氨酸670~720mg/ 100g;賴氨酸510~550mg/100g;苯丙氨酸400 ~430mg/100g;腫氨酸380~420mg/100g;絲氨 酸440~480mg/100g。更優(yōu)選地，各種的含量為：丙氨酸750mg/100g;天門冬氨酸1260mg/ 100g;甘氨酸640mg/100g;組氨酸 240mg/100g;異亮氨酸400mg/100g;亮氨酸 700mg/100g;賴 氨酸 530mg/100g;苯丙氨酸420mg/100g;脯氨酸400mg/100g;絲氨酸460mg/100g。
[0066] 作為進一步優(yōu)選的實施方式，步驟S5中，配合飼料的用量為仔魚體重呈反比例關 系，例如，可以為：3~5日齡按仔魚體重的8~10 %投喂，然后逐漸遞減，到30日齡以后按仔 魚體重的3~5%投喂，一般，平均按仔魚體重的5%投喂，分2-4次于投喂活餌前投喂；配合 飼料投喂至仔魚80~100日齡為止，優(yōu)選投喂至仔魚90~95日齡，此時，仔魚約為7cm長，體 色變化極其明顯且穩(wěn)定下來。
[0067] 作為進一步優(yōu)選的實施方式，配合飼料的營養(yǎng)成份包括:粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、 粗灰分、鈣、總磷、氨基酸以及水分。
[0068] 作為進一步優(yōu)選的實施方式，配合飼料中各種成份的質(zhì)量百分比為:粗蛋白2 48、 粗脂肪M5%、粗纖維<4%、粗灰分<17%、鈣2 1.5%、總磷2 1.2%、氨基酸2 2.2%以及 水分< 12%。
[0069] 優(yōu)選地，所述配合飼料的營養(yǎng)成份以及各營養(yǎng)成份的質(zhì)量百分比為:粗蛋白48~ 55%、粗脂肪15~22%、粗纖維1~4%、粗灰分10~17%、鈣1.5~3%、總磷1.2~2%、氨基 酸2.2~5%以及水分3~12%。更優(yōu)選地，粗蛋白50%、粗脂肪16%、粗纖維3%、粗灰分 14%、鈣1.7%、總磷1.3%、氨基酸2.5%以及水分10%，余量可為一些蛋白質(zhì)等成份。
[0070] 實施例2
[0071 ] -種用于放流研究的牙鲆生態(tài)標記方法，該方法包括以下步驟，參見表2:
[0072] Sl:將50m3的水泥池消毒處理后作為培養(yǎng)池，加過濾水，該培養(yǎng)池中設有充氣裝 置，調(diào)整充氣裝置上的充氣閥使池面有微波，在15°C下，布牙鲆魚卵，其密度為1.00~2.00 萬尾/m3具體可通過牙鲆的成長其養(yǎng)殖密度遞減；
[0073] S2:仔魚3日齡時，魚卵全部孵出仔魚或仔魚開口，開始投喂小球藻和營養(yǎng)強化的 輪蟲;小球藻從第3日一直投喂至第28日為止，其中第3~15天的投喂量為Im3/天，Im3的小球 藻個數(shù)為1億個左右，16~28天的的投喂量為3m3/天，每Im3的小球藻個數(shù)為1億個左右，則 3m 3有3億個左右；
[0074]營養(yǎng)強化后的輪蟲，從第3日投喂至仔魚28日齡為止，每日的投喂量:3~4日齡0.5 億個，然后由5日齡的1.5億個逐漸增加到第22日齡的18.2億個，再逐漸遞減到28日齡的6.6 億個，具體每日的投喂量及其變化如表2所示；
[0075] S3:仔魚12日齡時，開始投喂營養(yǎng)強化后的鹵蟲，投喂至仔魚46日齡為止，每日的 投喂量由第12日齡的0.7億個逐漸增加到第30日齡的3.1億個，再逐漸遞減到46日齡的0.7 億個，具體每日的投喂量及其變化如表2所示；
[0076] S4:仔魚17日齡時，開始投喂配合飼料，分2-4次于投喂活餌前投喂，活餌即為輪蟲 或鹵蟲；其具體添加量為：每日的投喂量由第17日齡的200g/50m 3逐漸增加到第48日齡的 1320g/50m3，具體每日的投喂量及其變化如表2所示。
