農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡及采用該檢測(cè)點(diǎn)卡檢測(cè)農(nóng)殘含量的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡，包括長(zhǎng)條形扁平薄殼狀卡體，卡體由卡座和扣合在卡座上的卡蓋組成，卡座上間隔排列有多個(gè)檢測(cè)孔，檢測(cè)孔內(nèi)自下而上依次疊放有底物膜和酶膜；卡蓋由左卡蓋和右卡蓋組成，在左卡蓋上開(kāi)設(shè)有與卡座最左側(cè)的檢測(cè)孔相對(duì)應(yīng)的對(duì)照品加樣孔，在右卡蓋上開(kāi)設(shè)有與其他檢測(cè)孔位置分別相對(duì)應(yīng)的多個(gè)加樣孔；底物膜由濾紙膜、玻璃纖維素膜或聚酯纖維素膜在吲哚乙酸酯中充分浸泡并經(jīng)冷凍抽干后制成；酶膜由濾紙膜、聚酯纖維素膜或玻璃纖維素膜在乙酰膽堿酯酶液中經(jīng)充分浸泡并經(jīng)冷凍抽干后制成。本發(fā)明提供的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡使用方便，檢測(cè)靈敏度更高，可以滿(mǎn)足現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的限量要求，在實(shí)際中具有較大的應(yīng)用潛力。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡及采用該檢測(cè)點(diǎn)卡檢測(cè)農(nóng)殘含量的 方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及對(duì)蔬菜、水果、糧食、飲用水及土壤中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)，尤其是涉及一 種農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡，本發(fā)明還涉及采用該檢測(cè)點(diǎn)卡檢測(cè)果蔬中農(nóng)殘含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著社會(huì)進(jìn)步和人們生活水平的提高，食品安全問(wèn)題越來(lái)越引起人們的重視，隨 著環(huán)境污染的加劇，果蔬的病蟲(chóng)害也越來(lái)越重，絕大部分果蔬需要連續(xù)多次施藥后才能成 熟上市，農(nóng)藥的廣泛使用以及水果蔬菜中農(nóng)藥的殘留時(shí)刻威脅著食品安全、生態(tài)環(huán)境和人 類(lèi)的健康。尤其是有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的廣泛應(yīng)用，阻礙了了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的進(jìn)步并且 影響了公共衛(wèi)生中許多疫病的控制。所以，許多國(guó)際組織和國(guó)家政府嚴(yán)格的限制了果蔬中 農(nóng)藥殘留含量，以保證食品安全。
[0003] 檢測(cè)果蔬中農(nóng)殘含量的方法較多，近幾年發(fā)展的也很快。目前市場(chǎng)上對(duì)有機(jī)磷和 氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥在果蔬中殘留量的快速檢測(cè)方法運(yùn)用較為廣泛的是速測(cè)卡法，但是此方 法需要用藥片沾取待測(cè)樣品的提取液預(yù)反應(yīng)10分鐘，對(duì)溫度、濕度的控制要求嚴(yán)格;同時(shí)在 藥片與藥片相互反應(yīng)時(shí)，依賴(lài)人工操作使折疊酶片與底物片反應(yīng)，既要求嚴(yán)格又操作繁瑣， 對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)知識(shí)有一定要求，并且僅限于在專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，滿(mǎn)足不了現(xiàn)場(chǎng)對(duì)果 蔬中農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便快速、結(jié)果準(zhǔn)確的農(nóng)藥殘留快速 檢測(cè)點(diǎn)卡的制備方法。