一種釓貝葡胺的含量檢測(cè)控制方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，該方法采用高效液相色譜法檢測(cè)葡甲胺。本發(fā)明通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出最佳的流動(dòng)相組成，洗脫程序、流速，檢測(cè)波長(zhǎng)和色譜柱等分析條件，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證表明，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，穩(wěn)定性和重復(fù)性好、分析效率高、分離度好，可以靈敏準(zhǔn)確的定性、定量檢測(cè)，從而可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)釓貝葡胺注射液的質(zhì)量，對(duì)控制釓貝葡胺注射液的質(zhì)量和保證臨床療效具有重要意義。
【專利說(shuō)明】
一種釓貝葡胺的含量檢測(cè)控制方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物制劑的質(zhì)量控制方法，具體涉及釓貝葡胺注射液的質(zhì)量控制 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 釓貝葡胺注射液，是一種新型的順磁性釓螯合劑，其強(qiáng)化程度高、具肝臟組織特異 性、較寬的成像時(shí)間窗以及高安全性，使之能進(jìn)一步提高M(jìn)RI對(duì)疾病的診斷及鑒別診斷能 力，是一種具廣闊應(yīng)用前景的新型釓類對(duì)比劑。現(xiàn)有技術(shù)中的釓貝葡胺注射液還未有準(zhǔn)確 可靠，靈敏度高，穩(wěn)定性好的檢測(cè)方法。因此為了控制好釓貝葡胺注射液制劑的臨床安全 性，維護(hù)患者的利益，很有必要在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)之上研究設(shè)計(jì)出能準(zhǔn)確檢測(cè)釓貝葡胺注 射液制劑中有效成分釓貝葡胺注射液的檢測(cè)方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種分離效果好，檢測(cè)靈敏度高，穩(wěn)定 性好，重復(fù)性好，可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)釓貝葡胺注射液的質(zhì)量，對(duì)控制釓貝葡胺注射 液劑的質(zhì)量和保證療效具有重要意義。
[0004] 技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制 方法，包括以下步驟：
[0005] (1)葡甲胺標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：取葡甲胺對(duì)照品約20mg，精密稱定，置100ml量瓶 中，加水溶解并稀釋制成每lml中約含葡甲胺0.2mg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
[0006] (2)釓貝葡胺注射液樣品溶液的制備:精密移取釓貝葡胺注射液lml，置100ml量瓶 中，加水稀釋至刻度，搖勻;再精密移取l〇ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，作為樣品溶 液。
[0007] (3)釓貝葡胺注射液樣品中釓貝葡胺注射液的含量測(cè)定:分別精密吸取步驟（1)釓 貝葡胺注射液標(biāo)準(zhǔn)品溶液和步驟(2)釓貝葡胺注射液樣品溶液各10uL，分別注入高效液相 進(jìn)行色譜分析，按外標(biāo)法計(jì)算釓貝葡胺注射液樣品中葡甲胺的含量，色譜條件為示差折光 檢測(cè)器，柱溫：30~45°C，流動(dòng)相：體積比為0.45:0.3:100~0.90:0.3:100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液，流速:0.7~1.3ml/min，色譜柱:用氫性陽(yáng)離子交換樹脂為填料的色譜柱。
[0008] 作為優(yōu)選方案，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，步驟(3)中柱 溫:35°C，流動(dòng)相:0.65:0.3:100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液，流速：1.0ml/min，示差折光 檢測(cè)器為安捷倫示差折光檢測(cè)器檢測(cè)器。
[0009] 作為優(yōu)選方案，本發(fā)明所述的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，步驟(3)所述 的陽(yáng)離子交換樹脂為填料的色譜柱為資生堂氫性陽(yáng)離子交換色譜柱。
[0010] 釓貝葡胺注射液中葡甲胺化合物極性較大，在200nm~400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)沒(méi)有紫外 吸收，無(wú)法使用常見的液相方法進(jìn)行檢測(cè)，為了嚴(yán)格控制好釓貝葡胺注射液的質(zhì)量，制定檢 測(cè)釓貝葡胺注射液含量的方法，本發(fā)明經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)篩選合適的方法，對(duì)色譜柱的選擇、流 動(dòng)相組成、流動(dòng)相的洗脫程序、流速、檢測(cè)波長(zhǎng)及色譜柱進(jìn)行篩選。
[0011] 1、本發(fā)明根據(jù)釓貝葡胺注射液的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)篩選最佳的色譜柱，實(shí) 驗(yàn)結(jié)果表明，該色譜柱能較好的分離葡甲胺，峰形狀對(duì)稱，且峰不易疊加，分離效果更好。
