一種蕓香草藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及藥材的定性與定量鑒別方法，特別是設(shè)及蕓香草藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在維藥寒喘祖帕顆粒中，蕓香草是作為其中一味主要組成藥材，藥理作用方面具 有平喘、鎮(zhèn)咳、抗菌等作用。3、蕓香草有同名異物現(xiàn)象，并且一直較為混淆，對(duì)藥廠中得到的 寒喘祖帕顆粒中原藥材"蕓香草"進(jìn)行生藥材鑒別，通過植物分類學(xué)鑒別，寒喘祖帕顆粒中 使用的蕓香草為大戟科大戟屬一年生草本植物對(duì)葉大戟(Euphorbia sororia A)的一種質(zhì) 量評(píng)價(jià)。
[0003] 蕓香草W全草和果實(shí)入藥，主要分布于中亞和我國(guó)新疆和田等地區(qū)，是維吾爾醫(yī) 學(xué)常用藥材，維吾爾名為"蘇扎甫"，在維吾爾醫(yī)學(xué)、藥學(xué)研究中占有重要位置。該藥材有重 要的藥用價(jià)值，作為一種具有悠久用藥歷史的傳統(tǒng)藥物，功能主治為利水消腫、降壓清腦、 平喘、鎮(zhèn)咳、抗菌、瀉下雜蟲。用于大便秘結(jié)、尿頻、高血壓頭痛、肝硬化、水腫W及巧瘡腫痛 等。現(xiàn)今對(duì)"對(duì)葉大戟"有一定記載的只有19W《中國(guó)植物志》第44(3)卷113頁，只是介紹了 其植物形狀和特點(diǎn)，并未詳細(xì)介紹，所W研究具有更多的基礎(chǔ)與臨床指導(dǎo)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性強(qiáng)、精密度 高的蕓香草藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法。
[0005] 本發(fā)明的目的通過W下技術(shù)方案來具體實(shí)現(xiàn)： 一種蕓香草藥材的質(zhì)量檢測(cè)方法，W蕓香草藥材中山奈酪、賞窘亭、香草酸的Ξ種成分 的含量作為比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)辨別藥材的真假或質(zhì)量。
[0006] 蕓香草藥材定性的檢測(cè)，確定其真假： W乙酸乙醋和25%鹽酸提取蕓香草藥材中山奈酪、賞窘亭、香草酸成分，提取液過濾后， 蒸干，甲醇溶解，作為供試品溶液； 山奈酪、賞窘亭標(biāo)品和提取的藥材樣品點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，展開劑展開， 365nm紫外燈下檢視，待測(cè)藥材與標(biāo)準(zhǔn)品在相同位置顯相同顏色； 香草酸標(biāo)品和提取的藥材樣品點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，展開劑展開，254nm紫外燈 下檢視，待測(cè)藥材與標(biāo)準(zhǔn)品在相同位置顯相同顏色。
[0007] 經(jīng)過優(yōu)選展開劑，山奈酪、賞窘亭所述的展開劑為甲苯-乙酸乙醋-甲酸，其體積比 為8:3:0.7;香草酸展開時(shí)，W甲苯-乙酸乙醋-甲醇-甲酸展開劑展開，其體積比為7:3:1: 0.6 具體的定量的檢測(cè)方法步驟如下： 1)供試品溶液制備 取蕓香草藥材粉末5. OOlg，加入乙酸乙醋50ml，25%鹽酸2.5ml充分混勻后，超聲60min， 過濾，轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿放置水浴鍋上蒸干，加入5ml甲醇完全溶解，作為供試品溶液5ml; 2) 對(duì)照品溶液制備 精密稱取山奈酪標(biāo)準(zhǔn)品10.58mg、賞窘亭標(biāo)準(zhǔn)品1.12mg和香草酸標(biāo)準(zhǔn)品10.54mg，分別 用甲醇定容置10ml容量瓶中，溶解，山奈酪對(duì)照品1.058mg/ml、賞窘亭對(duì)照品0.112mg/ml、 香草酸對(duì)照品1. 〇54mg/ml，作為對(duì)照品溶液； 3) 蕓香草薄層定性鑒別 吸取賞窘亭對(duì)照品化1、山奈酪對(duì)照品化1，供試品4μ1分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板 上，展開劑展開，取出，驚干，顯色后置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 吸取香草酸對(duì)照品4μ1，供試品化1點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，展開劑展開，取出，驚 干，顯色后置254nm紫外燈下檢視，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 4) 蕓香草薄層掃描定量 吸取賞窘亭對(duì)照品化1、山奈酪對(duì)照品化1，10批藥材供試品化1分別點(diǎn)于同一硅膠GF254 薄層板上，展開劑展開，取出，驚干，W1%的Ξ氯化侶-乙醇溶液作為顯色劑，均勻噴于驚干 的薄層板上，再次驚干，按照色譜法進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)為330nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì) 照品吸收度，計(jì)算，即得山奈酪、賞窘亭的含量； 吸取香草酸對(duì)照品化1、10批藥材供試品化1分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，展開，取 出，驚干，W1%的Ξ氯化侶-乙醇溶液作為顯色劑，均勻噴于驚干的薄層板上，再次驚干，按 照色譜法進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)為300nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度，計(jì)算，即得香 草酸的含量。
[0008] 優(yōu)選的，所述的步驟2)中，溶解時(shí)，將溶液置于超聲波中處理60min。
[0009] 優(yōu)選的，所述的步驟3)、4)中，山奈酪、賞窘亭展開時(shí)，所述的展開劑為甲苯-乙酸 乙醋-甲酸，其體積比為8:3:0.7;香草酸開時(shí)，W甲苯-乙酸乙醋-甲醇-甲酸展開劑展開，其 體積比為7:3:1:0.6。
[0010] 優(yōu)選的，薄層展開在室溫21~25°C條件下，空氣濕度40~43RH。
[0011] 本發(fā)明采用鹽酸一乙酸乙醋提取成分法，提取能力強(qiáng)。