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明可采取下述技術(shù)方案： 本發(fā)明所述的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡，包括長(zhǎng)條形扁平薄殼狀卡體，所述卡體由卡座 和扣合在所述卡座上的卡蓋組成，所述卡座上間隔排列有多個(gè)檢測(cè)孔，所述檢測(cè)孔內(nèi)自下 而上依次疊放有底物膜和酶膜;所述卡蓋由左卡蓋和右卡蓋組成，在所述左卡蓋上開(kāi)設(shè)有 與所述卡座最左側(cè)的檢測(cè)孔相對(duì)應(yīng)的對(duì)照品加樣孔，在所述右卡蓋上開(kāi)設(shè)有與其他檢測(cè)孔 位置分別相對(duì)應(yīng)的多個(gè)加樣孔;所述底物膜由濾紙膜、玻璃纖維素膜或聚酯纖維素膜在50~ 1 OOmM的吲哚乙酸酯中充分浸泡并經(jīng)冷凍抽干后制成，其厚度為0.1~0.3mm，直徑5~8mm;所 述酶膜由濾紙膜、聚酯纖維素膜或玻璃纖維素膜在乙酰膽堿酯酶液中經(jīng)充分浸泡并經(jīng)冷凍 抽干后制成，其厚度為0.3~0.5mm，直徑5~8mm。
[0006] 所述底物膜優(yōu)選采用聚酯纖維素膜，所述酶膜優(yōu)選采用玻璃纖維素膜。
[0007] 采用本發(fā)明的檢測(cè)點(diǎn)卡檢測(cè)果蔬中農(nóng)殘含量的方法為： 第一步，抽取待測(cè)樣本，按一定比例稀釋成多個(gè)樣本液后待用； 第二步，從左卡蓋上開(kāi)設(shè)的對(duì)照品加樣孔向下方的檢測(cè)孔中滴加對(duì)照純凈水，該檢測(cè) 孔作為檢測(cè)對(duì)照孔;從右卡蓋上開(kāi)設(shè)的其他加樣孔向下方的檢測(cè)孔中依次滴加稀釋后的不 同樣本液； 第三步，15~20分鐘后肉眼觀察各檢測(cè)孔中顏色變化并與檢測(cè)對(duì)照孔進(jìn)行比對(duì)，直接判 讀結(jié)果即可。
[0008] 該反應(yīng)溫度為20~30°C條件下進(jìn)行效果更好。
[0009] 本發(fā)明提供的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡能夠簡(jiǎn)單快速的直接將待檢測(cè)液通過(guò)加樣 孔滴加到檢測(cè)孔中，利用滲透作用，促使反應(yīng)液與酶、底物依次發(fā)生反應(yīng)，從而通過(guò)測(cè)試卡 的顏色變化，直觀的顯示被測(cè)樣品的農(nóng)藥殘留情況，可廣泛應(yīng)用于蔬菜、水果、糧食、水及土 壤中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的定性快速測(cè)試。本發(fā)明的檢測(cè)點(diǎn)卡易于制備且 節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用，使用簡(jiǎn)單可靠又方便快捷，無(wú)需特殊的儀器設(shè)備，不用要求檢測(cè)人員專(zhuān)業(yè)水 平，可以隨時(shí)隨地用于現(xiàn)場(chǎng)中果蔬農(nóng)殘含量的檢測(cè)；由于樣本量需要少，簡(jiǎn)便快速，也可適 用于大量樣本的篩查，結(jié)果準(zhǔn)確，靈敏度高，準(zhǔn)確率大。
