專(zhuān)利名稱(chēng):作為趨化因子受體拮抗劑的噻唑衍生物的制作方法
本發(fā)明涉及包含下述化合物的藥物組合物，該化合物通過(guò)CCR2b受體(對(duì)MCP-1是一種已知配體)的拮抗作用而起作用，并因此可用于治療由這些受體介導(dǎo)的炎性疾病。這些化合物包含環(huán)狀芳香部分。本發(fā)明還涉及用于該組合物的新化合物，制備它們的方法，用于制備它們的中間體，和它們作為治療劑的用途。
趨化因子(Chemokines)在各種疾病和失調(diào)的免疫和炎性反應(yīng)中起著重要作用，這些疾病和失調(diào)包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性阻塞性肺病、動(dòng)脈粥樣硬化和其它自身免疫病變?nèi)缪装Y性腸病、糖尿病、哮喘和過(guò)敏性疾病。趨化因子也在血管生成中起作用，并且趨化因子的調(diào)節(jié)可有益于癌癥的治療。趨化因子是分泌的小分子，其屬于不斷增加的8-14kDa蛋白超家族，該家族特征為保守的4個(gè)半光氨酸基序。趨化因子超家族可分成顯示出特征性結(jié)構(gòu)基序的兩類(lèi)主要家族Cys-X-Cys(C-X-C)和Cys-Cys(C-C)。這兩個(gè)家族是根據(jù)半光氨酸殘基NH-近端對(duì)之間的單個(gè)氨基酸插入和序列相似性來(lái)區(qū)分的。
C-C趨化因子包括單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的有效化學(xué)引誘物(chemoattractants)如單核細(xì)胞趨化蛋白1-3(MCP-1、MCP-2和MCP-3)、RANTE(調(diào)節(jié)活性、正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌)、嗜酸細(xì)胞活化趨化因子(eotaxin)和巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α和1β(MIP-1α和MIP-1β)。
C-X-C趨化因子包括嗜中性粒細(xì)胞的幾種強(qiáng)效化學(xué)引誘物和活化劑，例如白細(xì)胞介素-8(IL-8)和嗜中性粒細(xì)胞活化肽2(NAP-2)。
研究表明趨化因子的作用是通過(guò)G蛋白-偶聯(lián)受體亞科介導(dǎo)的，其中這些受體被稱(chēng)為CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5和CX3CR1。由于調(diào)節(jié)這些受體的藥物可用于治療上述提及的那些疾病和失調(diào)，因此這些受體表現(xiàn)了較好的藥物開(kāi)發(fā)目標(biāo)。
美國(guó)專(zhuān)利5,712,270描述了一系列用于治療神經(jīng)性疾病有用的噻唑衍生物。
申請(qǐng)人:已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一類(lèi)包含環(huán)部分的化合物，其具有C-C趨化因子受體有效的拮抗作用，尤其是CCR2b受體的有效拮抗作用。
本發(fā)明提供式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，在制備用于治療C-C趨化因子介導(dǎo)病癥的藥物中的用途， 其中X1為氮或CH；X2為硫或NH；R1為任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的芳基環(huán)，其中兩個(gè)取代基可連接到一起形成任選取代的稠合雙環(huán)(fused bicyclic ring)，所述稠合雙環(huán)可包含雜原子；Ra為氫、C1-3烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、三氟甲基、鹵素、氨基、C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、C1-4烷氧基、羥基、硫代C1-4烷基或環(huán)丙基；R8為氫或任選取代的C1-4烷基，R2為任選取代的C2-10直鏈或支化的亞烷基，其任選地插入有NRb基團(tuán)，其中Rb為氫或C1-3甲基；或R2與R8一起與它們連接的氮原子可形成任選取代的環(huán)烷基或雜環(huán)，R3和R4獨(dú)立地選自任選取代的C1-10烷基、任選取代的C2-10烯基、任選取代的C1-10炔基、或任選取代的雜環(huán)基團(tuán)，或R3和R4與它們連接的氮原子一起形成任選取代的雜環(huán)，所述雜環(huán)任選地包含另外的雜原子，或R3與R2或R8一起和它們連接的一個(gè)或多個(gè)氮原子形成任選取代的雜環(huán)，所述雜環(huán)任選包含另外的雜原子，或R3和R4與R2一起形成任選取代的橋環(huán)結(jié)構(gòu)(bridged ring structure)。
式(I)的化合物可用于治療其中趨化因子受體屬于C-C受體亞科的疾病，更優(yōu)選目標(biāo)趨化因子受體為CCR2受體。
CCR2是單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)的受體。MCP-1是介導(dǎo)白細(xì)胞趨化反應(yīng)和激活的促炎蛋白(pro-inflammatory protein)的趨化因子家族的一員。MCP-1是C-C趨化因子，其為有效的T細(xì)胞和單核細(xì)胞化學(xué)引誘物。MCP-1已牽涉到大量的炎性疾病的病理生理學(xué)，包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性阻塞性肺病、動(dòng)脈粥樣硬化和炎癥性腸病。
MCP-1通過(guò)CCR2受體起作用。MCP-2、MCP-3和MCP-4也可至少部分地通過(guò)此受體起作用。因此在本說(shuō)明書(shū)中，當(dāng)提到“MCP-1的抑制或拮抗作用”或“MCP-1介導(dǎo)的效果”時(shí)，這包括MCP-2和/或MCP-3和/或MCP-4介導(dǎo)效果的抑制或拮抗作用，同時(shí)MCP-2和/或MCP-3和/或MCP-4通過(guò)CCR2受體起作用。
式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，可用于治療以下疾病(1)(呼吸道)-氣道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支氣管哮喘、過(guò)敏性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、運(yùn)動(dòng)誘發(fā)哮喘、藥物誘發(fā)哮喘(包括阿司匹林和NSAID-誘發(fā)的)和粉塵誘發(fā)哮喘，間歇性的和持續(xù)性的，所有都是嚴(yán)重度的；和其它原因的氣道高反應(yīng)性；慢性阻塞性肺病(COPD)；支氣管炎，包括傳染性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣腫；支氣管擴(kuò)張；囊性纖維化；結(jié)節(jié)?。晦r(nóng)民肺和相關(guān)疾?。怀舾行苑窝?；肺纖維化，包括隱原性纖維化肺泡炎、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、并發(fā)抗腫瘤治療和慢性感染的纖維化，包括結(jié)核病和喂鴿者病和其它真菌感染；肺移植并發(fā)癥；肺脈管系統(tǒng)血管炎和血栓形成疾病；和肺動(dòng)脈高壓；鎮(zhèn)咳活性，包括治療與氣道炎癥和分泌情況相關(guān)的久嗽和醫(yī)源性咳嗽；急性和慢性鼻炎，包括藥物性鼻炎和血管舒縮性鼻炎；全年性鼻炎和季節(jié)性變應(yīng)性鼻炎，包括神經(jīng)性鼻炎(花粉癥)；鼻息肉?。患毙圆《靖腥?，包括感冒和因呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠形病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染。
(2)(骨和關(guān)節(jié))與骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病相關(guān)或包括它們的關(guān)節(jié)炎，既包括原發(fā)性的又包括繼發(fā)性的，例如先天性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良；頸和腰脊椎炎和腰背痛部和頸痛；類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和斯蒂爾病(Still’sdisease)；血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病，包括強(qiáng)直性脊柱炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和未分化脊柱關(guān)節(jié)病(undifferentiatedspondarthropathy)；膿毒性關(guān)節(jié)炎和其它感染相關(guān)的關(guān)節(jié)病(arthopathies)和骨疾病，諸如結(jié)核病，包括波特病(Potts’disease)和蓬塞綜合征(Poncet’s syndrome)；急性和慢性晶體誘發(fā)的滑膜炎，包括尿酸鹽貯積病、焦磷酸鈣沉積病與鈣磷灰石相關(guān)的腱、粘液囊和滑液炎癥；貝切特病(Behcet’s disease)；原發(fā)性和繼發(fā)性斯耶格倫綜合征(sjogren’s syndrome)；全身性硬化和局限性硬皮??；系統(tǒng)性紅斑狼瘡、混合型結(jié)締組織病和未分化結(jié)締組織病；炎性肌病，包括皮肌炎和多肌炎；風(fēng)濕性多肌??；幼年型關(guān)節(jié)炎(juvenile arthritis)，包括無(wú)論何種關(guān)節(jié)分布的原發(fā)性炎性關(guān)節(jié)炎和相關(guān)綜合征以及風(fēng)濕熱及其全身并發(fā)癥；血管炎(vasculitide)，包括巨細(xì)胞性動(dòng)脈炎、高安動(dòng)脈炎(Takayasu’s arteritis)、丘-施綜合征(hurg-Strauss syndrome)、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、微觀多動(dòng)脈炎，和與病毒感染、超敏反應(yīng)、冷球蛋白和異蛋白相關(guān)的血管炎；腰背痛；家族性地中海熱、穆-韋綜合征(Muckle-Wells syndrome)和家族性愛(ài)爾蘭熱(Familial Hibernian Fever)、菊池病(kikuchi)；藥物誘發(fā)的關(guān)節(jié)痛、腱炎(tendonititides)和肌病。
(3)(皮膚)牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎或其它濕疹性皮膚病和遲發(fā)型超敏反應(yīng)；植物性皮炎和光照性皮炎；脂溢性皮炎、皰疹樣皮炎、扁平苔癬、萎縮性硬化性苔癬、壞疽性膿皮癥、皮膚結(jié)節(jié)病、盤(pán)狀紅斑狼瘡、天皰瘡、類(lèi)天皰瘡、大皰性表皮松解、蕁麻疹、血管性水腫、血管炎、中毒性紅斑、表皮嗜曙紅細(xì)胞增多、斑禿、男性型禿發(fā)癥、斯威特綜合征(Sweet’s syndrome)、韋-克綜合征(Weber-Christian syndrome)、多形性紅斑；蜂窩組織炎，包括傳染性的和非傳染性的；脂膜炎；皮膚淋巴瘤；非黑素瘤皮膚癌和其它發(fā)育不良性損害；藥物誘發(fā)的疾病，包括固定性藥疹。
(4)(眼)瞼炎；結(jié)膜炎，包括多年性和春季變應(yīng)性結(jié)膜炎；虹膜炎；前色素層炎和后色素層炎；脈絡(luò)膜炎；自身免疫性疾病；影響視網(wǎng)膜的變性或炎性疾??；眼炎，包括交感性眼炎；結(jié)節(jié)??；感染，包括病毒、真菌和細(xì)菌感染。
