血液分析方法及血液分析裝置的制造方法
【專利說(shuō)明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及對(duì)血液待測(cè)樣品的血細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的血液分析方法及血液分析裝置?！尽颈尘凹夹g(shù)】】
[0002]作為瘧疾的種類，已知熱帶熱瘧疾、三日熱瘧疾、卵形瘧疾及四日熱瘧疾。其中，人如果罹患的熱帶熱瘧疾，則容易重癥化，有在罹患者盡早實(shí)施治療的必要。作為判斷瘧疾的罹患的方法，例如，已知特開(kāi)2007-24844號(hào)公報(bào)中記載的方法。在此方法中，將使紅細(xì)胞溶血的試劑添加到血液樣品而制備測(cè)定樣品。然后，向制備的測(cè)定樣品照射光而取得光學(xué)信息，基于取得的光學(xué)信息判斷血液樣品中的瘧疾原蟲(chóng)存在與否。其中，使用白細(xì)胞檢測(cè)用的散點(diǎn)圖區(qū)別瘧疾原蟲(chóng)和白細(xì)胞。
[0003]上述4種瘧疾之中，熱帶熱瘧疾的瘧疾原蟲(chóng)在紅細(xì)胞內(nèi)多取環(huán)形態(tài)。由于環(huán)形態(tài)的瘧疾原蟲(chóng)與白細(xì)胞比尺寸小，所以無(wú)法用特開(kāi)2007-24844號(hào)公報(bào)中記載的方法檢測(cè)。
[0004]【發(fā)明概述】
[0005]本發(fā)明的范圍僅由隨附的權(quán)利要求定義，不以任何程度受此發(fā)明概述部分的限制。
[0006]本發(fā)明的第1實(shí)施方式中涉及的血液分析方法使在血液樣品中的成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞之間發(fā)生熒光強(qiáng)度差地向使用熒光染料制備的測(cè)定樣品照射光，檢測(cè)從測(cè)定樣品中的血細(xì)胞發(fā)生的散射光和熒光，在每種血細(xì)胞，取得關(guān)于散射光的散射光數(shù)據(jù)及關(guān)于熒光的熒光數(shù)據(jù)，基于網(wǎng)織紅細(xì)胞的分布范圍內(nèi)的血細(xì)胞的分布狀況，所述網(wǎng)織紅細(xì)胞的分布范圍基于散射光數(shù)據(jù)和熒光數(shù)據(jù)，確定血液樣品中的熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性。
[0007]本發(fā)明的第2實(shí)施方式中涉及的血液分析裝置具備:使在血液樣品中的成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞之間發(fā)生熒光強(qiáng)度差地使用熒光染料制備測(cè)定樣品的樣品制備部，檢測(cè)通過(guò)向測(cè)定樣品中的血細(xì)胞照射光而發(fā)生的散射光和熒光，在每種血細(xì)胞，檢測(cè)關(guān)于散射光的散射光數(shù)據(jù)及關(guān)于熒光的熒光數(shù)據(jù)的檢測(cè)部，和基于網(wǎng)織紅細(xì)胞的分布范圍內(nèi)的血細(xì)胞的分布狀況，所述網(wǎng)織紅細(xì)胞的分布范圍基于散射光數(shù)據(jù)和熒光數(shù)據(jù)，確定血液樣品中的熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性的控制部。
[0008]本發(fā)明的第3實(shí)施方式中涉及的血液分析裝置具備:檢測(cè)通過(guò)向自血液樣品制備的測(cè)定樣品中的血細(xì)胞照射光而發(fā)生的散射光和熒光，在每種血細(xì)胞，檢測(cè)關(guān)于散射光的散射光數(shù)據(jù)及關(guān)于熒光的熒光數(shù)據(jù)的檢測(cè)部，實(shí)行可確定三日熱瘧疾原蟲(chóng)、卵形瘧疾原蟲(chóng)、及四日熱瘧疾原蟲(chóng)之中至少1種的存在的可能性的第1測(cè)定和可確定熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性的第2測(cè)定的控制部。
[0009]由本發(fā)明可知血液樣品中的熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性。
【【附圖說(shuō)明】】
[0010]圖1是顯示實(shí)施方式中涉及的血液分析裝置的構(gòu)成的框圖。
[0011]圖2是顯示實(shí)施方式中涉及的檢測(cè)部的構(gòu)成的模式圖。
[0012]圖3是顯示實(shí)施方式中涉及的關(guān)于第1測(cè)定和第2測(cè)定的處理的流程圖。
[0013]圖4(a)、(b)是顯示基于實(shí)施方式中涉及的第1測(cè)定的散點(diǎn)圖和范圍的圖。
