用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,包括流式表型檢測試劑套裝、細胞固定液、普通培養(yǎng)基、成脂分化誘導及檢測試劑套裝、成骨分化誘導及檢測試劑套裝、成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝。傳統(tǒng)成骨、成脂誘導分化通常需要大約24天,時間較長且誘導效率較低,本發(fā)明將成骨、成脂誘導分化時間縮短至18天,本發(fā)明提高誘導分化效率,縮短誘導分化的時間;同時提供流式檢測抗體,從而得出更為快速準確的鑒定結(jié)果。
【專利說明】
用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種試劑盒,尤其是一種用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]目前越來越多的研究將臍帶分離間充質(zhì)干細胞用于臨床,臍帶間充質(zhì)干細胞的發(fā)展前景也越來越好。國際細胞治療協(xié)會(ISCT)規(guī)定間充質(zhì)干細胞的鑒定包括形態(tài)學、流式表型和誘導分化能力三個方面。傳統(tǒng)的間充質(zhì)干細胞鑒定方法已經(jīng)比較成熟,但是誘導分化過程中耗時較長,而且誘導效率較低,影響最終細胞鑒定結(jié)果。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是,提供一種提高誘導分化效率,縮短誘導分化時間的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒。
[0004]為了解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,包括流式表型檢測試劑套裝、細胞固定液、普通培養(yǎng)基、成脂分化誘導及檢測試劑套裝、成骨分化誘導及檢測試劑套裝、成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝;
[0005]所述流式表型檢測試劑套裝:包括⑶73抗體、CD90抗體、CD105抗體、CD34抗體、CD45抗體、IgGl抗體,每只均為200uL;
[0006]所述成脂分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成脂誘導培養(yǎng)基和1mL成脂分化檢測試劑,成脂誘導培養(yǎng)基為含有0.2-2mmoL/L谷氨酰胺、l-20yg/mL IGF-1、5-10mmol/L3-磷酸甘油、0.5-1.5mmoL/L倍他米松、0.1-0.5mmoL/L異丁基甲基黃嘌呤、100_200ymoL/L叼丨噪美辛、20-100ymoL/L乙酰CoA、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0007]所述成骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成骨誘導培養(yǎng)基和1mL成骨分化檢測試劑,成骨誘導培養(yǎng)基為含有0.5-2mmoL/L谷氨酰胺、0.15-1μπιο 1/L倍他米松、3-10yg/mL TGF-0、2-lOmmol/L0-甘油磷酸鈉、5-10mmol/L維生素D3、10-20mmol/L維生素C、含有體積分數(shù)2-10 %胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0008]所述成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成軟骨誘導培養(yǎng)基和1mL成軟骨分化檢測試劑,成軟骨誘導培養(yǎng)基為含有10-100ng/ml TGF-βΙ、30_80mg/L維生素C、5_20nmol/L倍氯米松、20-60mg/ml ITS、15-30mmol/L氨基葡萄糖、l-5mmol/L丙酮酸鈉、3-10ug/mg亞油酸、l-5ng/ml人血清白蛋白、5-2Ommol/L0-甘油磷酸鈉、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
[0009 ] 所述細胞固定液為20mL質(zhì)量百分比濃度4 %多聚甲醛的水溶液。
[0010]所述普通培養(yǎng)基為20mL含體積分數(shù)2-8 %胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
[0011 ]所述成脂分化檢測試劑為含有l(wèi)g/L茜素磺酸鈉水溶液。
[0012]所述成骨分化檢測試劑為含有質(zhì)量體積分數(shù)為0.5%油紅O的異丙醇溶液。
[0013]所述成軟骨分化檢測試劑為含有10g/L阿爾新蘭、質(zhì)量體積分數(shù)3%醋酸的水溶液。
[0014]本發(fā)明的有益效果是:提高誘導分化效率,縮短誘導分化的時間,傳統(tǒng)成骨、成脂誘導分化通常需要大約24天,時間較長且誘導效率較低,本發(fā)明將成骨、成脂誘導分化時間縮短至18天;同時提供流式檢測抗體,從而得出更為快速準確的鑒定結(jié)果。
【附圖說明】
[0015]圖1流式檢測結(jié)果圖。
[0016]圖2成脂分化染色圖。
[0017]圖3成骨分化染色圖。
[0018]圖4成軟骨分化染色圖。
【具體實施方式】