(5)(胃腸道)舌炎、齦炎、牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸細(xì)胞性胃腸炎、肥大細(xì)胞增多癥、克羅恩病、結(jié)腸炎，包括潰瘍性結(jié)腸炎、直腸炎、肛門(mén)瘙癢；腹部疾病、腸易激綜合征和可以具有遠(yuǎn)離腸作用的食物相關(guān)變態(tài)反應(yīng)(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹)。
(6)(腹部)肝炎，包括自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纖維化和肝硬化；膽囊炎；胰腺炎，包括急性和慢性的。
(7)(生殖泌尿系統(tǒng))腎炎，包括間質(zhì)性腎炎和腎小球腎炎；腎病綜合征；膀胱炎，包括急性和慢性(間質(zhì)性)膀胱炎和杭納潰瘍(Hunner′sulcer)；急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睪炎、卵巢炎和輸卵管炎；女陰陰道炎；佩羅尼病(Peyronie’s disease)；勃起機(jī)能障礙(男性和女性)。
(8)(同種異體移植物排斥)急性和慢性同種異體移植物排斥，例如在腎、心臟、肝、肺、骨髓、皮膚或角膜移植后或輸血后的急性和慢性同種異體移植物排斥；或慢性移植物抗宿主病。
(9)(CNS)阿爾茨海默病和其它癡呆疾病，包括CJD和nvCJD；淀粉樣變性??；多發(fā)性硬化和其它脫髓鞘綜合征；腦動(dòng)脈粥樣硬化和血管炎(vasculitis)；顳動(dòng)脈炎；重癥肌無(wú)力；急性和慢性疼痛(急性、間歇性或持續(xù)性的，無(wú)論是來(lái)源于中樞的還是外周的)，包括內(nèi)臟痛、頭痛、偏頭痛、三叉神經(jīng)痛、不典型面痛、關(guān)節(jié)和骨痛、因癌癥和腫瘤侵入引起的疼痛、神經(jīng)性疼痛綜合征，包括糖尿病、皰疹后和與HIV-相關(guān)的神經(jīng)病變；神經(jīng)類(lèi)肉瘤??；惡性、感染性和自身免疫過(guò)程的中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥。
(10)其它自身免疫性疾病和變態(tài)反應(yīng)性疾病，包括橋本甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、格雷夫斯病(Graves’disease)、阿狄森病(Addison’s disease)、糖尿病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、嗜酸細(xì)胞性筋膜炎、高-IgE綜合征、抗磷脂綜合征。
(11)其它具有炎性或免疫性成分的疾病，包括獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、麻風(fēng)病、惡性皮膚網(wǎng)狀細(xì)胞增多綜合征(ezary syndrome)和瘤外綜合征。
(12)(心血管)動(dòng)脈粥樣硬化、影響冠狀動(dòng)脈和外周循環(huán)的心包炎；心肌炎、炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌結(jié)節(jié)病；局部缺血性再灌注損傷；心內(nèi)膜炎、心瓣炎和主動(dòng)脈炎，包括傳染性的(例如梅毒性的)；血管炎；近靜脈和外周靜脈疾病，包括靜脈炎和血栓形成，包括深部靜脈血栓形成和靜脈曲張并發(fā)癥。
(13)(腫瘤)治療常見(jiàn)癌癥，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、胰腺、腸和結(jié)腸、胃、皮膚和腦腫瘤和侵害骨髓(包括白血病)和淋巴組織增生系統(tǒng)的惡性腫瘤，諸如霍杰金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)和非霍杰金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)；包括預(yù)防和治療轉(zhuǎn)移性疾病和腫瘤復(fù)發(fā)以及瘤外綜合征。
申請(qǐng)人:已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在這種類(lèi)型的化合物側(cè)鏈中引入叔胺尤其有利。
此處所使用的“雜原子”是指非碳原子如氧、氮或硫原子。當(dāng)單獨(dú)使用或作為后綴使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“烷基”包括直鏈和支化結(jié)構(gòu)。這些基團(tuán)可包含多達(dá)10個(gè)，優(yōu)選多達(dá)6個(gè)，更優(yōu)選多達(dá)4個(gè)碳原子。類(lèi)似地，術(shù)語(yǔ)“烯基”和“炔基”是指包含2～10，優(yōu)選2～6個(gè)碳原子的不飽和直鏈或支化結(jié)構(gòu)。環(huán)部分(cyclic moiety)如環(huán)烷基、環(huán)烯基和環(huán)炔基的性質(zhì)類(lèi)似，但是具有至少3個(gè)碳原子。它們可能被橋接。術(shù)語(yǔ)如“烷氧基”和“烷酰基”包括連接到合適的官能團(tuán)上的上述烷基部分。
術(shù)語(yǔ)“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。芳基包括芳香族碳環(huán)基團(tuán)如苯基和萘基。術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”包括芳香族或非芳香族環(huán)，或部分不飽和的環(huán)體系，例如包含4～20，合適地5～10個(gè)環(huán)原子，所述環(huán)原子中至少一個(gè)是雜原子如氧、硫或氮。環(huán)可為單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)。它們也可包含橋基、尤其是烷基橋基(alkylbridge)。所述基團(tuán)的例子包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、噻唑基、四唑基、唑基、異唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三嗪基、喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、苯并噻唑基、苯并唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、四氫呋喃基、苯并二氫吡喃基(chromanyl)、苯并噻吩基、哌啶基、1，2，3，4-四氫喹啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、吡嗪基、哌嗪基、嘧啶基、噠嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、吲哚基、二氫吲哚基、苯并咪唑基、吡唑基、吲唑基、唑基、苯并唑基、異唑基、異噻唑基、嗎啉基、二氧戊環(huán)(dioxolane)、苯并二氧戊環(huán)(benzodioxolane)、4H-1，4-苯并嗪基、4H-1，4-苯并噻嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、二唑基、呋咱基、噻二唑基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、環(huán)氧乙烯基、氧雜環(huán)丁烷基、氮雜環(huán)丁烷基、哌啶基、氧雜環(huán)庚烷基(oxepanyl)、氧氮雜環(huán)庚烷基(oxazepanyl)、四氫-1，4-噻嗪基、1，1-二氧代四氫-1，4-噻嗪基、高哌啶基(homopiperidinyl)、高哌嗪基(homopiperazinyl)、二氫吡啶基、四氫吡啶基、二氫嘧啶基、四氫嘧啶基、四氫噻吩基、四氫噻喃基、或硫嗎啉基。
“雜芳基”是指上述具有芳香性質(zhì)的那些基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“芳烷基”是指芳基取代的烷基如芐基。
說(shuō)明書(shū)中所用的其它表述包括“烴基”，其是指包括碳和氫原子的任何結(jié)構(gòu)。例如，這些烴基可為烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基、環(huán)烯基或環(huán)炔基。
在具體實(shí)施方案中，X1為N。
X2合適地為S。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，R1為任選取代的芳基，尤其是任選取代的苯基或萘基。R1合適地為取代的苯基。
當(dāng)R1為任選取代的環(huán)烷基時(shí)，它合適地為任選取代的C5-7環(huán)烷基，如環(huán)己基。
對(duì)于R1，合適的雜環(huán)基團(tuán)包括雜芳基，尤其是吡啶基。
合適的烷基R1為支化的C3-10烷基如叔丁基。類(lèi)似地，烷氧基R1合適地包含所述烷基，R1的具體例子是叔丁氧基。
對(duì)于烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基團(tuán)R1，合適的任選的取代基包括1-4，合適地1-3個(gè)基團(tuán)，該基團(tuán)選自官能團(tuán)(funtional group)、烴基，如烷基、烯基、炔基或芳烷基、或雜環(huán)基團(tuán)。
此處所使用的術(shù)語(yǔ)“官能團(tuán)”是指反應(yīng)性取代基。它們可包括供電子或吸電子基團(tuán)。這種基團(tuán)的例子包括鹵素、氧代、氰基、硝基、C(O)nR11、OR11、S(O)qR11、NR12R13、C(O)NR12R13、OC(O)NR12R13、-CH＝NOR11、-NR12C(O)nR11、-NR11CONR12R13、-N＝CR12R13、S(O)qNR12R13或-NR12S(O)qR11，其中R11、R12和R13獨(dú)立地選自氫、任選取代的烴基或任選取代的雜環(huán)基，或者R12和R13一起形成任選取代的環(huán)，該環(huán)任選地包含另外的雜原子如S(O)q’、氧和氮，n為1或2的整數(shù)，q為0或選自1、2或3的整數(shù)，q’為0、1或2。當(dāng)官能團(tuán)包括S(O)qNR12R13或-NR12S(O)qR11時(shí)，q通常為1、2或3的整數(shù)，合適地為1或2。
對(duì)于烴基或雜環(huán)基團(tuán)R11、R12和R13，合適的任選取代基包括鹵素(包括全鹵烷基如三氟甲基)、巰基、羥基、烷氧基、氧代、雜芳氧基、烯氧基、炔氧基、烷氧基烷氧基、芳氧基(其中芳基可被鹵素、硝基或羥基取代)、氰基、硝基、氨基、一或二烷基氨基、烷基酰氨基、肟基(例如羥基亞氨基或烷氧基亞氨基)或S(O)qRy，其中q如上定義，Ry為烷基。
R1的具體取代基包括一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)，選自烷基(尤其是C1-4烷基如甲基)，C2-4烯基或炔基(如乙炔基)，芐基，飽和雜環(huán)基團(tuán)(如四氫吡喃基)，或如上定義的官能團(tuán)。可在R1上形成取代基的具體官能團(tuán)包括包括鹵素、氰基、C(O)nR11、OR11和S(O)qR11。R11的具體實(shí)例為氫、烷基或芳基，尤其是甲基或苯基。
n的具體實(shí)例為1。q的具體實(shí)例為0。
因此R1的取代基的實(shí)例為一個(gè)或多個(gè)鹵素基團(tuán)(如氯或氟)、羥基、甲氧基、氰基、甲基、甲硫基、乙?；?、乙炔基、芐基或苯磺?；?br>R1基團(tuán)的實(shí)例包括苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基或基團(tuán)(a)-(u)
合適地，R1被一個(gè)或兩個(gè)鹵素基團(tuán)取代，該鹵素基團(tuán)優(yōu)選選自氯或氟。
