用于診斷胰腺癌的組合物以及使用該組合物診斷胰腺癌的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本公開內(nèi)容涉及用于診斷胰腺癌的組合物和試劑盒，其包含用于測量蛋白的蛋白 表達(dá)水平或編碼所述蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平的試劑，可用于確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā) 病的可能性，以及涉及使用所述組合物或試劑盒診斷胰腺癌的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，在人類主要疾病中具有代表性的是癌癥。關(guān)于癌癥的研究正在積極進(jìn)行，特 別是在高發(fā)癌癥（包括肺癌、肝癌、胃癌等）領(lǐng)域，但是對低發(fā)癌癥（包括食管癌、結(jié)直腸 癌、胰腺癌等）進(jìn)行的研究較少。
[0003] 特別地，胰腺癌在其早期通常不引起可識別的癥狀，并且該疾病通常由于其癥狀 輕微（例如疼痛、體重減輕等），直到疾病從胰腺本身擴(kuò)散至全身才被診斷出。此外，胰腺癌 的存活率通常很低，因此定期診斷非常重要。在大多數(shù)情況下，胰腺癌的臨床癥狀是緩慢暴 露的，胰腺癌患者最常出現(xiàn)虛弱、厭食和體重減輕。已發(fā)現(xiàn)胰腺癌的五年存活率是1-4%，中 位生存期是5個(gè)月，其非常致命并且是人類癌癥中預(yù)后最差的。診斷后，發(fā)現(xiàn)80-90%的人 不能通過有希望的根治性切除術(shù)治療。這是通常預(yù)后非常差的主要原因之一。主要使用化 學(xué)療法治療胰腺癌。因此，與其他癌癥相比，迫切需要胰腺癌的早期診斷方法。盡管目前已 知一些抗癌藥物（包括5-氟尿嘧啶、吉西他濱和特羅凱）可用于治療胰腺癌，但是它們表 現(xiàn)出非常低的療效和對癌癥治療的僅15%左右的反應(yīng)率。這些情況表明，迫切需要更有效 的胰腺癌的早期診斷和治療，由此可改善預(yù)后。
[0004] 根據(jù)血液學(xué)檢驗(yàn)（CA19-9)、使用X-射線造影劑的胃腸道造影術(shù)和十二指腸造影 術(shù)、經(jīng)皮膚和肝的膽管造影術(shù)、或內(nèi)鏡逆行胰膽管造影術(shù)確定胰腺癌的診斷。許多疾病病變 可通過這樣的方法檢測，但是目前最優(yōu)選的是超聲波掃描術(shù)和計(jì)算機(jī)斷層掃描術(shù)。更謹(jǐn)慎 的活檢方法可導(dǎo)致相對更精確的結(jié)果。上述診斷方法由于其通常是精確的而被使用，但是， 受試者不愿經(jīng)受檢查，因?yàn)檫@些診斷方法是令人不舒服的或疼痛的。因此，需要方便并快速 診斷胰腺癌的方法。
[0005] 在這一方面，韓國專利No. 10-0819122公開了使用多種胰腺癌標(biāo)記物（包括母 系蛋白、甲狀腺素運(yùn)載蛋白和人分層蛋白）的技術(shù)。此外，未經(jīng)審查的韓國專利申請公開 No. 2012-0082373描述了使用多種胰腺癌標(biāo)記物診斷胰腺癌。KR2009-0003308公開了通 過檢測受試者血液樣品中REG4的表達(dá)水平診斷胰腺癌。KR2012-0009781A描述了測量受 試者癌癥組織中XISTRNA表達(dá)水平的分析方法，由此可提供受試者的胰腺癌的發(fā)病信息。 KR2007-0119250A公開了新的LBFL313基因家族，它們在正常胰腺組織和胰腺癌組織之間 以不同模式表達(dá)。US2011/0294136A1公開了使用生物標(biāo)記物（包括角蛋白8蛋白）的胰 腺癌的診斷方法。但是，不同標(biāo)記物之間的診斷效率和精確度非常不同。因此，迫切需要非 常有效的標(biāo)記物和使用該標(biāo)記物的診斷方法。
[0006] 本發(fā)明人努力開發(fā)出一種可用于在早期診斷胰腺癌的標(biāo)記物，因此鑒定出胰腺癌 中過表達(dá)或低表達(dá)的蛋白，并通過確認(rèn)使用所述蛋白可容易地診斷胰腺癌而完成了本發(fā) 明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 技術(shù)問題
[0008] 因此，本公開內(nèi)容的一個(gè)目的是提供胰腺癌的診斷組合物，使用該組合物可在早 期方便地診斷胰腺癌發(fā)病的可能性。
[0009] 本公開內(nèi)容的另一個(gè)目的是提供用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含所述組合物。
[0010] 本公開內(nèi)容的再一個(gè)目的是提供用于使用所述診斷組合物或試劑盒診斷胰腺癌 或提供關(guān)于胰腺癌的診斷結(jié)果的信息的方法。
[0011] 技術(shù)方案
[0012] 為實(shí)現(xiàn)以上目的，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的組合物，其包含用于測量 ABAT蛋白（4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶；GenBank登錄號：NP_001120920. 1)的蛋白表達(dá)水平或編碼 ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平的試劑。