[0019]下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步詳細說明:
[0020]本發(fā)明的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,包括流式表型檢測試劑套裝、細胞固定液、普通培養(yǎng)基、成脂分化誘導及檢測試劑套裝、成骨分化誘導及檢測試劑套裝、成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝;
[0021]所述流式表型檢測試劑套裝:包括CD73抗體、CD90抗體、CD105抗體、CD34抗體、CD45抗體、IgGl抗體,每只均為200uL;
[0022]所述成脂分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成脂誘導培養(yǎng)基和1mL成脂分化檢測試劑,成脂誘導培養(yǎng)基為含有0.2-2mmoL/L谷氨酰胺、l-20yg/mL IGF-1、5-10mmol/L3-磷酸甘油、0.5-1.5mmoL/L倍他米松、0.1-0.5mmoL/L異丁基甲基黃嘌呤、100_200ymoL/L叼丨噪美辛、20-100ymoL/L乙酰CoA、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0023]所述成骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成骨誘導培養(yǎng)基和1mL成骨分化檢測試劑,成骨誘導培養(yǎng)基為含有0.5-2mmoL/L谷氨酰胺、0.15-1μπιο 1/L倍他米松、3-10yg/mL TGF-0、2-lOmmol/L0-甘油磷酸鈉、5-10mmol/L維生素D3、10-20mmol/L維生素C、含有體積分數(shù)2-10 %胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0024]所述成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成軟骨誘導培養(yǎng)基和1mL成軟骨分化檢測試劑,成軟骨誘導培養(yǎng)基為含有10-100ng/ml TGF-βΙ、30_80mg/L維生素C、5_20nmol/L倍氯米松、20-60mg/ml ITS、15-30mmol/L氨基葡萄糖、l-5mmol/L丙酮酸鈉、3-10ug/mg亞油酸、l-5ng/ml人血清白蛋白、5-2Ommol/L0-甘油磷酸鈉、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
[0025]所述細胞固定液為20mL質(zhì)量百分比濃度4%多聚甲醛的水溶液。
[0026]所述普通培養(yǎng)基為20mL含體積分數(shù)2-8%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
[0027]所述成脂分化檢測試劑為含有l(wèi)g/L茜素磺酸鈉水溶液。
[0028]所述成骨分化檢測試劑為含有質(zhì)量體積分數(shù)為0.5%油紅O的異丙醇溶液。
[0029]所述成軟骨分化檢測試劑為含有10g/L阿爾新蘭、質(zhì)量體積分數(shù)3%醋酸的水溶液。
[0030]本發(fā)明的試劑盒操作步驟如下:
[0031](I)流式檢測步驟:
[0032]步驟一:將細胞懸液按照每管IX 15數(shù)量分裝到EP管內(nèi),離心后加入ImL PBS重懸后離心;
[0033]步驟二:加入相應的流式抗體,室溫避光孵育30min;
[0034]步驟三:每管加入ImL PBS重懸后離心;
[0035]步驟四:每管加入ImLPBS重懸后流式細胞儀檢測。
[0036](2)成脂分化誘導及檢測步驟:
[0037]步驟一:準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照2X13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0038]步驟二:待細胞融合度長至70-80%,更換成脂誘導培養(yǎng)基培養(yǎng),每三天換液一次。
[0039]步驟三:18天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次。
[0040]步驟四:4%多聚甲醛室溫固定20分鐘;PBS清洗3次;
[0041 ] 步驟五:按照Iml/孔加入成脂分化檢測試劑,室溫孵育一小時;
[0042]步驟六:清除掉沒有完全結(jié)合的染料,75%乙醇溶液清洗3次;
[0043]步驟七:倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
[0044](3)成骨分化誘導及檢測步驟:
[0045]步驟一:準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照5X13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0046]步驟二:待細胞融合度長至40-50%,更換成骨誘導培養(yǎng)基;每三天換液一次;
[0047]步驟三:18天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