R1基團(tuán)的具體實(shí)例為2-氯-3-氟苯基。
可選擇地，R1上的兩個(gè)取代基可連接在一起形成任選取代的稠合雙環(huán)體系。優(yōu)選地，稠合雙環(huán)為式(i) 其中A為任選取代的4-7元環(huán)，該環(huán)可包含一個(gè)或多個(gè)雜原子。上述R1上的任何取代基可位于R1基團(tuán)的環(huán)A上。對(duì)于環(huán)A而言，尤其合適的任選取代基包括官能團(tuán)、雜環(huán)基團(tuán)或烴基如烷基或芳烷基。環(huán)A可為飽和或不飽和的。當(dāng)不飽和時(shí)，它可為芳香性質(zhì)的。合適地，環(huán)A形成稠合的五元或六元環(huán)。
優(yōu)選地，環(huán)A包括至少一個(gè)雜原子。
雙環(huán)基團(tuán)R1的具體實(shí)例包括子式(v)-(f’)的基團(tuán)
其中r為1、2或3，R15、R16、R17、R18和R19獨(dú)立地選自氫或上述R1取代基。尤其是，當(dāng)R15、R16、R17、R18和R20不為氫時(shí)，它們選自烷基如甲基、甲氧基、芐基、哌啶基或苯磺?；蛘弋?dāng)R16、R17、R18和R19在相同的碳原子上時(shí)，它們可形成氧代取代基(oxo substituent)。這種基團(tuán)的具體實(shí)例在下文中說(shuō)明。
Ra合適地為氫或小取代基如甲基、三氟甲基或氨基，Ra優(yōu)選為氫。
當(dāng)R8為任選取代的烷基時(shí)，合適的任選取代基包括如上定義的官能團(tuán)。R8優(yōu)選為未取代的。
合適地，R2為任選取代的C2-6直鏈或支化亞烷基，尤其是C2-3亞烷基。R2優(yōu)選為未取代的。當(dāng)它為取代的時(shí)，合適的取代基包括如上定義的官能團(tuán)。
當(dāng)R2為被NRb基團(tuán)插入的亞烷基鏈時(shí)，該基團(tuán)不會(huì)在鏈的末端位置。Rb優(yōu)選為氫。
尤其是，R2和R8可與它們連接的氮原子一起形成雜環(huán)，尤其是飽和雜環(huán)如哌啶。
當(dāng)R3或R4包括任選取代的C1-10烷基、任選取代的C2-10烯基、任選取代的C2-10炔基或任選取代的雜環(huán)基團(tuán)時(shí)，合適的任選取代基包括官能團(tuán)，如氰基、氧代、羧基、環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基團(tuán)。其中任何環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)取代基本身可任選地被一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)，任選取代的烴基(如任選取代的烷基)，或雜環(huán)基團(tuán)取代。
在具體實(shí)施方案中，R3或R4為任選取代的C1-10烷基。
合適地，R3和/或R4為甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基或正己基，尤其是甲基或乙基。
當(dāng)作為C1-10烷基的R3或R4具有為官能團(tuán)的取代基時(shí)，具體實(shí)例包括氰基、C(O)nR11如羧基或甲基羧酸酯、OR11如羥基或甲氧基、或S(O)qR11如硫代C1-3烷基，例如硫代甲基，或甲磺?；?，其中n、q和R11如上所定義。尤其是，R11在這種情況下選自雜環(huán)如嗎啉代，或芳基如苯基。
尤其是，當(dāng)R3或R4為烷基時(shí)，它們?nèi)芜x地被雜環(huán)基團(tuán)取代，該雜環(huán)基團(tuán)本身可任選地被取代。雜環(huán)基團(tuán)的具體實(shí)例包括呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、異唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、咪唑基、吡唑基、吡咯烷基、咪唑基、吡啶基、嘧啶基、烷基(oxanyl)、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、哌啶基、哌嗪基、二氧戊環(huán)基、苯并-1，3-二氧雜環(huán)戊烯基(benzo-1，3-dioxolyl)、2，3-二氫吲哚或硫雜環(huán)丙烷基。
此外，R3或R4可包括任選地被芳基(如苯基)或環(huán)烷基(如環(huán)丙基)取代的烷基，芳基或環(huán)烷基兩者中任一個(gè)本身可任選地被取代。
當(dāng)R3和R4上的這些芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)取代基本身被取代時(shí)，那些取代基合適地選自任選地帶有所述官能團(tuán)作為取代基的C1-3烷基，或如上所定義的官能團(tuán)。這種情況下的具體官能團(tuán)包括鹵素如氟、氰基、氧代(當(dāng)環(huán)為至少部分不飽和時(shí))、C(O)nR11，例如羧基或甲基羧酸酯、OR11如羥基或甲氧基、或S(O)qR11如硫代C1-3烷基，例如硫代甲基，或甲磺酰基，其中n、q和R11如上定義。
優(yōu)選地，當(dāng)R3或R4為烷基時(shí)，它如上所述被取代。
在可選擇的實(shí)施方案中，R3和R4與它們連接的氮原子一起形成任選取代的雜環(huán)，該雜環(huán)任選地包含另外的雜原子。尤其是，這些環(huán)為飽和環(huán)。這些環(huán)的實(shí)例是式(I)的化合物，其中式R4R3N-包括子式(xx)-(xxv)的基團(tuán)。
其中R20為氫或取代基。
尤其是，式R4R3N-的基團(tuán)為(xxi)或(xxiv)基團(tuán)。
合適的取代基R20包括烷基，尤其是C1-4烷基如甲基、芳烷基如芐基、任選取代的雜環(huán)基團(tuán)，尤其是飽和的雜環(huán)基團(tuán)如吡咯烷基或哌啶基，其本身可為任選取代的，以及官能團(tuán)如氰基、-NR12R13、C(O)nR11、OR11或S(O)qR11，其中n、q、R11、R12和R13如上所定義。具體官能團(tuán)C(O)nR11包括羧基或甲基羧酸酯。具體官能團(tuán)OR11為羥基或甲氧基。具體官能團(tuán)S(O)qR11為硫代C1-3烷基，例如硫代甲基，或甲磺?；?，以及苯磺?；?。
當(dāng)R20為雜環(huán)基團(tuán)時(shí)，它可任選地被官能團(tuán)取代，尤其是以上對(duì)于R20。列出的官能團(tuán)。
在另一實(shí)施方案中，R3與R2或R8一起與它們連接的氮原子形成任選取代的雜環(huán)，該雜環(huán)任選地包含另外的雜原子。當(dāng)R3與R2一起與它們連接的氮原子一起形成環(huán)時(shí)，可在R2鏈中任何合適的碳原子處進(jìn)行連接，但是合適地在與基團(tuán)Y直接鄰接的R2碳處連接。因此，子式(x)基團(tuán) 的合適實(shí)例包括子式(bb)或(cc)的基團(tuán)，
其中R4如上所定義，R25、R26、R27和R28獨(dú)立地選自氫或C1-3烷基如甲基。優(yōu)選地，R25、R26、R27和R28全部為氫，或者全部為甲基，最優(yōu)選地，它們?nèi)繛闅洹?br>尤其優(yōu)選的(x)基團(tuán)為上述式(bb)的基團(tuán)。
因此，作為具體的實(shí)施方案，本發(fā)明提供如上所述式IB化合物的用途，
其中R1、R4和R8為如上所定義的。
子式(bb)至(ff)基團(tuán)中的R4基團(tuán)的具體實(shí)例包括表1所列的那些基團(tuán)。
表1

基團(tuán)R4的具體實(shí)例為以上子式1f、1k、11、1p、1q、1t、1x、1y、1z、2e、2j、2l、2p、3m、3x和4k的基團(tuán)。
在尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4包括被雜環(huán)基團(tuán)取代的烷基，該雜環(huán)基團(tuán)本身如上所述任選地被取代。
在另一優(yōu)選實(shí)施方案中，R4為被取代的芳基(如取代的苯基)取代的烷基，其中所述取代基如上所述。
在又一優(yōu)選實(shí)施方案中，R4為S(O)qR11基團(tuán)，其中q和R11如上所定義。
當(dāng)R3與R8一起與它們連接的氮原子形成任選取代的雜環(huán)(該雜環(huán)包含另外的雜原子)時(shí)，子式(y)基團(tuán)
的合適實(shí)例包括子式(g’)的基團(tuán)
這種基團(tuán)的具體實(shí)例為 當(dāng)R3和R4與R2一起形成任選取代的橋接環(huán)結(jié)構(gòu)時(shí)，具體結(jié)構(gòu)為式(h’) 合適的任選取代基為以上對(duì)烷基R3或R4描述的那些取代基。
許多式(I)的化合物是新的，并且這些化合物構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。具體地，本發(fā)明還提供式(IA)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物 其中X1、X2、R2、R8、Ra和R1為如對(duì)式(I)所定義的，其中R3’和R4’分別與對(duì)式(I)所定義的R3和R4相同，條件是如果R1為任選取代的苯基，并且Ra和R8為氫，R3’和R4’不同時(shí)為未取代的烷基，或不與它們連接的氮原子一起形成取代的哌嗪環(huán)，并且另外的條件是，如果R1為任選取代的苯基，Ra為氫、C1-3烷基或鹵素；R8為氫或C1-4烷基，并且R3’和R2與它們連接的氮原子一起形成哌啶環(huán)，或者R3’與R8一起與它們連接的氮原子一起形成哌嗪環(huán)，則R4’不為未取代的C1-6烷基，并且另外的條件是，如果R1為任選取代的苯基，Ra為氫、C1-3烷基或鹵素；R2和R8與它們連接的氮原子一起形成哌啶環(huán)，則R3’和R4’不都為未取代的C1-6烷基。
對(duì)基團(tuán)X1、X2、R1、R2、Ra、R8、R2而言，優(yōu)選的基團(tuán)如上所定義。對(duì)R3’和R4’而言，優(yōu)選的基團(tuán)分別如以上對(duì)R3和R4所定義。
尤其是，當(dāng)任何R4’基團(tuán)為烷基時(shí)，它帶有如上所示的取代基。
式(I)或(IA)化合物的合適藥學(xué)可接受的鹽包括堿性鹽，如堿金屬鹽例如鈉鹽、堿土金屬鹽例如鈣或鎂鹽，有機(jī)胺鹽例如三乙胺、嗎啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、普魯卡因、二芐基胺、N，N-二芐基乙胺，或氨基酸例如賴(lài)氨酸。在另一方面，當(dāng)化合物為足夠堿性時(shí)，合適的鹽包括酸加成鹽如甲磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、以及與磷酸和硫酸形成的鹽。根據(jù)帶電官能團(tuán)的數(shù)目和陽(yáng)離子或陰離子的化合價(jià)，可以有一個(gè)以上的陽(yáng)離子或陰離子。優(yōu)選的藥學(xué)可接受的鹽為鈉鹽。
式(I)和(IA)的具體化合物如下表2和3所列。
表2
表3
用于合成實(shí)例和它們制備中的某些中間體的化學(xué)路線標(biāo)記為A-F并在后文中解釋。
式(I)和(IA)的化合物可以由對(duì)化學(xué)人員顯而易見(jiàn)的各種路線合適地制備，并且制備式(IA)的化合物的路線構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。尤其是，式(I)的化合物可如下獲得使式(IV)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng)， 其中X1、X2、R1和Ra為如對(duì)式(I)所定義的， 其中R2、R3和R8為如對(duì)式(I)所定義的，R4a為如對(duì)式(I)所定義的基團(tuán)R4，或其前體；然后，如果需要或必要，使任何前體基團(tuán)R4a轉(zhuǎn)化為基團(tuán)R4。