[0010] 本發(fā)明采用的技術(shù)原理是酶的抑制率法。通過(guò)加樣孔向檢測(cè)孔內(nèi)滴加待檢測(cè)樣品 液，使酶膜上的乙酰膽堿酯酶快速溶解到待檢測(cè)樣品液中，若待檢測(cè)樣品不含農(nóng)藥殘留，， 混合酶液會(huì)緩慢的滲入底物膜，與無(wú)色底物吲哚乙酸酯發(fā)生顏色反應(yīng)，底物水解產(chǎn)物吲哚 酚自氧化產(chǎn)生靛藍(lán)色，適合作為肉眼觀察檢測(cè)結(jié)果的顯色劑。若待檢樣品含有殘留農(nóng)藥時(shí)， 可一定程度的抑制其活性，酶膜上的乙酰膽堿酯酶溶于水后，活性受到一定的影響，底物水 解不充分或不水解，顏色變淺藍(lán)色或無(wú)色。反應(yīng)結(jié)果在15~20分鐘后觀察，可通過(guò)顏色強(qiáng)度 分析軟件對(duì)其顏色進(jìn)行理論分析。
[0011] 因此，本發(fā)明提供的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡使用方便，檢測(cè)靈敏度更高，可以滿(mǎn)足 現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的限量要求，在實(shí)際中具有較大的應(yīng)用潛力。
【附圖說(shuō)明】
[0012] 圖1是本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0013]圖2是圖1中卡座的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0014]圖3是圖1中卡蓋的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0015]圖4是兩種材料膜片的顯色反應(yīng)效果對(duì)比。
[0016]圖5是底物濃度對(duì)顯色反應(yīng)的影響。
[0017]圖6是溫度對(duì)顯色反應(yīng)的影響。
[0018]圖7是時(shí)間對(duì)顯色反應(yīng)的影響。
[0019] 圖8、圖9為檢測(cè)實(shí)例1的反應(yīng)結(jié)果圖。
[0020] 圖10、圖11為檢測(cè)實(shí)例2的反應(yīng)結(jié)果圖。
[0021] 圖12、圖13檢測(cè)實(shí)例3的反應(yīng)結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 如圖1-3所示，本發(fā)明所述的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡，包括長(zhǎng)條形扁平薄殼狀的卡 體(一般情況下，卡體的長(zhǎng)為60~70mm，寬為15~28mm，厚為5~6mm，壁厚為1mm，由工程塑料制 成，實(shí)際制造時(shí)，可根據(jù)測(cè)試樣品的多少改變卡體的大?。w由卡座1和通過(guò)定位柱9扣 合在卡座1上的卡蓋組成，卡座1上間隔排列有多個(gè)(圖中顯示四個(gè))檢測(cè)孔2,檢測(cè)孔內(nèi)自下 而上依次疊放有底物膜3和酶膜4;卡蓋由左卡蓋5和右卡蓋6組成，在左卡蓋5上開(kāi)設(shè)有與卡 座1最左側(cè)的檢測(cè)孔相對(duì)應(yīng)的對(duì)照品加樣孔7,在右卡蓋6上開(kāi)設(shè)有與其他三個(gè)檢測(cè)孔2位置 分別相對(duì)應(yīng)的三個(gè)加樣孔8;底物膜3由濾紙膜、玻璃纖維素膜或聚酯纖維素膜(優(yōu)選為聚酯 纖維素膜）在50~lOOmM的吲哚乙酸酯中充分浸泡并經(jīng)冷凍抽干后制成，其厚度為0.1~ 0.3mm，直徑5~8mm;酶膜4由濾紙膜、聚酯纖維素膜或玻璃纖維素膜(優(yōu)選為玻璃纖維素膜） 在乙酰膽堿酯酶液中經(jīng)充分浸泡并經(jīng)冷凍抽干后制成，其厚度為0.3~0.5mm，直徑5~8mm。