[0012] 2、本發(fā)明針對(duì)葡甲胺的化合物特性，溶解在水中對(duì)折光率會(huì)產(chǎn)生影響，選擇示差 折光檢測(cè)器，根據(jù)因此本發(fā)明采用示差折光檢測(cè)器，可以準(zhǔn)確靈敏的檢測(cè)到釓貝葡胺注射 液中葡甲胺。
[0013] 3、葡甲胺容易電離成離子狀態(tài)，導(dǎo)致分離和洗脫效果差，本發(fā)明根據(jù)葡甲胺化學(xué) 性質(zhì)，對(duì)流動(dòng)相的組成進(jìn)行了大量篩選，確定采用0.45:0.3:100~0.90:0.3:100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液。，可以保證葡甲胺在色譜柱上達(dá)到很好的分離效果，不會(huì)出現(xiàn)峰重疊 或拖尾現(xiàn)象，而且能保證在色譜柱上有很好的分離度。
[0014] 4、同時(shí)本發(fā)明還對(duì)流動(dòng)相的流動(dòng)速度進(jìn)行了考察，如流速過(guò)快，分離度不夠理想， 因此本發(fā)明分別考察了 1 ? 5mL/min、lmL/min、0 ? 8mL/min、0 ? 6mL/min、0 ? 5mL/min、0 ? 4mL/min 不同流速，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)流動(dòng)相的流速為l.OmL/min時(shí)，葡甲胺的峰形最好、分離度最 好，理論塔板數(shù)最高，因此本發(fā)明采用流動(dòng)相的流速為1. OmL/min。
[0015] 5、同時(shí)本發(fā)明對(duì)色譜柱的柱溫進(jìn)行了篩選，考察了色譜柱在30 °C、35 °C、40 °C和45 °C條件下化合物的分離效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，色譜柱在35°C條件下分離效果最好，分離重復(fù) 性和穩(wěn)定性最好。因此本發(fā)明采用色譜柱的柱溫為35°C。
[0016] 有益效果:本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法和現(xiàn)有技術(shù)相比具 有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0017] 本發(fā)明根據(jù)釓貝葡胺注射液注射劑中活性成分結(jié)構(gòu)性質(zhì)特點(diǎn)，通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)篩選 出最佳的流動(dòng)相組成，洗脫程序、流速，檢測(cè)器、色譜柱等分析條件，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證表明， 本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法可以靈敏、準(zhǔn)確的檢測(cè)活性成分，因此 具有很高的分析效率，可以克服現(xiàn)有檢測(cè)方法中靈敏度低、準(zhǔn)確度低、穩(wěn)定性差等諸多缺 點(diǎn)，且本發(fā)明提供的質(zhì)量檢測(cè)方法穩(wěn)定性好，葡甲胺和其它雜質(zhì)的分離度好，可定性、定量 檢測(cè)分析葡甲胺。因此，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法可以客觀、全 面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)釓貝葡胺注射液的質(zhì)量，對(duì)控制釓貝葡胺注射液的質(zhì)量和保證臨床療效具 有重要意義。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 圖1為釓貝葡胺注射液標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜檢測(cè)分析圖。
[0019] 圖2為釓貝葡胺注射液樣品的高效液相色譜檢測(cè)分析圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而 不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形 式的修改均落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求所限定的范圍。
[0021 ]實(shí)施列1釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法的方法學(xué)考察 [0022] 1.1穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
[0023] 取葡甲胺對(duì)照品約20mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋制成每lml中 約含葡甲胺0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液;分別在0，4，8，12，24小時(shí)精密吸取標(biāo)準(zhǔn)液各3uL 進(jìn)行高效液相分析，色譜條件為示差折光檢測(cè)器，柱溫:35°C，流動(dòng)相:體積比為0.65:0.3: 100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液，流速：l.〇ml/min，色譜柱：用氫性陽(yáng)離子交換樹脂為填 料的色譜柱。計(jì)算峰面積(S)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0024]表1穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
[0025]
[0026] 以上穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法， 穩(wěn)定性好。
[0027] 1.2重復(fù)性實(shí)驗(yàn)
