乳腺癌腫瘤標(biāo)志物ca153的雙閾值檢測(cè)試紙的制作方法
【專利摘要】乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙，它涉及一種乳腺癌檢測(cè)試紙。本發(fā)明檢測(cè)試紙，使用者可自行檢測(cè)，具有方便、簡(jiǎn)單、快速、易于操作和診斷結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。該試紙使用者可在發(fā)病早期確定病情，及時(shí)就醫(yī)治療；同時(shí)還能在術(shù)后長(zhǎng)期跟蹤檢測(cè)、隨時(shí)監(jiān)測(cè)病情。檢測(cè)試紙包含玻璃纖維膜和硝酸纖維素膜；玻璃纖維膜上涂覆有標(biāo)記CA153抗體A的膠體金溶液；硝酸纖維素膜由下至上依次設(shè)T1區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)，硝酸纖維素膜T1區(qū)固定有CA153抗體B，硝酸纖維素膜T2區(qū)固定有CA153抗體C，硝酸纖維素膜質(zhì)控區(qū)固定有兔多抗。本發(fā)明可用于臨床乳腺癌的檢測(cè)。
【專利說明】
乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種乳腺癌檢測(cè)試紙。
【背景技術(shù)】
[0002] 乳腺癌是婦女中常發(fā)的惡性腫瘤之一，對(duì)乳腺癌的早期篩查是提高患者生存率的 關(guān)鍵。CA153是一種乳腺癌的相關(guān)抗原，存在于乳腺癌細(xì)胞中，并能釋放入血液，檢測(cè)血中 CA153水平可用于檢測(cè)乳腺癌。一般CA153的參考值為小于28U/ml，當(dāng)CA153大于100U/ml時(shí)， 可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變。同時(shí)，CA153含量的變化與治療效果密切相關(guān)，是乳腺癌患者診斷和 監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)、觀察療效的最佳指標(biāo)。長(zhǎng)期跟蹤檢測(cè)血液中CA153含量有助于乳腺癌患者對(duì) 自身病情的掌控。但現(xiàn)有的臨床檢測(cè)方法常采用化學(xué)發(fā)光方法，該方法耗時(shí)長(zhǎng)，需配備專業(yè) 的儀器和專業(yè)的技術(shù)人員，可操作性差，給臨床患者的長(zhǎng)期跟蹤檢測(cè)造成困擾。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙，使用者可自行檢測(cè)， 具有方便、簡(jiǎn)單、快速、易于操作和診斷結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。該試紙使用者可在發(fā)病早期確定 病情，及時(shí)就醫(yī)治療；同時(shí)還能在術(shù)后長(zhǎng)期跟蹤檢測(cè)、隨時(shí)監(jiān)測(cè)病情。
[0004] 本發(fā)明乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙包含玻璃纖維膜和硝酸纖維素 膜;3種不同CA153抗體，CA153抗體A、CA153抗體B和CA153抗體C;
[0005] 玻璃纖維膜上涂覆有標(biāo)記CA153抗體A的膠體金溶液；
[0006] 硝酸纖維素膜由下至上依次設(shè)T1區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)，硝酸纖維素膜T1區(qū)固定有 CA153抗體B，硝酸纖維素膜T2區(qū)固定有CA153抗體C，硝酸纖維素膜質(zhì)控區(qū)固定有兔多抗；
[0007] 其中，硝酸纖維素膜T1區(qū)內(nèi)CA153抗體B的濃度閾值為28U/ml;硝酸纖維素膜T2區(qū) 內(nèi)CA153抗體C的濃度閾值為100U/ml。
[0008] 本發(fā)明采用3種CA153抗體制備檢測(cè)試紙，在一次檢測(cè)中獲得雙閾值檢測(cè)結(jié)果，減 少了檢測(cè)的次數(shù)，節(jié)省了使用者的費(fèi)用。而且，本發(fā)明在雙閾值檢測(cè)過程中避免了試紙下部 閾值檢測(cè)區(qū)對(duì)上部閾值檢測(cè)區(qū)的干擾和影響，使檢測(cè)結(jié)果更為準(zhǔn)確可靠。
[0009] 使用本發(fā)明試紙5分鐘可出檢測(cè)結(jié)果，檢測(cè)速度快;使用者無需專業(yè)技術(shù)背景和專 業(yè)儀器，操作方便、簡(jiǎn)單；只需待測(cè)試者指尖1滴血，需血量少，并可減少患者抽血的痛楚;成 本低廉，可隨時(shí)測(cè)試及時(shí)了解身體患乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)，適合術(shù)后長(zhǎng)期跟蹤檢測(cè);檢測(cè)靈敏度高， 特異性強(qiáng)。