[0023]采用本發(fā)明的檢測(cè)點(diǎn)卡檢測(cè)果蔬中農(nóng)殘含量的方法如下： 第一步，抽取待測(cè)樣本，按一定比例稀釋成多個(gè)樣本液后待用； 第二步，從左卡蓋5上開(kāi)設(shè)的對(duì)照品加樣孔7向下方的檢測(cè)孔中滴加對(duì)照純凈水，該檢 測(cè)孔作為檢測(cè)對(duì)照孔，從右卡蓋6上開(kāi)設(shè)的其他加樣孔向下方的檢測(cè)孔中依次滴加稀釋后 的不同樣本液； 第三步，20~30°C條件下，15~20分鐘后肉眼觀察其他檢測(cè)孔中顏色變化并與檢測(cè)對(duì)照 孔進(jìn)行比對(duì)，直接判讀結(jié)果即可。
[0024]其反應(yīng)結(jié)果有以下四種情況： a、當(dāng)檢測(cè)孔和對(duì)照孔同時(shí)顯示藍(lán)綠色，表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品農(nóng)殘含 量在安全范圍內(nèi)。
[0025] b、當(dāng)檢測(cè)孔不顯示顏色，對(duì)照孔顯示藍(lán)綠色，檢測(cè)結(jié)果為陰性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品農(nóng) 殘含量超標(biāo)。
[0026] c、當(dāng)檢測(cè)孔顯示淺藍(lán)綠色，對(duì)照孔顯示藍(lán)綠色，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品 含有一定量農(nóng)殘，但含量不超標(biāo)。
[0027] d、當(dāng)檢測(cè)孔和對(duì)照孔均不顯色，則表明檢測(cè)點(diǎn)卡已失效。
[0028]下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更加詳細(xì)的介紹 一、本發(fā)明反應(yīng)條件的優(yōu)化 底物膜和酶膜的確定：由于各種材料的膜性能不同，而酶膜和底物膜材料的選擇在本 發(fā)明中有著非常重要的作用，對(duì)此
【申請(qǐng)人】選擇了兩種不同材料的膜片進(jìn)行試驗(yàn):如玻璃纖 維素膜(GF)和聚酯纖維素膜(PF)。首先，將GF和PF膜均切成直徑為6mm的圓形片，分別在酶 液和底物液中進(jìn)行充分浸泡，待膜片干燥后，分別放置在檢測(cè)卡孔中，滴加40此水進(jìn)行反 應(yīng)，15~20分鐘后，從顯色反應(yīng)的結(jié)果可以肉眼看出（如圖4所示），A:酶片、底物片均為GF;B: 酶片為PF，底物片為GF; C:酶片、底物片均為PF; D:酶片為GF，底物片為PF。結(jié)果顯示酶膜偏 于GF膜，而底物膜比較偏向于PF。
[0029] 底物吲哚乙酸酯溶解于甲醇中，分別在甲醇的稀釋下調(diào)整濃度為1 OmM，50mM，， 1 OOmM，200mM，進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)證，結(jié)果顯示（如圖5所示），當(dāng)?shù)孜餄舛却笥?0mM時(shí)，反應(yīng)結(jié)果差 距不明顯。這是由于甲醇屬于有機(jī)溶液，容易影響酶的活性，對(duì)此
【申請(qǐng)人】選用的底物濃度為 50~100mM 〇
[0030] 反應(yīng)溫度的不同對(duì)整個(gè)反應(yīng)的影響作用很大，因此
【申請(qǐng)人】在三個(gè)不同的溫度條件 下進(jìn)行反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，以探討反應(yīng)的最佳溫度。將底物膜片、酶膜片分別放置檢測(cè)卡孔中，滴加 40yL水后，將檢測(cè)卡分別放置在4°C、10°C、20°C、30°C下，15min后進(jìn)行顏色比對(duì)分析。結(jié)果 顯示(如圖6所示），在20°030°(：的條件下，反應(yīng)結(jié)果較佳。
[0031] 由于酶與底物的反應(yīng)是逐步完成的，因此在反應(yīng)時(shí)間的處理上
