一種檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法，尤其是涉及用氣相色譜 同時(shí)檢測(cè)達(dá)比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃殘留的方法，屬于藥物分析檢測(cè)領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 達(dá)比加群酯（dabigatran etexilate)，商品名為Pradaxa,是由德國(guó)勃林格殷格翰 公司開(kāi)發(fā)的具有多種特點(diǎn)的新型抗凝血藥物，達(dá)比加群酯是達(dá)比加群的前體藥物，在體內(nèi) 轉(zhuǎn)化為有活性的達(dá)比加群，后者通過(guò)直接抑制凝血酶而發(fā)揮抗凝血效應(yīng)。達(dá)比加群酯可用 于膝關(guān)節(jié)和髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后深靜脈血栓栓塞預(yù)防、深靜脈血栓栓塞治療、心房顫動(dòng)、冠脈事 件的二級(jí)預(yù)防，具有固定劑量給藥以及無(wú)需實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)等多項(xiàng)優(yōu)勢(shì)。
[0003] 藥品中的殘留溶劑是指在原料藥、制劑生產(chǎn)中所使用卻沒(méi)有完全除去的有機(jī)溶 劑。如果藥品中含有的殘留有機(jī)溶劑濃度高于安全值，患者服用后會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。人 用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)（ICH)的指導(dǎo)原則中，將藥品生產(chǎn)中常用的溶劑按照危害 程度分為4類，并規(guī)定了每種溶劑的限值。我國(guó)2010年版藥典也規(guī)定了"在生產(chǎn)過(guò)程中與 貯藏期間控制質(zhì)量應(yīng)檢查的項(xiàng)目"中，需要對(duì)有害有機(jī)溶劑限度進(jìn)行檢查，對(duì)乙醇、丙酮、乙 酸乙酯、四氫呋喃限度要求分別為不高于0. 5%，0. 5%，0. 5%，0. 072%。
[0004] 本發(fā)明針對(duì)達(dá)比加群酯中，由合成工藝引入的乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃4 種有機(jī)溶劑殘留，利用氣相色譜法，并選擇在合適的色譜條件下同時(shí)檢測(cè)這四種有機(jī)溶劑 的含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，提供一種檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方 法，利用氣相色譜法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的同時(shí)檢測(cè)出存在于達(dá)比加群酯中的乙醇、丙酮、乙酸 乙酯、四氫呋喃4種有機(jī)溶劑殘留量。
[0006] 本發(fā)明通過(guò)下列技術(shù)方案解決上述技術(shù)問(wèn)題。
[0007] -種檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法，用氣相色譜同時(shí)檢測(cè)達(dá)比加群酯中 乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃4種有機(jī)溶劑殘留量，其步驟具體如下。
[0008] 1.色譜條件
[0009] 色譜柱：Agilent DB-1301 (30mX0. 32mmX0. 25 μ m);柱溫：程序升溫，起始溫度 為40°C，保持6min，然后溫度以50°C /min速率升溫至180°C，保持IOmin ;進(jìn)樣口溫度： 200°C ;檢測(cè)溫度：250°C ;載氣=N2，流量2ml/min ;進(jìn)樣方式：頂空進(jìn)樣法；平衡時(shí)間：30min ; 平衡溫度：90°C。
[0010] 2.樣品測(cè)定，采用外標(biāo)法，其具體步驟如下。
[0011] (1)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
[0012] 取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液和四者的混合對(duì)照品溶液，分別進(jìn) 樣，繪制圖譜。
[0013] (2)精密度試驗(yàn)
[0014] 分別取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品貯備液置入同一量瓶，N，N-二甲基 甲酰胺稀釋后，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄各對(duì)照品峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。
[0015] ⑶線性試驗(yàn)
[0016] 分別取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液，等比例稀釋后，進(jìn)樣，以乙醇、 丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品的峰面積為縱坐標(biāo)，以四者濃度為橫坐標(biāo)建立線性回歸曲 線。
[0017] (4)回收率試驗(yàn)