[0028] 避光條件下，取批號(hào)66131001釓貝葡胺注射液，精密移取釓貝葡胺注射液lml，置 l〇〇ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻;再精密移取l〇ml，置l〇〇ml量瓶中，加水稀釋至刻度， 作為樣品溶液;精密吸取6份供試品溶液各10uL進(jìn)行高效液相分析，色譜條件為示差折光檢 測(cè)器，柱溫：30°C，流動(dòng)相：體積比為0.45 :0.3 :100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液，流速： 0.7ml/min，色譜柱:用氫性陽(yáng)離子交換樹脂為填料的色譜柱。測(cè)量6份釓貝葡胺注射液樣品 中葡甲胺的含量。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示：
[0029]表2重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果
[0030]
[0031] 以上重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的檢測(cè)方法的重復(fù)性 好。
[0032] 實(shí)施列2釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，包括以下步驟：
[0033] (1)葡甲胺標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：取葡甲胺對(duì)照品約20mg，精密稱定，置100ml量瓶 中，加水溶解并稀釋制成每lml中約含葡甲胺0.2mg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
[0034] (2)釓貝葡胺注射液樣品溶液的制備，取3批樣品（批號(hào)為130601、130602、130603) 進(jìn)行檢測(cè):精密移取釓貝葡胺注射液lml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻;再精密移 取10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，作為樣品溶液。
[0035] (3)釓貝葡胺注射液樣品中釓貝葡胺注射液的含量測(cè)定:分別精密吸取步驟（1)釓 貝葡胺注射液標(biāo)準(zhǔn)品溶液和步驟(2)釓貝葡胺注射液樣品溶液各10uL，分別注入高效液相 進(jìn)行色譜分析，按外標(biāo)法計(jì)算釓貝葡胺注射液樣品中葡甲胺的含量，色譜條件為示差折光 檢測(cè)器，柱溫:45°C，流動(dòng)相:體積比為0.90:0.3:100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液，流速： 1.3ml/min，色譜柱:用氫性陽(yáng)離子交換樹脂為填料的色譜柱。
[0036] 表3釓貝葡胺注射液中釓貝葡胺注射液的檢測(cè)結(jié)果
[0038] 由表1、表2和表3的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的檢測(cè)方法，葡 甲胺峰形好，靈敏度高，相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法 穩(wěn)定性和重復(fù)性好，可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)釓貝葡胺注射液的質(zhì)量，對(duì)控制釓貝葡胺 注射液的質(zhì)量和保證臨床療效具有重要意義。
[0039] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng) 視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 葡甲胺標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：取葡甲胺對(duì)照品約20mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加 水溶解并稀釋制成每1 ml中約含葡甲胺0.2mg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液； (2) 釓貝葡胺注射液樣品溶液的制備:精密移取釓貝葡胺注射液lml，置100ml量瓶中， 加水稀釋至刻度，搖勻;再精密移取l〇ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，作為樣品溶液； (3) 釓貝葡胺注射液樣品中葡甲胺的含量測(cè)定:分別精密吸取步驟(1)釓貝葡胺注射液 標(biāo)準(zhǔn)品溶液和步驟(2)釓貝葡胺注射液樣品溶液各10uL，分別注入高效液相進(jìn)行色譜分析， 按外標(biāo)法計(jì)算釓貝葡胺注射液樣品中葡甲胺的含量，色譜條件為示差折光檢測(cè)器，柱溫:30 ~45°C，流動(dòng)相:體積比為0.45:0.3:100~0.90:0.3:100的三乙胺-甲酸-水的混合溶液，流 速:0.7~1.3ml/min，色譜柱:用陽(yáng)離子交換樹脂為填料的色譜柱。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，其特征在于，柱溫:35 °C，流動(dòng)相:體積比為0.65:0.3:100的三乙胺，甲酸，水的混合溶液，流速:1.0ml/min。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的釓貝葡胺注射液的含量檢測(cè)控制方法，其特征在于，步驟(3) 所述的用陽(yáng)離子交換樹脂為填料的色譜柱為氫型陽(yáng)離子交換色譜柱。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK106053642SQ201610370055
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月27日
【發(fā)明人】施猛, 任亞?wèn)|, 劉志強(qiáng), 劉恩桂
【申請(qǐng)人】揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)廣州海瑞藥業(yè)有限公司