【申請(qǐng)人】仍然進(jìn)行了 最佳時(shí)間的優(yōu)化試驗(yàn)。
【申請(qǐng)人】分別檢測(cè)在反應(yīng)時(shí)間為5min、1〇111；[11、151]1；[11、201]1；[11的顏色變 化。結(jié)果顯示（如圖7所示），15min后顏色強(qiáng)度的增加不明顯，因此，本申請(qǐng)?jiān)O(shè)定的最佳反應(yīng) 時(shí)間為15~20min。
[0032]二、下面選擇三種常用的農(nóng)藥辛硫磷、殺撲磷、乙酰甲胺磷樣品按本發(fā)明方法進(jìn)行 檢測(cè)試驗(yàn) 檢測(cè)實(shí)例1 第一步，采用常規(guī)方法，配制4700U/ml的乙酰膽堿酯酶液和0.05yg/mL、0. lyg/mL、0.5y g/mL三個(gè)濃度的辛硫磷樣品液； 第二步，將聚酯纖維素底物膜和玻璃纖維素酶膜制成直徑8mm、厚度0.1mm的圓形膜片； 將底物膜在50mM的吲哚乙酸酯溶液中浸泡，酶膜在4700U/ml的乙酰膽堿酯酶液中浸泡，經(jīng) 過(guò)充分浸泡后將其分別冷凍抽干10~30分鐘，用鑷子依次夾取底物膜和酶膜放置在本申請(qǐng) 檢測(cè)點(diǎn)卡的檢測(cè)孔內(nèi)，蓋上卡蓋備用； 第三步，在左卡蓋5上開(kāi)設(shè)的對(duì)照品加樣孔7向下方的檢測(cè)孔中滴加對(duì)照純凈水作為檢 測(cè)對(duì)照孔，從右卡蓋6上開(kāi)設(shè)的三個(gè)加樣孔向下方的檢測(cè)孔中依次滴加稀釋后的三個(gè)辛硫 磷樣本液;純凈水和樣本液的滴加量根據(jù)檢測(cè)孔的大小決定，一般為2〇-l〇〇ul即可； 第三步，15~20分鐘后肉眼觀察:檢測(cè)對(duì)照孔內(nèi)酶膜上的乙酰膽堿酯酶可快速溶于純凈 水，并進(jìn)一步滲透到下面的底物膜上，與底物發(fā)生顏色反應(yīng)，對(duì)照孔顯示藍(lán)綠色，滴加0.05ix g/mL、0. lyg/mL、0.5yg/mL三個(gè)濃度的辛硫磷樣品液的檢測(cè)孔的顏色從藍(lán)綠色依次遞淺，如 圖8、圖9所示，檢測(cè)孔顯示藍(lán)綠色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比<50%，表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該 檢測(cè)樣品中雖含有0.05iig/mL的辛硫磷，但含量在安全范圍內(nèi)；檢測(cè)孔顯示淺藍(lán)綠色，顏色 強(qiáng)度與對(duì)照比<50%，表面檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品中雖含有O.lyg/mL的辛硫磷， 含量不完全超標(biāo);檢測(cè)孔不顯示顏色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比>50%，表示檢測(cè)結(jié)果為陰性，說(shuō)明 該檢測(cè)樣品中含有〇. 5iig/mL的辛硫磷，含量完全超標(biāo);如果檢測(cè)對(duì)照孔和檢測(cè)孔均不顯色， 則表面該檢測(cè)點(diǎn)卡已失效。
[0033] 檢測(cè)實(shí)例2 第一步，采用常規(guī)方法，配制4700U/ml的乙酰膽堿酯酶液和0. lyg/mL、0.5yg/mL、1.0y g/mL三個(gè)濃度的殺撲磷樣品液； 第二步，將聚酯纖維素底物膜和玻璃纖維素酶膜制成直徑6mm、厚度0.3mm的圓形膜片； 將底物膜在80mM的吲哚乙酸酯溶液中浸泡，酶膜在4700U/ml的乙酰膽堿酯酶液中浸泡，經(jīng) 過(guò)充分浸泡后將其分別冷凍抽干10~30分鐘，用鑷子依次夾取底物膜和酶膜放置在本申請(qǐng) 檢測(cè)點(diǎn)卡的檢測(cè)孔內(nèi)，蓋上卡蓋備用； 第三步，在左卡蓋5上開(kāi)設(shè)的對(duì)照品加樣孔7向下方的檢測(cè)孔中滴加對(duì)照純凈水作為檢 