[0018] 取達(dá)比加群酯適量，精密稱量，分別加入乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶 液作為回收率樣品溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算回收率。
[0019] 回收率％=(測(cè)得量-樣品量）/加入量X 100%
[0020] (5)檢測(cè)限及定量限試驗(yàn)
[0021] 依次分別用N，N-二甲基甲酰胺稀釋乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液， 以信噪比S/N = 3計(jì)算檢測(cè)限，以信噪比S/N = 10計(jì)算定量限。
[0022] (6)樣品檢驗(yàn)
[0023] 取達(dá)比加群酯適量，精密稱量，加N，N-二甲基甲酰胺溶解制成供試品溶液，乙醇、 丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液和供試品溶液分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰 面積計(jì)算達(dá)比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃的含量。
[0024] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：
[0025] (1)采用氣相色譜法同時(shí)檢測(cè)乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃含量，靈敏度高，重 復(fù)性好，精密度高。
[0026] (2)本發(fā)明方法適合達(dá)比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃殘留的檢測(cè)。
【附圖說(shuō)明】
[0027] 圖1乙醇系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)氣相色譜圖（1.乙醇；2. N，N-二甲基甲酰胺）
[0028] 圖2丙酮系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)氣相色譜圖（1.丙酮；2· N, N-二甲基甲酰胺）
[0029] 圖3乙酸乙酯系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)氣相色譜圖（1.乙酸乙酯；2. N，N-二甲基甲酰胺）
[0030] 圖4四氫呋喃系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)氣相色譜圖（1.四氫呋喃；2. N，N-二甲基甲酰胺）
[0031] 圖5乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃混合系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)氣相色譜圖（1.乙醇； 2.丙酮；3.乙酸乙酯；4.四氫呋喃；5. N，N-二甲基甲酰胺）
【具體實(shí)施方式】
[0032] 實(shí)施例
[0033] 1.儀器與試藥
[0034] 儀器：Agilent6890氣相色譜儀，檢測(cè)器FID ;Agilent色譜工作站；試藥：所用試 劑均為色譜純。
[0035] 2.色譜條件
[0036] 色譜柱：Agilent DB-1301 (30mX0. 32mmX0. 25 μ m);柱溫：程序升溫，起始溫度 為40°C，保持6min，然后溫度以50°C /min速率升溫至180°C，保持IOmin ;進(jìn)樣口溫度： 200°C ;檢測(cè)溫度：250°C ;載氣=N2，流量2ml/min ;進(jìn)樣方式：頂空進(jìn)樣法；平衡時(shí)間：30min ; 平衡溫度：90°C。
[0037] 3.溶液配制
[0038] 精密稱取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃各50〇11^、50〇11^、50〇11^、7211^，加11^-二 甲基甲酰胺溶解于100mL量瓶，制成濃度為每1ml中分別含乙醇5mg、丙酮5mg、乙酸乙酯 5mg、四氫呋喃0. 72mg溶液，作為乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃的對(duì)照品C備液。
[0039] 精密量取上述貯備液IOml置入100mL量瓶，加N，N-二甲基甲酰胺至刻度，搖勻， 制成濃度為每1ml中分別含乙醇0. 5mg、丙酮0. 5mg、乙酸乙酯0. 5mg、四氫呋喃0. 072mg溶 液，作為乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液。
[0040] 取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品貯備液各10ml，混合均勻制成四者的混 合對(duì)照品溶液。
[0041] 4.樣品測(cè)定
[0042] (1)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
[0043] 精密量取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液、混合對(duì)照品溶液，各取5ml， 頂空進(jìn)樣。
[0044] 在上述色譜條件下各組分可以得到較好的分離，各組分保留時(shí)間及分離度見(jiàn)表1， 系統(tǒng)適用性圖譜見(jiàn)附圖1~5。
[0045] 表1各組分保留時(shí)間及分離度測(cè)定結(jié)果