[0048]步驟四:使用4%多聚甲醛室溫固定15min,完成后使用PBS沖洗兩次;
[0049]步驟五:按照Iml/孔加入成骨分化檢測試劑,室溫孵育20min并輕微振蕩;
[0050]步驟六:清除掉沒有完全結(jié)合的染料,用PBS漂洗并振蕩5min重復4次;
[0051 ]步驟七:倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
[0052](4)成軟骨分化誘導及檢測步驟:
[0053]步驟一:準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照5X13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0054]步驟二:待細胞融合度長至50-60%,更換成軟骨誘導培養(yǎng)基;每三天換液一次;
[0055]步驟三:13天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
[0056]步驟四:用細胞固定液固定30min,再用3%醋酸水溶液洗2次后;
[0057]步驟五:按照Iml/孔加入成軟骨分化檢測試劑染色10?30min;
[0058]步驟六:清除掉沒有完全結(jié)合的染料,3%醋酸水溶液洗3次;
[0059]步驟七:倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
[0060]實施例1
[0061]所述成脂分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成脂誘導培養(yǎng)基和1mL成脂分化檢測試劑,成脂誘導培養(yǎng)基為含有2mmoL/L谷氨酰胺、20yg/mL IGF-1、10mmol/L 3-磷酸甘油、I.5mmoL/L倍他米松、0.5mmoL/L異丁基甲基黃嘌呤、200ymoL/L吲哚美辛、100ymoL/L乙酰CoA、含有體積分數(shù)1 %胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0062]所述成骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成骨誘導培養(yǎng)基和1mL成骨分化檢測試劑,成骨誘導培養(yǎng)基為含有2mmoL/L谷氨酰胺、lymol/L倍他米松、10yg/mL TGF-β、lOmmol/L0-甘油磷酸鈉、10mmol/L維生素D3、20mmol/L維生素C、含有體積分數(shù)10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0063]所述成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成軟骨誘導培養(yǎng)基和1mL成軟骨分化檢測試劑,成軟骨誘導培養(yǎng)基為含有100ng/ml TGF-βΙ、80mg/L維生素C、20nmol/L倍氯米松、60mg/ml ITS、30mmol/L氨基葡萄糖、5mmol/L丙酮酸鈉、10ug/mg亞油酸、5ng/ml人血清白蛋白、20mmol/U3-甘油磷酸鈉、含有體積分數(shù)10 %胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
[0064]操作步驟如下:
[0065](I)流式檢測:
[0066]將細胞懸液按照每管I X 15數(shù)量分裝到EP管內(nèi),離心后加入ImL PBS重懸后離心;
[0067]加入相應的流式抗體,室溫避光孵育30min;
[0068]每管加入ImL PBS重懸后離心;
[0069]每管加入ImL PBS重懸后流式細胞儀檢測。IgGl為同型對照,檢測結(jié)果⑶73、CD90、⑶105為陽性表達,⑶34、⑶45為陰性表達,見圖1。
[0070](2)成脂分化誘導及檢測:
[0071 ]準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照2 X 13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0072]待細胞融合度長至80%,更換成脂誘導培養(yǎng)基培養(yǎng),每三天換液一次。
[0073]18天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次。
[0074]4 %多聚甲醛室溫固定20分鐘;PBS清洗3次;
[0075]按照Iml/孔加入成脂分化檢測試劑,室溫孵育一小時;
[0076]清除掉沒有完全結(jié)合的染料,75%乙醇溶液清洗3次;
[0077]倒置顯微鏡觀察拍照記錄。檢測結(jié)果出現(xiàn)紅色液滴,見圖2。
[0078](3)成骨分化誘導及檢測:
[0079]準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照5X13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0080]待細胞融合度長至40-50%,更換成骨誘導培養(yǎng)基;每三天換液一次;
[0081]18天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
[0082]使用4%多聚甲醛室溫固定15min,完成后使用PBS沖洗兩次;