[0013] 為實(shí)現(xiàn)以上目的，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的組合物，其包含用于測量 ABAT蛋白（4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶；GenBank登錄號：NP_001120920. 1)的蛋白表達(dá)水平或編碼 ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平；以及CHI3L1蛋白（幾丁質(zhì)酶-3-樣蛋白1前體；GenBank 登錄號：NP_001267. 2)的表達(dá)水平或編碼CHI3L1蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平的試劑。
[0014] 為實(shí)現(xiàn)以上目的，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的試劑盒，其包含所述組合 物。
[0015] 為實(shí)現(xiàn)以上目的，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的方法，其包括：
[0016] (a)從待進(jìn)行胰腺癌發(fā)病診斷的受試者中獲得樣品；
[0017] (b)測量ABAT蛋白（4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶；GenBank登錄號：NP_001120920. 1)的蛋 白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平；
[0018] (c)將ABAT蛋白的蛋白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平與相應(yīng) 的正常對照的表達(dá)水平進(jìn)行比較；以及
[0019] (d)基于（c)步驟中的比較結(jié)果，當(dāng)待進(jìn)行胰腺癌發(fā)病檢測的受試者的ABAT蛋白 的蛋白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平比待進(jìn)行胰腺癌發(fā)病檢測的相應(yīng) 的正常對照的表達(dá)水平更高時(shí)，確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性高。
[0020] 為實(shí)現(xiàn)以上目的，本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的方法，其包括：
[0021] (a)從待進(jìn)行胰腺癌發(fā)病診斷的受試者中獲得樣品；
[0022] (b)測量ABAT蛋白（4-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶；GenBank登錄號：NP_001120920. 1)的蛋 白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平、以及CHI3L1蛋白（幾丁質(zhì)酶-3-樣 蛋白1前體；GenBank登錄號：NP_001267. 2)的蛋白表達(dá)水平或編碼CHI3L1蛋白的基因的 mRNA表達(dá)水平；
[0023] (c)將ABAT蛋白的蛋白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平、以及 CHI3L1蛋白的蛋白表達(dá)水平或編碼CHI3L1蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平與相應(yīng)的正常對照 的表達(dá)水平進(jìn)行比較；以及
[0024] (d)基于（c)步驟中的比較結(jié)果，當(dāng)待進(jìn)行胰腺癌發(fā)病檢測的受試者的ABAT蛋 白的蛋白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平比相應(yīng)的正常對照的表達(dá)水 平更高時(shí)，以及當(dāng)待進(jìn)行胰腺癌發(fā)病檢測的受試者的CHI3L1蛋白的蛋白表達(dá)水平或編碼 CHI3L1蛋白的基因的mRNA表達(dá)水平比受試者的相應(yīng)的正常對照的表達(dá)水平更低時(shí)，確定 胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性高。
[0025] 本發(fā)明的診斷胰腺癌的標(biāo)記物可使得能夠有效地估計(jì)或確定胰腺癌發(fā)病的可能 性，以在早期診斷胰腺癌和胰腺癌的嚴(yán)重程度。此外，本發(fā)明的診斷方法允許以無創(chuàng)性方式 從樣品（例如血液）中方便地檢測胰腺癌。