[0010] 本發(fā)明填補(bǔ)了腫瘤標(biāo)志物CA153臨床快速、準(zhǔn)確檢測(cè)上的空白。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉【具體實(shí)施方式】，還包括各【具體實(shí)施方式】間的 任意組合。
[0012]
【具體實(shí)施方式】一:本實(shí)施方式乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙包含玻 璃纖維膜和硝酸纖維素膜；
[0013] 3種不同CA153抗體，CA153抗體A、CA153抗體B和CA153抗體C;
[0014] 玻璃纖維膜上涂覆有標(biāo)記CA153抗體A的膠體金溶液；
[0015] 硝酸纖維素膜由下至上依次設(shè)T1區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)，硝酸纖維素膜T1區(qū)固定有 CA153抗體B，硝酸纖維素膜T2區(qū)固定有CA153抗體C，硝酸纖維素膜質(zhì)控區(qū)固定有兔多抗； [0016]其中，硝酸纖維素膜T1區(qū)內(nèi)CA153抗體B的濃度閾值為28U/ml;硝酸纖維素膜T2區(qū) 內(nèi)CA153抗體C的濃度閾值為100U/ml。
[0017]本實(shí)施方式乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙的硝酸纖維素膜T1區(qū)、T2 區(qū)和質(zhì)控區(qū)呈橫向帶狀。
[0018] 乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙使用方法：
[0019] 將待測(cè)試者血液滴在乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙的硝酸纖維素膜 下端，然后豎直靜置5分鐘，觀察試紙T1區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)顯色情況，既可獲得檢測(cè)結(jié)果。 [0020] 測(cè)試原理：
[0021]本實(shí)施方式試紙利用毛細(xì)管原理，待測(cè)試者血液沿著硝酸纖維素膜向上移動(dòng)，當(dāng) 移動(dòng)至T1區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)時(shí)，區(qū)域內(nèi)的抗體會(huì)與血液中相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合，若血 液中含有對(duì)應(yīng)的抗原則該區(qū)域內(nèi)的免疫金顯示出紅色，若血液中不含有對(duì)應(yīng)的抗原則該區(qū) 域內(nèi)的免疫金不顯色，從而實(shí)現(xiàn)特異性的免疫檢測(cè)。
[0022]檢測(cè)結(jié)果說明：
[0023] 試紙只有一條帶顯色（質(zhì)控區(qū)顯色為紅色），檢測(cè)結(jié)果為血液中CA153濃度小于 28U/ml。
[0024] 試紙有兩條帶顯色(T1區(qū)和質(zhì)控區(qū)顯色為紅色），檢測(cè)結(jié)果為血液中CA153濃度為 大于 28U/ml 且小于 100U/ml(28U/ml〈CA153〈100U/ml)。
[0025] 試紙有三條帶顯色(T1區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)顯色為紅色），檢測(cè)結(jié)果為血液中CA153濃 度為大于等于l〇〇U/ml。
[0026]試紙條無條帶顯色，則說明試紙失效。
[0027]【具體實(shí)施方式】二:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一的不同點(diǎn)是：乳腺癌腫瘤標(biāo)志物 CA153的雙閾值檢測(cè)試紙還包括NC膜和墊板，玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜、NC膜依次重疊固 定在墊板上。其它與實(shí)施方式一相同。
[0028]【具體實(shí)施方式】三:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一的不同點(diǎn)是:CA153抗體A、CA153 抗體B和CA153抗體C為3種CA153單克隆抗體。其它與實(shí)施方式一相同。
