測(cè)定氟康唑的有關(guān)物質(zhì)及特征未知雜質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及藥品分析方法領(lǐng)域。本發(fā)明旨在建立HPLC 法測(cè)定氟康挫的有關(guān)物質(zhì)，并對(duì)特征未知雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證。本發(fā)明采用CERIL-column ODS柱（250mmX4.6mm，5ym)色譜柱；以 0.01mol/L醋酸鈉緩沖液（pH5.0)_ 甲醇（95:5) 為流動(dòng)相A，乙腈-甲醇（60:40)為流動(dòng)相B，梯度洗脫；流速I(mǎi).OmL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)261nm， 柱溫30°C。本發(fā)明接著用LC-MS分析特征未知雜質(zhì)，再用半制備液相色譜分離純化，通過(guò) NMR確定結(jié)構(gòu)。由此，本發(fā)明建立的HPLC有關(guān)物質(zhì)分析方法具有良好的方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果， 與中國(guó)藥典方法比較，雜質(zhì)檢出能力更強(qiáng)；特征未知雜質(zhì)為2-(2, 4-二氟苯基）-1，3-二 (1H-1，2, 4-三唑-1-基）-丁 -2-醇。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明建立的方法簡(jiǎn)便、靈敏、專(zhuān)屬性好、 雜質(zhì)檢出能力強(qiáng)，能有效的反應(yīng)藥品質(zhì)量。
【背景技術(shù)】
[0002] 氟康唑（fluconazole)，分子式C13H12F2N60，分子量 306. 27 ;化學(xué)名： a- (2, 4-二氟苯基）-a- (1H-1，2, 4-三唑-1-基甲基）-1H-1，2, 4-三唑-1-基乙醇；英文 化學(xué)名：1_(2, 4-difluorophenyl)-l-(lH-l，2, 4_triazol-l-ylmethyl)-lH-l，2, 4-Triazo le-l-ethanol;CAS號(hào) 86386-73-4。
[0003] 氟康唑是治療真菌感染的一種藥物，為廣譜抗真菌藥，對(duì)人和動(dòng)物的真菌感染均 有治療作用，目前市場(chǎng)上有片劑、膠囊、粉針劑和注射液幾種劑型。
[0004] 氟康唑?yàn)榘咨蝾?lèi)白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無(wú)臭或微帶特異臭，味苦。該品在甲醇 中易溶，在乙醇中溶解，在二氯甲烷、水或醋酸中微溶，在乙醚中不溶。熔點(diǎn)為137~141°C。
[0005] 口服制劑以片劑為例，氟康唑片的適應(yīng)癥包括：1.念珠菌病：用于治療口咽部和 食道念珠菌感染；播散性念珠菌病，包括腹膜炎、肺炎、尿路感染等；念珠菌外陰陰道炎。尚 可用于骨髓移植患者接受細(xì)胞毒類(lèi)藥物或放射治療時(shí)，預(yù)防念珠菌感染的發(fā)生。2.隱球菌 ?。河糜谥委熌X膜以外的新型隱球菌??；治療隱球菌腦膜炎時(shí)，本品可作為兩性霉素B聯(lián)合 氟胞嘧啶初治后的維持治療藥物。3.球孢子菌病。4.用于接受化療、放療和免疫抑制治療 患者的預(yù)防治療。5.本品亦可替代伊曲康唑用于芽生菌病和組織胞漿菌病的治療。其用 法用量為：口服；成人（1)播散性念珠菌病：首次劑量〇. 4g，以后一次0. 2g，一日1次，至少 4周，癥狀緩解后至少持續(xù)2周；（2)食道念珠菌病：首次劑量0. 2g，以后一次0.lg，一日1 次，持續(xù)至少3周，癥狀緩解后至少持續(xù)2周；根據(jù)治療反應(yīng)，也可加大劑量至一次0. 4g，一 日1次；（3) 口咽部念珠菌?。菏状蝿┝?? 2g，以后一次0?lg，一日1次，療程至少2周；（4) 念珠菌外陰陰道炎：?jiǎn)蝿┝浚?. 15g。