測(cè)對(duì)照孔，從右卡蓋6上開(kāi)設(shè)的三個(gè)加樣孔向下方的檢測(cè)孔中依次滴加稀釋后的三個(gè)殺撲 磷樣本液;純凈水和樣本液的滴加量根據(jù)檢測(cè)孔的大小決定，一般為2〇-l〇〇ul即可； 第三步，15~20分鐘后肉眼觀察:檢測(cè)對(duì)照孔內(nèi)酶膜上的乙酰膽堿酯酶可快速溶于純凈 水，并進(jìn)一步滲透到下面的底物膜上，與底物發(fā)生顏色反應(yīng)，對(duì)照孔顯示藍(lán)綠色，滴加〇. ly g/mL、0.5yg/mL、1. Oyg/mL三個(gè)濃度的殺撲磷樣品液的檢測(cè)孔的顏色從藍(lán)綠色依次遞淺，如 圖10、圖11所示，檢測(cè)孔顯示藍(lán)綠色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比<50%，表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明 該檢測(cè)樣品中雖含有〇. lyg/mL的殺撲磷，但含量在安全范圍內(nèi)；檢測(cè)孔顯示淺藍(lán)綠色，顏色 強(qiáng)度與對(duì)照比<50%，表面檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品中雖含有0.5iig/mL的殺撲磷， 含量不完全超標(biāo);檢測(cè)孔不顯示顏色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比>50%，表示檢測(cè)結(jié)果為陰性，說(shuō)明 該檢測(cè)樣品中含有1. 〇yg/mL的殺撲磷，含量完全超標(biāo);如果檢測(cè)對(duì)照孔和檢測(cè)孔均不顯色， 則表面該檢測(cè)點(diǎn)卡已失效。
[0034] 檢測(cè)實(shí)例3 第一步，采用常規(guī)方法，配制4700U/ml的乙酰膽堿酯酶液和0. lyg/mL、0.5yg/mL、1. Oy g/mL三個(gè)濃度的乙酰甲胺磷樣品液； 第二步，將聚酯纖維素底物膜和玻璃纖維素酶膜制成直徑5mm、厚度0.5mm的圓形膜片； 將底物膜在1〇〇禮的吲哚乙酸酯溶液中浸泡，酶膜在4700U/ml的乙酰膽堿酯酶液中浸泡，經(jīng) 過(guò)充分浸泡后將其分別冷凍抽干10~30分鐘，用鑷子依次夾取底物膜和酶膜放置在本申請(qǐng) 檢測(cè)點(diǎn)卡的檢測(cè)孔內(nèi)，蓋上卡蓋備用； 第三步，在左卡蓋5上開(kāi)設(shè)的對(duì)照品加樣孔7向下方的檢測(cè)孔中滴加對(duì)照純凈水作為檢 測(cè)對(duì)照孔，從右卡蓋6上開(kāi)設(shè)的三個(gè)加樣孔向下方的檢測(cè)孔中依次滴加稀釋后的三個(gè)乙酰 甲胺磷樣本液;純凈水和樣本液的滴加量根據(jù)檢測(cè)孔的大小決定，一般為20-100ul即可； 第三步，15~20分鐘后肉眼觀察:檢測(cè)對(duì)照孔內(nèi)酶膜上的乙酰膽堿酯酶可快速溶于純凈 水，并進(jìn)一步滲透到下面的底物膜上，與底物發(fā)生顏色反應(yīng)，對(duì)照孔顯示藍(lán)綠色，滴加0. ly g/mL、0.5iig/mL、1.0iig/mL三個(gè)濃度的乙酰甲胺磷樣品液的檢測(cè)孔的顏色從藍(lán)綠色依次遞 淺，如圖12、圖13所示，檢測(cè)孔顯示藍(lán)綠色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比<50%，表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性， 說(shuō)明該檢測(cè)樣品中雖含有0.1yg/mL的乙酰甲胺磷，但含量在安全范圍內(nèi)；檢測(cè)孔顯示淺藍(lán) 綠色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比<50%，表面檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品中雖含有0.5iig/mL 的乙酰甲胺磷，含量不完全超標(biāo);檢測(cè)孔不顯示顏色，顏色強(qiáng)度與對(duì)照比>50%，表示檢測(cè)結(jié) 果為陰性，說(shuō)明該檢測(cè)樣品中含有l(wèi).〇yg/mL的乙酰甲胺磷，含量完全超標(biāo);如果檢測(cè)對(duì)照孔 和檢測(cè)孔均不顯色，則表面該檢測(cè)點(diǎn)卡已失效。