[0026] 有益效果
[0027] 如上所述，本公開內(nèi)容的胰腺癌的診斷標(biāo)記物可用于在早期預(yù)測或診斷胰腺癌的 發(fā)病、發(fā)病的可能性及嚴(yán)重性。所述標(biāo)記物還可用于胰腺癌腫瘤發(fā)生的研究。此外，本發(fā)明 的診斷方法允許以無創(chuàng)性方式在樣品（例如血液）中方便地檢測胰腺癌。
【附圖說明】
[0028] 圖1是示出了對照組和胰腺癌患者組的ABAT蛋白的相對濃度的圖，如通過MRM定 量分析所測量的。
[0029] 圖2是示出了ABAT的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C曲線（接收者操作特征）。
[0030] 圖3是示出了CA19-9的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C曲線（接收者操作特征）， 本領(lǐng)域已知CA19-9是胰腺癌的血液標(biāo)記物。
[0031] 圖4是比較了ABAT與CA19-9的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C曲線（接收者操作 特征）。
[0032] 圖5是示出了ABAT和CA19-9的結(jié)合物的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C曲線（接 收者操作特征）。
[0033] 圖6是比較了單獨(dú)的CA19-9和ABAT與CA19-9和ABAT的結(jié)合物的癌細(xì)胞（AUC) 診斷性能的R0C曲線（接收者操作特征）。
[0034] 圖7是示出了對照組和胰腺癌患者組的CHI3L1蛋白的相對濃度的圖，如通過MRM 定量分析所測量的。
[0035] 圖8是示出了CHI3L1和CA19-9的結(jié)合物的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C曲線 (接收者操作特征）。
[0036] 圖9是比較了CA19-9與ABAT和CHI3L1的結(jié)合物的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C 曲線（接收者操作特征）。
[0037] 圖10是示出了ABAT、CHI3L1和CA19-9的結(jié)合物的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C 曲線（接收者操作特征）。
[0038] 圖11是比較了ABAT、CHI3L1和CA19-9的結(jié)合物與ABAT和CHI3L1的結(jié)合物或單 獨(dú)的CA19-9的癌細(xì)胞（AUC)診斷性能的R0C曲線（接收者操作特征）。
【具體實(shí)施方式】
[0039] 術(shù)語為下文所定義。
[0040] 本文使用的術(shù)語"診斷"旨在涵蓋確定受試者對某種疾病或病癥的易感性、確 定受試者是否患有某種疾病或病癥、確定患有某種疾病或病癥的受試者的預(yù)后（例如鑒 定癌癥的轉(zhuǎn)移前狀態(tài)或轉(zhuǎn)移狀態(tài)、確定癌癥的階段或癌癥對治療的響應(yīng)）或度量療法 (therametrics)(例如，監(jiān)測受試者的狀態(tài)以提供關(guān)于治療功效的信息）。特別地，本文使 用的診斷意指確定胰腺癌的發(fā)病或發(fā)病的可能性（風(fēng)險(xiǎn)）。
[0041] 本文使用的術(shù)語"胰腺癌"意指產(chǎn)生于胰腺中的細(xì)胞的癌癥（癌）或惡性腫瘤。有 多種類型的胰腺腫瘤，這類腫瘤的90%是胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC)。因此，胰腺導(dǎo)管腺癌在狹 義上被稱為胰腺癌。胰腺癌的其他實(shí)例包括神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤和囊腺癌。
[0042] 本文使用的術(shù)語"標(biāo)記物"、"生物標(biāo)記物"或"診斷標(biāo)記物"意指允許區(qū)分正常和疾 病狀態(tài)、或能夠使治療結(jié)果被預(yù)測或客觀測量的標(biāo)簽。具體地，在與胰腺癌相關(guān)的情況下， 標(biāo)記物意指在患胰腺癌或有胰腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的受試者中，相比于正常對照（未患胰腺癌的 受試者），其蛋白或基因表達(dá)水平顯著升高或降低的有機(jī)生物分子，例如多肽或核酸（例如 mRNA等）、脂質(zhì)、糖脂、糖蛋白、糖（單糖、二糖、寡糖等）。
[0043] 本公開內(nèi)容提供了用于診斷胰腺癌的組合物，其包含用于測量ABAT蛋白（4-氨基 丁酸轉(zhuǎn)氨酶；GenBank登錄號：NP_001120920. 1)的蛋白表達(dá)水平或編碼ABAT蛋白的基因 的mRNA表達(dá)水平的試劑。
[0044] 在本發(fā)明中，ABAT被用作檢測胰腺癌的標(biāo)記物，從而有效地診斷受試者的胰腺癌 發(fā)病或發(fā)病的可能性。