反應(yīng)適合在有機(jī)溶劑例如二甲基甲酰胺中、在堿例如N，N-二異丙基乙胺和HATU存在下、在室溫下進(jìn)行。
前體基團(tuán)R4a的實(shí)例包括胺保護(hù)基團(tuán)如叔丁氧基羰基(Boc)基團(tuán)，其可使用常規(guī)脫保護(hù)方法除去。然后，氫基團(tuán)可通過(guò)烷基化反應(yīng)或還原性胺化反應(yīng)被可供選擇的R4基團(tuán)取代。
例如，對(duì)于式(I)化合物(其中R3和R2與它們連接的氮一起形成雜環(huán)，例如從而上述式(x)的基團(tuán)為式(bb)-(ff)的基團(tuán))的制備，它們可通過(guò)使式(VI)的化合物與式(X)的化合物反應(yīng)來(lái)制備， 其中X1、X2、R1、Ra和R8如對(duì)式(I)所定義，R3a和R2a與它們連接的氮原子一起形成環(huán)，R4-R51(VII)其中R4如對(duì)式(I)所定義，R51為離去基團(tuán)，如鹵素，尤其是溴。反應(yīng)適合在有機(jī)溶劑如二甲基甲酰胺中，在堿如堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鉀存在下進(jìn)行。合適地使用例如0-50℃的適度溫度，方便地為室溫。
可選擇地，當(dāng)R4為任選取代的烷基時(shí)，式(VI)的化合物可在弱還原劑(mild reducing agent)存在下與式(VIII)的化合物反應(yīng)，R4x-C(O)H(VIII)其中基團(tuán)R4x-CH2-相當(dāng)于所需的R4基團(tuán)。該反應(yīng)合適地在有機(jī)溶劑如四氫呋喃中，在例如0-50℃，并通常為室溫的適度溫度下進(jìn)行。合適的還原劑為三乙酰氧基氫硼化鈉。
在這種情況下，所用式(VI)的化合物合適地為鹽如酸加成鹽的形式，例如三氟乙酸鹽。
式(VI)的化合物通過(guò)使式(IX)的化合物脫保護(hù)來(lái)合適地制備， 其中X1、X2、R1、Ra和R8如對(duì)式(I)所定義，R2a和R3a如對(duì)式(VI)所定義，R52為胺保護(hù)基團(tuán)如叔丁氧基羰基(Boc)。合適的脫保護(hù)條件對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的，但是可包括用酸如鹽酸進(jìn)行處理。
上述式(IV)的化合物通過(guò)水解式(X)化合物合適地制備， 其中X1、X2、R1和Ra如對(duì)式(I)所定義，R30為烴基如C1-6烷基。
水解合適地在有機(jī)溶劑如甲烷-水中，在如25-45℃的溫度下進(jìn)行，并使用氫氧化鋰，以進(jìn)行水解。
式(X)的化合物合適地如下制備使式(XI)的化合物與式(XII)的化合物反應(yīng) 其中X1和X2如對(duì)式(I)所定義，R30如對(duì)式(X)所定義， 其中R1如對(duì)式(I)所定義，R32為離去基團(tuán)如鹵素。
反應(yīng)合適地在溶劑如乙腈、二甲亞砜(DMSO)或水中，在堿如二異丙基乙胺存在下進(jìn)行。合適地使用例如0-50℃的適度溫度，方便地為室溫。
式(I)的化合物也可通過(guò)使式(XIII)的化合物與式(XIV)的化合物反應(yīng)來(lái)制備， 其中X1、X2、Ra、R2、R3和R8如對(duì)式(I)所定義，R4a如對(duì)式(V)所定義，
其中R1如對(duì)式(I)所定義，R55為離去基團(tuán)如鹵素，尤其是氯，然后如果需要或必要，使任何前體基團(tuán)R4a轉(zhuǎn)化為基團(tuán)R4，例如使用上述方法。
反應(yīng)合適地在溶劑如乙腈、二甲亞砜(DMSO)或水中，在堿如二異丙基乙胺存在下進(jìn)行。合適地使用例如0-50℃的適度溫度，方便地為室溫。
式(XIII)的化合物可通過(guò)對(duì)式(XV)的化合物脫保護(hù)來(lái)制備， 其中X1、X2、R2、R3、R8和Ra如對(duì)式(I)所定義，R4a如對(duì)式(V)所定義，R56為氮保護(hù)基團(tuán)如叔丁氧基羰基(Boc)。除脫保護(hù)基團(tuán)合適的條件對(duì)化學(xué)人員是顯而易見(jiàn)的，但是可包括酸化，在高溫例如50-90℃，尤其是約70℃，例如使用有機(jī)酸如三氟乙酸進(jìn)行的酸化。
式(XV)的化合物可通過(guò)與以上對(duì)式(I)化合物的制備描述的那些方法類(lèi)似的方法來(lái)制備。例如，式(XVI)的化合物(其中Ra和R56如上所定義) 可與上述式(V)的化合物反應(yīng)，使用與對(duì)化合物(IV)和(V)之間的反應(yīng)描述的那些條件類(lèi)似的條件。
可選擇地，式(XIII)的化合物，尤其是其中X1為CH并且X2為S，可通過(guò)還原式(XVII)的化合物來(lái)制備， 其中X1、X2、Ra、R2、R3和R8如對(duì)式(I)所定義，R4a如對(duì)式(V)所定義。還原合適地在催化劑如鐵和氯化銨的存在下，在有機(jī)溶劑中如乙醇/水中進(jìn)行。合適地使用高溫例如50-100℃，方便地為溶劑的回流溫度。
式(XVII)的化合物合適地通過(guò)使式(XVIII)的化合物與式(XIX)的化合物反應(yīng)來(lái)制備， 其中X1、X2和Ra如對(duì)式(I)所定義， 其中R2、R3和R8如對(duì)式(I)所定義，R4a如對(duì)式(V)所定義。該反應(yīng)合適地在有機(jī)溶劑如二氯甲烷中，在堿如二異丙基乙胺存在下，在適度溫度如室溫下進(jìn)行。
式(V)、(VII)、(VⅢ)、(XI)、(XII)、(XIV)、(XVIII)和(XIX)的化合物或者是已知的化合物，或者它們可由已知的化合物、通過(guò)對(duì)熟練的化學(xué)人員顯而易見(jiàn)的常規(guī)方法來(lái)制備。
也可預(yù)想這些方法的變化形式。
如上所定義的新中間體化合物構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。
本發(fā)明還提供如上所定義的式(I)或(IA)的化合物，其用于治療C-C-介導(dǎo)疾病如炎癥。當(dāng)以這種方式使用時(shí)，化合物合適地被配制成還包含藥學(xué)可接受載體的藥物組合物，并且這些藥物組合物構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。
而且，本發(fā)明提供如上所定義的式(I)的化合物在制備藥物中的用途，該藥物用于治療C-C趨化因子介導(dǎo)疾病，尤其是用于治療CCR2B介導(dǎo)的炎癥。
一些式(I)和(IA)的化合物可具有手性中心。應(yīng)該理解，本發(fā)明包括所有這種光學(xué)異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體以及任何這些形式的式(IA)化合物，和包含式(IA)化合物的藥物組合物的用途。
本發(fā)明還涉及式(IA)化合物的所有互變異構(gòu)形式和包含這些化合物的藥物組合物。
也應(yīng)該理解，某些式(IA)的化合物可以以溶劑化和非溶劑化形式存在，例如水合形式。應(yīng)該理解，本發(fā)明包括所有這些溶劑化形式和包含這些形式的藥物組合物。
本發(fā)明的組合物可為下述合適的形式口服使用(例如片劑、錠劑、硬膠囊劑或軟膠囊劑、水性或油性混懸劑、乳劑、可分散的粉劑或顆粒劑、糖漿劑或酏劑)、局部使用(例如乳膏、軟膏、凝膠、或水性或油性溶液劑或混懸劑)、吸入給藥(例如微細(xì)分散的粉末或液態(tài)氣溶膠)、吹入給藥(例如微細(xì)分散的粉末)或腸胃外給藥(例如用于靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)或肌間給藥的無(wú)菌水性或油性溶液，或用于直腸給藥的栓劑)。
本發(fā)明的組合物可通過(guò)常規(guī)操作使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)藥物賦形劑來(lái)獲得。因此，目的用于口服使用的組合物可包含例如一種或多種著色劑、甜味劑、調(diào)味劑和/或防腐劑。
片劑配制用的合適藥學(xué)可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，造粒劑和崩解劑如玉米淀粉或海藻酸(algenicacid)；粘合劑如淀粉；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯，以及抗氧化劑如抗壞血酸。片劑可以是包衣或未包衣的，以改變它們的崩解和隨后活性成分在腸胃道內(nèi)的吸收，或提高它們的穩(wěn)定性和/或外觀，在任一種情況下，使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)包衣劑和操作。
口服使用的組合物可以是硬明膠膠囊的形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合；或者為軟明膠膠囊的形式，其中活性成分與水或油如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水性混懸劑通常包含細(xì)粉形式的活性成分以及一種或多種懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、黃蓍樹(shù)膠和阿拉伯樹(shù)膠；分散劑或潤(rùn)濕劑，如卵磷脂或烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如聚氧化乙烯硬脂酸酯)，或氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物如十七氧乙烯基十六醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨酸糖醇單油酸酯，或氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物如十七氧乙烯基十六醇，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨酸糖醇單油酸酯，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯失水山梨酸糖醇單油酸酯。水性混懸劑也可包括含一種或多種防腐劑(如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯)、抗氧化劑(如抗壞血酸)、著色劑、調(diào)味劑、和/或甜味劑(如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
可通過(guò)使活性成分懸浮在植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)中來(lái)配制油性混懸劑。油性混懸劑也可包含增稠劑如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇?？杉尤胩鹞秳┤缫陨狭谐龅哪切┨鹞秳┖驼{(diào)味劑，以提供適口的口服制品。這些組合物可通過(guò)加入抗氧化劑如抗壞血酸來(lái)保存。
通過(guò)加入水而適于制備水性混懸劑的可分散的粉末和顆粒通常包含活性成分以及分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑例如有上述的那些。也可存在另外的賦形劑如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物也可為水包油乳液的形式。油相可為植物油如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟，或任何這些油的混合物。合適的乳化劑可為例如天然存在的樹(shù)膠如阿拉伯樹(shù)膠、黃蓍樹(shù)膠，天然存在的磷脂如大豆、卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇的酯或偏酯(如失水山梨糖醇單油酸酯)，和所述偏酯與氧化乙烯的縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯失水山梨糖醇單油酸酯。該乳液也可包含甜味劑、調(diào)味劑和防腐劑。