[0035]三、將第二步檢測(cè)的農(nóng)藥辛硫磷、殺撲磷、乙酰甲胺磷與傳統(tǒng)檢測(cè)方法進(jìn)行對(duì)比， 其結(jié)果見(jiàn)下表。
[0036]從上表中可以看出，本發(fā)明的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡可以檢測(cè)處較低的檢出限制 (L0D)，即對(duì)農(nóng)藥的檢測(cè)更為敏感。同時(shí)本發(fā)明的檢測(cè)方法對(duì)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)更為簡(jiǎn)單和迅 速，并且可以在日常生活中隨時(shí)隨地的使用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡，包括長(zhǎng)條形扁平薄殼狀卡體，所述卡體由卡座（1)和扣 合在所述卡座（1)上的卡蓋組成，其特征在于:所述卡座（1)上間隔排列有多個(gè)檢測(cè)孔(2)， 所述檢測(cè)孔內(nèi)自下而上依次疊放有底物膜(3)和酶膜(4);所述卡蓋由左卡蓋(5)和右卡蓋 (6)組成，在所述左卡蓋(5)上開(kāi)設(shè)有與所述卡座（1)最左側(cè)的檢測(cè)孔相對(duì)應(yīng)的對(duì)照品加樣 孔(7)，在所述右卡蓋(6)上開(kāi)設(shè)有與其他檢測(cè)孔(2)位置分別相對(duì)應(yīng)的多個(gè)加樣孔(8);所 述底物膜(3)由濾紙膜、玻璃纖維素膜或聚酯纖維素膜在50~IOOmM的吲哚乙酸酯中充分浸 泡并經(jīng)冷凍抽干后制成，其厚度為0.1~0.3mm，直徑5~8mm;所述酶膜⑷由濾紙膜、聚酯纖維 素膜或玻璃纖維素膜在乙酰膽堿酯酶液中經(jīng)充分浸泡并經(jīng)冷凍抽干后制成，其厚度為0.3~ 0.5mm，直徑 5~8mm 〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)點(diǎn)卡，其特征在于:所述底物膜(3)為聚酯 纖維素膜，所述酶膜(4)為玻璃纖維素膜。3. 采用權(quán)利要求1的檢測(cè)點(diǎn)卡檢測(cè)果蔬中農(nóng)殘含量的方法，包括下述步驟： 第一步，抽取待測(cè)樣本，按一定比例稀釋成多個(gè)樣本液后待用； 第二步，從左卡蓋(5)上開(kāi)設(shè)的對(duì)照品加樣孔(7)向下方的檢測(cè)孔中滴加對(duì)照純凈水， 該檢測(cè)孔作為檢測(cè)對(duì)照孔;從右卡蓋(6)上開(kāi)設(shè)的其他加樣孔向下方的檢測(cè)孔中依次滴加 稀釋后的不同樣本液； 第三步，15~20分鐘后肉眼觀察各檢測(cè)孔中顏色變化并與檢測(cè)對(duì)照孔進(jìn)行比對(duì)，直接判 讀結(jié)果即可。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述檢測(cè)果蔬中農(nóng)殘含量的方法，其特征在于:第三步中的反應(yīng)溫度 為 20~30°C。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK105928929SQ201610246230
【公開(kāi)日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月20日
【發(fā)明人】翁海波, 孫召偉, 田柳楊, 李倩
【申請(qǐng)人】鄭州大學(xué)