高效液相色譜法測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種高效液相色譜法測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法，旨在提供一種分析效率高，可作為清喉利咽顆粒的質(zhì)量控制方法；該方法包括下述步驟：制備供試品溶液；制備對(duì)照品；屬性試驗(yàn)，分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液和對(duì)照品溶液各2μl注入液相色譜儀檢測(cè)，所述的色譜條件如下：色譜柱：InertsilODS?SP液相色譜柱，5μm，4.6×250mm；流動(dòng)相：乙腈－0.5％醋酸，其體積比為：44:56；流速0.8mL/min；波長(zhǎng)：287nm；柱溫：30℃；屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【專利說(shuō)明】
高效液相色譜法測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明提供一種黃芩苷的鑒別方法，具體地說(shuō)，是一種HPLC測(cè)定清喉利咽顆粒中 黃芩苷含量的方法;屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 清喉利咽顆粒是由黃芩、西青果、桔梗、竹茹、枳殼、胖大海、橘紅等13種中藥組成。 功效清熱利咽，寬胸潤(rùn)喉。用于外感風(fēng)熱所致的咽喉發(fā)干、聲音嘶?。患甭匝恃?、扁桃體炎 見上述證候者，常用有保護(hù)聲帶作用。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于:《中國(guó)藥典》2005年版一部，只有 黃芩苷的含量測(cè)定指標(biāo)，不利于控制該藥品的質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 針對(duì)上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種分析效率高，檢測(cè)結(jié)果重現(xiàn)好的清喉利 咽顆粒中黃芩苷的鑒別方法。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：
[0005] -種HPLC測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法，依次包括下述步驟：
[0006] 1)取本品粉末5g，加體積比1:1的N，N_二甲基甲酰胺和乙醇30ml溶解，離心取上清 液，通過已處理好的D101型樹脂柱，先用70 %乙醇洗，收集洗脫液，蒸干，再用40 %乙醇5ml 洗脫，收集洗脫液，蒸干，用5ml甲醇溶解，過濾作為供試品；
[0007] 2)取黃芩苷對(duì)照品5g，超聲30min溶解，用0.22wii微孔濾膜濾過，補(bǔ)足10ml制得作 為對(duì)照品儲(chǔ)備液;吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液l〇ml置20ml瓶中加甲醇稀釋至刻度，過濾作為對(duì)照品 溶液；
[0008] 3)專屬性試驗(yàn)
[0009] 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2iU注入液相色譜儀，檢測(cè)。
[0010] 所述的色譜條件如下：
[0011] 色譜柱：Inerts i 10DS-SP液相色譜柱，5wn，4 ? 6 X 250mm;
[0012]流動(dòng)相：乙腈一〇 ? 5 %醋酸，其體積比為:44:56
[0013] 流速 0.8mL/min;
[0014] 波長(zhǎng)：287nm;
[0015] 柱溫：3(TC;
[0016] 進(jìn)樣量 2iU。
[0017] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案采用大孔樹脂吸附法對(duì)清喉利咽顆粒進(jìn) 行提取分離，在通過高效液相色譜進(jìn)行含量檢測(cè)，該方法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可 以用于清喉利咽顆粒中黃芩苷的含量測(cè)定，為清喉利咽顆粒的質(zhì)量控制提供一定的理論依 據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的 權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0019] 本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說(shuō)明外，溶質(zhì)為液體的均為體積濃度，溶 質(zhì)為固定的均為質(zhì)量濃度。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 本發(fā)明提供的一種HPLC測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法，該方法具體如 下：
[0022] 一種HPLC測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法，依次包括下述步驟：