[0014]圖5(a)、(b)是顯示基于實(shí)施方式中涉及的第2測(cè)定的散點(diǎn)圖和范圍的圖。
[0015]圖6是顯示實(shí)施方式中涉及的關(guān)于第3測(cè)定的處理的流程圖。
[0016]圖7(a)、(b)是顯示基于實(shí)施方式中涉及的第3測(cè)定的散點(diǎn)圖和范圍的圖。
[0017]圖8(a)是顯示實(shí)施方式中涉及的表示處理的流程圖。
[0018]圖8(b)、(c)是顯示實(shí)施方式中涉及的畫(huà)面的構(gòu)成的模式圖。
[0019]圖9(a)是顯示由關(guān)于第1測(cè)定和第2測(cè)定的處理判斷熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性的時(shí)的結(jié)果的圖。
[0020]圖9(b)是顯示由關(guān)于第3測(cè)定的處理判斷熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性的時(shí)的結(jié)果的圖。
[0021]【實(shí)施方式】
[0022]如圖1所示，血液分析裝置10具備:樣品制備部20，檢測(cè)部30，控制部40，存儲(chǔ)部50，輸入部60，輸出部70，通信部80，和讀取部90。
[0023]血液分析裝置10進(jìn)行第1測(cè)定、第2測(cè)定和第3測(cè)定。在第1測(cè)定中，血細(xì)胞等被分類為嗜堿性粒細(xì)胞、除嗜堿性粒細(xì)胞之外的白細(xì)胞和有核紅細(xì)胞。在第2測(cè)定中，血細(xì)胞等被分類為，淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、包括嗜中性粒細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞的血細(xì)胞。在第3測(cè)定中，血細(xì)胞等被分類為成熟紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞和血小板。以下，作為含網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞的兩方的概念，使用“紅細(xì)胞”。
[0024]樣品制備部20接受作為自患者采集的末梢血的血液樣品11。在樣品制備部20連接有收容試劑21?26的容器。樣品制備部20混和試劑21、22和血液樣品11而制備測(cè)定樣品31，混和試劑23、24和血液樣品11而制備測(cè)定樣品32，混和試劑25、26和血液樣品11而制備測(cè)定樣品33。測(cè)定樣品31?33經(jīng)流路被送到檢測(cè)部30。
[0025]試劑21含用于使紅細(xì)胞溶血的表面活性劑，試劑22含用于使在血液樣品11中的有核紅細(xì)胞和白細(xì)胞之間發(fā)生熒光強(qiáng)度差的熒光染料。作為試劑21，使用例如，Sysmex株式會(huì)社制的，LYSERCELL (注冊(cè)商標(biāo))WNR(注冊(cè)商標(biāo))，作為試劑22，使用例如，Sysmex株式會(huì)社制的，F(xiàn)LU0R0CELL(注冊(cè)商標(biāo))WNR。試劑23含用于使紅細(xì)胞溶血的表面活性劑，試劑24含用于使在血液樣品11中的白細(xì)胞的亞類之間發(fā)生熒光強(qiáng)度差的熒光染料。作為試劑23，使用例如，Sysmex株式會(huì)社制的，LYSERCELL WDF(注冊(cè)商標(biāo))，作為試劑24，使用例如，Sysmex株式會(huì)社制的，F(xiàn)LU0R0CELL WDF。試劑25是稀釋液，試劑26含用于使在血液樣品11中的成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞之間發(fā)生熒光強(qiáng)度差的熒光染料。作為試劑25，使用例如，Sysmex株式會(huì)社制的，CELLPACK (注冊(cè)商標(biāo))DFL (注冊(cè)商標(biāo))，作為試劑26，使用例如，Sysmex株式會(huì)社制的，F(xiàn)LUOROCELL RET (注冊(cè)商標(biāo))。
[0026]再有，試劑25、26均不使紅細(xì)胞溶血。試劑25、26不使紅細(xì)胞溶血，并且，在可測(cè)定成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞的范圍內(nèi)，適宜、變更是可能的。其中，“不使紅細(xì)胞溶血”是指包括給紅細(xì)胞損傷至由少量的表面活性劑促進(jìn)染色。再有，在本實(shí)施方式中，使用多種試劑進(jìn)行測(cè)定樣品31?33的制備。但是，不限于此，對(duì)于血液樣品11，也可混合1種試劑而進(jìn)行測(cè)定樣品31?33的制備。