糖漿和酏劑可與甜味劑一起配制，甜味劑如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖，也可包含緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑和/或著色劑。
藥物組合物也可為無(wú)菌可注射的水性或油性混懸劑的形式，該混懸劑可根據(jù)已知操作來(lái)配制，使用一種或多種上述合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑。無(wú)菌可注射的制品也可為在無(wú)毒性腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無(wú)菌可注射溶液或混懸劑，例如在1，3-丁二醇中的溶液。
栓劑制劑可通過(guò)使活性成分與合適的非刺激性賦形劑混合來(lái)制備，該賦形劑在常溫下是固態(tài)，但是在直腸溫度下是液態(tài)，因此在直腸中融化，釋放出藥物。合適的賦形劑包括可可酯和聚乙二醇。
局部制劑如乳膏、軟膏、凝膠劑和水性或油性溶液或混懸劑，通?？墒褂帽绢I(lǐng)域公知的常規(guī)操作，使活性成分與常規(guī)局部可接受的載體或稀釋劑一起配制來(lái)獲得。
用于吹入給藥的組合物可為微細(xì)分散的粉末形式，該粉末包含平均直徑為例如30μ或更小的顆粒，該粉末自身或者僅包括活性成分，或者包括用一種或多種生理可接受的載體如乳糖稀釋的活性成分。然后用于吹入的粉末方便地保留在包含例如1-50mg活性成分的膠囊中，供渦輪推動(dòng)的吸入裝置(turbo-inhaler device)使用，如對(duì)吸入已知試劑色甘酸二鈉那樣。
用于吸入給藥的組合物可為常規(guī)的加壓氣溶膠形式，其設(shè)置成將活性成分分配成包含微細(xì)分散固體的氣溶膠或液滴?？墒褂贸Ｒ?guī)的氣溶膠推進(jìn)劑如揮發(fā)性氟化烴或烴，并且氣溶膠裝置通常設(shè)置成分配計(jì)量量的活性成分。
對(duì)于制劑的更多信息，讀者可參考Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990的第五卷中第25.2章。
與一種或多種賦形劑結(jié)合以制備單個(gè)劑型的活性成分的量必須根據(jù)治療的主體和具體給藥途徑而改變。例如，目的用于人的口服給藥的制劑通常包含例如0.5mg-2g的活性試劑，以及混合有合適、方便量的賦形劑，賦形劑的量可為整個(gè)組合物的約5～約98重量％。劑量單位形式通常包含約1mg～約500mg的活性成分。對(duì)于給藥途徑和劑量制度的更多信息，讀者可參考Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；Chairman ofEditorial Board)，Pergamon Press 1990的第5卷中第25.3章。
根據(jù)公知的醫(yī)藥原理，用于治療或預(yù)防目的的式I化合物的劑量大小，將自然地根據(jù)病癥性質(zhì)和嚴(yán)重性、動(dòng)物或病人的年齡和性別、以及給藥途徑而變化。
為了治療或預(yù)防目的而使用式I化合物的過(guò)程中，通常給藥該化合物，從而得到例如0.5mg-75mg/kg體重的日劑量，如果需要以分份劑量(divideddose)給藥。當(dāng)使用腸胃外途徑時(shí)，通常給藥較低劑量。因此，例如對(duì)于靜脈內(nèi)給藥，通常將使用例如0.5mg-30mg/kg體重的劑量。類(lèi)似地，吸入給藥，將使用例如0.5mg-25mg/kg體重的劑量。然而口服給藥是優(yōu)選的。
另一方面，本發(fā)明提供治療炎性疾病的方法，即給藥上述式(I)化合物或上述藥物組合物。
下述實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，而并非對(duì)其進(jìn)行限制，除非另外說(shuō)明外，使用以下一般操作。
在4分子篩上干燥N，N-二甲基甲酰胺(DMF)。無(wú)水四氫呋喃(THF)由Aldrich SURESEALTM瓶獲得。除非另外說(shuō)明，使用其它市售的試劑和溶劑，而沒(méi)有進(jìn)一步純化。用無(wú)水MgSO4干燥有機(jī)溶劑提取物。在Bruker WM200、WM250、WM300或WM400儀器上記錄1H、13C和19F NMR，并且視情況而定，使用Me2SO-d6與Me4Si或CCl3F作為適當(dāng)?shù)膬?nèi)標(biāo)，除非另外說(shuō)明。化學(xué)位移表示為d(ppm)，峰的多重性表明如下s，單峰；d，雙峰；dd，雙雙峰；t，三重峰；dt，雙三峰；q，四重峰；m，多重峰；br，寬峰。在VG 12-12四極、VG 70-250 SE、VG ZAB 2-SE或VG改進(jìn)的AEI/Kratos MS9分光計(jì)上記錄質(zhì)譜。對(duì)于TLC分析，使用Merck預(yù)涂TLC板(硅膠60 F254，d＝0.25mm)。在二氧化硅(Merck KieselgelArt.9385)上進(jìn)行快速色譜。在Kofler block上或用Büchi熔點(diǎn)裝置進(jìn)行熔點(diǎn)測(cè)定，并且未校正。所有的溫度均表示為攝氏度(℃)。
實(shí)施例1表2中化合物1的制備路線A 2-[(3-氯-4-氟苯甲酰基)氨基]-1，3-噻唑-4-羧酸向2-氨基-4-噻唑羧酸氫溴化物(2.24g)的乙腈(15ml)溶液中加入3-氯-4-氟苯甲酰氯(1.92g)和二異丙基乙胺(3.6ml)。在室溫下攪拌所得的溶液24小時(shí)，然后倒入水(30ml)中。用濃HCl將混合物酸化至pH為1，過(guò)濾所得固體2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-羧酸，用水洗滌并在真空、50℃下干燥(2.28g)。
LCMS M/z(+)301(M+H+) N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺在室溫下向2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-羧酸(0.3g)和二異丙基乙胺(0.16ml)的N，N-二甲基甲酰胺(4ml)溶液中加入HATU(0.38g)。15分鐘后，加入1-芐基-4-氨基哌啶(0.2g)，在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。在乙酸乙酯(10ml)和含水碳酸鉀(5ml)之間分配反應(yīng)混合物。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。使用反相HPLC，用5-95％的乙腈/水中的混合物洗脫，來(lái)純化殘余物，產(chǎn)生N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為白色固體(42mg)。
LCMS M/z(+)473(M+H+)1H-NMR(CDCl3)2.05(4H，m)，3.1(2H，m)，3.35(2H，d)，4.05(1H，m)，4.27(2H，d)，7.46(3H，m)，7.63(1H，t)，7.67(2H，m)，7.76(1H，d)，7.93(1H，s)，8.14(1H，m)，8.37(1H，q)在此步驟中可使用其它雙胺(bis-amines)代替1-芐基-4-氨基哌啶，制備具有不同堿性側(cè)鏈的化合物。
實(shí)施例2表2中化合物21的制備路線B 2-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺在室溫下向2-氨基-4-噻唑羧酸氫溴化物(2.24g)和二異丙基乙胺(4.0ml)的N，N-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入HATU(3.8g)。5分鐘后，加入1-芐基-4-氨基哌啶(1.9g)，在室溫下攪拌混合物18小時(shí)。在乙酸乙酯(30ml)和含水碳酸鉀(15ml)之間分配反應(yīng)混合物。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)為固化的2-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺的褐色殘余物(2.46g)。
N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺向3-氟苯甲酰氯(0.08g)和2-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺(0.15g)在乙腈(4ml)中的攪拌混合物中加入二異丙基乙胺(0.16ml)。在室溫下繼續(xù)攪拌18小時(shí)，然后在乙酸乙酯(10ml)和含水碳酸鉀(5ml)之間分配混合物。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。使用反相HPLC，用梯度為5-95％的乙腈水溶液洗脫，來(lái)純化殘余物，產(chǎn)生N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺白色固體(104mg)。
LCMS M/z(+)439(M+H+)在此步驟中可使用其它?；却?-氟苯甲酰氯，制備具有不同側(cè)鏈的化合物。
實(shí)施例3表2中化合物1的可替代制備方法路線C 2-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺在室溫下向2-叔丁氧基羰基-氨基-4-噻唑羧酸(0.6g)和二異丙基乙胺(0.4ml)在N，N-二甲基甲酰胺(6ml)中的攪拌溶液中加入HATU(0.95g)。15分鐘后，加入1-芐基-4-氨基哌啶(0.48g)，在室溫下攪拌整個(gè)混合物過(guò)夜。在水(20ml)和乙酸乙酯(3×10ml)之間分配反應(yīng)混合物。用硫酸鈉干燥有機(jī)層并蒸發(fā)。將殘余物再溶于甲醇中并施加到預(yù)潤(rùn)濕的SCX柱上，該柱用甲醇洗滌，然后用2M氨甲醇溶液(ammonia in methanol)洗脫。將洗脫液蒸發(fā)為油狀固體，使之溶于二氯甲烷(10ml)并在室溫下用三氟乙酸(3ml)處理過(guò)夜。加入水(50ml)，接著加入固體碳酸鉀以中和任何殘余的三氟乙酸。將有機(jī)層分離、蒸發(fā)和再溶于乙酸乙酯(15ml)中，然后加入過(guò)量的鹽酸(2M，在二乙醚中)溶液。通過(guò)蒸發(fā)收集得到的白色固體，用乙酸乙酯洗滌并在真空和室溫下干燥，得到2-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺(0.65g)。
LCMS M/z(+)317(M+H+) N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺在室溫下向2-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺(0.32g)和二異丙基乙胺(0.32ml)在二烷(5ml)中的混合物中加入3-氯-4-氟苯甲酰氯(0.38g)，然后在60℃下加熱30分鐘。冷卻混合物并在乙酸乙酯(15ml)和含水碳酸鉀(5ml)之間分配混合物。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。用硅膠柱色譜，用梯度為0-20％的甲醇/二氯甲烷溶液洗脫，來(lái)純化殘余物，產(chǎn)生N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為白色固體(310mg)。
1H-NMR(CDCl3)2.05(4H，m)，3.1(2H，m)，3.35(2H，d)，4.05(1H，m)，4.27(2H，d)，7.46(3H，m)，7.63(1H，t)，7.67(2H，m)，7.76(1H，d)，7.93(1H，s)，8.14(1H，m)，8.37(1H，q)；LCMS M/z(+)473(M+H+).