[0077] S5:經(jīng)48天的苗種培育，牙鲆魚苗的體色都在不同程度上有了變化，但由于魚苗較 小，肉眼觀察不明顯。再進行45天（即總共培育90多天)投喂配合飼料的中間培育到牙鲆魚 苗體長7cm左右時，體色變化極其明顯且穩(wěn)定下來，這45天配合飼料的投喂量為仔魚體重的 3 ~5%〇
[0078]表2仔牙鲆的每日投喂物與投喂量(50m3培養(yǎng)池為基準）。

[0081] 該實施例中用于進行營養(yǎng)強化的營養(yǎng)強化劑的成份包括DHA、EPA、維生素和氨基 酸。DHA的質(zhì)量百分比為:24.6%，EPA的質(zhì)量百分比為：18.05%，維生素為VA、VD和VE，其含 量為:VA :90IU/100g，VD:377IU/100g，VE:0.4IU/100g。氨基酸的成份包括10中必須氨基酸， 其種類以及各種的含量為：丙氨酸750mg/100g;天門冬氨酸1260mg/100g;甘氨酸640mg/ 100g;組氨酸 240mg/100g;異亮氨酸400mg/100g;亮氨酸 700mg/100g;賴氨酸 530mg/100g;苯 丙氨酸420mg/100g;脯氨酸400mg/100g;絲氨酸460mg/100g。
[0082] 該實施例中的配合飼料的營養(yǎng)成份包括:粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣、總 磷、氨基酸以及水分，其含量為：粗蛋白50%、粗脂肪16%、粗纖維3%、粗灰分14%、鈣 1.7%、總磷1.3%、氨基酸2.5%以及水分10%，余量可為一些蛋白質(zhì)等成份。
[0083]輪蟲中營養(yǎng)強化劑的添加量為:3日齡~11日齡，每1億輪蟲用15g的營養(yǎng)強化劑強 化營養(yǎng)；12日齡-20日齡每1億輪蟲用25g的營養(yǎng)強化劑強化營養(yǎng);21日齡-30日齡又恢復到1 億輪蟲15g營養(yǎng)強化劑的用量，參見圖1。
[0084] 齒蟲中營養(yǎng)強化劑的添加量為：12日齡-15日齡，每1億齒蟲用50g的營養(yǎng)強化劑強 化營養(yǎng);16日齡及其以后為每1億齒蟲用100g的營養(yǎng)強化劑強化營養(yǎng)，直至46日，參見圖1。
[0085] 表2中每Im3的小球藻個數(shù)為1億個左右。
[0086] 由以上方法培育得到的牙鲆的無眼側出現(xiàn)形態(tài)、特征穩(wěn)定的黑色素沉積斑，其為 生態(tài)標記型牙鲆，可用于放流統(tǒng)計研究。牙鲆的生態(tài)標記率為99.20%。
[0087] 實施例3
[0088] 選9個15m3水泥池消毒處理后作為培養(yǎng)池，分成三組，每組各三個池子，每池加過 濾水8m3，調(diào)整充氣裝置的充氣閥使池面有微波，水溫控制在15°C，每個培養(yǎng)池布牙鲆魚卵 100g。第三天魚卵全部孵出仔魚，可選擇加喂輪蟲，第五天仔魚開口后，進行營養(yǎng)強化。 [0089] 第一組:3個池子使用經(jīng)1億輪蟲5g強化劑強化的輪蟲和1億鹵蟲50g強化劑強化的 鹵蟲;配合飼料為市售的常規(guī)的飼喂牙鲆的飼料;強化劑為市售的常規(guī)的強化劑。
[0090]第二組:使用1億輪蟲IOg強化劑強化的輪蟲和1億鹵蟲80g強化劑強化的鹵蟲；配 合飼料為市售的常規(guī)的飼喂牙鲆的飼料。強化劑為市售的常規(guī)的強化劑。