[0083]按照lml/孔加入成骨分化檢測試劑,室溫孵育20min并輕微振蕩;
[0084]清除掉沒有完全結(jié)合的染料,用PBS漂洗并振蕩5min重復4次;
[0085]倒置顯微鏡觀察拍照記錄。檢測結(jié)果出現(xiàn)紅色結(jié)節(jié),見圖3。
[0086](4)成軟骨分化誘導及檢測:
[0087]準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照5X13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0088]待細胞融合度長至60%,更換成軟骨誘導培養(yǎng)基;每三天換液一次;
[0089]13天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
[0090]用細胞固定液固定30min,再用3%醋酸水溶液洗2次后;按照Iml/孔加入成軟骨分化檢測試劑染色30min ;
[0091]清除掉沒有完全結(jié)合的染料,3%醋酸水溶液洗3次;
[0092]倒置顯微鏡觀察拍照記錄。檢測結(jié)果出現(xiàn)藍色,見圖4。
[0093]實施例2
[0094]所述成脂分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成脂誘導培養(yǎng)基和1mL成脂分化檢測試劑,成脂誘導培養(yǎng)基為含有0.2mmoL/L谷氨酰胺、lyg/mL IGF-1、5mmol/L 3-磷酸甘油、0.5mmoL/L倍他米松、0.1mmoL/L異丁基甲基黃嘌呤、100ymoL/L吲哚美辛、20ymoL/L乙酰CoA、含有體積分數(shù)2 %胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0095]所述成骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成骨誘導培養(yǎng)基和1mL成骨分化檢測試劑,成骨誘導培養(yǎng)基為含有0.5mmoL/L谷氨酰胺、0.15411101/1倍他米松、348/1^ TGF-
0、2mmol/L0-甘油磷酸鈉、5mmol/L維生素D3、10mmol/L維生素C、含有體積分數(shù)2%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;
[0096]所述成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成軟骨誘導培養(yǎng)基和1mL成軟骨分化檢測試劑,成軟骨誘導培養(yǎng)基為含有10ng/ml TGF-m、30mg/L維生素C、5nmol/L倍氯米松、20mg/ml ]^、15_31凡氨基葡萄糖、1_31凡丙酮酸鈉、31^/11^亞油酸、11^/1111人血清白蛋白、5mmol/L β_甘油磷酸鈉、含有體積分數(shù)2%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。
[0097]操作步驟如下:
[0098](I)流式檢測步驟:
[0099]將細胞懸液按照每管I X 15數(shù)量分裝到EP管內(nèi),離心后加入ImL PBS重懸后離心;
[0100]加入相應的流式抗體,室溫避光孵育30min;
[0101]每管加入ImL PBS重懸后離心;
[0102]每管加入ImLPBS重懸后流式細胞儀檢測。檢測結(jié)果符合臍帶間充質(zhì)干細胞表型。IgGl為同型對照,檢測結(jié)果⑶73、⑶90、⑶105為陽性表達,⑶34、⑶45為陰性表達。
[0103](2)成脂分化誘導及檢測步驟:
[0104]準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照2X 13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0105]待細胞融合度長至70-80%,更換成脂誘導培養(yǎng)基培養(yǎng),每三天換液一次。
[0106]18天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次。
[0107]4%多聚甲醛室溫固定20分鐘;PBS清洗3次;
[0108]按照lml/孔加入成脂分化檢測試劑,室溫孵育一小時;
[0109 ]清除掉沒有完全結(jié)合的染料,75 %乙醇溶液清洗3次;
[0110]倒置顯微鏡觀察拍照記錄。檢測結(jié)果出現(xiàn)紅色液滴。
[0111](3)成骨分化誘導及檢測步驟:
[0112]準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照5X 13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0113]待細胞融合度長至40-50%,更換成骨誘導培養(yǎng)基;每三天換液一次;
[0114]18天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
[0115]使用4%多聚甲醛室溫固定15min,完成后使用PBS沖洗兩次;
[0116]按照lml/孔加入成骨分化檢測試劑,室溫孵育20min并輕微振蕩;
[0117]清除掉沒有完全結(jié)合的染料,用PBS漂洗并振蕩5min重復4次;