在此步驟中可使用其它酰基氯代替3-氯-4-氟苯甲酰氯，制備具有不同側(cè)鏈的化合物。
實(shí)施例4
表2中化合物24的制備路線D 2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-羧酸在室溫下向2-氨基噻唑-4-羧酸乙酯(1.0g)和二異丙基乙胺(1.0ml)在四氫呋喃(10ml)中的攪拌溶液中加入固體3-氯-4-氟苯甲酰氯(0.9g)。繼續(xù)攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑，并在乙酸乙酯(10ml)和稀的含水碳酸鉀(10ml)之間分配殘余物。用硫酸鈉干燥有機(jī)層并蒸發(fā)。
將殘余物在甲醇的混合物中攪拌，然后加入氫氧化鋰一水合物(0.63g)。攪拌過(guò)夜之后，使用濃鹽酸將澄清的溶液酸化至pH為1。在過(guò)濾器上收集沉淀的酸，用水洗滌并在真空和60℃下干燥，得到固體2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-羧酸(1.23g)。
LCMS M/z(+)301(M+H+).
2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-哌啶-4-基-1，3-噻唑-4-甲酰胺向2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-羧酸(1.23g)和二異丙基乙胺(0.7ml)在N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液中加入HATU(1.6g；4.26mmol)。在室溫下攪拌10分鐘之后，加入4-氨基-N-叔丁氧基羰基-哌啶(0.85g)，在室溫下攪拌整個(gè)混合物過(guò)夜。
在乙酸乙酯(15ml)和稀碳酸鉀水溶液(10ml)之間分配混合物。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將殘余物再溶于二氯甲烷(15ml)中，并在室溫下與4.0M鹽酸在二烷(10ml)中的溶液一起攪拌18小時(shí)。用二氯甲烷(15ml)稀釋所得的漿料并過(guò)濾。用二氯甲烷洗滌殘余固體，并在真空和室溫下干燥，得到固體2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-哌啶-4-基-1，3-噻唑-4-甲酰胺(1.45g)。
LCMS M/z(+)383(M+H+).
2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺向吲哚-3-甲醛(1mmol)在四氫呋喃(2ml)和乙腈(2ml)中的溶液中加入固體2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-哌啶-4-基-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽(0.12g)，接著加入二異丙基乙胺(0.16ml)。然后加入三乙酰氧基氫硼化鈉(0.22g)，在室溫下攪拌所得的混合物18小時(shí)。然后在水(5ml)和乙酸乙酯(10ml)之間分配反應(yīng)混合物。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過(guò)HPLC，用梯度為5-95％的乙腈/水洗脫，來(lái)進(jìn)行純化，產(chǎn)生2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為白色固體(97mg)。
LCMS M/z(+)512(M+H+).
在此步驟中可使用其它醛代替吲哚-3-甲醛，產(chǎn)生具有不同堿性側(cè)鏈的化合物。
實(shí)施例5表2中化合物26的制備路線EN-(1-芐基哌啶-4-基)-5-硝基噻吩-3-甲酰胺 向攪拌的2-硝基噻吩-4-羧酸(3.0g)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入1-氯-N，N-2-二甲基-1-丙烯胺(2.53ml)。30分鐘后加入二異丙基乙胺(5.95ml)，接著逐滴加入4-氨基-1-芐基-哌啶(3.61g)，繼續(xù)攪拌18小時(shí)。加入水(20ml)，分離各層，并在真空下濃縮有機(jī)物。對(duì)殘余物進(jìn)行硅膠柱色譜，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脫。在真空下濃縮產(chǎn)物部分，用醚研磨產(chǎn)生N-(1-芐基哌啶-4-基)-5-硝基噻吩-3-甲酰胺，為淡褐色固體(3.63g)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.5(2H，m)，1.8(2H，d)，2.0(2H，t)，2.8(2H，d)，3.5(2H，s)，3.7(1H，m)，7.3(5H，m)，8.3(1H，d)，8.5(1H，s)，8.55(1H，s).LCMSM/z(+)346(MH+)5-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)噻吩-3-甲酰胺 向N-(1-芐基哌啶-4-基)-5-硝基噻吩-3-甲酰胺(800mg)的乙醇/水(2∶1，15ml)溶液中加入鐵粉(900mg)和氯化銨(86mg)，并加熱混合物至70℃ 17小時(shí)。然后將混合物冷卻至室溫，加入硅藻土并繼續(xù)攪拌10分鐘。然后將該懸浮液過(guò)濾通過(guò)硅藻土墊，在真空下濃縮濾液。對(duì)殘余物進(jìn)行SCX2色譜分析，最初用甲醇/二氯甲烷(0-20％)洗脫，接著用0-10％(2M氨甲醇/二氯甲烷溶液)以洗脫產(chǎn)物。在真空下濃縮產(chǎn)物部分，使之吸附到二氧化硅上，并進(jìn)行柱色譜，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脫。在真空下濃縮產(chǎn)物部分，產(chǎn)生5-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)噻吩-3-甲酰胺，為褐色固體(220mg)。
LCMS M/z(+)316(MH+).