[0046]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法，用氣相色譜外標(biāo)法進(jìn)行檢測(cè)，其特征 在于，同時(shí)檢測(cè)出達(dá)比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃4種有機(jī)溶劑殘留量，其 中，色譜條件為：色譜柱Agilent DB-1301 (30 mX0.32 mmX0.25 ym )，柱溫程序升溫， 起始溫度40 °C，保持6 min，然后溫度以50 °C /min速率升溫至180 °C，保持10 min，進(jìn)樣 口溫度200 °C，檢測(cè)溫度250 °C，載氣N2，流量2 ml/min，采用頂空進(jìn)樣法的進(jìn)樣方式，平 衡時(shí)間30 min，平衡溫度90 °C ;樣品測(cè)定的步驟為： 取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液和四者的混合對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣，繪 制圖譜； 分別取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液，等比例稀釋后，進(jìn)樣，以乙醇、丙 酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品的峰面積為縱坐標(biāo)，以四者濃度為橫坐標(biāo)建立線性回歸曲 線. 取達(dá)比加群酯適量，精密稱量，分別加入乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液作 為回收率樣品溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算回收率； 回收率％=(測(cè)得量-樣品量）/加入量X 100% 檢測(cè)限及定量限試驗(yàn)，依次分別用A，二甲基甲酰胺稀釋乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫 呋喃對(duì)照品溶液，以信噪比S/N=3計(jì)算檢測(cè)限，以信噪比S/N=10計(jì)算定量限； 取達(dá)比加群酯適量，精密稱量，加二甲基甲酰胺溶解制成供試品溶液，乙醇、丙 酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液和供試品溶液分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面 積計(jì)算達(dá)比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃的含量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法，其特征在于，達(dá)比 加群酯為樣品；配制所述的乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液，取乙醇、丙酮、乙酸 乙酯、四氫呋喃各500 mg、500 mg、500 mg、72 mg,加A展二甲基甲酰胺溶解于100 ml量 瓶，作為對(duì)照品貯備液；精密量取上述貯備液10 ml置入100 ml量瓶，加％，二甲基甲酰 胺至刻度，搖勻，制成濃度為每1 ml中分別含乙醇0. 5 mg、丙酮0. 5 mg、乙酸乙酯0. 5 mg、 四氫呋喃〇. 072 mg的溶液，作為乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃對(duì)照品溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法，其特征在于所述的 乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃的混合對(duì)照品溶液的配制，分別取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四 氫呋喃對(duì)照品貯備液各10 ml，混合均勻制成四者的混合對(duì)照品溶液。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種檢測(cè)達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的方法，尤其是氣相色譜同時(shí)檢測(cè)達(dá)比加群酯中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃殘留的方法。其中，采用外標(biāo)法同時(shí)檢測(cè)達(dá)比加群酯中4種有機(jī)溶劑殘留量，色譜條件為：色譜柱Agilent DB-1301（30 m×0.32 mm×0.25 μm），柱溫程序升溫，起始溫度40 ℃，保持6 min，然后溫度以50 ℃/min速率升溫至180 ℃，保持10 min，進(jìn)樣口溫度200 ℃，檢測(cè)溫度250 ℃，載氣N2，流量2 ml/min，采用頂空進(jìn)樣法，平衡時(shí)間30 min，平衡溫度為90 ℃。本法靈敏度高，重復(fù)性好，精確度高；適合達(dá)比加群酯中有機(jī)溶劑殘留的檢測(cè)。
【IPC分類】G01N30-02
【公開(kāi)號(hào)】CN104678017
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510078256
【發(fā)明人】馮光玲, 丁文娟, 馮愛(ài)國(guó), 冀東, 王迎春
【申請(qǐng)人】山東省藥學(xué)科學(xué)院
【公開(kāi)日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2015年2月12日