’酰氯偶氮苯)溶于5mL二氯甲烷，得第二反應(yīng)溶液；

S04、將第二反應(yīng)溶液慢慢滴入第一反應(yīng)溶液中，25℃攪拌過(guò)夜；

S05、真空干燥除去步驟S04的產(chǎn)物中的二氯甲烷，得黃色固體；

S06、用二氯甲烷溶解步驟S05所得黃色固體，同時(shí)加入200-300目的硅膠攪拌，旋蒸除去二氯甲烷后上樣，加流動(dòng)相進(jìn)行柱層析，所述流動(dòng)相為按1:1體積比配制的石油醚和二氯甲烷混合液；得純化后的化合物3(4-甲基-4’正十二氨羧基偶氮苯)1.12g；

S07、將0.5g 4-甲基-4’正十二氨羧基偶氮苯、0.34g N-溴代琥珀酰亞胺和15mg過(guò)氧化苯甲酰在氬氣氛圍下溶于四氯甲烷，加熱回流反應(yīng)48小時(shí)；

S08、將步驟S07產(chǎn)物冷卻至0℃，抽濾得黃色粉末；

S09、用乙醚洗滌黃色粉末，除去未反應(yīng)的雜質(zhì)，得化合物4(4-溴甲基-4’-正十二氨羧基偶氮苯)；

S10、將250mg 4-溴甲基-4’-正十二酰氨基偶氮苯溶于6mL乙醇，然后加入1mL三丁胺和2mL乙醇，回流反應(yīng)24小時(shí)；

S11、將步驟S10的產(chǎn)物蒸干，再用20mL按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液溶解，過(guò)濾收集橘黃色固體沉淀；

S12、用20mL按5:1體積比配制的乙醚和二氯甲烷混合液洗滌橘黃色固體沉淀三次，得120mg圖3所示含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物，即4-(N,N,N-三丁胺甲基溴化物)-4’-正十二氨羧基偶氮苯。

為了進(jìn)一步證明本發(fā)明的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的光響應(yīng)特性，本發(fā)明的發(fā)明人設(shè)計(jì)了以下試驗(yàn)，以氯仿或乙醇為溶劑，將所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物配置成約1μmol/L的溶液，并測(cè)定其紫外可見(jiàn)吸收光譜，然后用紫外光照射不同的時(shí)間，測(cè)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸收光譜，然后按不同的紫外光照射時(shí)間，分別作吸光度和波長(zhǎng)的曲線。其中，以第三具體實(shí)施例所得含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的結(jié)果如圖4所示。如圖4所示，隨著紫外線照射時(shí)間的延長(zhǎng)，該偶氮苯衍生物在350nm處的吸光度值不斷降低，說(shuō)明該偶氮苯衍生物可以發(fā)生快速的反式-順式異構(gòu)，可作為一種光控開(kāi)關(guān)。

需要說(shuō)明的是，本發(fā)明的其他含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物，例如上述第一具體制備實(shí)施例、第二具體制備實(shí)施例中所得的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物，在上述試驗(yàn)中的結(jié)果與圖4類似(圖未示)，說(shuō)明本發(fā)明的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物可以發(fā)生快速的反式-順式異構(gòu)，可作為一種光控開(kāi)關(guān)。

在本發(fā)明的第三實(shí)施例中，一種制備含上述光響應(yīng)脂質(zhì)體的方法，包括以下步驟：

A、將摩爾比為：1～2：1～2：1～2的磷脂、膽固醇和含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物溶于有機(jī)溶劑中，旋干，得脂質(zhì)薄膜；

B、加入水化試劑，然后進(jìn)行超聲處理，得光響應(yīng)脂質(zhì)體。

需要說(shuō)明的是，在第三實(shí)施例中，所述磷脂為磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、或它們的任意組合物。所述機(jī)溶劑包括氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇和乙醚中的至少一種。所述水化試劑用于給光響應(yīng)脂質(zhì)體提供穩(wěn)定的環(huán)境，形成脂質(zhì)體懸液。

第三實(shí)施例中通過(guò)超聲分散法制備光響應(yīng)脂質(zhì)體，制備方法簡(jiǎn)單，效率高。

若要制備包封有藥物的含上述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物的脂質(zhì)體，根據(jù)藥物性質(zhì)的不同，可在第三實(shí)施例的方法的基礎(chǔ)上，通過(guò)不同的處理獲得。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)藥物為水溶性藥物時(shí)，可將適量的藥物溶于活性溶液中，例如pH＝7.4的磷酸鹽緩沖液(PBS)，然后將該溶液加入瓶壁上有脂質(zhì)薄膜的瓶中，用探頭式超聲波細(xì)胞破碎儀超聲10～40min，然后靜置于25～42℃環(huán)境中靜置1～6小時(shí)。將所得產(chǎn)物加入透析袋中，并在pH＝7.4的磷酸鹽緩沖液(PBS)中透析，除去未被包封的藥物，最終獲得內(nèi)包藥物的光響應(yīng)脂質(zhì)體懸液。