[0118]倒置顯微鏡觀察拍照記錄。檢測結(jié)果出現(xiàn)紅色結(jié)節(jié)。
[0119](4)成軟骨分化誘導及檢測步驟:
[0120]準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照5X 13個/平方厘米的規(guī)格接種于普通培養(yǎng)液中;
[0121]待細胞融合度長至50-60%,更換成軟骨誘導培養(yǎng)基;每三天換液一次;
[0122]13天后去除全部培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
[0123]用細胞固定液固定30min,再用3%醋酸水溶液洗2次后;
[0124]按照lml/孔加入成軟骨分化檢測試劑染色1min;
[0125]清除掉沒有完全結(jié)合的染料,3%醋酸水溶液洗3次;
[0126]倒置顯微鏡觀察拍照記錄。檢測結(jié)果出現(xiàn)藍色。
[0127]本發(fā)明提高誘導分化效率,縮短誘導分化的時間,傳統(tǒng)成骨、成脂誘導分化通常需要大約24天,時間較長且誘導效率較低,本發(fā)明將成骨、成脂誘導分化時間縮短至18天;同時提供流式檢測抗體,從而得出更為快速準確的鑒定結(jié)果。
[0128]綜上所述,本發(fā)明的內(nèi)容并不局限在上述的實施例中,相同領(lǐng)域內(nèi)的有識之士可以在本發(fā)明的技術(shù)指導思想之內(nèi)可以輕易提出其他的實施例,但這種實施例都包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,其特征在于,包括流式表型檢測試劑套裝、細胞固定液、普通培養(yǎng)基、成脂分化誘導及檢測試劑套裝、成骨分化誘導及檢測試劑套裝、成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝; 所述流式表型檢測試劑套裝:包括⑶73抗體、CD90抗體、CD105抗體、CD34抗體、CD45抗體、I gG I抗體,每只均為200uL ; 所述成脂分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成脂誘導培養(yǎng)基和1mL成脂分化檢測試劑,成脂誘導培養(yǎng)基為含有0.2-2mmoL/L谷氨酰胺、l-20yg/mL IGF-1、5-10mmol/L 3-磷酸甘油、0.5-1.5mmoL/L倍他米松、0.1-0.5mmoL/L異丁基甲基黃嘌呤、100_200ymoL/L吲哚美辛、20-100ymoL/L乙酰CoA、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基; 所述成骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成骨誘導培養(yǎng)基和1mL成骨分化檢測試劑,成骨誘導培養(yǎng)基為含有0.5-2mmoL/L谷氨酰胺、0.15-lymol/L倍他米松、3-10yg/mLTGF-0、2-lOmmol/U-甘油磷酸鈉、5-10mmol/L維生素D3、10-20mmol/L維生素C、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基; 所述成軟骨分化誘導及檢測試劑套裝:包括10mL成軟骨誘導培養(yǎng)基和1mL成軟骨分化檢測試劑,成軟骨誘導培養(yǎng)基為含有10-100ng/ml TGF-βΙ、30_80mg/L維生素C、5-20nmol/L倍氯米松、20-60mg/ml ITS、15-30mmol/L氨基葡萄糖、l-5mmol/L丙酮酸鈉、3-10ug/mg亞油酸、l-5ng/ml人血清白蛋白、5-2Ommol/L0-甘油磷酸鈉、含有體積分數(shù)2-10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,其特征在于,所述細胞固定液為20mL質(zhì)量百分比濃度4%多聚甲醛的水溶液。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,其特征在于,所述普通培養(yǎng)基為20mL含體積分數(shù)2-8 %胎牛血清的AMEM培養(yǎng)基。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,其特征在于,所述成脂分化檢測試劑為含有l(wèi)g/L茜素磺酸鈉水溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,其特征在于,所述成骨分化檢測試劑為含有質(zhì)量體積分數(shù)為0.5%油紅O的異丙醇溶液。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鑒定臍帶間充質(zhì)干細胞的試劑盒,其特征在于,所述成軟骨分化檢測試劑為含有10g/L阿爾新蘭、質(zhì)量體積分數(shù)3%醋酸的水溶液。
【文檔編號】C12N5/0775GK105891512SQ201610311230
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年5月11日
【發(fā)明人】魯振宇, 劉俊江, 韓洪起, 張冰晶, 秦臻, 徐悅, 黃文敬
【申請人】天津普瑞賽爾生物科技有限公司