[0023] 1)取本品粉末5g，加體積比1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙醇30ml溶解，離心取上清 液，通過已處理好的D101型樹脂柱，先用70 %乙醇洗，收集洗脫液，蒸干，再用40 %乙醇5ml 洗脫，收集洗脫液，蒸干，用5ml甲醇溶解，用0.22wii微孔濾膜過濾作為供試品；
[0024] 2)取黃芩苷對(duì)照品5g，超聲30min溶解，補(bǔ)足10ml，用0.22mi微孔濾膜濾過，制得作 為對(duì)照品儲(chǔ)備液;吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液l〇ml置20ml瓶中加甲醇稀釋至刻度，過濾作為對(duì)照品 溶液；
[0025] 3)專屬性試驗(yàn)
[0026] 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2iU注入液相色譜儀，檢測(cè)。
[0027]所述的色譜條件如下：
[0028]色譜柱：Inerts i 10DS-SP液相色譜柱，5wn，4 ? 6 X 250mm;
[0029]流動(dòng)相：乙腈一0 ? 5%醋酸，其體積比為:44:56
[0030] 流速 0.8mL/min;
[0031] 波長(zhǎng)：287nm;
[0032] 柱溫：30。(：；
[0033]進(jìn)樣量:2yl。
[0034]為了檢測(cè)該方法的精密度，取同一份對(duì)照品溶液，按同一色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次， 測(cè)定峰面積積分值，黃芩苷RSD為0.16 % (n = 6)結(jié)果表明，儀器精密度良好。
[0035]線性關(guān)系考察
[0036] 按上述的色譜條件分別精密吸取上述對(duì)照品溶液0.2、l、2、3、5yl注入色譜儀，測(cè) 定，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)(Y)，對(duì)照品進(jìn)樣量(ng)為橫坐標(biāo)(X)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;黃芩苷的 回歸方程為:￥ = 45.9乂+5.67& = 0.9997);結(jié)果表明；黃芩苷在25~625即范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與 峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系，進(jìn)樣量與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。
[0037] 穩(wěn)定性試驗(yàn)
[0038]取同一份樣品溶液，分別在0,2,4,8，12,2處，按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，分別測(cè)定 峰面積積分值，黃芩苷RSD為0.99 % (n = 6)結(jié)果表明，在24小時(shí)內(nèi)待測(cè)物穩(wěn)定。
[0039]樣品含量測(cè)定
[0040] 按上述含量測(cè)定方法，測(cè)定了本品3批樣品中的黃芩苷含量，結(jié)果見表1。
[0041] 表1、樣品測(cè)定結(jié)果(n = 3)

[0043]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于方法簡(jiǎn)單準(zhǔn)確，對(duì)提高產(chǎn)品質(zhì)量和臨床用藥 的有效性與安全性均具有重要意義。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高效液相色譜法測(cè)定清喉利咽顆粒中黃芩苷含量的方法，其特征在于，依次包 括下述步驟： 1) 取本品粉末5g，加體積比1:1的N，N-二甲基甲酰胺和乙醇30ml溶解，離心取上清液， 通過已處理好的D101型樹脂柱，先用70 %乙醇洗，收集洗脫液，蒸干，再用40 %乙醇5ml洗 脫，收集洗脫液，蒸干，用5ml甲醇溶解，過濾作為供試品； 2) 取黃芩苷對(duì)照品5g，超聲30min溶解，用0.22μπι微孔濾膜濾過，補(bǔ)足IOml制得作為對(duì) 照品儲(chǔ)備液;吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液IOml置20ml瓶中加甲醇稀釋至刻度，過濾作為對(duì)照品溶液； 3) 專屬性試驗(yàn) 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2μ1注入液相色譜儀，檢測(cè)。 所述的色譜條件如下： 色譜柱：Inertsi IODS-SP液相色譜柱，5μL?，4 · 6 X 250mm; 流動(dòng)相：乙腈一0.5 %醋酸，其體積比為:44:56 流速 〇.8mL/min; 波長(zhǎng):287nm; 柱溫：30°C; 進(jìn)樣量2μ1。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK105929055SQ201610248818
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月20日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 林冬杰, 李亞, 梁慧敏, 李澄
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所