需要說(shuō)明的是，本實(shí)施例中，所述溶有藥物的活性溶液的量，可根據(jù)瓶中瓶壁上的脂質(zhì)薄膜的覆蓋范圍進(jìn)行調(diào)整；所述透析袋的分子量大小根據(jù)藥物的分子量進(jìn)行選擇。

在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)藥物為脂溶性藥物，例如阿霉素時(shí)，可將適量的300mM的檸檬酸溶液(pH＝7.4)加入瓶壁上有脂質(zhì)薄膜的瓶中，用探頭式超聲波細(xì)胞破碎儀超聲10～40min，然后靜置于25～42℃環(huán)境中靜置1～6小時(shí)。然后用pH梯度法包封阿霉素(DOX)，獲得內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體懸液。

需要說(shuō)明的是，本發(fā)明所述的內(nèi)包藥物可為水溶性藥物，例如：鹽酸吉西他濱、卡鉑、鹽酸阿糖胞苷、鹽酸氮芥、鹽酸米托蒽醌；也可為脂溶性藥物，例如阿霉素、紫杉醇等。

在本發(fā)明的第四具體制備實(shí)施例中，所述含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物為上述第三具體制備實(shí)施例制備所得的產(chǎn)物；所述藥物為阿霉素。

1)將磷脂、膽固醇、含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物按照1:1:1的摩爾比(各0.02mmol)一起溶于按2:1體積比配置的20mL氯仿和甲醇混合液，充分溶解后，在37℃恒溫水浴下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去有機(jī)溶劑，圓底燒瓶底形成一層均勻脂質(zhì)薄膜。

2)然后加入10mL，300mM的檸檬酸溶液(pH＝7.4)，將脂質(zhì)薄膜水化下來(lái)，接著用探頭式超聲波細(xì)胞破碎儀超聲30min(功率100mW，on 30s，off 30s)，然后置于37℃水浴中放置2小時(shí)以完成封閉過(guò)程，所得即為脂質(zhì)體懸液。

3)用pH梯度法包封阿霉素(DOX)：稱取2mg DOX，加入到脂質(zhì)體懸液中，充分溶解，用1.0M NaOH調(diào)pH值至7.4。將脂質(zhì)體溶液10 000g離心10min，除去超聲過(guò)程中探頭上掉下來(lái)的鈦顆粒以及未分散的脂質(zhì)，上層液體即為內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體懸液。

為了驗(yàn)證所得內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體的光控釋放效果，本發(fā)明的發(fā)明人設(shè)計(jì)了另外一個(gè)驗(yàn)證試驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)組：將第四具體制備實(shí)施例制備的內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體懸液5mL分散在45mL pH＝7.4的PBS緩沖液中，然后將所得的溶液放置在黑暗環(huán)境中，每小時(shí)用紫外光照射10min，每2個(gè)小時(shí)測(cè)定一次PBS緩沖液中被釋放出的阿霉素含量。

對(duì)照組：將第四具體制備實(shí)施例制備的內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體5mL分散在45mL pH＝7.4的PBS緩沖液中，然后將所得的溶液放置在黑暗環(huán)境中，同樣每2個(gè)小時(shí)測(cè)定一次PBS緩沖液中被釋放出的阿霉素含量。

實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組各做3個(gè)重復(fù)。

以每個(gè)時(shí)間點(diǎn)PBS緩沖液中被釋放出的阿霉素含量與該P(yáng)BS緩沖液中的總阿霉素量的比值為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，作曲線，結(jié)果如圖5所示。

如圖5所示，在紫外線光照下，內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體的磷脂雙分子層中的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物發(fā)生反式-順式異構(gòu)，對(duì)磷脂膜造成擾動(dòng)，并在磷脂雙分子層中形成通道，進(jìn)而使得阿霉素被釋放出，加速內(nèi)包阿霉素的光響應(yīng)脂質(zhì)體內(nèi)部的阿霉素的釋放。

因此，本發(fā)明的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物能夠?qū)獯碳みM(jìn)行響應(yīng)，基于本發(fā)明的含季銨鹽基團(tuán)的偶氮苯衍生物制備的光響應(yīng)脂質(zhì)體可制備成內(nèi)包藥物的MNPs，具有廣闊的應(yīng)用前景。

以上僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說(shuō)明書及附圖內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。