[0006] 注射制劑以注射液為例，氟康唑的注射液適應(yīng)癥是主要用于以下適應(yīng)癥中病情較 重的患者：1.念珠菌?。河糜谥委熆谘什亢褪车滥钪榫腥?；播散性念珠菌病，包括腹膜 炎、肺炎、尿路感染等；念珠菌外陰陰道炎。尚可用于骨髓移植患者接受細(xì)胞毒類(lèi)藥物或放 射治療時(shí)，預(yù)防念珠菌感染的發(fā)生。2.隱球菌?。河糜谥委熌X膜以外的新型隱球菌病；治療 隱球菌腦膜炎時(shí)，本品可作為兩性霉素B聯(lián)合氟胞嘧啶初治后的維持治療藥物。3.球孢子 菌病。4.本品亦可替代伊曲康唑用于芽生菌病和組織胞漿菌病的治療。
[0007] 氟康唑?qū)龠量╊?lèi)抗真菌藥?？拐婢V較廣?？诜办o注該品對(duì)人和各種動(dòng)物真菌 感染，如念珠菌感染（包括免疫正?；蛎庖呤軗p的人和動(dòng)物的全身性念珠菌?。⑿滦碗[球 菌感染（包括顱內(nèi)感染）、糠秕馬拉色菌、小孢子菌屬、毛癬菌屬、表皮癬菌屬、皮炎芽生菌、 粗球孢子菌（包括顱內(nèi)感染）及莢膜組織胞漿菌、斐氏著色菌、卡氏枝孢霉等有效。該品的 體外抗菌活性明顯低于酮康唑，但該品的體內(nèi)抗菌活性明顯高于體外作用。該品的作用機(jī) 制主要為高度選擇性干擾真菌的細(xì)胞色素P-450的活性，從而抑制真菌細(xì)胞膜上麥角固醇 的生物合成。氟康唑?qū)φ婢蕾?lài)的細(xì)胞色素P-450酶具有高度選擇性。一日服用該品0. 5g， 連續(xù)28天，已證明對(duì)男性的血漿睪丸素濃度及育齡期婦女的留體激素濃度均無(wú)影響。
[0008] 氟康唑口服吸收良好，且不受食物、抗酸藥、H2受體阻滯藥的影響?？崭箍诜撈?約可吸收給藥量的90%。單次口服該品100mg，平均血藥峰濃度（Cmax)為4. 5~8mg/L。 表觀分布容積（Vd)接近于體內(nèi)水分總量。該品血漿蛋白結(jié)合率低（11%~12% )，在體內(nèi) 廣泛分布于皮膚、水皰液、腹腔液、痰液等組織體液中，尿液及皮膚中藥物濃度約為血藥濃 度的10倍；水皰皮膚中約為2倍；唾液、痰、水皰液、指甲中與血藥濃度接近；腦膜炎癥時(shí)， 腦脊液中該品的濃度可達(dá)血藥濃度的54%~85%。該品少量在肝臟代謝。主要自腎排泄， 以原形自尿中排出給藥量的80%以上。血消除半衰期（tl/2?)為27~37小時(shí)，腎功能 減退時(shí)明顯延長(zhǎng)。血液透析或腹膜透析可部分清除該品。
[0009] 氟康唑是三唑類(lèi)的第三代抗真菌藥，也是較少的水溶性抗真菌藥之一。該品種由 輝瑞公司于1981年首先研發(fā)成功，1992年國(guó)內(nèi)開(kāi)始生產(chǎn)并用于臨床?！吨袊?guó)藥典》2010年 版和USP38、BP2015、EP8. 0中均已收載本品種[中國(guó)藥典2010年版二部p547 ;USP38p3509 ; BP2015p969 ;EP8. 0p2245]，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[VaijanathG.Dongre,PravinP.Karmuse,Pradeep D.Ghugre,etal.Preparativeisolationandstructuralelucidationofimpurities influconazolebyLC/MS/MS[J].JPharmBiomedAnal, 2006, 42(3):334；Vaijanath G.Dongre,PradeepD.Ghugare,PravinP.Karmuse,etal.Isolationandstructural identificationofanimpurityinfluconazolebulkdrugsubstance[J].JPharm BiomedAnal,2007, 45(3) :422；HoudaBourichi,YounessBrik,PhilipeHubert,et al.Solid-statecharacterizationandimpuritiesdeterminationoffluconazol genericproductsmarketedinMorocco[J].JP