C3、C4的信息。時(shí)間t和持續(xù)時(shí)間t*取決于相應(yīng)偏轉(zhuǎn)裝置20的選定長度a。通常，計(jì)數(shù)頻率f越低，樣本30的濃度越低。
[0070]校準(zhǔn)的系統(tǒng)是前提。即設(shè)定使得在后續(xù)步驟中能夠進(jìn)行集中的、分離的細(xì)胞26的定量的一系列流速Ivl ;vn}。因此，有可能確立其中實(shí)施細(xì)胞樣本30的限定體積且因此特定濃度區(qū)域C1、C2、C3、C4的時(shí)間周期。為了使得計(jì)數(shù)系統(tǒng)隨后能夠計(jì)數(shù)，能夠校準(zhǔn)應(yīng)用至特定的計(jì)數(shù)頻率f。取決于細(xì)胞或顆粒濃度，此頻率f在相對(duì)應(yīng)濃度區(qū)域Cl、C2、C3或C4中在對(duì)應(yīng)時(shí)間tl、t2、t3或t4處設(shè)定。如果針對(duì)每個(gè)濃度區(qū)域C1、C2、C3、C4實(shí)施校準(zhǔn)，則這是有利的。因此，理想的校準(zhǔn)使得有可能隨后定量過程解析濃度區(qū)域C1-C4。理想地，濃度區(qū)域Cl、C2、C3或C4的每個(gè)校準(zhǔn)包括高達(dá)1000個(gè)計(jì)數(shù)細(xì)胞以便獲得穩(wěn)定統(tǒng)計(jì)。
[0071]確定濃度:
樣本的濃度區(qū)域Cl、C2、C3、C4能夠通過特定的計(jì)數(shù)頻率f和時(shí)間范圍t來確定。從已知的幾何形狀和由其形成的此濃度區(qū)域C1、C2、C3、C4中的液體體積，有可能定量每個(gè)體積內(nèi)的細(xì)胞或顆粒。在此時(shí)間窗中計(jì)數(shù)的細(xì)胞或顆粒使得有可能推導(dǎo)整個(gè)樣本30中的細(xì)胞或顆粒的濃度。
[0072]在評(píng)估期間的步驟:
首先，有可能確立在什么時(shí)間t之后已經(jīng)達(dá)到計(jì)數(shù)頻率f。因此，有可能確立濃度區(qū)域Cl、C2、C3、C4，其被校準(zhǔn)至每次測量中1000個(gè)計(jì)數(shù)的細(xì)胞26顆粒。同樣有可能確立對(duì)于這些濃度區(qū)域Cl、C2、C3、C4的計(jì)數(shù)值。
[0073]細(xì)胞計(jì)數(shù)濃度測量的另一實(shí)施例能夠基于圖6來進(jìn)行解釋:存在樣本30，其通過超順磁標(biāo)記物標(biāo)記且具有未知濃度。由于所描述的幾何參數(shù)(流速和/或磁場的強(qiáng)度)，有可能出于理想定量的目的設(shè)定例如標(biāo)記細(xì)胞26的所需頻率f。圖6示出的示例中，系統(tǒng)被校準(zhǔn)至f = 4。有可能觀察到，所需頻率f設(shè)置在時(shí)間t = 3處。因此，這是具有濃度區(qū)域C2的樣本30。如果頻率f增加超出4，則計(jì)數(shù)完成，因?yàn)樵跁r(shí)間t = 4處富集區(qū)域Cl中的細(xì)胞26已經(jīng)被計(jì)數(shù)。
[0074]—些測量示例，其中濃度區(qū)域被校準(zhǔn)至1000個(gè)細(xì)胞:
當(dāng)校準(zhǔn)濃度區(qū)域Cl (例如其具有10微升的體積)時(shí)，利用例如具有12個(gè)細(xì)胞/微升的參照樣本。以示例的方式，從未知樣本30計(jì)數(shù)300個(gè)細(xì)胞；因此，未知樣本具有30個(gè)細(xì)胞/微升的濃度。
[0075]濃度區(qū)域C2的校準(zhǔn)(I微升，參照樣本的濃度:13個(gè)細(xì)胞/微升)緊接著的是例如測量(例如)400個(gè)細(xì)胞。未知樣本具有400個(gè)細(xì)胞/微升的濃度。
[0076]在校準(zhǔn)濃度區(qū)域C3 (例如0.1微升)的情況下，參照樣本具有例如14個(gè)細(xì)胞/微升的濃度。在未知樣本30中計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞；所針對(duì)的濃度是2000個(gè)細(xì)胞/微升。