[0012] 本發(fā)明有益效果： 本發(fā)明提供一種維吾爾常用藥材--蕓香草藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，它完成了蕓香草的薄 層色譜定性鑒別和含量測(cè)定，其中含量測(cè)定是運(yùn)用薄層色譜掃描法測(cè)定山奈酪、賞窘亭和 香草酸的含量。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證表明，該方法精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性及加樣回收率均良好，表 明該方法符合含量測(cè)定的技術(shù)要求。
[0013] 本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)便、色譜斑點(diǎn)清晰、分離效果較好，方法學(xué)考察可W得出其精密 度和重復(fù)性良好，建立的W蕓香草中巧中主要有效成分的高效薄層色譜，能為維藥寒喘祖帕 顆粒的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供一定的參考信息。也為深入寒喘祖帕顆粒藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究和其種類 的新藥研發(fā)提供了參考價(jià)值。
【附圖說明】
[0014] 圖1為山奈酪(A)、賞窘亭(B)混標(biāo)和10批樣品在紫外365nm條件下薄層展開圖； 圖2為賞窘亭標(biāo)品(B)、山奈酪標(biāo)品(A)和10批樣品在紫外365nm條件下薄層展開圖； 圖3為香草酸標(biāo)品(C)和10批樣品在紫外254nm條件下薄層展開圖，C為香草酸標(biāo)品； 圖4為山奈酪(A)、賞窘亭(B)混標(biāo)和10批樣品在紫外330nm條件下薄層定量掃描圖； 圖5為香草酸(C)和10批樣品在紫外300nm條件下薄層定量掃描圖。
【具體實(shí)施方式】
[0015] W下對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用 于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0016] 1.儀器與試藥 1.1儀器 CAMAG TLC SCAN肥R3型薄層掃描儀（瑞±);CAMAG LIN0MAT5半自動(dòng)點(diǎn)樣儀（瑞±); CAMAG REPR0STAR3 (瑞±);硅膠GF254高效薄層板(安徽良臣娃源材料有限公司）;XS-105型 電子天平(瑞±梅勒-托利多公司）;XS105型十萬分之一電子天平(瑞±梅特勒-托利公司）； KQ-200KDE型超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;皿-S4數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市醫(yī)療 儀器廠） 1.2試藥 蕓香草藥材：（新疆奇康哈博維藥股份有限公司，批號(hào):090202-1、120916-3、130816-2、 130916-1、130916-1-113、140305-2、140227-1)、烏市維吾爾醫(yī)院、和田市人民醫(yī)院、和田個(gè) 體維藥藥店。
[0017] 其余試劑均為分析純。
[001引 2.方法 2.1蕓香草薄層色譜定性鑒別 2.1.1供試品溶液的制備:精密稱取W上各批次藥材5.OOlg，分別置于100ml加塞錐形 瓶中，加乙酸乙醋50ml，25%鹽酸2.5ml，混勻超聲處理60min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?5ml甲 醇使溶解，即得供試品溶液(1、2、3、4、5、6、7、8、9、10)。
[0019] 2.1.2對(duì)照品溶液的制備：精密稱取山奈酪對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含 1.058mg的溶液，作為對(duì)照品溶液A;精密稱取賞窘亭對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含 0.112mg的溶液，作為對(duì)照品溶液B;精密稱取香草酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含 1.054mg的溶液，作為對(duì)照品溶液C。
[0020] 2.1.3薄層色譜條件：吸取賞窘亭對(duì)照品化1、山奈酪對(duì)照品化1，供試品4μ1分別 點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，W體積比為8:3:0.7的甲苯-乙酸乙醋-甲酸為展開劑，展開， 取出，驚干，顯色后置365nm紫外燈下檢視;供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置 上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。吸取香草酸對(duì)照品4μ1，供試品4μ1點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，W 體積比為7 :3:1:0.6的甲苯-乙酸乙醋-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，驚干，顯色后置 254nm紫外燈下檢視;在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0021 ] 2.2蕓香草薄層色譜掃描法定量 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取樣品溶液化1，對(duì)照品A溶液化1，對(duì)照品B溶液化1，點(diǎn)于同一娃 膠GF25褲層板上，W體積比為8:3:0.7的甲苯-乙酸乙醋-甲酸為展開劑，展開，取出，驚干， 噴氯化侶-乙醇溶液顯色，驚干，照色譜法進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)為330nm，測(cè)量供試品吸收 度積分值與對(duì)照品吸收度，計(jì)算，即得蕓香草中山奈酪、賞窘亭的含量。香草酸含量測(cè)定:吸 取樣品化1溶液，對(duì)照品C溶液化1，點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，W體積比為7:3:1:0.6的甲 苯-乙酸乙醋-甲醇-甲酸為展開劑，同W上操作方法一致，掃描波長(zhǎng)為3(K)nm，測(cè)量供試品吸 收度積分值與對(duì)照品吸收度，計(jì)算，即得蕓香草中香草酸的含量。
[0022] 3.結(jié)果 3.1蕓香草薄層色譜定性鑒別 將制備好的標(biāo)準(zhǔn)溶液及10批供試品溶液按上述薄層色譜條件點(diǎn)樣展開并在紫外燈 (254nm)下檢識(shí)，獲得標(biāo)準(zhǔn)溶液及蕓香草提取物薄層色譜圖，如圖1。
[0023] 3.2