[0091 ]第三組:3個池子，12日齡前按1億輪蟲15g營養(yǎng)強化劑進行強化，12日齡-20日齡每 1億輪蟲增加 IOg營養(yǎng)強化劑，達到258。21日齡-30日齡又恢復到1億輪蟲15g營養(yǎng)強化劑的 用量；鹵蟲營養(yǎng)強化劑用量為12日齡-15日齡每1億鹵蟲50g，16日齡后為每1億鹵蟲10(^，如 圖1所示。所用到的營養(yǎng)強化劑的成份以及各成份的量同實施例1~3中的成份和量一致，這 里不再重復限定。所用到的配合飼料的營養(yǎng)成份以及各成份的量同實施例1~2中的成份和 量一致，這里不再重復限定。
[0092]對于以上三組，從仔魚17日齡開始馴化配合飼料，用量為仔魚體重的3~10 % (具 體可參見前幾個實施例），分2~4次于投喂活餌前投喂，活餌即為輪蟲或鹵蟲，輪蟲投喂到 仔魚30日齡停喂，鹵蟲投喂到仔魚48日齡停喂。
[0093]經(jīng)48天的苗種培育，牙鲆魚苗的體色都在不同程度上有了變化，但由于魚苗較小， 肉眼觀察不明顯。再進行45天（即總共培育90多天)投喂配合飼料的中間培育到牙鲆魚苗體 長7cm左右時，體色變化極其明顯且穩(wěn)定下來，這45天配合飼料的投喂量根據(jù)牙鲆苗的食量 可逐漸增加。
[0094]為了統(tǒng)計生態(tài)標記率，夜間當牙鲆魚苗在池中均勻分散時，我們用1平方米面積的 網(wǎng)箱在池中不同的3個位置取樣，計數(shù)有生態(tài)標記魚苗的數(shù)量。以此，測算不同營養(yǎng)強化水 平下，牙鲆魚苗的生態(tài)標記率，結果如表3所示，每次抽樣的生態(tài)標記率以及平均生態(tài)標記 率基本均在99%以上，同時可參見圖2~5。
[0095] 表3生態(tài)標記試驗牙鲆魚苗體色統(tǒng)計表
[0097] 通過上述牙鲆生態(tài)標記苗種培育試驗，本申請人發(fā)現(xiàn)在牙鲆仔魚孵出后第3天后 的變態(tài)期按本發(fā)明方法培育，能得到明顯的生態(tài)標記作用。
[0098] 實施例4
[0099] 小型試驗:本申請人采用本發(fā)明方法培育得到具有生態(tài)標記型的牙鲆后，對1萬尾 牙鲆采用常規(guī)方法進行養(yǎng)殖，一年后，本申請人發(fā)現(xiàn)所飼養(yǎng)的牙鲆無眼側的黑色素沉積斑 沒有脫色，和野生牙鲆無眼純白形成依然鮮明對比。
[01 00]由此可得，本發(fā)明的生態(tài)標記方法能夠用于放流統(tǒng)計研究。
[0101] 實施例5
[0102] 經(jīng)本申請人的生產(chǎn)實踐，牙鲆魚苗的生態(tài)標記率大多在99%以上。但是生態(tài)標記 魚苗的無眼側黑色素沉積斑是否會隨著牙鲆魚苗生長，養(yǎng)殖環(huán)境和投喂飼料的不同而消 失？又或者正常牙鲆魚苗無眼側是否會隨著養(yǎng)殖環(huán)境和投喂飼料的不同，而在無眼側出現(xiàn) 黑色素沉積斑?一旦在后續(xù)的牙鲆生長過程中，出現(xiàn)了諸如上述生態(tài)標記斑的逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象，將 大大影響牙鲆生態(tài)標記的可靠性。為了驗證牙鲆生態(tài)標記是否會產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)，本申請人又進 行了牙鲆生態(tài)標記的驗證試驗。
[0103] 一、試驗地點
[0104] 1、全國水產(chǎn)技術推廣總站(即本申請人）日照海水基地
[0105] 本試驗全部工廠化養(yǎng)殖條件下的牙鲆生態(tài)標記不可逆驗證試驗，全部在我站日照 海水良種示范基地綜合車間進行。
[0106] 2、巖礁池
[0107] 本試驗天然巖礁條件下的牙鲆生態(tài)標記不可逆驗證試驗全部在劉成波老板