一種黑老虎提取物的制備方法及在治療非酒精性脂肪肝中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中草藥提取技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種黑老虎提取物的制備方法 及在治療非酒精性脂肪肝中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 黑老虎為五味子科南五味子屬植物冷飯團(tuán)（Kadsuracoccinea)的根及蔓莖，亦名 臭飯團(tuán)、過(guò)山龍?zhí)佟⒕p紅南五味子等，主要分布于廣西、廣東、云南、貴州等地，民間常用于治 療慢性胃炎、急性胃腸炎、風(fēng)濕痹痛、跌打損傷和骨折等?，F(xiàn)代藥理研究表明，黑老虎具有抗 癌、抗HIV、抗炎、保肝、抗氧化等藥理作用，其中木脂素類和三萜類成分研究報(bào)道較多。但未 見(jiàn)黑老虎對(duì)非酒精性脂肪肝治療作用的研究報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種黑老虎提取物的制備方法。
[0004]本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供黑老虎提取物在制備治療或預(yù)防非酒精性脂肪肝 藥物中的應(yīng)用。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的： 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： 51. 黑老虎粉碎后，用6~12倍體積50~95%乙醇溶液提取1~3次，每次1~3h， 放冷后過(guò)濾，合并濾液，濃縮得稠膏； 52. 取稠膏懸浮于1~5倍體積的水中，用1~3倍體積石油醚-乙酸乙酯混合溶劑反 復(fù)萃取1~3次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0006]本發(fā)明制備得到的黑老虎提取物主要含有kadsuralignanA、kadsuralignanB、 戈米辛R、schizanrinF、戈米辛E、冷飯團(tuán)素等聯(lián)苯環(huán)辛二稀型木脂素類成分，且這些有效 成分總含量在50~100%之間。
[0007] 乙醇溶液的提取時(shí)間決定了提取物中各種中藥成分的差異，為了盡量多的提取到 聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分，優(yōu)選地，用50~95%乙醇溶液每次提取的時(shí)間為2h。
[0008]優(yōu)選地，所述石油醚-乙酸乙酯混合溶劑中乙酸乙酯的體積百分比含量為30~100%〇
[0009] 優(yōu)選地，用8倍體積70%乙醇溶液提取2次。
[0010] 優(yōu)選地，用2倍體積石油醚-乙酸乙酯混合溶劑反復(fù)萃取2次。
[0011] 黑老虎提取物在制備治療或預(yù)防非酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用。
[0012] 如上所述提取方法制備得到的黑老虎提取物在制備治療或預(yù)防非酒精性脂肪肝 藥物中的應(yīng)用。
[0013] 非酒精性脂肪肝是指由于高脂飲食導(dǎo)致的脂肪肝。
[0014]利用不同的黑老虎組織進(jìn)行提取，得到的提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分 總量差異比較顯著，優(yōu)選地，本發(fā)明使用黑老虎的根進(jìn)行提取。黑老虎的果實(shí)提取物中聯(lián)苯 環(huán)辛二烯型木脂素類成分總量要低于根的。
[0015] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果： 目前，國(guó)家藥監(jiān)局未有上市的治療非酒精性脂肪肝的藥物，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)黑老虎提 取物可用于治療非酒精性脂肪肝，治療效果顯著，克服了現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供了一種潛在 的治療非酒精性脂肪肝的藥物，制備工藝簡(jiǎn)單，適合于應(yīng)用生產(chǎn)。另外，本發(fā)明制備得到的 黑老虎提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量在50~100%之間。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作出進(jìn)一步地詳細(xì)闡述，所述實(shí)施例只用于解釋本 發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。下述實(shí)施例中所使用的試驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常 規(guī)方法；所使用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，為可從商業(yè)途徑得到的試劑和材料。
[0017] 實(shí)施例1 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： 51. 將黑老虎的根粉碎后，用6倍體積50%(v/v)的乙醇溶液提取1次，提取時(shí)間為lh， 提取液放冷后過(guò)濾，濾液濃縮得稠膏； 52. 取稠膏懸浮于2倍體積的水中，用1倍體積石油醚-乙酸乙酯（其中乙酸乙酯占 50%)混合溶劑反復(fù)萃取1次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0018] 利用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以五味子酯甲為對(duì)照品)測(cè)得本實(shí)施例制得的黑老虎 提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量為64%。
[0019] 實(shí)施例2 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： 51. 將黑老虎的根粉碎后，用8倍體積70% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取2h， 提取液放冷后過(guò)濾，合并濾液，濃縮得稠膏； 52. 取稠膏懸浮于3倍水中，用2倍體積石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占80%)混合 溶劑反復(fù)萃取2次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0020] 利用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以五味子酯甲為對(duì)照品)測(cè)得本實(shí)施例制得的黑老虎 提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量為86%。
[0021] 實(shí)施例3 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： 51. 將黑老虎的根粉碎后，用12倍體積95%乙醇溶液提取3次，每次提取3h，提取液放 冷后過(guò)濾，合并濾液，濃縮得稠膏； 52. 取稠膏懸浮于5倍水中，用3倍體積石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占40%)混合 溶劑反復(fù)萃取3次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0022] 利用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以五味子酯甲為對(duì)照品)測(cè)得本實(shí)施例制得的黑老虎 提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量為55%。
[0023] 對(duì)比例1 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： S1.將黑老虎的根粉碎后，用8倍體積70% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取4h， 提取液放冷后過(guò)濾，合并濾液，濃縮得稠膏； S2.取稠膏懸浮于3倍水中，用2倍體積石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占35%)混合 溶劑反復(fù)萃取2次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0024] 利用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以五味子酯甲為對(duì)照品)測(cè)得本實(shí)施例制得的黑老虎 提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量為46%。
[0025] 對(duì)比例2 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： 51. 將黑老虎的根粉碎后，用8倍體積70% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取2h， 提取液放冷后過(guò)濾，合并濾液，濃縮得稠膏； 52. 取稠膏懸浮于3倍水中，用2倍體積石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(其中乙酸乙酯占 20%)反復(fù)萃取2次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0026] 利用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以五味子酯甲為對(duì)照品)測(cè)得本實(shí)施例制得的黑老虎 提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量為42%。
[0027] 對(duì)比例3 一種黑老虎提取物的制備方法，包括以下步驟： 51. 將黑老虎的根粉碎后，用8倍體積35% (v/v)的乙醇溶液提取2次，每次提取3h， 提取液放冷后過(guò)濾，合并濾液，濃縮得稠膏； 52. 取稠膏懸浮于3倍水中，用2倍體積石油醚-乙酸乙酯(其中乙酸乙酯占50%)混合 溶劑反復(fù)萃取2次，合并有機(jī)溶劑萃取層，回收溶劑，干燥，粉碎得黑老虎提取物。
[0028] 利用紫外-可見(jiàn)分光光度法（以五味子酯甲為對(duì)照品)測(cè)得本實(shí)施例制得的黑老虎 提取物中聯(lián)苯環(huán)辛二烯型木脂素類成分總含量為36%。
[0029] 實(shí)施例4 以實(shí)施例1制備得到的黑老虎提取液來(lái)制備黑老虎保肝片，制備方法為：稱取250g實(shí) 施例1的黑老虎提取物，加入250g硫酸鈣、10g交聯(lián)聚維酮混勻。以適量80%乙醇作潤(rùn)濕劑 制成軟材，以14目篩制粒，于60°C溫度下干燥后過(guò)12目