[0029] 本實(shí)施方式CA153抗體A、CA153抗體B和CA153抗體C選自北京熱景生物技術(shù)有限公 司生產(chǎn)的CA153抗體"8A6"以及大慶麥伯康生物技術(shù)有限公司購買的CA153抗體"TM002"（配 對(duì)抗體）。
【具體實(shí)施方式】 [0030] 四：本實(shí)施方式與一的不同點(diǎn)是:將CA153抗體A包被 到膠體金顆粒上制成標(biāo)記CA153抗體A的膠體金溶液。其它與實(shí)施方式一相同。
[0031 ]【具體實(shí)施方式】五:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一的不同點(diǎn)是:硝酸纖維素膜質(zhì)控 區(qū)還固定有葡萄糖氧化酶。其它與實(shí)施方式一相同。
[0032]本實(shí)施方式試紙未失效的情況下，用電子血糖檢測(cè)儀檢測(cè)質(zhì)控區(qū)可測(cè)出血液中的 葡萄糖含量。本實(shí)施方式兼具檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物和血糖的多效檢測(cè)。
[0033]【具體實(shí)施方式】六:本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一的不同點(diǎn)是:選大慶麥伯康生物 技術(shù)有限公司CA153抗體"TM002"中的一種單克隆抗體作為CA153抗體B，CA153抗體B的濃度 為35yg/mL;選北京熱景生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的CA153抗體"8A6"作為CA153抗體C，CA153 抗體〇濃度為1 Oyg/mL。
[0034] 實(shí)施例
[0035]選取100名女性采用本發(fā)明【具體實(shí)施方式】六乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢 測(cè)試紙和化學(xué)發(fā)光進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。其中25~60歲大眾女性隨機(jī)30名，確診乳腺癌術(shù)前患者 30名，乳腺癌術(shù)后患者40名。
[0038]對(duì)于本發(fā)明試紙出現(xiàn)3條帶顯色的人群進(jìn)行正規(guī)復(fù)查，均發(fā)現(xiàn)有轉(zhuǎn)移性病變。檢測(cè) 結(jié)果證明本發(fā)明試紙檢測(cè)準(zhǔn)確率高達(dá)100 %，且對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移性病變能夠做準(zhǔn)確的判斷。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙，其特征在于乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的 雙閾值檢測(cè)試紙包含玻璃纖維膜和硝酸纖維素膜； 3種不同CA153抗體，CA153抗體A、CA153抗體B和CA153抗體C; 玻璃纖維膜上涂覆有標(biāo)記CA153抗體A的膠體金溶液； 硝酸纖維素膜由下至上依次設(shè)Tl區(qū)、T2區(qū)和質(zhì)控區(qū)，硝酸纖維素膜Tl區(qū)固定有CA153抗 體B，硝酸纖維素膜T2區(qū)固定有CAl 53抗體C，硝酸纖維素膜質(zhì)控區(qū)固定有兔多抗； 其中，硝酸纖維素膜T1區(qū)內(nèi)C A15 3抗體B的濃度閾值為2 8 U / m 1;硝酸纖維素膜T 2區(qū)內(nèi) CAl 53抗體C的濃度閾值為I OOU/ml。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙，其特征在于3種 CAl 53抗體為3種CAl 53單克隆抗體。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙，其特征在于將 CA153抗體A包被到膠體金顆粒上制成標(biāo)記CA153抗體A的膠體金溶液。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳腺癌腫瘤標(biāo)志物CA153的雙閾值檢測(cè)試紙，其特征在于硝酸 纖維素膜質(zhì)控區(qū)還固定有葡萄糖氧化酶。
【文檔編號(hào)】G01N33/574GK105929168SQ201610542058
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年7月11日
【發(fā)明人】曹滌非, 黃國(guó)慶, 薛佳瑩
【申請(qǐng)人】黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院, 哈爾濱對(duì)俄高端技術(shù)轉(zhuǎn)移孵化中心