[0077]在校準(zhǔn)濃度區(qū)域C4 (例如0.01微升，參照樣本的濃度:15個(gè)細(xì)胞/微升)之后，在樣本30中計(jì)數(shù)例如800個(gè)細(xì)胞；因此，未知樣本具有80000個(gè)細(xì)胞/微升的濃度。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于流式細(xì)胞術(shù)測量的裝置(10)，所述裝置包括室(12)和通道(14)，其中所述通道(14)包括磁傳感器(18)并且被布置在所述室(12)的下游且與所述室(12) 一起存在于閉合系統(tǒng)中，其中所述通道(14)的軸線(A)沿所述通道(14)的流動(dòng)方向(P)延伸， 其特征在于， 磁體(22)和偏轉(zhuǎn)裝置(20)布置在所述通道(14)的預(yù)定側(cè)(SI)處，并且其中所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)被分成至少一個(gè)區(qū)段(20-1、20-2、20-3)且每個(gè)區(qū)段(20-1、20-2、20_3)布置在所述通道(14)的濃度區(qū)域(C1、C2、C3)中，其中所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)具有用于引導(dǎo)多個(gè)細(xì)胞(26)朝向所述軸線(A)的裝置。2.如權(quán)利要求1所述的裝置(10)，其中磁體(16)布置在所述室(12)的預(yù)定側(cè)處。3.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的裝置(10)，其中所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)的至少一個(gè)區(qū)段(20-1、20-2、20-3)包括布置成與所述軸線(A)成角度的多個(gè)導(dǎo)向元件(24)，所述導(dǎo)向元件(24)作為用于引導(dǎo)多個(gè)細(xì)胞(26)的裝置，所述導(dǎo)向元件一起或獨(dú)立地形成在所述流動(dòng)方向(P)上漸縮的至少一個(gè)漏斗形狀。4.如權(quán)利要求3所述的裝置(10)，其中 -多個(gè)所述導(dǎo)向元件(24)中的至少一個(gè)形成在所述流動(dòng)方向(P)上漸縮的V形，且其全部或部分地包括鐵磁性材料，和/或 -多個(gè)所述導(dǎo)向元件(24)中的至少兩個(gè)沿著所述流動(dòng)方向(P)在所述軸線(A)上偏置并且由此形成朝向所述軸線(A)的機(jī)械引導(dǎo)。5.如權(quán)利要求3和4中任一項(xiàng)所述的裝置(10)，其中磁性腹板(28)沿著所述通道(14)的所述軸線(A)布置。6.如前述權(quán)利要求中的一項(xiàng)所述的裝置(10)，其中至少兩個(gè)濃度區(qū)域(Cl、C2、C3、C4)具有不同的構(gòu)型。7.如權(quán)利要求6所述的裝置(10)，其中在所述通道的(14)的預(yù)定水平(h)處的所述至少兩個(gè)濃度區(qū)域(C1、C2、C3、C4)在所述預(yù)定側(cè)(SI)與同所述預(yù)定側(cè)(SI)相對(duì)的一側(cè)之間是不同的。8.如權(quán)利要求6或7所述的裝置(10)，其中通道寬度是恒定的并且所述至少兩個(gè)濃度區(qū)域(Cl、C2、C3)在所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)的預(yù)定寬度(b)方面是不同的。9.如權(quán)利要求6至8中的一項(xiàng)所述的裝置(10)，其中每個(gè)濃度區(qū)域(Cl、C2、C3)特征在于所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)的各自的所述區(qū)段(20-1、20-2、20-3)沿所述通道(14)的所述軸線(A)的長度(a)。10.一種用于富集用于流式細(xì)胞術(shù)的細(xì)胞樣本(30)中待檢測的細(xì)胞類型的多個(gè)細(xì)胞的方法，所述方法包括以下步驟: -提供所述待檢測的細(xì)胞類型的多個(gè)磁性標(biāo)記細(xì)胞(26)，以及 -將多個(gè)所述標(biāo)記細(xì)胞(26)富集在如權(quán)利要求1至9中的一項(xiàng)所述的裝置(10)的所述通道(14 )中，其中多個(gè)所述標(biāo)記細(xì)胞(26 )通過所述磁體(22 )被拉至所述通道(14 )的所述預(yù)定側(cè)(SI)上，并且那里的多個(gè)所述細(xì)胞(26)中的至少一些通過所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)被引導(dǎo)至所述軸線(A)，所述軸線(A)沿所述通道(14)的所述流動(dòng)方向(P)延伸，并且由此所述細(xì)胞(26)富集在所述軸線(A)上。