[0027]檢測(cè)部30向測(cè)定樣品31?33照射光，檢測(cè)從測(cè)定樣品31?33中的血細(xì)胞等發(fā)生的前方散射光、側(cè)方散射光、和熒光。檢測(cè)部30基于各光，取得關(guān)于前方散射光的前方散射光數(shù)據(jù)、關(guān)于側(cè)方散射光的側(cè)方散射光數(shù)據(jù)、和關(guān)于熒光的熒光數(shù)據(jù)。檢測(cè)部30將這些數(shù)據(jù)輸出到控制部40。對(duì)于檢測(cè)部30，追加參照?qǐng)D2而進(jìn)行說(shuō)明。
[0028]控制部40將前方散射光數(shù)據(jù)、側(cè)方散射光數(shù)據(jù)和熒光數(shù)據(jù)存儲(chǔ)到存儲(chǔ)部50。存儲(chǔ)部50預(yù)先存儲(chǔ)血細(xì)胞的分析中使用的程序51。控制部40執(zhí)行程序51，進(jìn)行接下來(lái)示的血細(xì)胞的分析。
[0029]控制部40基于第1測(cè)定和第2測(cè)定中得到的數(shù)據(jù)，各自進(jìn)行上述的分類。再者，控制部40基于第1測(cè)定和第2測(cè)定中得到的數(shù)據(jù)，判斷血液樣品11中的熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)以外的種類的瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性。熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)以外的種類的瘧疾原蟲(chóng)是指三日熱瘧疾原蟲(chóng)、卵形瘧疾原蟲(chóng)、四日熱瘧疾原蟲(chóng)。以下，將熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)以外的種類的瘧疾原蟲(chóng)稱為“其他瘧疾原蟲(chóng)”。對(duì)于判斷其他瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性的處理追加參照?qǐng)D3而進(jìn)行說(shuō)明。
[0030]控制部40基于第3測(cè)定中得到的數(shù)據(jù)，進(jìn)行上述的分類。再者，控制部40基于第3測(cè)定中得到的數(shù)據(jù)，判斷血液樣品11中的熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性。對(duì)于判斷熱帶熱瘧疾原蟲(chóng)的存在的可能性的處理，追加參照?qǐng)D6而進(jìn)行說(shuō)明。
[0031]控制部40經(jīng)輸入部60接受來(lái)自操作部的指示，將血細(xì)胞的分析結(jié)果表示于輸出部70。輸入部60是鼠標(biāo)或鍵盤(pán)，輸出部70是顯示器?？刂撇?0經(jīng)通信部80與外部的計(jì)算機(jī)等進(jìn)行通信，經(jīng)讀取部90讀入外部的程序。讀取部90是光學(xué)驅(qū)動(dòng)器。在血細(xì)胞的分析中使用的程序51不限于預(yù)先存儲(chǔ)于存儲(chǔ)部50，也可在血細(xì)胞分析前，經(jīng)通信部80和讀取部90，從外部存儲(chǔ)到存儲(chǔ)部50。
[0032]如圖2所示，檢測(cè)部30具備:鞘流系統(tǒng)310、光束斑形成系統(tǒng)320、前方散射光光接收系統(tǒng)330、側(cè)方散射光光接收系統(tǒng)340、熒光光接收系統(tǒng)350、和信號(hào)處理電路360。
[0033]鞘流系統(tǒng)310具備流動(dòng)池311。流動(dòng)池311由有透光性的材料構(gòu)成管狀。測(cè)定樣品31?33在被鞘液包著的狀態(tài)下在流動(dòng)池311內(nèi)流動(dòng)。測(cè)定樣品31?33內(nèi)含的粒子在排成一列的狀態(tài)下通過(guò)流動(dòng)池311內(nèi)。
[0034]光束斑形成系統(tǒng)320構(gòu)成為，自光源321發(fā)射的光通過(guò)準(zhǔn)直管透鏡322和聚光鏡323向流過(guò)流動(dòng)池311內(nèi)的測(cè)定樣品31?33照射。光源321是半導(dǎo)體激光，自光源321發(fā)射的光是紅色波長(zhǎng)帶區(qū)的激光。再有，自光源321發(fā)射的光的波長(zhǎng)可在上述的血細(xì)胞的分類可能的范圍內(nèi)適宜變更。
[0035]通過(guò)向測(cè)定樣品31?33內(nèi)含的粒子照射光，從測(cè)定樣品31?33中的粒子發(fā)生前方散射光、側(cè)方散射光、和熒光。前方散射光反映關(guān)于粒子的大小的信息，側(cè)方散射光反映粒子的內(nèi)部信息，熒光反映粒子的染色程度。在向流動(dòng)池311照射的光之中，不向粒子照射而透過(guò)流動(dòng)池311的光被光束遮擋器324阻斷。
[0036]前方散射光光