N-(1-芐基哌啶-4-基)-5-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]噻吩-3-甲酰胺 向5-氨基-N-(1-芐基哌啶-4-基)噻吩-3-甲酰胺(100mg)的二氯甲烷(5ml)溶液加入3-氯-4-氟苯甲酰氯(67mg)，并在室溫下攪拌30分鐘。在真空下濃縮混合物，使之吸附到二氧化硅上，并用硅膠色譜純化，用0-20％甲醇/二氯甲烷洗脫。用醚研磨產(chǎn)生N-(1-芐基哌啶-4-基)-5-[(3-氯-4-氟苯甲酰基)氨基]噻吩-3-甲酰胺，為褐色固體(120mg)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.6(2H，m)，1.8(2H，m)，2.0(2H，m)，2.8(2H，m)，3.5(2H，s)，3.7(1H，m)，7.25(1H，s)，7.4(5H，m)，7.65(2H，m)，8.65(2H，m)，8.25(1H，dd)，11.7(1H，s).LCMS M/z(+)472/474(MH+)在此步驟中可使用其它?；却?-氯-4-氟苯甲酰氯，制備具有不同側(cè)鏈的化合物。
實(shí)施例6表2中化合物27的制備路線F4-{[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)羰基]氨基}哌啶-1-羧酸叔丁酯 將2-氨基-4-噻唑羧酸氫溴化物(2.67g)和1-叔丁氧基羰基-4-氨基哌啶鹽酸鹽(2.81g)懸浮于二氯甲烷(100ml)中，并且在室溫下攪拌。加入二甲基氨基吡啶(5.8g)，接著加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(2.5g)。為了幫助溶解，加入N，N-二甲基甲酰胺(5ml)并且繼續(xù)攪拌過(guò)夜。在真空下濃縮反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯(100ml)和鹽水(50ml)之間分配殘余物。在真空下濃縮有機(jī)部分，使之吸附到二氧化硅上，并用硅膠色譜純化，用0-5％甲醇/二氯甲烷洗脫，產(chǎn)生4-{[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)羰基]氨基}哌啶-1-羧酸叔丁酯，為褐色易碎泡沫(1.7g)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.4(11H，m)，1.7(2H，m)，2.8(2H，m)，3.9(3H，m)，7.0(2H，s)，7.15(1H，s)，7.5(1H，d).LCMS M/z(+)327(MH+)4-[({2-[(4-氟苯甲酰基)氨基]-1，3-噻唑-4-基}羰基)氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯 將4-{[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)羰基]氨基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(300mg)、三乙胺(0.39)、4-氟苯甲酰氯(0.22ml)和四氫呋喃(6ml)密封在微波容器中并在150℃下微波處理2小時(shí)。在真空下濃縮反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯(25ml)和鹽水(15ml)之間分配殘余物。在真空下濃縮有機(jī)部分，使之吸附到二氧化硅上，并用硅膠色譜純化，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脫，產(chǎn)生4-[({2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-基}羰基)氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯，為褐色樹(shù)膠(340mg)。
LCMS M/z(-)447(MH-)2-[(4-氟苯甲酰基)氨基]-N-哌啶-4-基-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽 將4-[({2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-基}羰基)氨基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(340mg)溶解于甲醇(10ml)和4N氯化氫的1，4-二烷(5ml)溶液中，在室溫下攪拌過(guò)夜。在真空下濃縮混合物，用甲苯共沸一次，產(chǎn)生2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-N-哌啶-4-基-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽，為淡黃色固體(330mg)。
LCMS M/z(+)349(MH+)2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-N-[(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺 在室溫下將2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-N-哌啶-4-基-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽(115mg)在四氫呋喃(12ml)中攪拌，形成懸浮液。加入N，N-二異丙基乙胺(0.21ml)，接著加入吲哚-3-甲醛(87mg)和硫酸鎂(30mg)。5分鐘后，加入三乙酰氧基氫硼化鈉(127mg)。繼續(xù)攪拌過(guò)夜，在乙酸乙酯(25ml)和鹽水(10ml)之間分配反應(yīng)混合物。在真空下濃縮有機(jī)部分，使之吸附到二氧化硅上，并用硅膠色譜純化，用0-12.5％甲醇/二氯甲烷洗脫，產(chǎn)生2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-N-[(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為淺褐色固體(60mg)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.9(4H，m)，3.3(6H，m)，4.4(1H，m)，7.1(2H，m)，7.4(3H，m)，7.6(1H，s)，7.8(2H，d)，7.9(1H，s)，8.2(2H，m)，11.4(1H，s)，12.8(1H，s).LCMS M/z(+)478(MH+)表2中化合物28的制備
N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-2-(2-萘甲酰基氨基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺 使用2-萘甲酰氯代替4-氟苯甲酰氯，通過(guò)路線F制備N(xiāo)-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-2-(2-萘甲?；被?-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為淡黃色玻璃狀物(100mg)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.9(4H，m)，3.0(5H，m)，4.0(2H，m)，7.1(2H，m)，7.45(1H，d)，7.6(3H，m)，7.8(2H，m)，7.95(1H，s)，8.1(4H，m)，8.8(1H，s).LCMS M/z(+)510(MH+)表2中化合物29的制備2-[(1，3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-5-基羰基)氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺 使用胡椒基酰氯(piperonyloyl chloride)代替4-氟苯甲酰氯，通過(guò)路線F制備2-[(1，3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-5-基羰基)氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為白色固體(43mg)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.8(4H，m)，3.4(7H，m)，6.1(1H，s)，7.1(3H，m)，7.4(1H，d)，7.5(1H，m)，7.65(1H，s)，7.7(3H，m)，7.85(1H，s).LCMS M/z(+)504(MH+)表2中化合物30的制備N(xiāo)-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-2-[(3-噻吩基羰基)氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺 使用噻吩-3-碳酰氯代替4-氟苯甲酰氯，通過(guò)路線F制備N(xiāo)-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-2-[(3-噻吩基羰基)氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺，為淺褐色固體(23mg)。
1H-NMR(D6-DMSO)1.9(4H，m)，2.6(4H，m)，3.5(2H，m)，3.9(1H，m)，7.1(2H，m)，7.4(2H，d)，7.7(4H，m)，7.8(1H，s)，8.6(1H，s).LCMS M/z(+)466(MH+)實(shí)施例7生物學(xué)測(cè)定a)THP-1細(xì)胞中MCP-1介導(dǎo)的鈣通量在合成細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI 1640中生長(zhǎng)人單核細(xì)胞的細(xì)胞系THP-1，該培養(yǎng)基補(bǔ)充有10％胎牛血清(foetal calf serum)，6mM谷氨酰胺和青霉素-鏈霉素(50IU/ml青霉素，50μg鏈霉素/ml，Gibco BRL)。在測(cè)定緩沖液中洗滌THP-1細(xì)胞，并將其再懸浮相同的緩沖液中，密度為1×106個(gè)細(xì)胞/毫升，所述測(cè)定緩沖液包含HBSS(含有Ca2+和Mg2+)(沒(méi)有酚紅)(Gibco BRL)+20mM HEPES+0.71mg/ml丙磺舒(Propenecid)+2mls/升CaCl21M(BDH)+0.3mg/ml BSA(Sigma)pH值7.4。然后，在37℃用測(cè)定緩沖液+1mM FLUO-4(分子探針)裝載細(xì)胞40分鐘，在測(cè)定緩沖液中洗滌兩次，并以2×105個(gè)細(xì)胞/毫升的密度再懸浮。將100μl的細(xì)胞懸浮液加入到黑色透明底部的96孔板的孔中，得到2×104個(gè)細(xì)胞/孔。通過(guò)離心分離，使細(xì)胞成粒，并用測(cè)定緩沖液洗滌。將100μl緩沖液+50μl化合物加入到孔中，并培養(yǎng)20分鐘(37℃)。使用FLIPR(FLuorometric Imaging Plate Reader-Molecular Devices)記錄熒光。將hMCP-1加入至孔中，以刺激細(xì)胞。
用hMCP-1刺激THP-1細(xì)胞，以特異和劑量依賴(lài)性方式引起[Ca2+]i的快速瞬時(shí)增加。劑量響應(yīng)曲線表明了大約4nm的EC50值。將化合物溶于DMSO(10mM)中，并在起始于10μM的各濃度范圍內(nèi)測(cè)定對(duì)鈣釋放的抑制。
在該篩選中測(cè)試了上述某些化合物，并發(fā)現(xiàn)其是活性的。例如，表2中化合物13的IC50值為0.597μM，表2中化合物22的IC50值為0.314μM。
b)hMCP-1受體-結(jié)合測(cè)定i)hMCP-1受體的克隆和表達(dá)使用合適的寡聚核苷酸引物，基于公開(kāi)的MCP-1受體序列(Charo等人1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，2752)，從THP-1細(xì)胞RNA通過(guò)PCR克隆MCP-1受體B(CCR2B)cDNA。將得到的PCR產(chǎn)物克隆到載體PCR-IITM中(InVitrogen，San Diego，CA.)。將無(wú)錯(cuò)CCR2B cDNA以Hind III-Not I片段的形式亞克隆到真核生物表達(dá)載體pCDNA3(InVitrogen)中，分別產(chǎn)生pCDNA3/CC-CKR2A和pCDNA3/CCR2B。
通過(guò)磷酸鈣沉淀將線性化的pCDNA3/CCR2B DNA轉(zhuǎn)染到CHO-K1細(xì)胞中(Wigler等人1979，Cell，16，777)。在細(xì)胞已經(jīng)轉(zhuǎn)染24小時(shí)之后，通過(guò)以1mg/ml加入遺傳霉素硫酸鹽(G418，Gibco BRL)來(lái)選擇轉(zhuǎn)染細(xì)胞。按照現(xiàn)有的描述，進(jìn)行RNA和Northern印跡的制備(Needham等人1995，Prot.Express.Purific.，6，134)。將CHO-K1克隆7(CHO-CCR2B)確定為最高級(jí)的MCP-1受體B表達(dá)子。
ii)膜片段的制備在DMEM中生長(zhǎng)CHO-CCR2B細(xì)胞，DMEM中補(bǔ)充有10％胎牛血清，2mM谷氨酰胺，1x非必需氨基酸，1x次黃嘌呤和胸苷補(bǔ)充物和青霉素-鏈霉素(50μg鏈霉素/ml，Gibco BRL)。按照現(xiàn)有的描述，利用細(xì)胞溶解作用/差速離心方法制備膜片段(Siciliano等人1990，J.Biol.Chem.，265，19658)。按照生產(chǎn)商的說(shuō)明書(shū)，用BCA蛋白測(cè)定估計(jì)蛋白濃度(Pierce，Rockford，Illinois)。
iii)測(cè)定使用Bolton和Hunter結(jié)合，制備125I-標(biāo)記的MCP-1(Bolton等人1973，Biochem.J.，133，529；Amersham International plc)。
將測(cè)試化合物溶于DMSO中，并進(jìn)一步在測(cè)定緩沖液(50mM HEPES，1mM CaCl2，5nM MgCl2，0.03％BSA，pH值7.2)稀釋?zhuān)玫狡鹗加?0μM的頂部最終濃度的濃度范圍。所有的培養(yǎng)物具有100μl的最終體積和1％的DMSO濃度。培養(yǎng)物包括200pM125I-標(biāo)記的MCP-1(Amersham Pharmacia)、2.5mg/ml閃爍親近測(cè)定珠(Amersham Pharmacia RPNQ)和大約5μgCHO-CCR2B細(xì)胞膜。通過(guò)1μM未標(biāo)記的MCP-1的內(nèi)含物來(lái)代替測(cè)試化合物，確定非特異性結(jié)合。在1％DMSO(沒(méi)有化合物)的存在下確定總結(jié)合。在密封的光學(xué)板(optiplates)中進(jìn)行培養(yǎng)，并在室溫保持16小時(shí)，而后將該板在Packard TopCount(Packard TopCountTM)上計(jì)數(shù)。由雙份數(shù)據(jù)點(diǎn)產(chǎn)生劑量響應(yīng)曲線，并使用GraphPad Prizm軟件計(jì)算IC50值。使用下式100-((化合物結(jié)合-非特異性結(jié)合)/(總結(jié)合-非特異性結(jié)合)×100)來(lái)計(jì)算單個(gè)濃度化合物的抑制百分?jǐn)?shù)。