11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中提供多個(gè)所述磁性標(biāo)記細(xì)胞(26)包括標(biāo)記多個(gè)所述細(xì)胞并且其中所述標(biāo)記步驟包括以下步驟: -在所述通道(14)中提供對(duì)于所述待檢測的細(xì)胞類型具有特異性的至少一種抗體，所述抗體與至少一種磁性標(biāo)記物相連接， -使用布置在所述通道(14)的一側(cè)(SI)處的所述磁體(22)在所述通道(14)中產(chǎn)生磁場，并且由此，將所述抗體富集在所述通道(14)的所述側(cè)處， -緊接著，將所述細(xì)胞樣本(30)引入至所述通道(14)中，使所述至少一種特異性抗體與所述細(xì)胞樣本的以層流方式流經(jīng)所述通道(14)的所述側(cè)(SI)的那部分相接觸，并且由此標(biāo)記包含在此部分中的多個(gè)所述細(xì)胞。12.如權(quán)利要求10和11中任一項(xiàng)所述的方法，其中借助于所述磁傳感器(18)在所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)下游的所述軸線(A)上進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述細(xì)胞樣本(30)的所述濃度借助于所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)下游的細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定，所述確定包括以下步驟: -借助于所述磁傳感器(18)對(duì)來自所述濃度區(qū)域(Cl、C2、C3、C4)中至少一個(gè)的富集的多個(gè)所述細(xì)胞(26)進(jìn)行計(jì)數(shù)，所述細(xì)胞流經(jīng)所述軸線(A)上， -對(duì)于所述濃度區(qū)域(C1、C2、C3、C4)中的至少一個(gè)，從在計(jì)數(shù)富集的所述細(xì)胞(26)時(shí)確立的所述濃度區(qū)域(Cl、C2、C3、C4)的計(jì)數(shù)值、所述濃度區(qū)域(Cl、C2、C3、C4)的體積以及所述偏轉(zhuǎn)裝置(20)的寬度(b)來確立所述細(xì)胞樣本(30)的濃度。14.如權(quán)利要求13所述的方法，其中當(dāng)前正在計(jì)數(shù)所述細(xì)胞的所述濃度區(qū)域(Cl、C2、C3、C4)是通過所述磁傳感器(18)基于計(jì)數(shù)的確立的時(shí)間(tl、t2、t3、t4)來確立的。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于流式細(xì)胞術(shù)的裝置（10），其具有室（12）、通道（14）和磁傳感器（18）。通道（14）和室（12）存在于閉合系統(tǒng)中，通道（14）的軸線（A）沿通道（14）的流動(dòng)方向（P）延伸。磁體（22）和偏轉(zhuǎn)裝置（20）布置在通道（14）的預(yù)定側(cè)上。偏轉(zhuǎn)裝置（20）被分成至少一個(gè)區(qū)段（20-1、20-2、20-3）且每個(gè)區(qū)段（20-1、20-2、20-3）布置在通道（14）的濃度區(qū)域（C1、C2、C3）中。偏轉(zhuǎn)裝置（20）具有作為用于引導(dǎo)細(xì)胞朝向軸線（A）的裝置的導(dǎo)向元件（24）。本發(fā)明還涉及一種借助于此類裝置（10）用于流式細(xì)胞術(shù)的方法。為此目的，能夠完全或部分地標(biāo)記來自復(fù)雜樣本的細(xì)胞。
【IPC分類】G01N15/06
【公開號(hào)】CN105190286
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201480017546
【發(fā)明人】M.J.黑勞, L.里希特, O.海登
【申請(qǐng)人】西門子公司
【公開日】2015年12月23日
【申請(qǐng)日】2014年1月15日
【公告號(hào)】DE102013200927A1, EP2932233A1, US20150355072, WO2014114530A1