上述測(cè)定中，各實(shí)施例中列出的每個(gè)化合物顯示了比20μmol更好的IC50值。
實(shí)施例8藥物組合物該實(shí)施例用于說(shuō)明，但并非意圖限制，此處所定義的代表性藥物劑型用于人類(lèi)治療或預(yù)防目的，其中活性成分稱(chēng)為“化合物X”。
實(shí)施例A(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)
(j)
(k)
(l)
注釋上述制劑中的化合物X可以包括本文中所說(shuō)明的化合物。
上述制劑可以通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域熟知的常規(guī)操作獲得。片劑(a)-(c)可以通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行腸溶包衣，例如提供醋酸鄰苯二甲酸纖維素的包衣。氣溶膠制劑(h)-(k)可以與標(biāo)準(zhǔn)的、計(jì)量的氣溶膠分配器結(jié)合使用，懸浮劑失水山梨糖醇三油酸酯和大豆磷脂可以用其它懸浮劑例如失水山梨糖醇單油酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、聚山梨酸酯80、聚丙三醇油酸酯或油酸替代。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物在制備用于治療C-C趨化因子介導(dǎo)病癥的藥物中的用途， 其中X1為氮或CH；X2為硫或NH；R1為任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的芳基環(huán)，其中兩個(gè)取代基可連接到一起形成任選取代的稠合雙環(huán)，所述稠合雙環(huán)可包含雜原子；Ra為氫、C1-3烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、三氟甲基、鹵素、氨基、C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、C1-4烷氧基、羥基、硫代C1-4烷基或環(huán)丙基；R8為氫或任選取代的C1-4烷基；R2為任選取代的C2-10直鏈或支化的亞烷基，其任選地插入有NRb基團(tuán)，其中Rb為氫或C1-3甲基；或R2與R8一起與它們連接的氮原子可形成任選取代的環(huán)烷基或雜環(huán)；R3和R4獨(dú)立地選自任選取代的C1-10烷基、任選取代的C2-10烯基、任選取代的C1-10炔基、或任選取代的雜環(huán)基團(tuán)，或R3和R4與它們連接的氮原子一起形成任選取代的雜環(huán)，所述雜環(huán)任選地包含另外的雜原子，或R3與R2或R8一起與它們連接的氮原子形成任選取代的雜環(huán)，所述雜環(huán)任選包含另外的雜原子，或R3和R4與R2一起形成任選取代的橋環(huán)結(jié)構(gòu)。
2.權(quán)利要求
1的用途，其中在式(I)的化合物中，X1為氮，X2為硫。
3.權(quán)利要求
1或2的用途，其中在式(I)的化合物中，R1為任選取代的苯基。
4.權(quán)利要求
3的用途，其中在式(I)的化合物中，R1為4-氟-3-氯-苯基。
5.權(quán)利要求
1-4中任一項(xiàng)的用途，其中在式(I)的化合物中，R1為吡啶基。
6.前述權(quán)利要求
中任一項(xiàng)的用途，其中在式(I)的化合物中，R8為氫。
7.權(quán)利要求
1-6中任一項(xiàng)的用途，其中在式(I)的化合物中，R4R3N-包括子式(xx)-(xxv)的基團(tuán)， 其中R20為氫或選自烷基、芳烷基如芐基、任選取代的雜環(huán)基團(tuán)和官能團(tuán)的取代基。
8.權(quán)利要求
1-6中任一項(xiàng)的用途，其中在式(I)的化合物中，子式(x)的基團(tuán) 為子式(bb)、(cc)、(dd)、(ee)或(ff)的基團(tuán)， 其中R4如權(quán)利要求
1中所定義，R25、R26、R27和R28獨(dú)立地選自氫或C1-3烷基。
9.權(quán)利要求
8的用途，其中子式(x)的基團(tuán)為上述式(bb)的基團(tuán)。
10.式(IA)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物 其中R2、R8、Ra和R1為如權(quán)利要求
1中所定義，其中R3’和R4’分別與權(quán)利要求
1中所定義的R3和R4相同，條件是當(dāng)R1為任選取代的苯基，并且Ra和R8為氫時(shí)，R3’和R4’不同時(shí)為未取代的烷基，或不與它們連接的氮原子一起形成取代的哌嗪環(huán)；并且另外的條件是，當(dāng)R1為任選取代的苯基，Ra為氫、C1-3烷基或鹵素；R8為氫或C1-4烷基，并且R3’和R2與它們連接的氮原子一起形成哌啶環(huán)，或者R3’與R8一起與它們連接的氮原子一起形成哌嗪環(huán)時(shí)，那么R4’不為未取代的C1-6烷基；并且另外的條件是，當(dāng)R1為任選取代的苯基，Ra為氫、C1-3烷基或鹵素；R2和R8與它們連接的氮原子一起形成哌啶環(huán)時(shí)，那么R3’和R4’不都為未取代的C1-6烷基。
11.權(quán)利要求
10的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中R1為任選取代的苯基。
12.權(quán)利要求
11的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中R1為4-氟-3-氯-苯基。
13.權(quán)利要求
10-12中任一項(xiàng)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中R1為吡啶基。
14.權(quán)利要求
10-13中任一項(xiàng)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中Ra為氫。
15.權(quán)利要求
10-14中任一項(xiàng)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中R8為氫。
16.權(quán)利要求
10-15中任一項(xiàng)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中R4R3N-包括子式(xx)-(xxv)的基團(tuán)， 其中R20為氫或選自烷基、芳烷基如芐基、任選取代的雜環(huán)基團(tuán)和官能團(tuán)的取代基。
17.權(quán)利要求
10-15中任一項(xiàng)的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中子式(x)的基團(tuán) 為子式(bb)、(cc)、(dd)、(ee)或(ff)的基團(tuán)， 其中R4如權(quán)利要求
1中所定義，R25、R26、R27和R28獨(dú)立地選自氫或C1-3烷基。
18.權(quán)利要求
17的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，其中子式(x)的基團(tuán)為上述式(bb)的基團(tuán)。
19.權(quán)利要求
10的化合物或藥學(xué)可接受的鹽或其溶劑化物，所述化合物選自(4-{[(1-芐基哌啶-4-基)氨基]羰基}-1，3-噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁酯、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-(1-{[5-(羥基甲基)-2-呋喃基]甲基}哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(1H-咪唑-2-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(1H-咪唑-4-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3，4-二氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(2-羥基乙基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-(1-{[6-(羥基甲基)吡啶-2-基]甲基}哌啶-4-基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(2，3-二氫-1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲酰基)氨基]-N-[1-(1H-吡唑-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(2-羥基芐基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-{1-[(1-甲基-1H-吡咯-2-基)甲基]哌啶-4-基}-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-{1-[4-(甲磺?；?芐基]哌啶-4-基}-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(1H-吡咯-2-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(環(huán)丙基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(吡啶-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-(4-{[(1-芐基哌啶-4-基)氨基]羰基}-1，3-噻唑-2-基)異煙酰胺、N-(4-{[(1-芐基哌啶-4-基)氨基]羰基}-1，3-噻唑-2-基)吡啶-2-甲酰胺、N-(4-{[(1-芐基哌啶-4-基)氨基]羰基}-1，3-噻唑-2-基)煙酰胺、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3，4-二氯苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氰基苯甲酰基)氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲酰基)氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽、N-(1-芐基哌啶-4-基)-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-甲基-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽、N-[(3S)-1-芐基吡咯烷-3-基]-2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺鹽酸鹽、3-氯-4-氟-N-{4-[(4-吡咯烷-1-基哌啶-1-基)羰基]-1，3-噻唑-2-基}苯甲酰胺、2-[(3-氯-4-氟苯甲?；?氨基]-N-(3-哌啶-1-基丙基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺、或N-{4-[(4-芐基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]-1，3-噻唑-2-基}-3-氯-4-氟苯甲酰胺鹽酸鹽、2-[(4-氟苯甲?；?氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-2-(2-萘甲酰基氨基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺、2-[(1，3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-5-基羰基)氨基]-N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺、N-[1-(1H-吲哚-3-基甲基)哌啶-4-基]-2-[(3-噻吩基羰基)氨基]-1，3-噻唑-4-甲酰胺。
20.制備如權(quán)利要求
10所定義的式(IA)化合物的方法，該方法包括(a)使式(IV)的化合物與式(V)的化合物反應(yīng)， 其中R1和Ra為對(duì)式(I)所定義的， 其中R2、R3’和R8為對(duì)式(IA)所定義的，R4a為如權(quán)利要求
10中所定義的基團(tuán)R4’，或其前體；或者(b)使式(XIII)的化合物與式(XIV)的化合物反應(yīng) 其中Ra、R2、R3’和R8如權(quán)利要求
10中所定義，R4a如對(duì)式(V)所定義， 其中R1如對(duì)式(I)所定義，R55為離去基團(tuán)；然后如果需要或必要，使任何前體基團(tuán)R4a轉(zhuǎn)化為如權(quán)利要求
10所定義的基團(tuán)R4’。
21.如權(quán)利要求
1所定義的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物，其用于治療C-C趨化因子介導(dǎo)疾病。
22.如權(quán)利要求
1所定義的式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物，其用于治療CCR2B炎性疾病。
23.一種藥物組合物，其包括權(quán)利要求
10-19中任一項(xiàng)的化合物。
24.抑制C-C趨化因子介導(dǎo)疾病的方法，該方法包括對(duì)需要這種治療的患者給藥權(quán)利要求
1-9中任一項(xiàng)所定義的式(I)的化合物。
25.權(quán)利要求
1-9中任一項(xiàng)的化合物用途，其用于制備用于治療CCR2B介導(dǎo)炎癥的藥物。
專(zhuān)利摘要
本發(fā)明式(I)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療C－C趨化因子介導(dǎo)病癥的藥物中的用途，其中R
文檔編號(hào)C07D417/14GK1993358SQ20058002653
公開(kāi)日2007年7月4日 申請(qǐng)日期2005年5月31日
發(fā)明者賈斯廷·F·鮑爾, 戈登·A·漢林, 喬恩·溫特 申請(qǐng)人:阿斯利康(瑞典)有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan